HbA1c、LDL-C、HDL-C联合检测在2型糖尿病肾病中的诊断价值

目的:探究糖化血红蛋白(HbA1c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)联合检测在2型糖尿病肾病中的诊断价值。方法:选取2019年1月—2021年12月南京中医药大学附属苏州市中医医院收治的120例2型糖尿病患者作为研究对象。根据患者是否发生糖尿病肾病将其分为合并肾病组(n=35)和未合并肾病组(n=85)。收集两组患者一般资料。检测两组Hb A1c、LDL-C、HDL-C。比较两组一般资料及Hb A1c、LDL-C、HDL-C水平。分析2型糖尿病肾病的危险因素。分析HbA1c、LDL-C、HDL-C对2型糖尿病肾病的诊断价值。结果:合并肾病组糖尿病病程长于未合并肾病组,吸烟史占比高于未合并肾病组,差异有统计学意义(P<0.05)。合并肾病组HbA1c、LDL-C水平均高于未合并肾病组,HDL-C水平低于未合并肾病组,差异有统计学意义(P<0.05)。logistic分析结果显示,HbA1c、LDL-C、吸烟史、糖尿病病程均是2型糖尿病患者合并糖尿病肾病的危险因素,HDL-C是保护因素(P<0.05)。HbA1c、LDL-C、HDL-C联合检测的AUC最高。结论:HbA1c、LDL-C、HDL-C联合检测应用于2型糖尿病肾病诊断中,具有较高的诊断价值,为临床对2型糖尿病肾病的早期诊断提供新思路。

银杏素调节TGF⁃β1/Smad通路对ox⁃LDL诱导血管内皮细胞损伤的影响

目的探讨银杏素调节转化生长因子⁃β1(TGF⁃β1)/Smad信号通路对ox⁃LDL诱导血管内皮细胞损伤的影响。方法将人脐静脉血管内皮细胞HUVEC分为对照组(未处理的HUVEC细胞)、模型组(50μg/mL ox⁃LDL处理的HUVEC细胞)、银杏素组(50μg/mL ox⁃LDL+12.5μmol/L银杏素处理HUVEC细胞)、SRI⁃011381组(50μg/mL ox⁃LDL+10μmol/L的TGF⁃β1/Smad激活剂SRI⁃011381处理HUVEC细胞)、银杏素+SRI⁃011381组(50μg/mL ox⁃LDL+12.5μmol/L银杏素+10μmol/L的SRI⁃011381共同处理HUVEC细胞)。ELISA试剂盒检测HUVEC细胞丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、IL⁃6、IL⁃1β、TNF⁃α水平;CCK⁃8法检测HUVEC细胞增殖;流式细胞术检测HUVEC细胞凋亡率;Western blot检测细胞上皮间质转化(EMT)、TGF⁃β1/Smad通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组IL⁃1β、IL⁃6、TNF⁃α、MDA水平、细胞凋亡率、TGF⁃β1、Smad3、神经型钙黏附蛋白(N⁃cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白水平显著增加(P<0.05),A值、GSH、SOD水平、上皮钙黏附素(E⁃cadherin)蛋白水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,银杏素组IL⁃1β、IL⁃6、TNF⁃α、MDA水平、细胞凋亡率、TGF⁃β1、Smad3、N⁃cadherin、Vimentin蛋白水平显著下降(P<0.05),A值、GSH、SOD水平、E⁃cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),而SRI⁃011381组趋势相反,SRI⁃011381减弱了银杏素对ox⁃LDL诱导的HUVEC细胞损伤的抑制作用。结论银杏素可能通过下调TGF⁃β1/Smad信号通路对ox⁃LDL诱导的血管内皮细胞损伤起到改善作用。

短暂性脑缺血发作患者血清ox-LDL、sdLDL-C水平及其临床意义

目的 探究短暂性脑缺血发作(TIA)患者血清氧化性低密度脂蛋白(ox-LDL)、小而密低密度脂蛋白胆固醇(sdLDL-C)水平及其临床意义。方法 选取2021年4月至2022年9月延安大学附属医院收治的216例短暂性脑缺血发作(TIA)患者设为观察组,根据ABCD-3评分将观察组患者分为低危组(n=77)、中危组(n=93)和高危组(n=46),另选同期入院的健康体检者150名为对照组。对比两组以及观察组不同ABCD-3评分患者血清ox-LDL、sdLDL-C水平;采用Pearson相关系数分析血清ox-LDL、sdLDL-C水平与ABCD3评分的相关性;发病后随访患者1年,根据是否发生缺血性脑卒中(AIS)将观察组患者分为AIS组(n=43)和非AIS组(n=173),比较两组血清ox-LDL、sdLDL-C水平;采用受试者工作曲线分析血清ox-LDL、sdLDL-C水平对TIA患者进展为AIS的预测价值。结果 观察组血清血清ox-LDL、sdLDL-C水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);血清ox-LDL、sdLDL-C水平:低危组<中危组<高危组,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关系数分析显示,TIA患者血清ox-LDL、sdLDL-C水平与ABCD-3评分呈显著正相关(P<0.05);AIS组血清ox-LDL、sdLDL-C水平显著高于非AIS组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析显示,血清ox-LDL、sdLDL-C水平单独及联合预测TIA患者进展为AIS的敏感度为0.791、0.814、0.954,特异度为0.751、0.636、0.624,AUC为0.789、0.792、0.872。结论 TIA患者血清ox-LDL、sdLDL-C水平均呈高表达,且与患者病情显著相关,二指标对TIA患者进展为AIS具有较高的预测价值。

