贝母素乙通过诱导G0/G1期阻滞抑制结肠癌细胞的增殖

目的:探讨贝母素乙对结肠癌HCT116细胞增殖的抑制作用及其分子机制。方法:利用不同浓度的贝母素乙处理人结肠癌细胞HCT116和正常结肠上皮细胞CCD841 CON,通过CCK-8法和结晶紫染色法检测贝母素乙对HCT116和CCD841 CON细胞增殖活力的影响,流式细胞术和WB法检测贝母素乙对HCT116细胞周期及其细胞周期相关蛋白表达的影响。构建HCT116移植瘤裸鼠模型和AOM/DSS结肠癌小鼠模型,观察贝母素乙对小鼠模型肿瘤生长和OS的影响,免疫组化法和WB法检测对移植瘤或肿瘤组织中细胞周期相关蛋白CDK4、CDK6和cyclin D1表达的影响。结果:贝母素乙可显著抑制结肠癌HCT116细胞的增殖能力(P<0.01),诱导HCT116细胞周期G0/G1期阻滞(P<0.01),降低CDK4、CDK6和cyclin D1的蛋白表达水平(均P<0.01)。荷瘤小鼠实验结果显示,贝母素乙(0.75 mg/kg)显著抑制HCT116细胞移植瘤的生长并延长荷瘤裸鼠的OS(P<0.05或P<0.01),降低AOM/DSS模型小鼠的体质量、延长OS、减少癌变肠组织的肿瘤个数和肿瘤体积,下调肿瘤组织中CDK4、CDK6和cyclin D1的蛋白表达(P<0.01或P<0.05)。结论:贝母素乙通过下调CDK4、CDK6和cyclin D1的表达水平,引起细胞周期G0/G1期阻滞,从而抑制结肠癌HCT116细胞的增殖。

TDK积层陶瓷电容器C0G特性的树脂电极产品及带金属端子的迭容新系列产品

TDK株式会社发布将自2016年12月起开始量产和销售的积层陶瓷电容器C0G特性的树脂电极产品及带金属端子的迭容(Mega Cap)新系列产品。作为防止基板翘曲裂纹、焊接裂纹对策上最后的有力手段,树脂电极系列产品及带金属端子的迭容产品被广泛应用于汽车产业及重视产品可靠性的其他用途。对于X5R、X7R、X8R特性等的高电容率系列,已做出量产对应,但尚未对C0G低电容率系列做出对应。通过树脂电极系列产品和带金属端子的迭容产品的推进。

敲除G0S2基因对绵羊卵巢颗粒细胞增殖、类固醇激素及相关基因表达的影响

本文旨在探究G0S2基因对绵羊卵巢颗粒细胞增殖,雌激素(E_(2))和孕酮(P_(4))分泌,以及类固醇分泌相关基因和细胞凋亡基因表达的影响。采集小尾寒羊新鲜卵巢,用割吸法收集中小卵泡的卵泡液,离心分离颗粒细胞,分为试验组和对照组,试验组采用CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除G0S2基因,获得重组表达载体PX458-sgRNA-G0S2转染至颗粒细胞;对照组转染PX458质粒至颗粒细胞。检测颗粒细胞活力和凋亡情况,以及E_(2)和P_(4)水平及相关基因的表达量。结果表明,试验组G0S2 mRNA的表达量及蛋白水平极显著低于对照组(P<0.01),分别降低了66%和70%,G0S2敲除成功。试验组颗粒细胞的增殖活力显著高于对照组(P<0.05),细胞凋亡率极显著下降56%(P<0.01)。试验组E_(2)水平显著高于对照组(P<0.05),P_(4)水平显著低于对照组(P<0.05)。试验组颗粒细胞中StAR、CYP11、3β-HSD的表达量极显著低于对照组(P<0.01),CYP19的表达量极显著高于对照组(P<0.01)。与对照组相比,试验组颗粒细胞中Caspase3和Bax的表达极显著下调(P<0.01),Bcl-2的表达极显著上调(P<0.01)。上述结果表明,敲除G0S2基因能促进在绵羊卵巢颗粒细胞的增殖,抑制其凋亡,通过下调StAR、CYP11、3β-HSD,上调CYP19的表达影响E_(2)和P_(4)的分泌。

