长链非编码RNA Linc00467在肿瘤中的作用研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一类转录本长度大于200 nt的不编码蛋白质的RNA分子,其在肿瘤发展过程中的作用目前正被广泛研究。lncRNA Linc00467是一种新发现的lncRNA,且已被证实在肝癌、胃癌、肺癌、结直肠癌等多种肿瘤中均有异常表达。其可调节肿瘤细胞的恶性进程,并影响患者的生存及预后,是与多种恶性肿瘤相关的癌基因。笔者结合目前已有报道,对Linc00467在恶性肿瘤中的作用及其机制研究进展作一综述,以期为Linc00467更全面的研究提供帮助。

乳腺癌组织lncRNA LINC00467和miR-4735-3p表达水平与术后复发转移的相关性

目的检测乳腺癌组织中长链非编码RNA LINC00467(lncRNA LINC00467)、微小RNA-4735-3p(miR-4735-3p)的表达水平,并探讨两者表达水平与乳腺癌患者术后复发转移的相关性。方法回顾性选取2017年4月~2019年4月于河北医科大学第一医院接受乳腺癌改良根治术治疗的109例乳腺癌患者,手术过程中收集乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织(经病理诊断);对患者进行3年的术后随访,将31例出现复发转移的患者作为复发转移组,75例未出现复发转移的患者作为未复发转移组。检测各组织中lncRNA LINC00467、miR-4735-3p的表达水平;Pearson相关分析评价乳腺癌组织lncRNA LINC00467与miR-4735-3p表达水平的相关性;多因素Logistic回归分析评价影响乳腺癌患者术后3年内复发转移的因素;受试者工作特征曲线分析乳腺癌组织lncRNA LINC00467、miR-4735-3p表达水平对术后3年内复发转移的预测价值。结果与癌旁正常乳腺组织比较,乳腺癌组织lncRNA LINC00467表达水平较高,miR-4735-3p表达水平较低(P<0.05);复发转移组和未复发转移组TNM分期比较,差异有统计学意义(P<0.05);与未复发转移组比较,复发转移组乳腺癌组织lncRNA LINC00467表达水平较高,miR-4735-3p表达水平较低(P<0.05);乳腺癌组织中lncRNA LINC00467与miR-4735-3p表达水平呈负相关(P<0.05);TNMⅢ期及lncRNA LINC00467表达水平是影响乳腺癌患者术后3年内复发转移的独立危险因素,而miR-4735-3p表达水平是保护因素(P<0.05);lncRNA LINC00467和miR-4735-3p两者联合预测术后3年内复发转移的曲线下面积优于各自单独预测(P<0.05)。结论乳腺癌组织中lncRNA LINC00467呈高表达,miR-4735-3p呈低表达,两者的表达水平与乳腺癌患者术后3年内复发转移有关,有作为预测乳腺癌复发转移的生物学指标的潜力。

LINC00467靶向miR-495-3p对胃癌细胞HGC-27增殖迁移的影响

目的:探讨长基因间非编码RNA 00467(LINC00467)是否靶向miR-495-3p调控胃癌细胞HGC-27的增殖和迁移。方法:采用实时定量PCR(RT-qPCR)技术检测HGC-27细胞以及人胃黏膜上皮细胞GES-1中LINC00467和miR-495-3p表达量。采用双荧光素酶报告实验和RT-qPCR确定LINC00467和miR-495-3p之间的靶向调控关系。将HGC-27细胞分为si-NC组、si-LINC00467组、si-LINC00467+anti-miR-NC组、si-LINC00467+anti-miR-495-3p组。采用CCK-8法、平板克隆实验检测细胞增殖;划痕愈合实验检测细胞迁移;免疫印迹法分析上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)和神经钙黏素(N-cadherin)表达。结果:与GES-1细胞相比,HGC-27细胞中LINC00467表达量显著升高(P<0.05),miR-495-3p表达量显著降低(P<0.05)。LINC00467与miR-495-3p直接结合。与si-NC组比较,si-LINC00467组HGC-27细胞存活率、克隆形成数、划痕愈合率、N-cadherin蛋白表达量均显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量、miR-495-3p表达量显著升高(P<0.05)。与si-LINC00467+anti-miR-NC组比较,si-LINC00467+anti-miR-495-3p组HGC-27细胞存活率、克隆形成数、划痕愈合率、N-cadherin蛋白表达量均显著升高(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论:干扰LINC00467通过上调miR-495-3p表达能够抑制胃癌细胞HGC-27增殖和迁移。