益母草碱对ox-LDL诱导的THP-1源性巨噬细胞焦亡的保护作用

目的探讨益母草碱(LEO)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的THP-1源性巨噬细胞焦亡的保护作用。方法采用MTT法检测不同浓度LEO对THP-1巨噬细胞/THP-1源性泡沫细胞活力;采用油红O染色评估细胞内脂质蓄积的情况,并检测细胞内总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量以及细胞上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)和乳酸脱氢酶(LDH)含量;采用Western blot检测细胞焦亡相关蛋白的表达水平;采用流式细胞术测定活性氧(ROS)水平。结果随着LEO浓度的增加,细胞活性与LEO的浓度呈正相关。LEO干预后,细胞内TC和TG的含量降低,细胞内脂质积累减少,且LEO可下调细胞焦亡相关蛋白NLRP3、N-GSDMD、Cleaved Caspase-1的表达,同时经LEO处理可逆转ox-LDL诱导的ROS生成增加。结论LEO可以减缓由ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞内脂质积累,并且可以抑制ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞焦亡的发生。

LDL-C/HDL-C比值与急性心肌梗死患者主要不良心血管事件的相关性研究

目的:探讨急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)/高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)比值(LHR)与其院内主要不良心血管事件(MACE)的相关性及其在临床中的应用价值。方法:收集发病12h内就诊的481例STEMI住院患者的临床资料及MACE发生情况,根据LHR的中位数(2.9)将患者分为低LHR组(LHR≤2.9,n=223)和高LHR组(LHR>2.9,n=258)。分析LHR与STEMI患者院内MACE的相关性。结果:高LHR组患者院内MACE比例均高于低LHR组[恶性室性心律失常:29(11.2%) VS 9(4.0%),P=0.004;高度房室传导阻滞:22(8.5%) VS 6(2.7%),P=0.006;心源性休克+死亡:29(11.2%) VS 7(3.1%),P=0.001]。恶性室性心律失常、心源性休克+死亡患者LHR差异有统计学意义(P均<0.05)。Pearson相关分析显示,除高度房室传导阻滞(r=0.060,P>0.05)外,LHR与恶性室性心律失常(r=0.121)、心源性休克和死亡(r=0.115)均显著相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,LHR、空腹血糖是STEMI患者发生院内MACE的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线显示LHR预测STEMI患者院内MACE的曲线下面积为0.606(95%CI:0.544~0.668),cut-off值为2.854,敏感度为80.6%,特异度为52.1%;LHR>2.854时STEMI住院患者很可能会发生MACE。结论:STEMI患者LHR升高与恶性室性心律失常、心源性休克及死亡发生呈正相关。LHR是STEMI患者发生MACE的独立危险因素,对恶性室性心律失常、心源性休克及死亡发生有一定的预测价值。