G0S2抑制ALV-J在鸡巨噬细胞中增殖

G0/G1期开关基因2(G0/G1 switch 2,G0S2)在脂肪稳态、细胞增殖和肿瘤发生等生物学过程中扮演着重要角色,而有关G0S2基因在家禽抗病毒免疫中的研究相对甚少。为探讨G0S2基因在鸡巨噬细胞中的抗病毒作用及其机制,构建G0S2真核表达载体并转染鸡巨噬细胞系HD11细胞,通过荧光定量PCR和Western blot检测G0S2过表达对J亚群禽白血病病毒(ALV-J)复制水平、天然免疫基因TLR3和糖酵解关键调控基因MYC表达的影响。结果表明:G0S2过表达可显著抑制ALV-J在HD11细胞中增殖。G0S2显著上调HD11细胞内双链RNA(dsRNA)识别受体基因TLR3表达,并抑制糖酵解调控基因MYC表达,说明激活TLR3表达和抑制MYC表达可能是G0S2基因抑制ALV-J在巨噬细胞中增殖的重要机制。综上,该研究揭示了鸡G0S2在巨噬细胞中的抗病毒功能及其作用机制,为今后研究G0S2的功能及其宿主遗传抗性提供了参考依据。

肝细胞癌患者血清中G0S2表达及临床意义

目的评估血清G0/G1开关基因2(G0S2)作为肝细胞癌(HCC)潜在生物标志物的诊断价值。方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测本院2016年6月至2022年6月83例HCC患者和65例健康对照的血清G0S2水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价G0S2在HCC的诊断效能。分析血清G0S2水平与HCC患者临床病理特征的相关性。采用Cox风险比例回归模型分析影响HCC预后的独立危险因素。结果HCC患者的血清G0S2水平低于健康对照(0.447 vs.0.937,P<0.01)。G0S2表达水平与肿瘤分化程度(χ^(2)=5.033,P=0.025)、TNM分期(χ^(2)=7.332,P=0.007)和淋巴结转移(χ^(2)=4.878,P=0.027)有关。G0S2诊断HCC的曲线下面积为0.800(95%CI:0.728~0.871,P<0.01),最佳截断值为0.512,敏感度和特异度分别为87.69%和65.06%。G0S2高表达组HCC患者的中位总生存期为66.0个月,高于G0S2低表达组的35.0个月(χ^(2)=22.936,P<0.01)。另外,肿瘤分化程度(HR=3.045,95%CI:1.702~5.448,P<0.001)、肿瘤最大径(HR=2.047,95%CI:1.160~3.613,P=0.013)和血清G0S2表达水平(HR=0.286,95%CI:0.149~0.549,P<0.001)是影响HCC患者预后的独立危险因素。结论HCC患者血清G0S2表达水平降低,可作为肝癌诊断的潜在血清生物标志物。

黄芪总黄酮对K562细胞凋亡及细胞周期的影响

白血病是严重危害人类健康的恶性肿瘤,儿童尤其多见。黄芪总黄酮（total flavonoids of Astragalus,TFA）是从蒙古黄芪中分离的抗氧化、清除自由基的主要活性成分[1,2],