长链非编码RNA-LINC00467调控代谢重编程对肺腺癌增殖及迁移的影响

目的:探讨敲降长链非编码RNA00467(LINC00467)调控代谢重编程对肺腺癌(LAD)增殖及迁移的影响。方法:qRT-PCR验证H1299、A549细胞和正常支气管上皮细胞(16HBE)中LINC00467的表达情况。H1299、A549细胞中使用慢病毒(shRNA)敲降LINC00467,通过平板克隆、Transwell、流式细胞术检测细胞增殖、迁移和凋亡率。使用慢病毒敲降的H1299、A549细胞验证己糖激酶2(Hexokinase2)和葡萄糖转运体1(Glucose transporter1)的表达含量。使用乳酸试剂盒和ATP试剂盒检测被慢病毒敲降LINC00467的H1299、A549细胞的乳酸含量和ATP含量。结果:LINC00467在H1299和A549细胞中的表达上调(P<0.001);在H1299和A549细胞中敲降LINC00467后能明显抑制细胞的增殖和迁移能力,并促进细胞的凋亡。Hexokinase2和Glucose transporter1在被敲降LINC00467的H1299和A549细胞中表达降低(P<0.001)。被敲降后的H1299和A549细胞的乳酸含量和ATP含量与对照组相比降低(P<0.001)。结论:敲降LINC00467可以降低LAD细胞的能量代谢水平,从而影响LAD增殖及迁移能力。

长链非编码RNA Linc00467在肺腺癌中的表达及功能

目的长链非编码RNA Linc00467在肺腺癌发生发展中的作用尚不明确。文中旨在研究Linc00467在人肺腺癌中的表达情况及临床意义,并阐明Linc00467在体外对肺腺癌细胞及内皮细胞功能的影响。方法选取2012年1月至2013年12月南京军区南京总医院心胸外科60例行肺叶切除并经术后病理证实为肺腺癌I-IIIa期患者的肺腺癌组织标本,及癌周正常组织标本。HUVEC细胞系分为HUVEC实验组(转染pccl-Linc00467过表达质粒)、HUVEC对照组(转染pccl空质粒);A549细胞系分为A549实验组(转染Linc00467-siRNA)、A549对照组(转染阴性siRNA);H1299细胞系分为H1299实验组(转染Linc00467-siRNA)、H1299对照组(转染阴性siRNA)。使用qRT-PCR验证Linc00467在人肺腺癌中的表达情况,分析其与患者临床病理参数的相关性;CCK-8法研究Linc00467在体外对肺腺癌细胞A549、H1299及内皮细胞HUVEC增殖能力的影响;探究Linc00467对HUVEC内皮细胞形成新生血管能力的影响。结果 Linc00467在肺腺癌组织中的表达水平是正常肺组织的(2.72±1.31)倍;Linc00467在A549、H1299中的相对表达量分别为HBE的(3.45±0.25)、(3.22±0.33)倍,差异具有统计学意义(P<0.01)。患者肿瘤大小、血管侵犯与Linc00467的相对表达水平显著相关(P<0.05)。转染Linc00467-siRNA后,A549实验组、H1299实验组Linc00467的表达水平分别较A549对照组、H1299对照组下调72%和68%(P<0.01)。培养48、72、96 h后,A549实验组活细胞数量较A549对照组显著减少[(1.29±0.07)vs(1.51±0.09)个、(1.53±0.15)vs(2.13±0.11)个、(1.98±0.18)vs(3.02±0.12)个];H1299实验组较H1299对照组亦显著减少;HUVEC实验组较HUVEC对照组显著增加(P<0.01)。实验第5天,HUVEC实验组生成血管的分支数量、相对血管长度较HUVEC对照组均明显增加(7.36个/微珠vs 4.25个/微珠、3.12 vs 1,P<0.01)。结论 Linc00467能在体外促进肺腺癌细胞增殖和血管生成,人肺腺癌组织中高表达Linc00467与肿瘤大小和血管侵犯等因素密切相关,提示其为潜在的生物标记物和治疗靶标。

