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Therapeutic and Immunomodulatory Effects of Raw Maize "OGI" on Rats Infected with Escherichia coil 0157:H7
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作者 Busuyi Micheal Komolafe Ayodele O. Ogundare Tinuola Tokunbo Adebolu 《Journal of Life Sciences》 2013年第6期570-576,共7页
Escherichia coli O157:H7 is known to cause food borne illness globally. Treatment of infections caused by this organism is difficult because the administration of antibiotics might precipitate kidney complications; t... Escherichia coli O157:H7 is known to cause food borne illness globally. Treatment of infections caused by this organism is difficult because the administration of antibiotics might precipitate kidney complications; therefore there is the need to search for alternative therapy. In this study, the therapeutic and immunomodulatory effects of raw maize "ogi" was investigated on rats infected with Escherichia coli 0157:H7. Infected rats treated with maize "ogi" slurry 1.0 mL once or twice daily and maize "ogi" liquor, 1.0 mL twice daily recovered 72 h while those that were treated with less than 1.0 mL recovered by 96 h. Without treatment with "ogi" however, the rats started recovering by 120 h. The treatment caused the white blood cells which had already gone up as a result of the infection to reduce significantly (P 〈 0.05) by 24 h of administration of raw fermented maize "ogi" components to the infected rats. It also caused a significant decrease in the lymphocyte counts of the infected and treated rats by 24 h. On the other hand, there was an increase in the neutrophil count irrespective of the different volumes and different components of raw "ogi" used by 24 h but by the 72 h of treatment, it started to decrease and by 120 h reduced to normal levels. Since the administration of raw maize "ogi" either slurry or liquor caused the duration of infection in rats infected with Escherichia coli 0157:H7 to reduce from 120 h to 72 h, it is therefore suggested that people having diarrhoea caused by this organism could drink fermented raw maize "ogi" slurry or liquor to treat the infection. 展开更多
关键词 Maize "ogi" E. coli 0157:h7 ThERAPEUTIC immunomodulatory.
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使用SPR生物传感器快速检测大肠杆菌E.Coli 0157∶H7 被引量:19
