m6A甲基化修饰调控结直肠癌细胞中PD-L1表达

目的检测程序性死亡配体-1(PD-L1)mRNA在结直肠癌细胞中是否存在m6A甲基化修饰以及m6A对PD-L1表达的影响,为结直肠癌的免疫治疗提供新的理论依据。方法利用实时荧光定量聚合酶链式反应技术(qPCR)及蛋白质印迹法检测m6A相关蛋白表达变化对PD-L1mRNA和蛋白表达的影响,通过双荧光素酶报告基因实验验证YTHDF2对PD-L1mRNA的调控作用,采用甲基化RNA免疫共沉淀结合qPCR技术(MeRIP-qPCR)确认YTHDF2对PD-L1m6A水平的影响,通过qPCR比较PD-L1和YTHDF2在结直肠癌组织中表达的相关性。结果qPCR和蛋白质印迹检测结果显示m6A阅读蛋白YTHDF2可负向调控PD-L1mRNA和蛋白表达水平,双荧光素酶实验结果说明YTHDF2可识别并作用于PD-L1基因上的潜在m6A修饰位点,MeRIP-qPCR分析发现YTHDF2可以抑制PD-L1mRNA的m6A水平,qPCR进一步发现YTHDF2与PD-L1在癌组织中的表达量呈负相关关系。结论PD-L1在结直肠癌细胞中存在m6A修饰,且YTHDF2可抑制其在结直肠癌细胞中的m6A水平及表达量。

血液透析治疗患者按照0-1-2月免疫程序接种乙型肝炎疫苗的依从性和免疫原性

目的探讨血液透析治疗患者按照0-1-2月免疫程序接种乙型肝炎(乙肝)疫苗(Hepatitis B vaccine,HepB)的依从性和免疫原性。方法采用两种乙肝免疫程序完成率和免疫原性比较的随机对照临床试验,在北京市朝阳区8家医疗机构招募接受血液透析治疗且乙肝表面抗原、乙肝表面抗体(Hepatitis B surface antibody,HBsAb)和乙肝核心抗体均阴性的18-70岁患者,随机分为试验组和对照组,分别按照0-1-2月和0-1-6月免疫程序接种20μg HepB,检测免疫前和免疫后1个月血清HBsAb,比较两组HepB全程接种完成率、HBsAb阳转率和几何平均浓度(GMC)。结果试验组、对照组受试者HepB全程接种完成率分别为94.39%(101/107)、90.83%(99/109)(χ^(2)=1.00,P=0.316);两组全程免疫后HBsAb阳转率分别为70.10%(68/97)、87.76%(86/98)(率差=-17.66%,95%CI下限:-28.84%);GMC分别为60.81mIU/mL、247.08mIU/mL(t=-3.68,P=0.000)。结论血液透析治疗患者HepB 0-1-2月免疫程序的依从性较好,但免疫原性弱于0-1-6月免疫程序。

CMTM6、PD-L1在结直肠癌中的表达及临床意义

结直肠癌为消化系统最常见的恶性肿瘤之一,前期通常症状隐匿,直到疾病中后期才诊断。相较于传统的治疗方案,结直肠癌的新型治疗手段更需要个体化、精确化。其中,靶向程序性死亡受体-1(programmed death 1,PD-1)及其配体(programmed death-ligand 1,PD-L1)的免疫抑制剂为研究热点。而趋化素样因子超家族6(chemokine-like factor superfamily 6,CMTM6)是趋化素样因子超家族的重要成员,其编码的蛋白质通过调节肿瘤细胞增殖、侵袭、转移和免疫逃逸等多个信号通路发挥作用,为PD-L1的关键调控因子,可以稳定PD-L1在质膜上的表达,防止PD-L1被溶酶体降解,从而造成免疫治疗效果不佳。因此,本文就CMTM6、PD-L1在结直肠癌中的表达及与临床病理特征、免疫浸润、预后的相关性研究作一综述,探讨CMTM6及PD-L1作为结直肠癌免疫治疗靶点的重要地位及临床价值。

