基于气相色谱-质谱联用结合多元统计分析不同炮制方法对砂仁挥发性成分的影响

目的分析炒制、姜炙、盐炙不同炮制方法对砂仁挥发性成分的影响。方法本实验采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)基于多元统计分析对砂仁不同炮制品的挥发性成分进行检测分析,经OPLS-DA分析后,以VIP>1.5和P<0.05为条件筛选差异成分,利用NIST 11谱库检索定性。结果鉴定出49种差异成分,其中只在种子团中发生变化的成分有14种,在果皮中发生变化的成分有22种。砂仁经炮制后能够显著降低种子团中樟脑含量,而炒制则显著增加果皮中乙酸龙脑酯含量,盐炙处理对砂仁中烷烃类成分影响较大,姜炙处理并非仅增加生姜中挥发性成分,体现了炮制机制的复杂性。结论尽管目前并不清楚具体炮制机制,但实验结果为砂仁炮制“减毒增效”作用提供了理论数据,反映出炮制的科学性,从而丰富了砂仁的炮制理论,为深入研究砂仁不同炮制品活性提供了借鉴。

砂仁挥发性成分及其对GES-1细胞保护作用的比较分析

目的:分析阳春砂、绿壳砂、海南砂及其伪品海南假砂的挥发性成分,比较四种砂仁挥发油对胃黏膜保护的活性。方法:采用顶空固相微萃取技术与气相色谱-质谱联用技术(HS-SPME-GC-MS),结合NIST08和NIST08s谱库对比定性色谱结果,分析4种砂仁的挥发性成分;采用面积归一化法,计算各挥发性成分的相对百分比含量,并进行主成分及热图分析;建立人胃黏膜上皮细胞(GES-1细胞)损伤模型,采用CCK-8法,对4种砂仁挥发油进行胃黏膜保护活性评价。结果:从阳春砂、绿壳砂、海南砂及其海南假砂中共检出114种化学成分,分别鉴定出57、58、58、58种成分,各占总挥发性成分相对百分比含量的93.23%、88.79%、90.87%、91.40%,其中总单萜烃类化合物各占总挥发性成分相对百分比含量的40.48%、37.77%、37.09%、33.39%,总倍半萜烃类化合物各占总挥发性成分相对百分比含量的52.53%、49.88%、31.22%、35.45%;阳春砂、绿壳砂、海南砂挥发油对乙醇致GES-1细胞损伤具有保护作用(P<0.05),海南假砂无明显活性。结论:阳春砂与绿壳砂的挥发性成分及含量差异较小,而海南砂、海南假砂与阳春砂、绿壳砂的挥发性成分及含量差异较大;阳春砂、绿壳砂、海南砂挥发油具有一定的胃黏膜保护活性。

砂仁炭疽病及其致病病原菌研究进展

刺盘孢属真菌(Colletotrichum spp.)引起的炭疽病是砂仁最主要的病害之一,其严重影响了砂仁的安全生产和品质。目前,对砂仁炭疽病病原菌的研究较少。从砂仁炭疽病发生、危害与防控措施,及其病原菌的特性、分类概况与鉴定检测技术等方面研究成果进行概述,以期为砂仁炭疽病基础研究和防控提供参考。

基于黄元御“一气周流”理论探讨妊娠恶阻论治

黄元御将《黄帝内经》气机运动延伸归纳为“一气周流,土枢四象”理论,肝木、心火、肺金、肾水为人体四象,水火为升降两极,木金为左右翼佐,调节阴阳升降。妊娠恶阻发病为妊胎壅阻产妇体内气机,中失斡旋,一气则郁,气郁则滞塞,滞塞而不降,升降反作,故病上逆。病机有水火不济,枢机失常;金弱水衰,痰饮上泛;木亢无制,冲气上逆。治病求本,治宜修复轮、轴关系。若患者恶心呕吐、头昏头晕等症不甚严重,无其他不适,治宜理气开郁,斡旋中气,方选豆蔻苓砂汤加减。火水不交属心火不足而戊土虚寒者,治疗需补心火,方用香砂六君子汤加丁香、良姜;若属肾水亏虚而戊土失养者,治疗需注意滋肾水,方用六味地黄丸加石斛、党参、白术、半夏、化橘红等。湿邪所致者,用药需同时考虑理气和化饮两方面,理气先理肺、肾,方中需加入炒牛蒡子、紫菀以利肺气,甘草、桔梗以开肺气;化饮为治标,温土暖水为治阳虚痰饮法则,可加入药对茯苓、干姜。木气郁滞日久者,治疗应润木达郁,兼调中土,方选桂枝汤加减。