Essen卒中风险评分联合OX-LDL、UCH-1对非房颤人群首发急性缺血性脑卒中患者短期预后的预测价值

目的探讨Essen卒中风险评分联合氧化型低密度脂蛋白胆固醇(Oxidized low-density lipoprotein,OX-LDL)、血清泛素C末端水解酶L1(Ubiquitin carboxy-terminal hydrolase-L1,UCH-L1)对非房颤人群首发急性缺血性脑卒中(Acute ischemic stroke,AIS)患者短期预后的预测价值。方法根据改良Rankin量表(Modified rankin scale,mRS)评分,将132例非房颤人群首发AIS患者分为预后良好组(mRS≤2分)93例,预后不良组(mRS>2分)39例,在入院治疗前进行Essen卒中风险评分和血清OX-LDL、UCH-L1检测。采用Spearman相关性分析Essen卒中风险评分与OX-LDL、UCH-L1水平的差异,采用Logistic回归分析预后不良的危险因素,采用受试者工作特征(Receiver operating characteristic,ROC)曲线分析Essen卒中风险评分、OX-LDL、UCH-L1水平及三者联合对非房颤人群首发AIS预后评估的效果。结果预后不良组Essen卒中风险评分高于预后良好组(Z=-5.365,P<0.001),血清中OX-LDL、UCH-L1水平高于预后良好组(Z=-6.152,P<0.001;Z=-7.020,P<0.001)。血清中OX-LDL、UCH-L1水平与Essen评分呈正相关(r=0.629,P<0.001;r=0.598,P<0.001)。Logistic回归分析显示,Essen卒中风险评分、OX-LDL、UCH-L1是脑卒中预后的独立影响因素。Essen卒中风险评分联合OX-LDL、UCH-L1对非房颤人群首发AIS预后的ROC曲线下面积为0.896,灵敏度为88.54%,特异度为92.93%。结论Essen卒中风险评分联合OX-LDL、UCH-L1对非房颤人群首发AIS预后有良好的预测作用,Essen卒中风险评分、OX-LDL、UCH-L1水平越高,提示预后不良的风险越大。

探讨阿托伐他汀联合依折麦布对冠脉支架术后单用阿托伐他汀LDL-C未达标患者的血脂水平及炎性因子的影响

目的评估阿托伐他汀+依折麦布应用在冠脉支架术后单用阿托伐他汀且低密度脂蛋白胆固醇(Low Density Lipoprotein Cholesterol,LDL-C)未达标患者中的效果及对血脂水平、炎性因子的影响。方法选取2022年1月—2023年7月庆阳市第二人民医院收治的88例冠脉支架术后单用阿托伐他汀且LDL-C未达标(≥1.8 mmol/L)的患者为研究对象,以随机数表法分为对照组(n=44,给予阿托伐他汀治疗)、观察组(n=44,给予阿托伐他汀+依折麦布治疗)。评价两组患者的血脂水平、血管内皮功能、炎性因子水平及用药安全性。结果治疗前,两组患者的血脂水平[包括高密度脂蛋白(High Density Lipoprotein,HDL-C)、LDL-C、三酰甘油(Triglyceride,TG)、总胆固醇(Total Cholesterol,TC)]、血管内皮功能[一氧化氮(Nitric Oxide,NO)、内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)]、炎性因子[超敏C反应蛋白(Hypersensitive C-reactive Protein,hs-CRP)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-alpha,TNF-α)]对比,差异无统计学意义(P均>0.05)。治疗12周后,两组患者的HDL-C、TG水平以及不良反应发生率对比,差异无统计学意义(P均>0.05);观察组患者的LDL-C水平为(1.83±0.17)mmol/L,低于对照组的(2.09±0.23)mmol/L,差异有统计学意义(t=6.030,P<0.05);另外,观察组患者的TC、ET-1、hs-CRP、IL-6、TNF-α水平较对照组更低,NO较对照组更高,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论对冠脉支架术后单用阿托伐他汀且LDL-C未达标患者采用阿托伐他汀+依折麦布治疗,安全性高,并且可以有效调节血脂,降低炎性因子水平,改善血管内皮功能。

血清VILIP-1 CXCL16联合ox-LDL预测急性缺血性脑卒中患者预后不良的价值

目的探讨血清VILIP-1、CXCL16结合ox-LDL预测急性缺血性脑卒中患者预后不良的价值。方法以2020-05—2021-12南阳市中心医院治疗的100例急性缺血性脑卒中患者为观察组,另取100例进行体检的健康者为对照组,采用酶联免疫法检测所有受试者血清VILIP-1、CXCL16、ox-LDL水平。依据患者的神经功能缺损情况进行量化评分,分为轻型组、中型组、重型组。采用改良Rankin量表评定患者半年内的临床预后情况,分为预后良好组、预后不良组,以患者临床预后为因变量,VILIP-1、CXCL16、ox-LDL为自变量拟合多分类或二分类Logistic回归方程,分析各指标对患者病情或临床预后的影响。结果与对照组相比,观察组血清VILIP-1、CXCL16、ox-LDL水平均显著升高(P<0.05)。与轻度组比较,中度组血清VILIP-1、CXCL16、ox-LDL水平升高(P<0.05);与中度组比较,重度组血清VILIP-1、CXCL16、ox-LDL水平升高(P<0.05)。与预后良好组比较,预后不良组血清VILIP-1、CXCL16、ox-LDL水平显著升高(P<0.05)。ILIP-1、CXCL16、ox-LDL等均是影响急性脑卒中患者疾病分级及预后的独立危险因素。VILIP-1的AUC值为0.834,灵敏度69.45%,特异性80.29%;CXCL16的AUC值为0.830,灵敏度69.38%,特异性81.02%;ox-LDL的AUC值为0.824,灵敏度69.40%,特异性80.31%;联合检测的AUC值为0.938,灵敏度83.56%,特异性93.11%。结论血清VILIP-1、CXCL16、ox-LDL水平的异常变化与疾病分型和患者预后密切相关,联合检测在急性缺血性脑卒中诊断中效能良好。