人肾小管上皮细胞血清饥饿法同步化方法的研究

目的:探讨采用血清饥饿法建立将人肾小管上皮细胞(HKC)的同步化方法。方法:将HKC分为6个不同低血清浓度组及对照组,分别采用胎牛血清浓度为0、1、2、3、4、5和100 mL/L的DMEM培养液培养24 h。根据流式细胞术结果选择的最佳同步化HKC的胎牛血清浓度。将HKC的同步化处理时间分别延长为24 h、48 h和72 h,选择最佳同步化时间。用MTT法绘制生长曲线观察血清饥饿处理对HKC生长的影响。采用免疫细胞化学方法验证血清饥饿同步化处理HKC的效果。结果:选择无血清(0 mL/L)和1 mL/L为HKC最佳同步化的胎牛血清浓度,选择48 h为HKC同步化最佳时间。细胞生长曲线表明采用1 mL/L胎牛血清的DMEM培养液培养48 h后恢复正常培养的HKC细胞,其生长曲线更接近于正常培养的细胞。Brdu进一步证明,用1 mL/L胎牛血清的DMEM培养液培养48 h可以使90%以上的HKC细胞处于G0/G1期。结论:用1 mL/L胎牛血清的DMEM培养液培养48 h可获得90%以上的G0/G1期HKC。

丹参酮衍生物对K562细胞的生长抑制及诱导凋亡作用研究

目的研究丹参酮衍生物对人红白血病细胞株K562的生长抑制以及诱导凋亡作用。方法MTT比色法检测不同浓度丹参酮1、丹参酮2和丹参酮B对K562细胞的增殖抑制作用；PI单染法检测3者对K562细胞周期的影响；Annexin V／PI双染法检测3者对K562细胞诱导凋亡的作用。结果丹参酮1和丹参酮B能够抑制K562细胞增殖，C50分别为5．22和15．11μmol·L^-1，且分别在2．5～10μmol·L^-1和10～40μmol·L^-1剂量范围内，G0／G1期细胞比例的增加及早期凋亡细胞百分率的提高均呈剂量相关性；丹参酮2在100μmol·L^-1的剂量下，对K562细胞的抑制率仅为27．8％，无诱导其凋亡作用，但可以使G0／G1期细胞增多。结论丹参酮1和丹参酮B抑制K562细胞增殖，阻滞其于G0／G1期并诱导细胞凋亡；丹参酮2对K562细胞没有明显生长抑制及诱导凋亡作用，但可将其阻滞于G0／G1期。

阳性表达表皮钙粘蛋白增加G0/G1期人乳腺癌细胞比例及其分子机制

表皮钙粘蛋白 (E cadherin)阴性的乳腺癌细胞株MDA MB 2 3 1和MDA MB 43 5转染野生型表皮钙粘蛋白基因 ,通过流式细胞仪测量细胞周期发现表皮钙粘蛋白阳性细胞生长变慢 ,更多细胞停滞在G0 /G1期 ,蛋白质印迹证实由G0 /G1期进入S期的重要调控分子细胞周期蛋白 D1(cyclinD1)下降了 ,并发现表皮钙粘蛋白还能降低直接激活细胞周期蛋白 D1基因转录的 β 连环蛋白的蛋白质浓度 .蛋白激酶B (PKB)能通过抑制糖原合成激酶 3 β(GSK 3 β)的活性来抑制β 连环蛋白降解 ,并在乳腺癌高转移细胞株中普遍过表达 ,其表达同样受到了表皮钙粘蛋白的抑制 .并且在表皮钙粘蛋白阳性细胞中 ,作为PKB上游信号分子并能激活PKB的粘着斑激酶 (FAK)和整联蛋白相关激酶 (ILK)蛋白量也发生下降 ,能抑制PKB激活的PTEN蛋白量却增加了 .结果显示 ,表皮钙粘蛋白能通过降低乳腺癌细胞中的PKB蛋白浓度 ,并通过上游信号分子抑制PKB的激活 ,进而降低PKB对β 连环蛋白降解的抑制作用 ,导致 β 连环蛋白直接调控的靶基因细胞周期蛋白D1的表达量下降 ,引起更多的细胞停止在G0