砂仁产业标准化现状分析及标准体系构建

通过对砂仁现行标准进行整合梳理,分析现行标准的发布时间、标准类别和标准内容,归纳砂仁产业标准及标准体系建设中存在的不足,构建覆盖砂仁全产业链的砂仁产业技术标准体系,并提出砂仁技术标准体系实施的对策,为进一步规范砂仁产业、助推砂仁产业标准示范基地建设和切实推动砂仁产业稳步发展提供参考。

砂仁及其伪品鉴别方法研究进展

砂仁是常用中药,也是我国“四大南药”之一,市场需求量巨大,而在云南、广东等地的种植量不能满足市场需求,仍需大量进口。由于进口国家豆蔻属植物种类丰富,进口砂仁中掺杂大量近缘种,药材鉴别困难,导致如今砂仁药材市场掺伪现象严重。通过查阅了近40年的文献,对目前市场上主要砂仁伪品进行总结,分析了鉴别砂仁真伪品的主要方法。随着砂仁伪品不断变化,传统性状鉴别、显微鉴别、色谱方法等很难实现砂仁的真伪鉴别,分子鉴别方法能够基本实现砂仁真伪鉴别,市场推广应用不足。若要规范砂仁药材市场,需在药材源头控制的基础上,开发更为简易、普适的鉴别方法,同时也为砂仁临床用药安全提供保障。

QuEChERS结合超高效液相色谱-串联质谱法测定砂仁中4种黄曲霉毒素

该研究建立了利用QuEChERS-超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定砂仁中4种黄曲霉毒素(Aflatoxin B1、B2、G1、G2)的分析方法。通过对QuEChERS前处理技术、色谱和质谱条件的优化,确定了最佳的实验条件。研磨后的样品经φ=1%甲酸酸化的乙腈提取,无水硫酸镁及氯化钠脱水盐析,上清液经十八烷基键合硅胶(C18)、乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)、无水硫酸镁混合吸附剂净化。经ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(1.8μm,2.1 mm×100 mm)进行分离,以乙腈和φ=0.1%甲酸-5 mmol/L乙酸铵溶液进行梯度洗脱。在正离子模式下,进行多反应监测(MRM),进一步通过空白基质标准溶液外标法定量。结果表明,4种黄曲霉毒素在0.20~10.00μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9989。实际样品的加标回收试验结果显示,回收率范围为89.50%~113.12%,日内精密度为1.31%~6.71%,日间精密度为1.29%~6.20%,4种黄曲霉毒素的方法检出限为0.30~0.60μg/kg、定量限为1.00~2.00μg/kg。该方法操作简单,快速,灵敏,适用于砂仁中4种黄曲霉毒素的定性、定量筛查。