sdLDL、LDL及TEG在高脂血症患者颈动脉粥样硬化诊断中的应用

目的:研究小而密低密度脂蛋白(sdLDL)、低密度脂蛋白(LDL)、血栓弹力图(TEG)在高脂血症患者颈动脉粥样硬化(CAS)诊断中的应用价值。方法:回顾性选取2021年11月-2022年10月于丰城市中医院就诊的200例高脂血症患者作为研究对象,根据其是否伴发CAS进行分组,单纯高脂血症患者分为A组(n=94),伴发CAS的高脂血症患者分为B组(n=106),另外选取同时期于本院体检健康者(n=50)作为C组,收集三组相关临床资料。比较三组sdLDL、LDL及TEG,分析sdLDL、LDL及TEG参数诊断高脂血症CAS的价值。结果:B组sdLDL、LDL水平均显著高于A组、C组(P<0.05);A组、B组反应时间(R)、血凝块形成时间(K)均明显短于C组,B组R明显短于A组(P<0.05);A组、B组最大振幅(MA)、弹力图最大切角(Angle)均显著高于C组,B组MA明显高于A组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,sdLDL、LDL、R、MA诊断CAS的曲线下面积(AUC)分别为0.728、0.667、0.764、0.693,而四者联合检测CAS的AUC为0.832,显著高于单独指标检测(Z=3.727、4.850、3.037、4.386,P=0.000、0.000、0.002、0.000),敏感度为84.91%,特异度为68.75%。结论:sdLDL、LDL及TEG与高脂血症患者CAS密切相关,均有一定的诊断价值,且联合检测可显著提高诊断效能。

虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷通过上调SIRT1对创伤后应激障碍模型大鼠血清miR-9表达及其ox-LDL诱导的巨噬细胞增殖和炎性因子的影响

目的 探讨虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷通过上调沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)对创伤后应激障碍模型大鼠血清微小RNA-9(microRNA-9,miR-9)表达及其氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, ox-LDL)诱导的巨噬细胞增殖和炎性因子的影响。方法 选取100只大鼠,建立创伤后应激障碍大鼠模型,50只给予虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷,作为虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷组,另外50只不做任何处理作为模型组。培养大鼠巨噬细胞THP-1,对照组:加入普通培养基;ox-LDL组:80μmol/L ox-LDL处理细胞24 h;虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷+ox-LDL组:100μmol/L虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷预处理2 h后,再加入80μmol/L ox-LDL处理24 h。实时定量PCR(qRT-PCR)检测SIRT1 mRNA和miR-9表达水平;四甲基偶氮唑蓝(Tetramethylazolazole blue, MTT)检测细胞增殖情况;采用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(Interleukin-1 β,IL-1β)、白细胞介素6(Interleukin 6,IL-6)炎性因子水平;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白1(CyclinD1)、周期素依赖性激酶2(Cyclin dependent kinase 2,CDK2)、p21蛋白表达。结果 与模型组相比,虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷组SIRT1 mRNA表达水平显著上升(P<0.05),miR-9表达水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,ox-LDL组细胞增殖率、CyclinD1、CDK2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而p21蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与ox-LDL组相比,虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷+ox-LDL组细胞增殖率、CyclinD1、CDK2蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而p21蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,ox-LDL组SOD含量显著降低(P<0.05),但MDA含量和ROS水平显著升高(P<0.05)。与ox-LDL组相比,虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷+ox-LDL组SOD含量显著升高(P<0.05),但MDA含量和ROS水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,ox-LDL组TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著升高(P<0.05)。与ox-LDL组相比,虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷+ox-LDL组TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低(P<0.05)。结论 虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷通过上调SIRT1降低创伤后应激障碍模型大鼠血清miR-9表达水平,且增加ox-LDL诱导的巨噬细胞增殖能力,同时降低炎性因子水平。