长病程1型糖尿病患者残余胰岛功能与自身免疫状态关系的研究

目的:探讨长病程1型糖尿病(T1DM)患者残余胰岛功能与自身免疫状态的关系。方法:采用放射配体法测定的血清C肽对中南大学湘雅二医院T1DM综合管理门诊中长病程(病程≥10年)自身免疫T1DM患者的胰岛功能进行评价。将空腹或餐后2 h C肽高于仪器检测敏感度下限(16.7 pmol/L)定义为胰岛功能存留,否则为胰岛功能丧失。筛查并入组所有胰岛功能存留患者(19例),同时入组性别、年龄、病程、体质指数(BMI)匹配的胰岛功能丧失患者(19例)及健康对照(19例)。检测研究对象外周血CD4+T淋巴细胞亚群:Th1辅助细胞(Th1)、Th2辅助细胞(Th2)、Th17辅助细胞(Th17)、调节性T细胞(Treg)及B淋巴细胞亚群:边缘区B细胞(MZB)、滤泡状B细胞(FoB)、分泌白细胞介素10的调节性B细胞(B10)频率及CD4+T、CD8+T、CD19+B细胞表面程序性死亡受体1(PD-1)及其配体(PD-L1)的表达水平;测定研究对象空腹血清中炎症因子干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-1受体抗体(IL-1RA)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-12p40亚基(IL-12p40)、白细胞介素-12p70亚基(IL-12p70)、白细胞介素-23(IL-23)及干扰素诱生蛋白-10(IP-10)的水平。比较上述指标在胰岛功能存留组、胰岛功能丧失组患者与健康对照之间的差异。结果:19例胰岛功能存留组患者中男性占42.1%(8例),年龄[M(Q1,Q3)]为29.0(23.0,40.0)岁,病程[M(Q1,Q3)]为11.0(10.0,14.0)年;19例胰岛功能丧失组患者中男性占42.1%(8例),年龄[M(Q1,Q3)]为30.0(23.0,40.0)岁,病程[M(Q1,Q3)]为12.0(10.0,15.0)年;19例健康对照中男性占42.1%(8例),年龄[M(Q1,Q3)]为29.0(24.0,40.0)岁。健康对照、胰岛功能丧失组、胰岛功能存留组患者Th1细胞频率[M(Q1,Q3)]分别为9.93%(7.45%,15.20%)、14.90%(11.70%,18.00%)、10.20%(6.93%,15.80%)(P=0.015);Treg细胞频率[M(Q1,Q3)]分别为3.52%(2.92%,5.68%)、2.88%(1.64%,3.22%)、3.12%(2.81%,4.81%)(P=0.005);B淋巴细胞表面PD-1分子表达比例[M(Q1,Q3)]分别为4.69%(2.64%,6.37%)、2.11%(1.45%,3.63%)、4.20%(2.53%,6.01%)(P=0.003);血清IL-6水平[M(Q1,Q3)]分别为26.43(18.06,33.35)ng/L、42.97(25.52,66.30)ng/L、22.07(14.85,34.45)ng/L(P=0.006);血清IP-10水平[M(Q1,Q3)]分别为107.39(76.19,126.07)ng/L、188.82(131.27,348.18)ng/L、128.26(114.31,136.50)ng/L(P<0.001)。两两比较发现,胰岛功能丧失组Th1细胞频率、血清IL-6、IP-10水平均分别高于胰岛功能存留组及健康对照,Treg细胞频率、B淋巴细胞表面PD-1分子表达比例均分别低于胰岛功能存留组及健康对照(均P<0.05)。结论:胰岛功能存留的长病程T1DM患者外周血Th1细胞频率、IL-6、IP-10因子水平更低,Treg细胞频率、B细胞表面PD-1分子水平更高,提示存在更强的自身免疫耐受。