LINC00467通过靶向miR-495-3p调控视网膜母细胞瘤细胞增殖和凋亡

目的:探讨LINC00467对视网膜母细胞瘤(Rb)细胞增殖、凋亡的影响和分子机制。方法:RT-qPCR检测Rb组织和正常视网膜组织中LINC00467和miR-495-3p表达。将Y79细胞分为si-NC、si-LINC00467、miR-NC、miR-495-3p、siLINC00467+anti-miR-NC、si-LINC00467+anti-miR-495-3p组,MTT法检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞周期素D1(CyclinD1)、p21、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白(Bax)蛋白表达。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR确定LINC00467对miR-495-3p的靶向调控作用。结果:抑制LINC00467表达,Y79细胞活力、CyclinD1和Bcl-2蛋白表达显著降低,细胞凋亡率、p21和Bax蛋白表达显著升高(P<0.05)。过表达miR-495-3p后Y79细胞活力、CyclinD1和Bcl-2蛋白表达显著降低,细胞凋亡率、p21和Bax蛋白表达显著升高(P<0.05)。抑制miR-495-3p表达可逆转抑制LINC00467表达对Y79细胞增殖、凋亡以及相关蛋白表达的影响(P<0.05)。结论:Rb中LINC00467表达升高,miR-495-3p表达降低。抑制LINC00467通过靶向上调miR-495-3p抑制Rb细胞增殖,诱导其凋亡。

长链非编码RNA LINC00467靶向miR-1247-5p调控肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的探究长链非编码RNA LINC00467(lncRNA LINC00467)靶向微小RNA-1247-5p(miR-1247-5p)对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制。方法体外培养肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721、BEL-7402与正常肝细胞株L02,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中lncRNA LINC00467与miR-1247-5p相对表达量。用LINC00467 siRNA(si-LINC00467组)、miR-1247-5p mimic(miR-1247-5p组)及其各自阴性对照分别转染肝癌HepG2细胞,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性,Transwell实验检测HepG2细胞迁移及侵袭能力,荧光素酶报告基因实验确定LINC00467与miR-1247-5p的靶向关系,Western印迹检测细胞增殖、迁移及侵袭相关蛋白表达。结果与正常肝细胞株L02相比,不同肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721、BEL-7402中LINC00467相对表达量明显升高(P<0.05),而miR-1247-5p相对表达量明显降低(P<0.05);沉默LINC00467或miR-1247-5p过表达均可显著抑制肝癌细胞增殖及细胞周期蛋白(Cyclin)D1的表达,显著促进p21及p27蛋白表达(P<0.05);沉默LINC00467或miR-1247-5p过表达还能显著抑制肝癌细胞迁移、侵袭及基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、MMP-14的表达(P<0.05);LINC00467可负向调节miR-1247-5p表达;抑制miR-1247-5p可显著减弱si-LINC00467对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的作用(P<0.05)。结论lncRNA LINC00467可通过靶向miR-1247-5p增强肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。

长链非编码RNA Linc00467在结直肠癌中的表达及影响

目的探讨长链非编码RNA Linc00467在结直肠癌中的表达和意义。方法实时荧光定量PCR检测Linc00467在结直肠癌组织和结肠癌细胞系中的表达水平。通过Transwell迁移实验、MTS实验和克隆形成实验检测Linc00467对结肠癌细胞迁移、增殖等行为的影响。统计纳入的67例患者的临床病理资料,分析Linc00467的表达水平和患者临床病理学特征之间的关系。结果 Linc00467在结直肠癌组织和细胞系中高表达。敲低Linc00467可以抑制结肠癌细胞的迁移和增殖。Linc00467的表达丰度与结直肠癌患者的临床病理特征之间无显著相关性。结论 Linc00467在结直肠癌中高表达,可以促进结肠癌的迁移和增殖。