CT灌注成像参数与血清CTRP-3、LDL-C及MMP-9对急性脑梗死后出血转化的评价

目的:探讨CT灌注成像参数与血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-3(CTRP-3)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)对急性脑梗死(ACI)后出血转化(HT)的评价。方法:选取2019年8月至2022年7月于简阳市人民医院诊治的206例ACI患者,根据患者静脉溶栓后是否发生HT分为HT组(45例)和非HT组(161例),对比两组CT灌注成像参数[血流量(BF)、血容量(BV)、平均通过时间(MTT)、表面通透性(PS)]、CTRP-3、LDL-C及MMP-9;采用受试者工作特征曲线(ROC)模型分析CT灌注成像参数、CTRP-3、LDL-C及MMP-9诊断HT的曲线下面积(AUC)值、灵敏度及特异度。结果:HT组的BF、BV低于非HT组,而MTT、PS高于非HT组,差异均有统计学意义(t=-5.941,t=-5.777,t=5.863,t=6.954;P<005)。HT组的CTRP-3、LDL-C均低于非HT组,而MMP-9高于非HT组,差异均有统计学意义(t=-3.788,t=-5.835,t=6.935;P<0.05)。ROC曲线分析显示,BF、BV、MTT、PS、CT综合参数、CTRP-3、LDL-C及MMP-9诊断HT的AUC值分别为0.790、0.779、0.738、0.775、0.949、0.692、0.777和0.785;灵敏度分别为88.90%、100.00%、53.30%、66.70%、100.00%、88.90%、66.70%和78.60%;特异度分别为64.60%、51.60%、91.30%、77.60%、81.40%、47.80%、78.90%和75.80%;CT灌注图像参数与CTRP-3、LDL-C和MMP-9的AUC比较,差异均有统计学意义(Z=6.202,Z=4.563,Z=3.704;P<0.05)。结论:CT灌注成像参数及血清CTRP-3、LDL-C及MMP-9水平与ACI后HT具有密切关联,监测其变化程度有助于为预测ACI患者溶栓后发生HT提供重要参考依据。

Plin2通过NF-κB通路参与oxLDL诱导巨噬细胞LOX1的表达

目的oxLDL可上调Plin2的表达,进而促进泡沫细胞的形成,LOX1是oxLDL的受体。本文探讨Plin2与LOX1在动脉粥样硬化发生发展过程中的关系。方法从GEO数据库中下载GSE43292,分析Plin2、LOX1的表达及Plin2、LOX1与NF-κB信号通路的相关性。采用oxLDL处理的RAW264.7细胞作为动脉粥样硬化的细胞模型进行研究,蛋白质免疫印迹法检测细胞中Plin2、LOX1和p-p65的表达,荧光中性脂质染料BODIPY 493/503染色法检测细胞内脂滴。结果通过分析GSE43292数据发现,Plin2、LOX1在颈动脉粥样硬化斑块中的表达显著高于颈动脉邻近组织。oxLDL处理RAW264.7细胞24 h后,Plin2与LOX1的表达、细胞内脂滴明显增加。过表达Plin2的细胞中LOX1表达升高;当用oxLDL孵育过表达Plin2的细胞后,LOX1的水平升高更为显著;但在没有oxLDL处理的情况下,敲减Plin2对细胞内LOX1的表达没有影响。基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)结果显示,在动脉粥样硬化中,Plin2和LOX1的表达与NF-κB的活化呈正相关。此外,尽管采用oxLDL处理细胞,NF-κB抑制剂JSH-23预处理仍可显著降低Plin2与LOX1的表达、细胞内的脂质积聚,过表达Plin2后,JSH-23亦能显著抑制oxLDL孵育的细胞中Plin2和LOX1的表达。结论Plin2可通过上调LOX1的表达促进细胞内脂质积聚,参与动脉粥样硬化,这一过程至少部分是通过激活NF-κB通路实现的。