基于G^0分布的高海况SAR船只目标检测方法

高海况条件下船只目标检测一直是SAR船只检测的难点之一,选用何种分布来精确描述强海杂波对目标检测效果有重要影响。文章将常用于陆地城区SAR图像建模的G0分布应用于高海况条件下杂波建模,分析了G0分布对不同星载SAR数据的建模效果,验证了其用于海面杂波拟合的适应性,得出G0分布对极不均匀区域海杂波建模能力要优于常用分布;结合恒虚警目标检测算法,提出了基于G0分布的星载SAR船只目标检测算法;利用海上同步实验,验证了此方法的有效性。

白藜芦醇抑制胆囊癌细胞生长与诱导细胞凋亡的实验研究

目的探讨白藜芦醇(Res)对胆囊癌细胞(GBC)和正常成纤维细胞(3T3)体外增殖的影响,进而观察Res对GBC和3T3细胞凋亡的影响。方法MTT法测定肿瘤细胞生长抑制率;流式细胞术分析细胞周期,检测细胞凋亡;SABC法检测细胞bcl2、cmyc、p53蛋白表达。结果Res呈浓度依赖性抑制GBC细胞的生长与增殖(P<0.01),抑制率最高可达54%。Res能明显诱导GBC细胞凋亡,凋亡率最高为30.52%;处理组较对照组G1期细胞由34.88%上升至55.47±3.95%,S期细胞减少8.41%～17.54%,呈明显的G0/G1期阻滞现象。GBC细胞的bcl2、cmyc基因蛋白表达降低,而p53基因蛋白表达增强。结论Res能通过诱导GBC细胞凋亡而抑制其生长与增殖,但对3T3细胞无此作用。

一种基于G^0分布的SAR图像快速CFAR检测方法

杂波统计模型是决定CFAR检测算法性能的关键因素。G0分布能对单视和多视SAR图像中均匀、一般不均匀和极不均匀区域精确建模,但存在参数估计复杂、阈值表达式难以求解的问题,限制了其实用性。针对这些问题,分别采用矩估计法和二分法来完成参数的估计和阈值的求取,并通过目标区域预筛选和迭代计算等手段进一步提高了计算效率,得到了一种兼顾检测效果和效率的快速CFAR检测方法。实验结果验证了该方法的有效性。

蟾蜍灵在体内外抑制急性红白血病细胞K562增殖及下调WT1表达的研究

目的研究蟾蜍灵在体内外抗K562细胞增殖及对WT1表达影响。方法半固体集落形成实验检测蟾蜍灵对K562细胞的增殖抑制作用,流式细胞术分析蟾蜍灵对K562细胞周期的影响,Western blot观察蟾蜍灵对WT1表达作用。通过高致瘤性K562细胞制备裸鼠皮下荷瘤模型,分组为模型组、蟾蜍灵组及高三尖杉酯碱组,比较各组皮下瘤体积与重量、病理形态学改变及WT1蛋白表达情况。结果①半固体集落形成实验、流式及Westem blot结果显示,蟾蜍灵能明显抑制K562细胞增殖,阻滞细胞在G_0/G_1期,并下调其WT1蛋白表达,呈剂量依赖性;②蟾蜍灵组和阳性对照组裸鼠肿瘤的抑瘤率均明显高于模型组(P<0.05),且蟾蜍灵组和阳性对照组裸鼠皮下瘤重量均明显低于模型组(P<0.05);③病理切片显示,蟾蜍灵导致K562皮下瘤组织内肿瘤细胞大量坏死、凋亡,继发出血及纤维化等改变;并明显抑制K562皮下瘤组织中WT1蛋白表达水平。结论蟾蜍灵在体外可抑制K562细胞增殖及阻滞细胞周期于G_0/G_1期并下调其WT1蛋白表达,在体内可明显抑制裸鼠K562皮下瘤体积和重量,导致皮下瘤组织坏死、凋亡,并可下调其WT1蛋白的表达。