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作者 葛晶 殷涌光 王凯 《吉林大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期214-218,共5页
利用大肠杆菌抗体的免疫吸附反应,使用集成化手持式 SpreetaTM SPR传感器快速检测大肠杆菌E.Coli 0157∶H7,采用亲和素 生物素系统放大检测的响应信号,并引入复合抗体作为二次抗体,使该传感器对大肠杆菌的检测限由106cfu/mL下降到105cfu... 利用大肠杆菌抗体的免疫吸附反应,使用集成化手持式 SpreetaTM SPR传感器快速检测大肠杆菌E.Coli 0157∶H7,采用亲和素 生物素系统放大检测的响应信号,并引入复合抗体作为二次抗体,使该传感器对大肠杆菌的检测限由106cfu/mL下降到105cfu/mL。 展开更多
关键词 食品检测 SPR生物传感器 快速检测 大肠杆菌 复合抗体
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大肠杆菌0157:H7呼吸系统调控蛋白FNR对三型分泌系统调控的研究
3
作者 徐雪芳 阎泽军 +1 位作者 熊衍文 徐建国 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1043-1046,共4页
目的了解大肠杆菌0157:H7FNR(fumarate nitrate reduction,富马酸硝酸盐还原)对三型分泌系统(type Ⅲ secretion system,T3SS)表达的影响。方法本研究采用kRed重组技术,利用PCR产物,通过Bet(a ssDNA annealing protein,ssDN... 目的了解大肠杆菌0157:H7FNR(fumarate nitrate reduction,富马酸硝酸盐还原)对三型分泌系统(type Ⅲ secretion system,T3SS)表达的影响。方法本研究采用kRed重组技术,利用PCR产物,通过Bet(a ssDNA annealing protein,ssDNA退火蛋白)和Exo(a5’-3’dsDNA exonuclease,5’-3’dsDNA外切酶)蛋白促进同位交换的方法,成功构建了.—矿突变株。结果虽然细胞黏附结果显示,与野生株相比,缺失株的黏附力并没有明显下降。但是T3SS的蛋白图谱显示.加突变株中蛋白分泌量有明显下降。结论推测可能是fnr基因敲除后导致高浓度的ClpXP(caseinolytic proteaseX&P,酪蛋白水解酶X&P)引起GrlA(global regulator of LEE activator)蛋白的降解,从而导致LEE(locus of enteroeyte effacement)表达的下降,造成T3SS蛋白分泌量的下降。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 h7 FNR T3SS
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动物源大肠杆菌O157:H7多重PCR检测方法的初步研究 被引量:4
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作者 陈雅君 胡慧 +6 位作者 段志刚 崔保安 张龙现 孟振北 彭新然 陈丽颖 王亚宾 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第5期87-91,共5页
为建立快速、特异的分离鉴定大肠杆菌O157∶H7的多重PCR方法,根据GenBank上已发表的大肠杆菌O157∶H7菌体抗原和鞭毛抗原的基因序列(rfbE和fliC基因)设计2对特异引物,分别建立针对rfbE、fliC基因的单一PCR方法;通过优化扩增条件,进一步... 为建立快速、特异的分离鉴定大肠杆菌O157∶H7的多重PCR方法,根据GenBank上已发表的大肠杆菌O157∶H7菌体抗原和鞭毛抗原的基因序列(rfbE和fliC基因)设计2对特异引物,分别建立针对rfbE、fliC基因的单一PCR方法;通过优化扩增条件,进一步建立可用于动物粪便检测的大肠杆菌多重PCR方法,并进行特异性和灵敏性试验,同时还初步应用到临床样品的检测中。结果表明:所建立的多重PCR方法能同时扩增出rfbE基因(327 bp)和fliC基因(247 bp)的特异性片段,特异性结果显示其他非大肠杆菌O157∶H7的扩增结果均为阴性,表明该方法有较高的特异性;灵敏度试验结果显示细菌纯培养物的检测灵敏度为102cfu/mL。通过试验初步建立了快速、灵敏、特异的检测大肠杆菌O157∶H7的多重PCR方法,为从动物粪便中分离鉴定大肠杆菌O157∶H7提供了一种简单、灵敏的试验方法,可用于临床动物携带大肠杆菌O157∶H7的分子流行病学调查。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157h7 多重PCR rfbE基因 fliC基因
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大肠杆菌O157:H7多克隆抗体纯化 被引量:6
