阿拉伯木聚糖、β-D-葡聚糖和α-纤维素涂层对杏果活性氧代谢的影响

使用阿拉伯木聚糖(arabinoxylan,AX)、(1,3;1,4)-β-D-葡聚糖((1,3;1,4)-β-D-glucan,BG)和α-纤维素复合溶液对采后杏果进行涂层处理,探究谷物细胞壁多糖涂层对采后杏果活性氧代谢系统的影响,并阐明其作用机理。结果表明:涂层能够有效抑制丙二醛和活性氧含量的上升,对照组的丙二醛、H2O2和O2-含量分别比ABF-C8处理组(α-纤维素质量浓度8 g/100 mL)高37.50%、33.33%和57.14%;此外,涂层处理还能维持杏果的抗氧化能力和抗氧化酶活性,其抗坏血酸和总酚含量分别比对照组高73.33%和8.40%;小麦细胞壁多糖涂层能够延缓杏果实呼吸过程中活性氧的产生和积累,从而保持细胞膜的完整性,同时涂层能够使水果和外界环境形成气体和水分之间的屏障,维持活性氧清除酶活性及抗氧化能力,从而延长采后杏果的贮藏期。

β-D-葡聚糖通过下调HPV16 E6和重新激活p53调节HPV16阳性宫颈癌细胞的生物学行为

目的:研究β-D-葡聚糖在宫颈癌细胞中的作用及可能机制。方法:CCK-8法检测β-D-葡聚糖对宫颈癌细胞CaSki、HeLa和SiHa细胞增殖的影响,伤口愈合试验检测细胞迁移情况,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞中HPV16 E6/E7、HPV18 E6/E7、p53和p21 mRNA表达水平,Western blot检测N-钙黏蛋白、E-钙黏蛋白、p53、波形蛋白、p21蛋白表达水平。以宫颈癌CaSki细胞为研究对象,在雌性BALB/c小鼠皮下注射成瘤,验证β-D-葡聚糖在体内对肿瘤生长的抑制作用。结果:β-D-葡聚糖对不同宫颈癌细胞增殖的影响不同,对CaSki细胞增殖有显著的时间依赖性抑制作用,对HeLa细胞增殖无显著影响,对SiHa细胞作用72h后表现为促进增殖作用(P<0.05)。β-D-葡聚糖对CaSki、HeLa和SiHa细胞的迁移都有抑制作用(P<0.05)。β-D-葡聚糖对CaSki、SiHa的细胞周期有调节作用并能促进其凋亡(P<0.05),但对HeLa细胞无显著影响。与对照组相比,β-D-葡聚糖处理组CaSki和HeLa细胞中HPV16 E6 mRNA表达水平降低,p53和p21 mRNA表达水平在3种细胞中均升高(P<0.05)。与对照组相比,β-D-葡聚糖处理组3种细胞波形蛋白表达量降低,E-钙黏蛋白、p53和p21表达量增加(P<0.05)。结论:β-D-葡聚糖抑制宫颈癌细胞中HPV16 E6表达并上调p53和p21表达,抑制HPV16阳性宫颈癌细胞的增殖、迁移,调节细胞周期,促进细胞凋亡,并在体内发挥抗肿瘤作用。

啤酒酵母中(1→3)-β-D-葡聚糖的提取及其机理研究

分别采用酸法、酸碱法来提取啤酒酵母中的(1→3) β D 葡聚糖,然后对其产品进行多糖成分和紫外光谱分析。结果发现,在用c(CH3COOH)=0 5mol/L的水溶液提取啤酒酵母中的(1→3) β D 葡聚糖时,其产品中除含有葡聚糖外,还含有一定量的甘露聚糖和蛋白质这两种成分。但先用c(NaOH)=1 0mol/L的水溶液提取,再用w(CH3COOH)=4%的醋酸溶液处理时,产品为高纯度的(1→3) β D 葡聚糖。此结论由傅立叶红外光谱和核磁共振碳谱得到进一步的证实。接着从其水解机理上阐述了产生上述两种不同结果的原因,从而说明了酸碱法是从啤酒酵母中提取(1→3) β D 葡聚糖的理想途径。