长链非编码RNA LINC00467在卵巢癌的表达及其临床意义

目的通过检测卵巢癌(ovarian cancer,OC)组织和卵巢癌细胞系中长链非编码RNA LINC00467的表达情况,探讨其与卵巢癌临床病理特征的关系及生物学特性,初步探讨LINC00467可能的调控机制。方法首先基于癌症基因组图谱(TCGA)的基因表达谱交互分析数据库,通过生物信息学分析评估LINC00467在卵巢癌组织中的表达水平,使用Starbase数据库预测LINC00467可能的miRNA作用靶点。再采用定量实时PCR(qPCR)检测66对卵巢癌组织和正常卵巢组织中LINC00467和miR-302a-3p的表达情况,分析其与卵巢癌临床病理特征的关系。进一步通过基因沉默技术,降低LINC00467的表达后,再采用CCK-8实验、集落形成实验、Transwell迁移和侵袭实验测定LINC00467对卵巢癌细胞的生物学特性的影响;使用双荧光素酶报告基因检测LINC00467和miR-302a-3p的结合关系,降低LINC00467的表达后检测miR-302a-3p的表达量。结果生物信息学分析提示癌症基因组图谱(TCGA)数据库中卵巢癌组织LINC00467表达明显高于正常对照组;实时定量PCR(qPCR)提示66例OC组LINC00467的表达明显高于正常卵巢组,差异有统计学意义(P<0.001),卵巢癌细胞系中LINC00467的表达亦明显高于人卵巢上皮细胞系(HOSEpiC),差异有统计学意义(P<0.001),验证了生物信息学分析揭示的结果。LINC00467高表达组和低表达组卵巢癌的病理分级、淋巴结转移情况以及FIGO分期差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析结果表明低表达LINC00467的卵巢癌患者总生存期优于高表达LINC00467的卵巢癌患者,差异有统计学意义(P<0.01)。沉默LINC00467表达后,卵巢癌细胞的增殖活性、集落形成能力、迁移和侵袭能力都受到明显抑制,反而miR-302a-3p的表达量明显提高,差异有统计学意义(P<0.01),LINC00467与miR-302a-3p可以直接结合。结论长链非编码RNA LINC00467在卵巢癌组织及细胞中高表达,与卵巢癌细胞的增殖、转移能力相关,与卵巢癌患者预后不良呈正相关,其作用机制可能是LINC00467靶向调控miR-302a-3p而达到抑制作用。

敲降长链非编码RNA 00467表达对肺腺癌患者预后的影响及其机制

目的:探讨敲降长链非编码RNA00467(long intergenic non-coding RNA00467,linc00467)对肺腺癌(lung adenocarcinoma,LAD)患者预后的影响及其机制。方法:收集LAD患者和健康志愿者血清样本,采用定量逆转录PCR(qRT-PCR)方法检测LAD患者和健康志愿者血清中linc00467的表达水平。绘制ROC曲线检测linc00467在LAD中的诊断效能。通过Kaplan-Meier生存曲线和对数秩检验分析患者总生存期(overall survival,OS)。使用细胞增殖测定法和裸鼠皮下瘤实验来证实敲降linc00467表达在体外和体内对肿瘤发生的影响。结果:与健康志愿者相比,LAD患者血清中的linc00467表达上调,并且linc00467在肿瘤直径大于3 cm的LAD患者、有淋巴结转移和晚期LAD患者血清中的表达水平明显上调(P=0.038、P=0.018和P=0.019)。血清中高表达的linc00467提示LAD患者预后较差,多因素分析表明linc00467的表达可以作为LAD总生存期的独立预后因素。功能实验表明,敲降linc00467表达可以在体外和体内抑制LAD细胞增殖。结论:研究表明linc00467参与了LAD的发生发展,并且linc00467可能是一种新型的诊断和预后生物标志物,也是LAD的潜在治疗靶标。