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作者 郎婧 金敏 +2 位作者 王新为 李君文 晁福寰 《解放军预防医学杂志》 CAS 北大核心 2008年第4期238-241,共4页
目的制备大肠杆菌O157∶H7多克隆抗体,比较3种纯化方法对抗体性能的影响,为食品检验、临床和血清学检验O157∶H7奠定基础。方法应用传统方法制备大肠杆菌O157∶H7多克隆抗体,利用盐析法、亲和层析法和抗原吸附法对其进行纯化,采用SDS-P... 目的制备大肠杆菌O157∶H7多克隆抗体,比较3种纯化方法对抗体性能的影响,为食品检验、临床和血清学检验O157∶H7奠定基础。方法应用传统方法制备大肠杆菌O157∶H7多克隆抗体,利用盐析法、亲和层析法和抗原吸附法对其进行纯化,采用SDS-PAGE、Bradford法、ELISA等实验技术检测纯化后抗体的纯度、比效价、交叉反应性,从而比较3种纯化方法的纯化效果。结果获得效价1∶131072的大肠杆菌O157∶H7抗血清。亲和层析法所得纯化产物纯度较高,抗体解链为分子量约55 kDa和25 kDa的蛋白,抗原吸附法所得产物纯度次之,盐析法所得产物的纯度较差,有多条杂蛋白条带。抗原吸附法所得纯化产物比效价较高为349.3,并且与其他5株细菌的交叉反应情况相对反应较小。结论亲和层析法和抗原吸附法纯化抗体均有一定的优越性,抗原吸法得到的抗体使用性能较好。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157:h7 多克隆抗体 纯化
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肠出血性大肠杆菌O157∶H7志贺样毒素Ⅱ毒素亚单位Stx2A的表达与纯化 被引量:2
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作者 马颖 毛旭虎 +1 位作者 邹全明 张卫军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第15期1582-1584,共3页
目的克隆表达肠出血性大肠杆菌(Enterohem orrhagic Escherichia col,i EHEC)O157∶H7志贺样毒素A亚单位(Sh iga-like toxin,Stx2A),并对其初步纯化。方法设计引物采用PCR法自EHEC O157∶H7基因组扩增Stx2A的编码基因stx2 a,T-A克隆后... 目的克隆表达肠出血性大肠杆菌(Enterohem orrhagic Escherichia col,i EHEC)O157∶H7志贺样毒素A亚单位(Sh iga-like toxin,Stx2A),并对其初步纯化。方法设计引物采用PCR法自EHEC O157∶H7基因组扩增Stx2A的编码基因stx2 a,T-A克隆后构建原核表达质粒pET-11 c(+)-stx2 a,经测序鉴定后转化E.coli.BL21(DE3),IPTG诱导表达,以SDS-PAGE和W esten b lot分析目的蛋白的表达,并采用固相镍离子亲和层析纯化重组蛋白。结果扩增的stx2 a基因约950bp;原核表达质粒pET-11 c(+)-stx2 a经酶切和测序鉴定与预期序列一致;并在E.coli.BL21(DE3)中得到高效表达,蛋白表达率约30%;PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量约31×103;经固相镍离子亲和层析纯化后,蛋白纯度可达92.3%。结论EHEC O157∶H7 Stx2A的高效表达与初步纯化,为探讨O157∶H7菌的感染机制奠定基础。 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌0157:h7 毒素A亚单位 表达 纯化
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肠出血性大肠杆菌O157:H7△hly△stx△toxB基因缺失株的构建 被引量:1
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作者 张雪寒 何孔旺 +11 位作者 赵攀登 栾晓婷 叶青 温立斌 倪艳秀 周俊明 李彬 王小敏 郭容利 俞正玉 茅爱华 吕立新 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第5期76-82,共7页
肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli)O157:H7是食源感染的人兽共患病原菌。志贺毒素(Shiga toxin,Stx)、溶血素(haemolysin,Hly)和ToxB是O157:H7重要的毒力因子。选用自杀性质粒pMEG375,体外构建具有同源臂的重组自... 肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli)O157:H7是食源感染的人兽共患病原菌。志贺毒素(Shiga toxin,Stx)、溶血素(haemolysin,Hly)和ToxB是O157:H7重要的毒力因子。