异甘草素通过激活PPAR⁃γ信号通路调控ox⁃LDL稳定动脉粥样硬化斑块

目的:探讨异甘草素通过激活PPAR⁃γ信号通路调控ox⁃LDL代谢稳定动脉粥样硬化(AS)斑块的分子机制。方法:采用高脂喂养+右侧颈总动脉外置套管术(PCCP)制备ApoE⁃/⁃小鼠AS颈动脉斑块模型。ApoE⁃/⁃小鼠经PCCP术后随机分为模型组和异甘草素组,正常组采用C57BL/6J小鼠。术后高脂饲料继续喂养8周,建立AS模型。全自动生化仪检测血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL⁃C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL⁃C)含量。ELISA检测血清中氧化低密度脂蛋白(ox⁃LDL)含量。HE染色观察颈动脉病理形态,并测定颈动脉参数。油红O染色用于脂质测定,Masson染色用于胶原含量测定,MOMA⁃2和α⁃SMA免疫组织化学染色用于巨噬细胞和平滑肌细胞测定,并计算易损指数。Western blot检测小鼠动脉中PPAR⁃γ、LXR⁃α、FABP⁃4、MMP⁃2及MMP⁃9蛋白表达。结果:与正常组相比,模型组TC、TG、LDL⁃C、HDL⁃C和ox⁃LDL升高。与模型组相比,异甘草素组TC、TG、LDL⁃C和ox⁃LDL降低,HDL⁃C无明显变化。与正常组相比,模型组小鼠颈动脉的内膜厚度(IT)、内膜/中膜厚度(IT/MT)、斑块面积(PA)、斑块面积/血管管腔面积(PA/LA)均增加,斑块内脂质和MOMA⁃2含量增加,胶原和α⁃SMA含量减少,易损指数较高,PPAR⁃γ、LXR⁃α表达减少,FABP⁃4、MMP⁃2、MMP⁃9表达增加。与模型组比较,异甘草素组小鼠颈动脉IT、IT/MT、PA、PA/LA均减少,斑块内脂质和MOMA⁃2含量减少,胶原和α⁃SMA含量增加,易损指数降低,PPAR⁃γ、LXR⁃α表达增加,FABP⁃4、MMP⁃2、MMP⁃9表达减少。结论:异甘草素能够通过激活PPAR⁃γ、上调LXR⁃α,减少FABP⁃4表达,降低ox⁃LDL水平,减少MMP⁃2和MMP⁃9的蛋白表达,降低斑块易损指数,增加斑块稳定性,发挥抗AS的作用。

剪切修复基因D通过下调mTOR/LOX-1抑制ox-LDL诱导的人脐静脉平滑肌细胞增殖

[目的]探讨剪切修复基因D(XPD)在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)促血管平滑肌细胞增殖中的作用及分子机制。[方法]将重组质粒pEGFP-N2/XPD利用脂质体转染人脐静脉平滑肌细胞(HUVSMC),沉默哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因,用MTT、EdU法测定各组细胞的增殖;流式细胞仪检测各组凋亡率;利用Western blot检测XPD、血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、mTOR、p-mTOR、Bcl-2及Bax的表达。[结果]与对照组比较,ox-LDL组XPD表达明显下调(P<0.05),Bax蛋白表达下调(P<0.05),Bcl-2蛋白、Bcl-2/Bax、mTOR磷酸化活性及LOX-1蛋白表达升高(P<0.05);MTT、BdU结果显示,ox-LDL组细胞增殖较对照组上调(P<0.05)。转染pEGFP-N2/XPD重组质粒能上调Bax蛋白表达(P<0.05)并抑制Bcl-2蛋白、mTOR磷酸化活性及LOX-1蛋白表达(P<0.05),Bcl-2/Bax比值下调(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示,转染pEGFP-N2/XPD重组质粒后,细胞凋亡率较对照组增加(P<0.05);MTT、BdU结果显示,转染pEGFP-N2/XPD重组质粒后,细胞增殖较对照组下调(P<0.05)。沉默mTOR基因后,与对照组相比,siRNA mTOR组HUVSMC中LOX-1蛋白表达被抑制(P<0.05)。[结论]XPD能抑制HUVSMC的增殖并且促进其凋亡,下调mTOR和LOX-1蛋白表达,抑制ox-LDL的促HUVSMC增殖和抗凋亡作用,有可能成为抗动脉粥样硬化治疗的靶点。

雷公藤甲素对ox-LDL诱发的血管内皮细胞炎症反应的抑制作用及机制研究

目的本实验研究拟阐明雷公藤甲素(Triptolide,TP)对氧化型低密度脂蛋白(Oxidized lowdensity lipoprotein,ox-LDL)所诱发的血管内皮细胞介导的炎症反应的抑制作用及相关机制,从而阐明TP防治动脉粥样硬化的药理学机制。方法利用人类脐静脉血管内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)培养模型,通过酶联免疫吸附法、细胞酶联免疫吸附法和单核细胞粘附实验,以及活性氧相关指标测定等方法,明确TP对ox-LDL所诱发的血管内皮细胞介导的炎症反应的影响及机制。结果与正常对照组相比,ox-LDL明显促进HUVECs产生和释放细胞因子(肿瘤坏死因子-ɑ、白细胞介素-6)、趋化因子(单核细胞趋化蛋白-1)和黏附因子(血管细胞黏附分子-1、血管细胞黏附分子-1)(P<0.05),并增加单核细胞粘附于HUVECs的数量(P<0.05),同时ox-LDL显著增加磷酸化抑制因子κBα(InhibitoryκBα,IκBα)蛋白含量及核转录因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)的活性(P<0.05)。另外,ox-LDL明显增加活性氧代谢产物(8-异构前列腺素、丙二醛)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(Nicotinanamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶活性,并降低超氧化物歧化酶活性(P<0.05)。TP明显抑制上述病理变化(P<0.05),并呈剂量依赖性。结论本实验的体外实验结果提示,TP可能通过抑制活性氧/NF-κB信号通路减轻和缓解ox-LDL所诱发的血管内皮细胞介导的炎症反应。