长链非编码RNA00467通过调控巨噬细胞极化促进肺腺癌细胞增殖

目的 长链非编码RNA是肿瘤细胞影响周围环境的重要方式之一,其机制仍然是目前研究的热点。文中旨在探讨肺腺癌细胞是否通过长链非编码RNA00467诱导巨噬细胞极化,进而促进肺腺癌细胞的增殖。方法 100 ng/mL佛波酯(PMA)处理人THP-1细胞48 h, RT-PCR检测细胞CD68的表达水平。巨噬细胞分别与A549细胞和16HBE细胞共培养,A549细胞与巨噬细胞共培养为实验组,16HBE细胞与巨噬细胞共培养为对照组,共培养实验验证肺腺癌细胞对巨噬细胞极化的影响。RT-PCR实验检测巨噬细胞极化后linc00467表达水平变化。通过慢病毒shRNA敲低A549细胞中linc00467水平并进行巨噬细胞共培养实验,观察巨噬细胞极化情况。随后通过慢病毒shRNA敲低巨噬细胞linc00467水平并分别与A549细胞共培养,MTT实验检测敲低巨噬细胞linc00467水平后对A549细胞增殖能力的影响。结果 实验组CD68mRNA水平(1.95±0.49)较对照组(0.41±0.15)明显增加(P<0.01)。肺腺癌细胞组中巨噬细胞IL-12的表达水平(8.27±1.06)较对照组(16.28±2.11)下降(P<0.01);IL-10的表达水平(12.86±2.17)较对照组(7.91±1.85)上升(P<0.01)。与对照组(0.42±0.19)相比,A549细胞与巨噬细胞共培养组中巨噬细胞linc00467的表达水平(1.87±0.41)增加(P<0.01)。与对照组相比,转染shRNA-linc00467的巨噬细胞组,A549细胞增殖能力显著降低(P<0.01)。结论 肺腺癌细胞的linc00467会被巨噬细胞摄取,诱导巨噬细胞极化,进而促进肺腺癌细胞的增殖能力,这为肺腺癌的治疗提供了新的可能的靶点。

新疆维吾尔族溃疡性结肠炎患者长链非编码RNA LINC00467表达特征与预后分析

目的探讨新疆维吾尔族溃疡性结肠炎(UC)患者长链非编码RNA(LncRNA)LINC00467表达特征与预后关系。方法回顾性分析2017年1月至2019年6月新疆医科大学第四附属医院收治的维吾尔族UC患者30例,其中活动期20例,缓解期10例。另选择2019年1月至2020年6月新疆医科大学第四附属医院维吾尔族健康人30例作为对照组。受试者均于结肠镜检查时,内镜直视下采用统一型号活检钳,取3块肠黏膜组织。采用荧光定量PCR测定LncRNA LINC00467表达。比较不同分期的UC患者LncRNA LINC00467表达;LncRNA LINC00467表达与UC患者临床特征的关系;比较不同预后的UC患者LncRNA LINC00467表达;采用Cox多因素分析影响预后危险因素。结果LncRNA LINC00467表达比较,活动期组(1.56±0.27)和缓解期组(0.89±0.21)高于对照组(0.34±0.08),活动期组(1.56±0.27)高于缓解期组(0.89±0.21),差异有统计学意义(P<0.05)。不同性别、年龄、病程和病变范围LncRNA LINC00467表达比较无统计学差异(P>0.05);LncRNA LINC00467表达比较,中度(1.30±0.25)和重度(1.67±0.24)高于(0.86±0.16)轻度,且重度(1.67±0.24)高于中度(1.30±0.25),差异有统计学意义(P<0.05)。随访末,预后良好21例,预后不良9例。预后不良组LncRNA LINC00467表达(2.42±0.48)高于预后良好组(0.63±0.12),差异有统计学意义(P<0.05)。经Cox多因素分析显示,疾病活动程度和LncRNA LINC00467表达为影响预后危险因素。结论新疆维吾尔族UC患者LncRNA LINC00467呈高表达,且随着病情加重及预后进展表达越高,及LncRNA LINC00467表达为影响危险因素。