选用自杀性质粒pMEG375,体外构建具有同源臂的重组自杀性质粒,借助于sm10宿主菌获得O157:H7杂交菌株,通过同源重组,依次获得O157:H7(△hly△stx△toxB)基因缺失株,△hly△stx△toxB接种HEp-2细胞和感染链霉素处理的Balb/c小鼠,明确缺失株粘附定植的能力。经PCR鉴定,hly、stx和toxB基因分别被壮观霉素(Spc+)、庆大霉素(Gm+)和卡那霉素(Kan+)基因表达盒所代替,Western blot鉴定结果显示,O157:H7(△hly△stx△toxB)检测不到相应的Stx、Hly和ToxB蛋白。O157:H7(△hly△stx△toxB)生长特性与亲本株无明显差异。对于HEp-2细胞的粘附能力明显降低。Balb/c小鼠排菌时间和排菌量明显减少和降低。本研究成功获得O157:H7(△hly△stx△toxB),并且明确Stx、Hly和ToxB的缺失导致了O157:H7对HEp-2细胞和Balb/c小鼠的粘附和定植能力降低。本研究旨在为研制EHEC O157:H7基因缺失疫苗奠定物质基础。 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌O157:h7 hly STX toxB 缺失株 小鼠 粘附
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生物传感器在大肠杆菌O157:H7检测中的应用 被引量:4
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作者 李蓉卓 刘霞 +1 位作者 李蕾 李文进 《化学传感器》 CAS 2013年第1期12-17,共6页
生物传感器因其简单、快速、特异性强、灵敏度高等优越性越来越引起重视,已被广泛应用于各个研究领域。肠出血性大肠杆菌O157:H7自发现以来就被认为是危害性很大的致病菌,并且在世界范围内曾多次暴发食源性疾病,已成为威胁人类健康的全... 生物传感器因其简单、快速、特异性强、灵敏度高等优越性越来越引起重视,已被广泛应用于各个研究领域。肠出血性大肠杆菌O157:H7自发现以来就被认为是危害性很大的致病菌,并且在世界范围内曾多次暴发食源性疾病,已成为威胁人类健康的全球性公共卫生问题。因此,在食品安全领域,对大肠杆菌O157:H7检测方法的研究已成为热点。文章简单介绍了生物传感器的原理和分类,重点综述了近年来生物传感器在E.coli O157∶H7检测中的应用,并展望了其发展前景。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 h7 生物传感器 检测
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冻融循环下大肠杆菌O157:H7在长春市南湖岸边水中的存活行为研究 被引量:1
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作者 张蕊 丁美月 +1 位作者 李慧儒 马金才 《科学技术与工程》 北大核心 2017年第21期150-155,共6页
北方地区的初春、晚秋,水体表层的夜冻昼融过程是典型特征。冻融循环过程影响水体自身理化性质,理化性质的变化对水中微生物,尤其是潜在的致病微生物的存活也会产生一定的影响。实验在室内模拟了大肠杆菌O157:H7在冻融循环条件下,在长... 北方地区的初春、晚秋,水体表层的夜冻昼融过程是典型特征。冻融循环过程影响水体自身理化性质,理化性质的变化对水中微生物,尤其是潜在的致病微生物的存活也会产生一定的影响。实验在室内模拟了大肠杆菌O157:H7在冻融循环条件下,在长春南湖水中的动态存活特征;并通过线性模型和Weibull模型,计算大肠杆菌O157:H7在污染水体后衰减达到最低检测限的时间(ttd);并运用多元线性回归进行相关性分析,找出影响实验菌种存活的关键因素。研究表明,南湖水的p H和氨氮与大肠杆菌O157:H7的存活相关。研究结果可为调查大肠杆菌O157:H7在湖水中的存活趋势,评估其可能带来的环境健康风险,为制定相应的环境管控措施提供科学依据。 展开更多
关键词 冻融循环 湖水 大肠杆菌O157:h7 存活
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大肠杆菌O157:H7 eaeA基因的原核表达
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作者 龚霞 郭霄峰 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期109-113,共5页
将含广东分离株大肠杆菌O157∶H7 021210eaeA基因的克隆质粒双酶切后,亚克隆至原核表达载体pET-28 a(+),经PCR鉴定、酶切鉴定及核苷酸序列测定,正确构建了原核重组表达质粒pET-eaeA.再将该重组质粒转化E.coliBL21(DE3)pLysS,经IPTG诱导... 将含广东分离株大肠杆菌O157∶H7 021210eaeA基因的克隆质粒双酶切后,亚克隆至原核表达载体pET-28 a(+),经PCR鉴定、酶切鉴定及核苷酸序列测定,正确构建了原核重组表达质粒pET-eaeA.再将该重组质粒转化E.coliBL21(DE3)pLysS,经IPTG诱导,进行SDS-PAGE,结果显示,目的蛋白的相对分子质量约为94 000,与eaeA基因蛋白的理论值相符.破菌后电泳证实目的蛋白主要以包涵体形式存在.表达蛋白经初步纯化,3次免疫新西兰兔,获得抗eaeA蛋白的多克隆血清.经琼脂扩散试验和W estern-b lotting试验,表明该蛋白具有较好的免疫原性和反应原性. 展开更多