β-1,3-D-葡聚糖的免疫调节作用及其机制研究进展

大量研究表明,免疫调节剂β-1,3-D-葡聚糖具有调节动物免疫机能、抵抗感染和应激、促进动物健康等作用。本文主要就免疫调节剂β-1,3-D-葡聚糖的结构特点、免疫调节作用及其免疫调节机制进行初步探讨。

支气管肺泡灌洗液(1-3)β-D-葡聚糖定量检测对侵袭性肺部真菌感染的诊断

目的评价支气管肺泡灌洗液(BALF)(1-3)β-D-葡聚糖定量检测(G试验)对侵袭性肺部真菌感染(IPFI)的诊断价值,探讨其最佳诊断阈值。方法将ICU内具有侵袭性肺部真菌感染(IPFI)高危因素的214例肺部感染患者纳入研究。所有患者在入住ICU当天行支气管肺泡灌洗术检查,留取BALF标本行真菌涂片染色、真菌培养及G试验检测,同时留取血液标本行血浆G试验、血液真菌培养;依据IPFI诊断标准及检查结果将IPFI诊断分为确诊、临床诊断、拟诊3个层次并进行针对性治疗;将确诊、临床诊断及治疗有效的拟诊认定为IPFI真阳性,将治疗无效的拟诊及不能诊断认定为IPFI真阴性,测算并比较血浆G试验、BALF普通病原学检查及BALF G试验对IPFI诊断准确性上的差异。结果共155例患者可至少拟诊为IPFI,结合治疗效果,共112例患者最终诊断为IPFI;与其他病原学检测方式相比,以>30 ng/L作为检验阈值水平的BALF G试验为最优微生物依据诊断方法,经比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 BALF G试验可为临床医师提供IPFI的诊断依据,但检验阈值水平需进一步验证。

自溶超声波耦合法提取啤酒废酵母中β-1,3-D-葡聚糖

采用自溶-超声波耦合法提取啤酒废酵母中β-1,3-D-葡聚糖。首先以自溶率为考察指标,将单因素和正交实验相结合,结果显示,pH=5.0条件下,质量分数5%NaCl和体积分数1.5%乙酸乙酯混合添加可以最大限度地促进酵母细胞的自溶,从而促进酵母细胞质壁分离。进而,采用超声波法从自溶后收集的细胞壁沉淀中提取β-1,3-D-葡聚糖,以质量分数2%NaOH作超声溶剂,利用Box-Behnken设计考察了超声功率、超声时间和超声次数对葡聚糖提取率的影响,确定最佳提取条件为:超声功率550 W,超声时间33 min,超声次数2次,在该条件下葡聚糖提取率达到50.5%,与纯超声波提取葡聚糖法相比提取率提高了2倍。

菌血症患者血浆（1,3）-β-D-葡聚糖结果分析

目的 了解菌血症对GKT-5M Set动态真菌检测试剂盒的影响.方法 回顾性分析27例非侵袭性真菌感染（IFI）菌血症患者血培养当日（1,3）-β-D-葡聚糖结果.结果 27例非IFI的菌血症患者中8例（29.63%）为G试验阳性,其中革兰氏阳性菌感染的菌血症患者中4例G试验阳性（33.33%,4/12）,均为葡萄球菌属感染.革兰氏阴性菌感染的菌血症患者中4例（26.67%,4/15）G试验阳性,其中2例为铜绿假单胞菌感染病人,1例为鲍曼不动杆菌复合群感染病人.金黄色葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、鲍曼不动杆菌复合群、铜绿假单胞菌、霍氏肠杆菌感染可引起（1,3）-β-D-葡聚糖检测阳性.结论 葡萄球菌属、铜绿假单胞菌等与GKT-5M Set动态真菌检测试剂盒有交叉反应,可能会引起G试验假阳性.