长链非编码RNA linc00467在儿童急性髓系白血病中的表达及耐药中的作用研究

目的研究长链非编码RNA linc00467在儿童急性髓系白血病(AML)中的表达及功能。方法采集2016年5月至2018年6月确诊的5例儿童AML病例的骨髓标本,以进行骨髓检查提示为正常的3例儿童骨髓标本作为对照。通过实时荧光定量PCR检测并比较linc00467在两组样本中的表达量。通过慢病毒系统在AML细胞(HL-60)中过表达linc00467(linc00467过表达组),以表达绿色荧光蛋白(GFP)的空载体转入AML细胞作为对照(GFP对照组);通过慢病毒系统将干扰序列插入AML细胞中(sh-linc00467干扰组),以插入随机序列作为对照(sh-NC对照组)。检测各组细胞增殖情况及对阿霉素耐药性的影响。结果与对照组儿童相比,linc00467在儿童AML中表达上调。过表达与干扰linc00467表达对细胞增殖无明显影响(P>0.05)。相比于GFP对照组,过表达linc00467在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg/mL阿霉素浓度作用下均可增强HL-60细胞活性(P<0.05)。相比于sh-NC对照组,干扰linc00467的表达在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg/mL阿霉素浓度作用下均可降低HL-60细胞活性(P<0.05)。与未处理组相比,阿霉素处理HL-60细胞后linc00467表达量升高(P<0.05)。结论linc00467有促进AML细胞对阿霉素耐药的生物学功能,为AML新的治疗药物开发提供了依据。

长链非编码RNA linc00467在儿童急性髓系白血病中的表达及耐药中的作用研究

研究长链非编码RNA linc00467在儿童急性髓系白血病中的表达及耐药中的作用。方法:(1)按照儿童正常骨髓和病例骨髓取样分组;(2)在基因表达研究中,将绿色荧光蛋白纳入对照组,将linc00467纳入过表达组;(3)在基因干扰研究中,将sh-NC纳入对照组,将sh-linc00467纳入干扰组。结果:(1)经由实时荧光定量PCR检测发现,患儿linc00467表达水平高于对照组表达水平,差异有统计学意义(P<0.05);(2)过表达组linc00467相对表达量高于GFP对照组,有差异性(P<0.02)、(t=-22.377);(3)根据慢病毒基因干扰对HL-60细胞中干扰linc00467的表达分析发现:sh-NC对照组表达水平为(0.97±0.17),高于sh-linc00467干扰组(P<0.05)、(t=10.645)。结论:长链非编码RNA linc00467能够促进儿童急性髓系白血病细胞对阿霉素的耐药性,对儿童急性髓系白血病的耐药机制研究有重要的临床价值。

LINC00467调控miR-363促进胶质瘤替莫唑胺耐药的机制研究

目的探讨LINC00467调控miR-363促进胶质瘤(GBM)替莫唑胺(TMZ)耐药的作用机制。方法亲本GBM细胞系A172和U373构建TMZ抗性细胞株A172TR和U373TR,通过CCK-8、Western Blot以及AnnexinV-FITC/PI法验证耐TMZ细胞模型。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测LINC00467在亲本细胞与耐TMZ细胞中水平,通过siRNA干扰LINC00467表达后,CCK-8、qRT-PCR以及AnnexinV-FITC/PI法检测干扰LINC00467表达对耐TMZ细胞的影响。双荧光素酶实验验证miR-363与LINC00467的关系。qRT-PCR检测miR-363在GBM细胞以及沉默LINC00467后耐TMZ细胞中水平。结果与亲本细胞相比,耐TMZ细胞株A172TR和U373TR增殖能力明显上调(P<0.05),ABC超家族ABCB1、ABCC1、ABCG2及MGMT的蛋白表达量显著上调(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。与亲本细胞相比,LINC00467在耐TMZ细胞A172TR和U373TR中表达显著上调,且在耐TMZ细胞中下调LINC00467表达可明显降低其增殖活力,提高其凋亡率(P<0.05)。miR-363在耐TMZ细胞中的表达显著低于亲本细胞,且在耐TMZ细胞中下调LINC00467表达后,miR-363的表达增高(P<0.05)。经验证,miR-363与LINC00467存在调控关系。结论LINC00467可能通过负向调控miR-363进而参与调控GBM细胞增殖及凋亡等过程,从而促进GBM TMZ耐药。