关键词 大肠杆菌0157:h7 eaeA基因 紧密素 原核表达
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茶多酚EGCG抑制大肠杆菌O157:H7生物膜研究 被引量:5
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作者 肖洁 张秀琴 +2 位作者 杜文芳 段合波 李睿 《武汉轻工大学学报》 2017年第3期33-36,67,共5页
研究低于抑菌浓度的茶多酚EGCG对大肠杆菌O157:H7 EDL933生物膜形成和泳动性能的影响。在培养基中添加不同浓度的EGCG加入到玻璃试管,接种大肠杆菌O157:H7EDL933,30℃下静置培养5 d。结晶紫法测定生物膜量。结果表明亚抑菌浓度(0.125mg/... 研究低于抑菌浓度的茶多酚EGCG对大肠杆菌O157:H7 EDL933生物膜形成和泳动性能的影响。在培养基中添加不同浓度的EGCG加入到玻璃试管,接种大肠杆菌O157:H7EDL933,30℃下静置培养5 d。结晶紫法测定生物膜量。结果表明亚抑菌浓度(0.125mg/m L,0.25 mg/m L,0.5 mg/m L)的EGCG可以显著抑制大肠杆菌O157:H7 EDL933的生物膜形成。0.3%LB软琼脂加入亚抑菌浓度(0.125 mg/m L、0.25 mg/m L、0.5 mg/m L)的EGCG,37℃培养大肠杆菌O157:H7 EDL933 24 h,结果证实大肠杆菌O157:H7 EDL933泳动能力显著减小。结果证实EGCG具有很强的抑制细菌生物膜的能力,有望用于食品工业控制细菌污染。 展开更多
关键词 茶多酚EGCG 大肠杆菌O157:h7 生物膜 泳动性
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Musa Paradaisica and Vitis vinifera Functionalised Ag-NPs: Electrochemical and Optical Detection of Escherichia coli in Seawater
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作者 Sphamandla Nqunqa Takalani Mulaudzi +2 位作者 Njagi Njomo Usisipho Feleni Rachel F. Ajayi 《Journal of Surface Engineered Materials and Advanced Technology》 CAS 2022年第3期35-59,共25页
Herein, we demonstrate a simple and inexpensive one-pot green synthesis of silver nanoparticles (Ag-NPs) functionalised with a combination of banana peel (Musa paradisiaca) and grape (Vitis vinifera) fruit extracts. T... Herein, we demonstrate a simple and inexpensive one-pot green synthesis of silver nanoparticles (Ag-NPs) functionalised with a combination of banana peel (Musa paradisiaca) and grape (Vitis vinifera) fruit extracts. The reaction mixture of aqueous silver nitrate, banana peel and grapefruit extracts revealed a dark brown colour after a reaction time of 18 minutes, which indicates the presence and the successful synthesis of silver nanoparticles. The optical and structural properties of the green synthesised nanoparticles were analysed using UV-Visible spectroscopy (UV-Vis) which confirmed an absorption band at 440 nm. The polydispersity nature and the AgNPs sizes of 30 nm were revealed using small angle X-ray scattering (SAXS) and high-resolution transmission electron microscopy (HR-TEM) techniques. Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR) studies revealed the structure of these nanoparticles which included carbonyl groups, primary amine groups, OH groups and other stabilizing functional groups characteristic of the properties of combined extracts. A simple, quick, less time-consuming surface plasmon resonance (SPR) and electrochemical method in the form of optical and electrochemical sensors have been developed for the detection of Escherichia coli 0157:H7. The obtained limit of detection (LOD) values for SPR and GBPE-Ag-NPs/GCE-based sensor systems were found to be 1 × 102 CFU/mL and 3.5 × 101 CFU/mL, respectively. The obtained values fall within the range for E. coli 0157:H7 in seawater. 展开更多
关键词 Cyclic Voltammetry Electrochemical Sensors Escherichia coli 0157:h7 Musa paradisiaca Vitis vinifera Silver Nanoparticles
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2008—2012年南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7监测结果 被引量:4
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作者 曾毅 林建燕 +5 位作者 黄世美 闭志友 甘文烨 冯景强 潘海西 汤洪洋 《职业与健康》 CAS 2013年第14期1748-1749,共2页
目的了解南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7在人群及外环境中的感染情况,为防制工作提供依据。方法 2008—2012年采集南宁市现症腹泻患者、动物宿主粪便标本、市场生熟食品和苍蝇标本,经mEC增菌后用SMAC分离,纯化菌株经生化鉴定、血清分型... 目的了解南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7在人群及外环境中的感染情况,为防制工作提供依据。方法 2008—2012年采集南宁市现症腹泻患者、动物宿主粪便标本、市场生熟食品和苍蝇标本,经mEC增菌后用SMAC分离,纯化菌株经生化鉴定、血清分型等方法进行检测。结果在2 139份腹泻患者标本中未检出阳性标本;在3 088份外环境标本中检出阳性标本20份。南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7感染阳性率呈现逐年下降趋势;不同动物粪便肠出血性大肠杆菌O157:H7阳性率不同,以牛粪检出阳性率最高。结论南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7仍有散在的动物感染,应加强对动物粪便的管理及肠出血性大肠杆菌O157:H7的监测工作。 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌O157 h7 监测 分析
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气体二氧化氯对葡萄表面细菌杀菌规律研究 被引量:4
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作者 晋日亚 胡双启 顾宁 《中国安全科学学报》 CAS CSCD 2008年第2期97-101,共5页
研究气体二氧化氯杀灭金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、李斯特单增菌和腐生酵母菌4种葡萄表面的危险致病菌的杀菌规律。在实验范围内,随着气体二氧化氯浓度的增加和杀菌时间的延长,杀菌效果明显增加。当杀菌时间超过12min,杀菌量级几乎不再... 研究气体二氧化氯杀灭金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、李斯特单增菌和腐生酵母菌4种葡萄表面的危险致病菌的杀菌规律。在实验范围内,随着气体二氧化氯浓度的增加和杀菌时间的延长,杀菌效果明显增加。当杀菌时间超过12min,杀菌量级几乎不再增加。杀菌效率随温度的增加而减小,在实验温度条件下,只有大肠杆菌的杀菌效果减少了5.38~6.09log量级,其他3种菌均减少了6log量级以上,杀菌作用温度在实验条件下对杀菌效果影响不大。研究表明,当气体二氧化氯的杀菌浓度为25mgl-1、杀菌时间12min、杀菌温度25℃的条件下,金黄色葡萄球菌、李斯特单增菌和腐生酵母菌均减少了6.4log量级以上,而大肠杆菌达到5.76log量级;同时表明二氧化氯气体的杀菌保鲜功能也是食品安全技术非热杀菌手段。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 单核细胞增生李斯特氏菌 腐生酵母菌 气体二氧化氯 葡萄