碱-酶法提取啤酒酵母粉中β-(1,3)-D-葡聚糖

以啤酒酵母粉为原料,综合考虑提取率、蛋白质含量和多糖含量3个指标,在单因素实验的基础上,采用正交实验,得出碱-酶法提取废啤酒酵母中β-(1,3)-D-葡聚糖的理想工艺条件:酵母粉经过水洗,脱色后,按照150mL∶10g的比例加入3%的NaOH溶液,在80℃水浴条件下水解2h,离心,洗涤,调整pH至8.5～9.0,再加入600U/g碱性蛋白酶(以干酵母粉计),在55℃下水解24h,离心,沉淀,干燥得到成品。β-(1,3)-D-葡聚糖的提取率为13.8%,产品多糖含量85.2%、蛋白质含量1.2%、水分9.2%,产品为乳白色粉状固体,色度为L值83.07、a值2.12、b值8.86。

血浆β-1,3-D-葡聚糖对深部真菌感染诊断的研究

目的观察血浆β-1,3-D-葡聚糖对深部真菌感染诊断的作用。方法将2005年8月～2006年6月北京友谊医院145例患者(标本182份)分为深部真菌感染组和无深部真菌感染组,分析比较两组葡聚糖水平;使用ROC曲线确定最佳临界值。结果深部真菌感染组的葡聚糖水平64.7±86.0(25.5)pg/ml明显高于对照组6.3±21.0(0.0)pg/ml(P<0.001);血浆葡聚糖用于诊断深部真菌感染的ROC曲线下面积为0.887(95%的置信区间为0.795～0.979),使用临界值13.7pg/ml诊断深部真菌感染的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为88.9%、90.2%、50.0%和98.7%;Kappa值0.588(P<0.05)。结论血浆葡聚糖水平可用于诊断深部真菌感染,本研究中使用GKT-5MSet动态真菌检测试剂盒检测血浆葡聚糖水平诊断深部真菌感染的最佳临界值为13.7pg/ml,使用此临界值对深部真菌感染进行诊断在本研究中的一致性较好。

血浆(1,3)-β-D-葡聚糖抗原检测对器官移植术后患者侵袭性肺部真菌感染的诊断价值

目的探讨血浆（1，3）-β-D-葡聚糖（BG）检测（G试验）在早期诊断器官移植术后合并侵袭性肺部真菌感染（IPFI）的敏感性与特异性。方法2006年1月-2008年2月在本院器官移植中心接受器官（或组织）移植合并有肺部病变的患者60例，分别为接受造血干细胞移植（HSCT）、肾移植和肝移植。入选患者在住院期间每周采集2次全血，进行血浆G试验和血清曲霉菌半乳甘露聚糖抗原（GM）检测。10例健康志愿者均采血1次。结果32例确诊和临床诊断IPFI患者共采集35株致病型真菌，主要为曲霉菌（22株）；有12例患者G试验结果为阴性。单份血浆标本G试验阳性的敏感性为60%～71．4％，特异性为74．796-89．7％，连续双份血浆标本G试验阳性的敏感性（40％-57．1％）略有降低，但特异性（86．7％～98．3％）有所升高。G试验较痰液真菌培养平均提前8．2d出现阳性结果，差异有显著统计学意义（P〈0．01）。较典型影像学改变也平均提前3d（P〈0．05）。结论通过连续检测血浆BG浓度，G试验对器官移植术后合并IPFI的诊断敏感性接近60％，特异性则达到98％；且较微生物学培养及典型影像学改变更早出现阳性结果。

大鼠实验性系统性白念珠菌感染血浆β-D-葡聚糖检测初报

目的:评价血浆β-D-葡聚糖定量检测方法诊断系统性白念珠菌感染的价值。方法:建立G试验方法定量检测血浆β-D-葡聚糖浓度。结果:在40只系统性白念珠菌感染大鼠动物模型(经内脏组织真菌培养证实为白念珠菌感染)中,血浆β-D-葡聚糖浓度随感染时间的延长而逐渐增高,敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为80%、100%、100%和55.6%。感染组与对照组相比差异有显著性(P<0.001)。在40只系统性白念珠菌感染的动物治疗模型中,血浆β-D-葡聚糖浓度随疗程的延长而逐渐降低。平均批内变异系数(coefficientvariations,CV)为4.62%,批间CV为6.85%。结论:G试验定量检测血浆β-D-葡聚糖具有方法简便、结果稳定等特点,本试验提示其可用于系统性白念珠菌感染的早期诊断和疗效的动态监测。

酿酒酵母β-D-葡聚糖测定方法的研究

针对酵母细胞破壁困难和酸碱不可溶性β-D-葡聚糖水解不彻底的问题,首先利用涡流微珠破壁法对酵母细胞进行破壁,使酵母细胞破壁率达到95.28%;其次采用高浓度酸预处理酸水解方法使酵母β-D-葡聚糖的酸解回收率高达98.76%;最后,由GOPOD法测定出酵母β-D-葡聚糖的含量.在此基础上建立了一个新的酵母β-D-葡聚糖的测定方法,新方法的相对标准差(RSD)和平均加样回收率分别为0.46%和99.96%.