应用血管内超声虚拟组织学成像技术探讨LDL-C与HDL-C比值与冠心病患者冠状动脉斑块特点关系的研究

目的应用血管内超声虚拟组织学成像技术探讨低密度脂蛋白胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比值(LDL-C/HDL-C,LHR)与冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者冠状动脉(冠脉)斑块特点的关系。方法选取2020年11月至2021年11月于华北理工大学附属医院心内一科住院行冠脉造影治疗(PCI)且行血管内IVUS检查的72例冠心病患者。依据患者LHR水平中位数分为高LHR水平组(n=35)和低LHR水平组(n=37),通过虚拟组织学血管内超声(VH-IVUS)检查,探讨LDL-C与HDL-C比值与冠脉斑块特点的关系。结果高LHR组中重构指数、斑块面积均高于低LHR组,差异有统计学意义(P<0.01);高LHR组中外弹力膜面积、斑块负荷均大于低LHR组,差异有统计学意义(P<0.05);高LHR组脂肪组织容积比例、斑块总容积大于低LHR组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示:LHR水平与外弹力膜面积(r=0.241,P=0.041)、重构指数(r=0.490,P=0.000)、斑块面积(r=0.272,P=0.021)及斑块负荷(r=0.255,P=0.031)均呈正相关性。结论LHR水平与斑块大小及斑块内脂质含量有关。

梓醇对T2DM大鼠大血管病变的保护作用及与oxLDL/LDL和NF-κB信号通路的关系

目的探讨梓醇对2型糖尿病(T2DM)大鼠大血管病变的保护作用与氧化低密度脂蛋白(oxLDL)/低密度脂蛋白(LDL)和核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的关系。方法用高糖高脂饲料喂养和腹腔注射STZ复合因素对大鼠进行T2DM造模,将大鼠分为模型组、二甲双胍组(134 mg·kg^(-1)·d^(-1))、梓醇组(10 mg·kg^(-1)·d^(-1)),另设对照组,每组10只,模型组和对照组给予相同体积的0.9%氯化钠溶液,干预4周。结束后,自动生化分析仪检测大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FBG)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)水平;酶联免疫吸附法测定人巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、oxLDL含量;RT-PCR法检测主动脉壁LOX-1、NF-κB p65、MCP-1 mRNA表达;Western blot检测主动脉壁LOX-1、NF-κB p65、MCP-1蛋白表达;透射电镜观察大鼠主动脉内皮细胞结构。结果对照组大鼠主动脉内皮细胞形态正常,模型组细胞显著肿胀,连续性中断、见空泡,部分内皮细胞有显著脱落,细胞核褶皱变形,线粒体、内质网中度肿胀,嵴肿胀紊乱或溶解,见脂滴、糖原颗粒;二甲双胍组和梓醇组内皮细胞形态结构轻微肿胀,线粒体、内质网结构正常,细胞核轻微变形,部分内皮细胞有轻微脱落,损伤程度显著轻于模型组。与对照组比较,模型组血清FBG、TC、TG、LDL水平,MCP-1和oxLDL水平,主动脉壁LOX-1、NF-κB p65、MCP-1 mRNA及蛋白表达量显著性升高(P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组和梓醇组血清FBG、TC、TG、LDL水平,MCP-1和oxLDL水平,主动脉壁LOX-1、NF-κB p65、MCP-1 mRNA及蛋白表达量显著性降低(P<0.05)。结论梓醇可能通过oxLDL/LDL和NF-κB信号通路减轻T2DM大鼠大血管病变。