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大肠埃希菌O157:H7新型多重PCR检测方法的建立及其初步应用 被引量:3
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作者 李争 卜昭阳 +4 位作者 卢晓冉 李诗语 郎需龙 王兴龙 吴大成 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第9期956-960,共5页
目的建立一种能够满足现场快速检测、完全脱离实验室仪器设备的大肠埃希菌O157∶H7多重PCR检测方法。方法利用大肠埃希菌O157∶H7抗原基因保守序列fli Ch7和rfb E设计2对引物,并对Palm PCR G1-12退火温度、循环数、引物浓度及引物最佳... 目的建立一种能够满足现场快速检测、完全脱离实验室仪器设备的大肠埃希菌O157∶H7多重PCR检测方法。方法利用大肠埃希菌O157∶H7抗原基因保守序列fli Ch7和rfb E设计2对引物,并对Palm PCR G1-12退火温度、循环数、引物浓度及引物最佳比例进行优化,建立微量快速检测大肠埃希菌O157∶H7的多重PCR方法,并对该方法的特异性、灵敏性、重复性进行验证。取疑似病牛粪便共9份,利用粪便DNA提取试剂盒提取DNA,按照建立的PCR方法进行扩增,扩增产物经微型电泳仪电泳检测并照相。结果确定大肠埃希菌O157∶H7 PCR的最佳退火温度为54℃,循环数为25个循环,上下游引物浓度为10μmol/L,2对引物最适比为fli Ch7∶rfb E=1∶3。大肠埃希菌O157∶H7扩增产物可见625 bp(fli Ch7)和213 bp(rfb E)的特异性片段,而大肠埃希菌(ATCC25922)、猪链球菌2型、金黄葡萄球菌、鲍氏不动杆菌、小肠耶尔森菌、单增李斯特菌、沙门菌的PCR检测结果均为阴性,最低扩增DNA浓度为10 pg/μl,重复扩增5次均可见目的条带。9份疑似病牛粪便样品中,共检测出7份大肠埃希菌O157∶H7阳性样品。结论建立了大肠埃希菌O157∶H7微量快速多重PCR检测方法,该方法特异性、灵敏性和重复性均良好,可在现场约1 h报告结果,对突发性传染病的防治具有重要意义。 展开更多
关键词 大肠埃希菌O157h7 多重PCR
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免疫磁珠富集-实时荧光PCR检测生畜肉中大肠埃希菌O157∶H7的实验研究 被引量:5
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作者 高涛 张克俭 +3 位作者 张丽萍 魏雯 杨海峰 武永平 《医学动物防制》 2016年第11期1184-1186,共3页
目的建立免疫磁珠富集(immunomagnetic separation,IMS)-实时荧光PCR(q PCR)技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7的方法。方法根据肠出血性大肠埃希菌O157∶H7抗原特异性基因rfb EO157设计引物和Taq Man探针,建立q PCR检测体系... 目的建立免疫磁珠富集(immunomagnetic separation,IMS)-实时荧光PCR(q PCR)技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7的方法。方法根据肠出血性大肠埃希菌O157∶H7抗原特异性基因rfb EO157设计引物和Taq Man探针,建立q PCR检测体系;对样品中的O157∶H7大肠埃希菌用出血性大肠O157抗体标记免疫磁珠进行特异性捕获,再利用q PCR技术对磁珠吸附的菌株进行检测。结果采用IMS-q PCR方法检测,当25 g样本中菌量为10^0cfu,样品被1∶2稀释时,检测结果呈阳性,检测全过程需时2-3 h。结论 IMS-q PCR检测O157∶H7大肠埃希菌的方法具有灵敏度高、特异性强、快速等优点,可用于大肠埃希菌O157∶H7食物中毒的快速诊断和食品微生物检测,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。 展开更多
关键词 免疫磁珠富集 联合 实时荧光PCR 大肠埃希菌O157h7
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基于量子点和磁珠的大肠埃希菌O157∶H7检测研究 被引量:3
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作者 张燕辉 谢服役 陈效黎 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第9期1366-1368,共3页