血浆1,3-β-D-葡聚糖测定在侵袭性真菌感染诊断中的价值

目的探讨血浆1,3-β-D-葡聚糖的检测(G试验)对侵袭性真菌感染(IFI)的早期诊断价值。方法收集2009年6月至2010年3月IFI患者113例,非真菌感染者44例,体检健康者53例。采用MB-80微生物动态快速检测系统及配套G试验试剂盒定量检测血浆1,3-β-D-葡聚糖的含量,用ROC曲线进行评估。结果 IFI组的1,3-β-D-葡聚糖水平显著高于对照组,而两对照组之间水平无显著差异;ROC曲线分析,1,3-β-D-葡聚糖的临界值定为25.3 pg/mL时,其敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为84.1%、90.0%、89.4%、84.9%,可达最佳诊断效果。结论血浆1,3-β-D-葡聚糖检测是IFI实验室诊断的有效方法。

检测(1,3)-β-D-葡聚糖在老年肺癌侵袭性肺部真菌感染中的临床价值

目的探讨血浆(1,3)-β-D-葡聚糖(BG)在老年肺癌侵袭性肺部真菌感染(IPFI)中的临床价值。方法老年肺癌合并感染患者65例,根据诊断分3组:侵袭性肺部真菌感染20例(A组)、混合性肺部感染(真菌+细菌)22例(B组)、细菌性肺部感染23例(C组),另设健康对照组20例(D组)。A、B、C组患者于入院第1、3天采集静脉血,A、B组患者于抗真菌治疗第3、7、10、14、17、21、24天采集静脉血,D组采集静脉血1次,检测和分析各组的BG浓度。结果 A组和B组患者中感染白假丝酵母菌26例(61.91%);IPFI感染组(A组、B组)的BG含量均显著高于非IPFI感染组和健康组(C组、D组)(P<0.01);双份血浆标本BG试验阳性在A组和B组患者中的敏感性及阴性预测值均较单份血浆标本BG试验阳性下降,但其特异性及B组患者中的阳性预测值则有所升高。与治疗前比较,A组治疗第10、14、17、21、24天血浆的BG含量均显著降低(P<0.05),B组治疗第14、17、21、24天血浆的BG含量均显著降低(P<0.01)。结论血浆BG检测对于老年肺癌IPFI患者具有早期、快速诊断和动态监测治疗效果的价值。

(1,3)-β-D-葡聚糖在诊断深部真菌感染中的意义

探讨(1,3)-β-D-葡聚糖(BG)检测对于诊断深部真菌感染的临床意义。收集2009年同时进行(1,3)-β-D-葡聚糖检测和真菌培养的住院患者的临床资料。分析不同科室送检真菌抗原情况,重症医学科的(1,3)-β-D-葡聚糖检测阳性者真菌菌种分布情况以及(1,3)-β-D-葡聚糖检测假阳性情况。同时送检(1,3)-β-D-葡聚糖和真菌培养共275例,重症医学科送检最多,共178例:重症医学科(1,3)-β-D-葡聚糖检测阳性36例(阳性率20.22%);重症医学科(1,3)-β-D-葡聚糖检测阳性同时真菌培养阳性者25例,其中白假丝酵母菌10例,热带假丝酵母菌7例,光滑假丝酵母菌4例,阿萨希毛孢子菌2例,克柔假丝酵母菌1例,烟曲霉1例。11例(1,3)-β-D-葡聚糖假阳性,9例存在细菌菌血症。重症医学科等科室应加强真菌感染监测。深部真菌感染中,假丝酵母菌属感染最多见。细菌菌血症可能造成(1,3)-β-D-葡聚糖检测假阳性。