不同砂仁种植模式土壤环境与砂仁产量质量的相关性研究

目的研究不同砂仁种植模式土壤环境对砂仁生长、产量及质量的影响。方法以中国西双版纳自然林、大棚和橡胶林三种种植模式为研究对象,测定开花前期(3月)、盛花期(6月)、果实成熟期(9月)和采果后期(12月)四个时期的土壤理化指标和酶活性,分析不同种植模式下土壤指标在砂仁生长期的变化特征,探究不同种植模式下砂仁植株长势、产量与质量的区别。应用Pearson相关性分析土壤指标与砂仁生长、产量及质量的关系,运用主成分分析法研究不同种植模式土壤环境对砂仁生长、产量及质量的影响。结果三种砂仁种植模式的土壤水分、有效钾含量和脲酶活性全年中先增大后减小;pH和有机质含量在全年中变化不大;交换性锰含量和酸性磷酸酶活性全年逐渐增大;水解氮含量、交换性钙含量、有效锌含量、蛋白酶活性和蔗糖酶活性全年先降低后升高;交换性镁含量、有效铁含量和过氧化氢酶活性全年均降低;全氮含量、全磷含量和有效磷含量全年呈波动变化;自然林下和大棚下的全钾含量全年均降低,橡胶林下的全钾含量全年呈上升趋势。大棚的有机质含量、全氮含量、全钾含量、有效钾含量、有效锌含量、脲酶活性、酸性磷酸酶活性和过氧化氢酶活性显著低于自然林下和橡胶林下(P<0.05)。相关性分析结果砂仁的植株生长、产量和质量与土壤中的有机质、全氮、水解氮、全磷、有效磷、全钾、有效钾、交换性锰、交换性镁、交换性钙、有效锌、脲酶、酸性磷酸酶和转化酶显著相关(P<0.05)。主成分分析结果显示砂仁土壤环境:自然林下>橡胶林下>大棚;其优劣顺序与砂仁植株的生长指标一致,但与砂仁产量相反,说明土壤环境直接影响植株的生长指标及植株的营养成分。结论不同砂仁种植模式的土壤养分含量高低不同,生长期的变化规律亦不相似,具有一定的差异性。土壤指标对砂仁的植株生长、产量和质量均有影响。土壤生态环境与砂仁植株生长特征正相关,而与产量、质量无直接的相关性。

基于SWOT方法的云南省金平砂仁合作社品牌建设分析和对策研究

特色农业品牌化发展有利于促进区域农民增收和乡村振兴。通过对云南金平砂仁专业合作社的实地调研,对合作社发展的现状进行介绍和对比,并借助SWOT对合作社品牌建设进行分析。研究得出,金平砂仁区域品牌建设效果显著,合作社品牌化发展尚处于起步阶段;合作社品牌建设既拥有良好自然资源条件等优势,也存在产品研发不足、产业集群程度弱等劣势,并且外部良好发展环境机遇和市场风险、生态环境压力等挑战并存。建议金平砂仁合作社协调发展生态环境保护与砂仁规范化种植,并通过砂仁产品创新和研发提升合作社品牌竞争力,积极进行产品和合作社品牌的推广和营销。同时政府加大多方位支持,壮大培育砂仁产业集群,多举措推动金平砂仁专业合作社品牌建设。

白豆蔻、红豆蔻、草豆蔻和肉豆蔻挥发油成分的比较

采用气相色谱-质谱联用技术对白豆蔻、红豆蔻、草豆蔻和肉豆蔻的挥发油成分进行了研究。从4种豆蔻中分别鉴定出33、54、37和29种化学成分,并测定了其相对含量。采用色谱指纹图谱分区法,将白豆蔻、红豆蔻、草豆蔻和肉豆蔻的总离子流色谱图分为4个区,对它们的挥发油成分进行比较。结果表明,白豆蔻挥发油成分与红豆蔻、草豆蔻或肉豆蔻挥发油成分差异较大,且白豆蔻的药效成分为1,8-桉叶油素,其含量远高于红豆蔻或草豆蔻,而在肉豆蔻中未检出该成分,故不宜用红豆蔻、草豆蔻或肉豆蔻代替白豆蔻入药。该研究为白豆蔻、红豆蔻、草豆蔻和肉豆蔻的精油挥发性成分的比较及质量评价提供了新途径。

豆蔻仁挥发油成分的GC-MS分析

目的 用气相色谱-质谱法对豆蔻仁挥发油进行化学成分的分析。方法 采用水蒸气蒸馏法从豆蔻仁中提取挥发油。用归一化法测定各组分的相对百分含量,并用气相色谱-质谱法对其化学成分进行鉴定。结果 共鉴定了25个成分,占挥发油总成分的89.3％以上。结论 此方法稳定可靠,重现性好,适用于中药挥发油的化学成分分析。