目的构建一种基于量子点和磁珠的大肠埃希菌O157∶H7的检测方法。方法以亲和素化磁珠结合生物素化的抗体制备修饰有大肠埃希菌O157∶H7抗体的磁珠,该磁珠可从检测体系中捕获大肠埃希菌O157∶H7,依次加入生物素化大肠埃希菌O157∶H7抗体... 目的构建一种基于量子点和磁珠的大肠埃希菌O157∶H7的检测方法。方法以亲和素化磁珠结合生物素化的抗体制备修饰有大肠埃希菌O157∶H7抗体的磁珠,该磁珠可从检测体系中捕获大肠埃希菌O157∶H7,依次加入生物素化大肠埃希菌O157∶H7抗体、亲和素化Cd Se量子点后,分别经磁分离弃去未结合的分子,通过溶液的荧光吸收光谱的改变定量检测该菌。结果该方法特异性好,只有大肠埃希菌O157∶H7呈阳性反应,其余对照菌株均无明显反应;随着大肠埃希菌O157∶H7浓度的增大,655 nm处荧光值也逐步升高;并在1 h内实现对104cfu/ml的菌液的检测。结论本实验建立的这种方法检测时间短,结果易于判断,具有良好的临床应用前景。 展开更多
关键词 量子点 磁珠 大肠埃希菌O157h7 荧光
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畜禽胴体微生物控制技术的现状与发展 被引量:2
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作者 戴瑞彤 周伟伟 刘毅 《肉类研究》 2006年第12期18-20,共3页
冷却肉加工过程中,减少初始菌数可大大延长产品的货架期,保证产品的安全。本文主要介绍了国内外屠宰工业中常用的胴体微生物控制技术及该技术今后的发展趋势,为我国屠宰加工业控制产品初始菌数及肉类研究机构今后的科研方向提供参考。
关键词 胴体 微生物控制 大肠杆菌 O157 h7
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基于噬菌体特异性的新型荧光酶联方法检测食品中大肠埃希菌O157∶H7 被引量:1
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作者 吕敬章 刘慧玲 +3 位作者 黄李华 赵芳 马淑棉 洪小柳 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2012年第3期222-225,共4页
目的对一种基于噬菌体特异性的检测食品中大肠埃希菌O157∶H7的新型荧光酶联方法(VIDASECPT)进行了评价。方法利用VIDASECPT、VIDASECO、BAXO157三种快速方法检测不同浓度大肠埃希菌O157∶H7标准菌株的生理盐水悬浮液,并对VIDAS... 目的对一种基于噬菌体特异性的检测食品中大肠埃希菌O157∶H7的新型荧光酶联方法(VIDASECPT)进行了评价。方法利用VIDASECPT、VIDASECO、BAXO157三种快速方法检测不同浓度大肠埃希菌O157∶H7标准菌株的生理盐水悬浮液,并对VIDASECPT和常规培养法检测食品中大肠埃希菌O157∶H7进行了比对。结果 VIDASECPT检测大肠埃希菌O157∶H7的检出限为104 CFU/ml,并且不受大肠埃希菌背景菌的干扰,其他两种快速方法的检出限均为105 CFU/ml,其中VIDASECO易受到背景菌的干扰;检测不同食品基质中大肠埃希菌O157∶H7,当大肠埃希菌O157∶H7的浓度为104 CFU/ml时,VIDASECPT与常规培养法无统计学差异。结论 VIDASECPT方法检测大肠埃希菌O157∶H7具有快速、灵敏、抗干扰性强的特点。 展开更多
关键词 大肠埃希菌O157h7 VIDASECPT VIDASECO BAXO157
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硫化银纳米球负载金纳米粒子信号放大的大肠杆菌O157:H7电化学免疫传感器 被引量:5
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作者 宋新贺 王文昌 陈智栋 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1122-1126,共5页
设计了一种利用碳纳米管作为基底固定材料以及硫化银纳米球负载金纳米粒子做为电化学标记信号的无酶免疫传感器,用于检测大肠杆菌O157:H7。同时引入具有信号放大功能的硫化银纳米球负载金纳米粒子作为标记物,并采用示差脉冲伏安法对金... 设计了一种利用碳纳米管作为基底固定材料以及硫化银纳米球负载金纳米粒子做为电化学标记信号的无酶免疫传感器,用于检测大肠杆菌O157:H7。同时引入具有信号放大功能的硫化银纳米球负载金纳米粒子作为标记物,并采用示差脉冲伏安法对金纳米粒子进行检测,其产生的电化学信号在一定范围内与大肠杆菌O157:H7的浓度呈线性关系。在最优条件下,该传感器线性范围为:1×10~3~1×10~7cfu/m L,检出限为4×10~2cfu/m L,并且具有良好的精密度和稳定性。该免疫传感器可以用于大肠杆菌O157:H7的快速检测。 展开更多
关键词 电化学免疫传感器 大肠杆菌O157:h7 硫化银纳米球 金纳米粒子
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