啤酒酵母β-D-葡聚糖吸附毒素玉米赤霉烯酮(ZEA)的研究

本文用碱法,碱酸法和酶碱法从啤酒废酵母中提取碱不溶性葡聚糖,对产品进行了定性定量分析,得到的产品主要为β-D-葡聚糖,且不含甘露糖。研究了三种产品对真菌毒素玉米赤霉烯酮(ZEA)的吸附作用,实验结果表明,酶碱法提取的葡聚糖具有较好的吸附效果,在反应条件:β-D-葡聚糖100μg/ml,玉米赤霉烯酮40μg/ml,37℃,200r/min振荡2h,吸附量最大可达到2.296μg/mg葡聚糖。

提取酵母细胞壁中β-D-葡聚糖的新方法

研究了一种从酵母细胞壁中提取β-D-葡聚糖的新方法,包括高温抽提、脱脂和酶解3部分。在高温条件下分别考察了pH、料液比、温度及时间对β-D-葡聚糖得率和纯度的影响。结果表明,高温提取的最佳工艺条件为:料液比为1:15、pH=8、温度120℃,时间3 h,β-D-葡聚糖得率为61.05%,纯度达到41.51%;为了进一步提高β-D-葡聚糖的纯度,采用了脱脂和酶解的方法去除粗多糖中的蛋白质、脂质等杂质,最终产品的纯度达到78.31%。

检测血浆(1→3)-β-D-葡聚糖对深部真菌感染诊断的研究

目的研究检测临床患者血浆(1→3)-β-D-葡聚糖的含量,以便对危重病人深部真菌感染早发现、早治疗,降低死亡率。方法应用MB-80微生物动态快速检测系统,并以传统真菌培养方法作平行对照实验,分析比较深部真菌感染组和非深部真菌感染组血浆(1→3)-β-D-葡聚糖的水平。结果16例深部真菌感染组的(1→3)-β-D-葡聚糖水平为51.7±66.5 pg/mL,明显高于正常非深部真菌感染组8.6±25.2 pg/mL(P<0.05),且比传统培养方法快速、准确。结论血浆(1→3)-β-D-葡聚糖的含量检测用于临床诊断深部真菌感染,具有敏感性高、特异性强、快速准确等特点。

血清1,3-β-D-葡聚糖、半乳甘露聚糖检测联合胸部CT检查对COPD合并侵袭性肺曲霉菌感染的诊断价值

目的分析血清l,3-β-D-葡聚糖(G)试验、半乳甘露聚糖(GM)试验、CT检查和三者联合检测对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者合并侵袭性肺曲霉菌感染(IPA)的诊断价值。方法收集2017年1月-2018年12月山东省菏泽市立医院呼吸科及重症监护室诊治COPD患者95例的临床资料,其中合并IPA组(COPD合并IPA)患者49例,单纯COPD组(COPD不合并IPA)患者46例,对患者均行血清G试验、GM试验、胸部CT检查,分析3种方法联合检测的诊断价值。结果 3种方法单独检测的敏感度均很低,特异度均较高。三者中两两比较,GM试验的敏感度较好,特异度三者相近(P>0.05);3种方法联合检测,较单独G试验、GM试验及CT检测的敏感度要高(χ^2=23.5、5.4、16.5,P均<0.05),但特异度略低,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 G试验、GM试验联合胸部CT检查能提高COPD患者中IPA诊断的敏感性和准确性,利于临床医生早期诊断COPD合并IPA。

(1,3)-β-D-葡聚糖检测和半乳甘露聚糖抗原检测在侵袭性真菌病诊断中的价值探讨

目的探讨(1,3)-β-D-葡聚糖检测和半乳甘露聚糖抗原检测在侵袭性真菌病诊断中的价值。方法回顾性研究北京大学第一医院2008年1月～2010年7月临床疑诊侵袭性真菌病的住院患者。根据诊断标准确定是否诊断侵袭性真菌病。分析非培养诊断方法血清半乳甘露聚糖(GM试验)和血浆(1,3)-β-D-葡聚糖(G试验)的敏感度和特异度,以及二者联合应用后诊断的敏感度和特异度。结果 GM试验灵敏度为70%,特异度为84%;G试验灵敏度为50%,特异度为92%。GM试验和G试验二者联合试验时,其灵敏度和特异度分别为93%和78%。结论 GM试验和G试验均对侵袭性真菌病具有诊断价值,二者联合应用使其应用价值进一步提高。