LINC00467调控CDK1和CDC45促进肝细胞癌对索拉非尼耐药的研究

目的探讨LINC00467调控肝细胞癌(肝癌)对索拉非尼耐药的作用机制。方法通过加权基因共表达网络分析GEO数据集GSE73571,筛选与索拉非尼耐药相关基因;并通过GO和KEGG富集分析确认与LINC00467相关的功能基因及其调控的下游基因。构建索拉非尼耐药细胞株HepG2-R,正常HepG2细胞设为HepG2-。CCK-8检测索拉非尼细胞毒性和计算IC50值;荧光定量RTPCR检测LINC00467、周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)和细胞分裂周期蛋白45(CDC45)的mRNA表达水平。两组LINC00467、CDK1、CDC45 mRNA相对表达量比较采用t检验。结果加权基因共表达网络分析筛选与索拉非尼耐药相关基因LINC00467,GO和KEGG分析确认与LINC00467相关功能及其调控下游基因CDK1和CDC45。荧光定量RT-PCR检测发现HepG2-R细胞LINC00467 mRNA相对表达量为2.49±0.30,明显高于HepG2-P细胞的1(t=4.91,P<0.05);siRNA干扰后LINC00467 mRNA相对表达量为0.36±0.04,干扰前为1,LINC00467 mRNA表达明显降低(t=-14.60,P<0.05)。转染siRNA-LINC00467可将耐药细胞对索拉非尼的IC50值从14.03μmol/L降低至7.33μmol/L。CDK1和CDC45在HepG2-R耐药细胞中表达升高,而siRNA干扰LINC00467的表达导致CDK1和CDC45在HepG2耐药细胞中的表达明显降低。结论基于公共数据库挖掘发现LINC00467在肝癌中高表达,LINC00467可能通过上调CDK1和CDC45参与调控细胞周期以及DNA损伤修复过程,从而促进肝癌对索拉非尼耐药。

LINC00467促进结直肠癌细胞增殖和血管生成机制的初步研究

目的研究结直肠癌细胞HCT116中长链非编码RNA LINC00467的相对表达水平,探索LINC00467对HCT116细胞增殖和血管生成的影响及可能的分子机制。方法使用生物信息学方法分析LINC00467在结直肠癌中的相对表达水平和核质分布情况,通过qRT-PCR检测结直肠癌细胞HCT116及人正常结肠上皮细胞株FHC中LINC00467的相对表达水平。克隆形成和基质胶成管实验检测LINC00467在HCT116中的部分生物学功能。生物信息学和双荧光素酶报告基因实验探索LINC00467和miR-128-3p的相互作用。结果生物信息学分析显示LINC00467在结直肠癌组织中表达上调,LINC00467在HCT116细胞中表达量较FHC升高(P<0.05)。敲低LINC00467后HCT116细胞增殖和血管生成能力降低(P<0.01)。核质分离实验显示LINC00467主要位于HCT116细胞的胞质。生物信息学预测LINC00467与miR-128-3p相结合,双荧光素酶报告基因实验显示LINC00467竞争性吸附miR-128-3p。拯救实验显示LINC00467靶向miR-128-3p促进HCT116细胞增殖和血管生成。结论LINC00467可能通过竞争性吸附miR-128-3p促进结直肠癌细胞HCT116增殖和血管生成。