中药砂仁化学成分研究

从阳春砂果实中分得７个化合物，经光谱分析鉴定为龙脑乙酸酯，樟脑，龙脑，β谷甾醇，香草酸，硬脂酸和棕榈酸，香草酸是首次从本植物分得。用ＧＣＭＳ分析砂仁挥发油成分，鉴定了５７个化合物，其中含量１％以上的有龙脑乙酸酯，樟脑，龙脑，柠檬烯，樟烯，月桂烯，蒈烯３和α松油醇等８个化合物。

响应曲面法优化微波辅助提取白豆蔻挥发油的工艺研究(英文)

在单因素试验基础上,采用Box-Behnken设计对白豆蔻挥发油微波辅助提取工艺中的液料比、微波时间和微波功率3因素的最优化组合进行定量研究,建立并分析各因素与得率关系的数学模型。结果表明,最佳的工艺条件为液料比10:1(mL/g),微波时间153s和微波功率322W。经验证实验,在此条件下得率为2.67%,与理论计算值2.64%基本一致。说明回归模型能较好地预测白豆蔻挥发油的提取得率。

砂仁药材质量标准研究

目的：对不同品种、不同产地砂仁药材以及砂仁药材不同部位进行系统的质量标准研究。方法：气相色谱法，水分测定法，灰分测定法。结果：不同品种、不同产地砂仁药材以及砂仁药材不同部位中乙酸龙脑酯含量有明显差异，并与其传统疗效一致；制订了砂仁药材中总灰分、酸不溶性灰分和水分含量的标准。结论：砂仁药材的质量标准研究应选择乙酸龙脑酯为指标并规定其限量。

豆蔻提取物对人胃癌细胞裸鼠移植瘤的影响的实验研究

目的观察豆蔻提取物对人胃癌细胞裸鼠移植瘤的影响及可能的机制。方法建立24只裸小鼠胃癌原位移植瘤模型,随机分成4组(每组6只):对照组、5-FU组、豆蔻提取物组、联合组,各组按设计剂量给药,实验期间,每3 d测量移植瘤瘤径及体积,4周后,颈椎脱臼法处死,计算抑瘤率,用免疫组化法检测各组移植瘤瘤体中COX-2和VEGF的表达情况。结果成功建立胃癌裸鼠原位移植瘤模型,各组实验裸鼠体重下降明显低于对照组,各组抑瘤率分别为:5-FU组55.99%,豆蔻提取物组42.81%,联合用药组67.36%,联合用药组瘤体中COX-2和VEGF的表达明显下调。结论豆蔻提取物可抑制胃癌原位移植瘤的生长,豆蔻提取物联合5-FU可显著抑制胃癌原位移植瘤的生长,2组具有协同作用,其抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用机制可能与下调COX-2和VEGF的表达有关。

3味中药挥发油对磷酸川芎嗪贴剂促渗作用的比较

目的考察草果挥发油、白豆蔻挥发油、砂仁挥发油单独和组合使用对磷酸川芎嗪(ligustrazine phosphate,LP)黏胶分散型透皮贴剂在离体裸鼠皮肤的促渗作用。方法采用E 100、丁二酸等制备LP黏胶分散型透皮贴剂;采用改良的Franz扩散池进行裸鼠体外透皮吸收实验;采用HPLC法进行接受液中药物含量测定。结果加入挥发油及氮酮促渗剂的LP贴剂的12 h累积渗透量(Q12)都有所增加,质量浓度为3%草果挥发油、5%白豆蔻挥发油、7%砂仁挥发油、1.5%草果挥发油+2.5%白豆蔻挥发油、2.5%白豆蔻挥发油+3.5%砂仁挥发油及3%氮酮组的Q12分别是(0.972±0.121)、(0.953±0.243)、(0.876±0.138)、(0.932±0.192)、(0.667±0.171)、(0.862±0.139)mg cm-2;增渗倍数(ER)分别是1.638、1.596、1.489、1.596、1.149、1.489;与阴性对照组比较,3%草果挥发油、5%白豆蔻挥发油、1.5%草果挥发油+2.5%白豆蔻挥发油有明显的促渗作用(P<0.01)。结论各种质量浓度单一及组合的挥发油对贴剂中LP都具有一定促渗作用,以3%草果挥发油的促渗作用最好。