血清NT-proBNP、sd-LDL、GDF-15、hs-CRP/PA水平变化与老年冠心病患者PCI术后发生MACE的关系

目的探讨血清氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、小而密低密度脂蛋白(sd-LDL)、生长分化因子15(GDF-15)、超敏C反应蛋白/前清蛋白比值(hs-CRP/PA)与老年冠心病患者PCI术后发生心血管不良事件(MACE)的关系。方法选取2021年1月至2021年12月于本院接受经皮冠状动脉介入术(PCI)治疗且随访至2022年6月的98例冠心病患者作为研究对象,设立为观察组,出院后随访6个月,根据患者随访期间是否发生MACE分为非MACE组(n=63)与MACE组(n=35),同期选取49名健康体检者设立为健康对照组。结果观察组的NT-proBNP、sd-LDL、GDF-15、hs-CRP/PA高于对照组,差异有统计学意义(t=10.387、8.146、28.429、16.997,P<0.05)。MACE组入院时、出院时的NT-proBNP、sd-LDL、GDF-15、hs-CRP/PA与非,MACE组相比,差异无统计学意义(t入院时=0.121、0.890、0.019、1.25,t出院时=0.128、0.584、0.166、0.581,P均>0.05);MACE组出院30 d的NT-proBNP、sd-LDL、GDF-15、hs-CRP/PA均高于非MACE组,差异有统计学意义(t=13.085、6.611、14.042、3.933,P<0.05)。血清NT-proBNP、sd-LDL、GDF-15、hs-CRP/PA高水平组出院1个月后的心力衰竭、脑梗死、不稳定心绞痛等MACE发生率均高于低水平组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归模型中显示NT-proBNP、sd-LDL、GDF-15、hs-CRP/PA水平是影响老年冠心病患者预后的危险因素(P<0.05)。结论血清NT-proBNP、sd-LDL、GDF-15、hs-CRP/PA水平与老年冠心病患者预后具有一定相关性,动态检测其水平有利于为及时发现MACE提供参考。

王不留行黄酮苷通过NLRP3/Caspase-1信号通路抑制ox-LDL诱导的细胞焦亡

[目的]探讨王不留行黄酮苷对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤的保护作用及作用机制。[方法]以ox-LDL(100μg·mL-1)刺激HUVECs建立模型。采用细胞增殖活性检测(cell counting kit-8,CCK-8)法检测1~10μmol·L-1王不留行黄酮苷对ox-LDL诱导的HUVECs的保护作用;采用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)法检测LDH的释放;采用AnnexinⅤ-FITC/碘化丙啶(propidium iodide,PI)凋亡试剂盒检测细胞凋亡;使用2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯(2’,7’-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFD-A)荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattracctant protein-1,MCP-1)、人血管内皮细胞黏附分子-1(human vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)的mRNA表达;采用免疫印迹法检测B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、胱天蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,caspase-1)、裂解的胱天蛋白酶-1(cleaved caspase-1)、IL-1β和IL-18的蛋白表达。[结果]1~10μg·mL-1王不留行黄酮苷减轻100μg·mL-1的ox-LDL诱导的HUVECs损伤(P<0.05,P<0.01)。王不留行黄酮苷减轻ox-LDL诱导的LDH释放,减少细胞凋亡,同时促进Bcl-2蛋白表达,抑制Bax蛋白表达(P<0.01)。王不留行黄酮苷显著减少了ox-LDL诱导的ROS生成,抑制ox-LDL诱导的炎症因子IL-6、MCP-1和VCAM-1的水平(P<0.01)。王不留行黄酮苷抑制了ox-LDL诱导的NLRP3炎症小体介导的焦亡相关蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。[结论]王不留行黄酮苷能够减轻ox-LDL诱导的HUVECs凋亡,缓解炎症反应,其机制可能与NLRP3介导的焦亡有关。

脑卒中患者血清ox-LDL、ANGPTL8、IL-18变化及其与神经功能缺损程度的关系

目的分析脑卒中患者血清氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、人血管生成素样蛋白8(ANGPTL8)和白介素18(IL-18)的变化及其与患者神经功能缺损程度的关系。方法选取于2020年1月-2022年12月运城市中心医院接收的106例脑卒中患者作为实验组,使用中国脑卒中患者临床神经功能缺损程度评分量表(CSS)评估患者的神经功能缺损程度,并分为轻度组和中重度组;使用改良Rankin量表(mRS)评估患者预后状况,并分为预后良好组和预后不良组;另随机选取40名健康成年人作为对照组,对实验组和对照组、轻度组和中重度组、预后良好组和预后不良组的血清ox-LDL、ANGPTL8和IL-18水平进行组间比较,使用Pearson直线相关分析血清ox-LDL、ANGPTL8和IL-18与CSS评分的关系,采用受试者工作曲线(ROC)分析血清ox-LDL、ANGPTL8和IL-18水平对脑卒中预后的评估价值。结果实验组血清ox-LDL、ANGPTL8和IL-18水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),中重度组血清ox-LDL、ANGPTL8和IL-18水平均高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05),预后不良组血清ox-LDL、ANGPTL8和IL-18水平均高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);脑卒中患者血清ox-LDL、ANGPTL8和IL-18水平与神经功能缺损程度呈正相关(P<0.05);三者联合评估患者预后预测的曲线下面积(AUC)为0.944,ox-LDL、ANGPTL8和IL-18单独评估的AUC为0.849、0.838和0.897,三者联合优于单独评估(P<0.05)。结论脑卒中患者伴血清ox-LDL、ANGPTL8和IL-18水平升高,三指标与神经功能缺损程度呈正相关,三者联合对患者预后预测效能最高,未来有可能成为检测及判断患者预后状况的血清学指标。