中药砂仁“品与质”电子鼻判别模型的建立

目的建立一种快速、有效识别中药砂仁品质的科学评价方法。方法引入电子鼻建立中药砂仁的气味指纹图谱,以不同品种、不同产地的25批砂仁样品为研究对象,采用不同分类器建立其"品与质"的电子鼻判别模型,并基于盲样回判进行模型的验证。结果经十折交叉验证法、外部测试集验证法验证,所建立的气味判别模型正判率分别为78%和84%,表明电子鼻可以完成对阳春砂道地与非道地样品的定性分析;此外,传感器响应值为0.04和0.03的砂仁,预测其主要挥发性成分(乙酸龙脑酯)含量情况分别为>3.5 mg/g和<1.8 mg/g,表明电子鼻还可进行定量分析。结论电子鼻技术可作为一种快速、有效鉴别中药"品与质"的潜在分析方法。

砂仁及其混淆品的ITS2序列鉴定

目的应用内转录第二间隔区(ITS2)序列及其二级结构对砂仁混淆品进行鉴定。方法应用CLUSTALX1.83软件进行序列比对,比对后的长度为252bp。用MEGA4.1计算种间、种内遗传距离,并构建系统进化树。结果 ITS2序列可以将砂仁的三个来源阳春砂Amomum villosum、绿壳砂Amomum villosum var.xanthioides或海南砂Amomum longiligulare互相区分开,并与伪品艳山姜Alpinia zerumbet、山姜Alpinia japonica、草果Amomum tsao-ko及同属其它近缘种区分开。结论推荐ITS2作为砂仁及其伪品鉴定用条形码序列。

基于DNA条形码鉴定豆蔻类中药材

目的:利用ITS2序列对豆蔻类中药材进行DNA条形码鉴定研究。方法:本文采集了包括豆蔻两个基原白豆蔻Amomum kravanh与爪哇白豆蔻Amomum compactum、红豆蔻Alpinia galanga、草豆蔻Alpinia katsumadai等在内的70份样品,采用试剂盒法提取基因组DNA,应用Primer premier 5.0设计引物,通过聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增其ITS2序列,并对PCR产物进行双向测序,所得序列经Codon Code Aligner V3.71拼接后,采用MEGA5.0软件进行序列比对,计算种内和种间距离,构建邻接树(Neighbor-joining tree,NJ Tree)。ITS2序列采用基于隐马尔可夫模型(Hidden Markov model,HMM)的注释方法获得。结果:通过新设计引物扩增的序列可以注释到5.8 S与28 S,扩增序列位于ITS2间隔区。采用新设计的引物,所有实验样品均可获得ITS2序列,NJ树结果显示不同种豆蔻类药材分别聚为一支,可以互相区分,且可以与其混伪品相互区分。另外,通过序列比对发现有5个SNP(s)存在于豆蔻与其它物种种间,且有2个稳定的SNP(s)存在于白豆蔻和爪哇白豆蔻种间,可用于二者的准确鉴定。结论:ITS2序列作为DNA条形码可准确稳定地鉴别不同种豆蔻类药材,本研究将为保障临床安全用药提供新的技术手段。

高分辨连续光源火焰原子吸收光谱法测定白豆蔻中金属元素

建立高分辨连续光源火焰原子吸收光谱法测定白豆蔻中Ca、Fe、Mg、Zn的方法。以微波消解作为样品的前处理方式，分析乙炔流量和燃烧器高度对测定结果的影响，通过实验分别确定测定Ca、Fe、Mg、Zn的最佳参数。在最佳参数条件下，测定白豆蔻中Ca、Fe、Mg、Zn的含量分别为7641、982、5367、87．7μg/g，加标回收率为97．9％-106．3％，精密度为1．1％～2．1％。该方法快速、准确、稳定、污染少，具有较高的实用价值，可为食品中多元素检测提供科学依据。