结直肠癌组织中CD44^+肿瘤细胞与S期标志物增殖细胞核抗原的关系

背景:目前尚未找到结直肠癌干细胞理想的标志物,结合周期蛋白能更精确的找到GO/G1期癌干细胞。目的:了解结直肠癌组织中CD44和增殖细胞核抗原PCNA的表达及CD44+肿瘤细胞与S期标志物增殖细胞核抗原PCNA的关系。方法:采用组织芯片检测、免疫组织化学和双重免疫组织化学染色技术检测61例结直肠癌组织、10例正常肠黏膜组织中增殖细胞核抗原PCNA和CD44表达情况。结果与结论:在结直肠癌组织中,PCNA+细胞数远多于CD44+细胞数,CD44+癌细胞形态有两种,一种核较大,染色质边集,呈空泡状,核膜核仁清晰,这些细胞大多数呈PCNA阳性;另一种核较小,染色质致密,呈小圆形,部分表达PCNA。在大多数病例中,CD44+细胞中90%以上的瘤细胞同时为PCNA阳性,只有(3.38±2.08)%细胞为单纯PCNA阳性。说明结直肠癌组织中大多数CD44+细胞呈现S期标志物PCNA阳性,处于S期;只有极少数CD44+/PCNA-处于G0/G1期的细胞可能为肿瘤干细胞。

玉米须总皂苷对肥胖大鼠脂肪组织的调节作用研究

目的观察玉米须总皂苷对高脂饮食诱导的肥胖大鼠脂肪组织中G0/G1期开关基因(G0S2)和脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)表达的影响。方法将40只适应性喂养7 d后雄性清洁级SD大鼠随机分为正常组、模型组、玉米须总皂苷低剂量和玉米须总皂苷高剂量组,每组10只。除正常组外,其余3组均给予高脂高糖饮食12周建立肥胖大鼠模型。造模成功后均给予普通饲料喂养,同时玉米须总皂苷低剂量组和高剂量组分别给予玉米须总皂苷100 mg/(kg·d)和200 mg/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予生理盐水1m L/(kg·d)灌胃,均1次/d,连续12周。12周后腹主动脉取血,检测各组大鼠空腹血糖(FPG)和血脂指标[三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、血清ATGL以及空腹胰岛素(FINS)水平,计算大鼠体脂比,HE染色观察脂肪组织病理学变化,RT-PCR法和Western Blot法检测脂肪细胞中G0S2和ATGL mRNA及蛋白表达水平。结果模型组大鼠体质量、内脏脂肪湿质量、体脂比及FPG、TG、TC、LDL-C、FINS水平均明显高于正常组(P均<0. 05),而玉米须总皂苷低剂量组和玉米须总皂苷高剂量组均明显低于模型组(P均<0. 05);模型组大鼠HDL-C、ATGL水平均明显低于正常组(P均<0. 05),而玉米须总皂苷低剂量组和玉米须总皂苷高剂量组均明显高于模型组(P均<0. 05)。HE染色显示玉米须总皂苷低剂量组和玉米须总皂苷高剂量组脂肪细胞体积明显减小,数量明显增多。模型组大鼠脂肪组织中G0S2mRNA和G0S2蛋白表达水平均明显高于正常组(P均<0. 05),ATGL mRNA和ATGL蛋白表达水平均明显低于正常组(P均<0. 05);玉米须总皂苷低剂量组和玉米须总皂苷高剂量组G0S2 mRNA和G0S2蛋白表达水平均明显低于模型组(P均<0. 05),而ATGL mRNA和ATGL蛋白表达水平均明显高于模型组(P均<0. 05),玉米须总皂苷低剂量组和玉米须总皂苷高剂量组组间比较差异均无统计学意义(P均> 0. 05)。结论玉米须总皂苷能够明显下调脂肪组织中G0S2 mRNA和蛋白表达、上调ATGL mRNA和蛋白表达,进而促进肥胖大鼠脂肪分解,降低大鼠体质量。

基于Mellin变换的G^0分布参数估计方法

G0分布模型具有广泛均匀度变化下的杂波区域建模能力和较强的模型兼容性,是目前合成孔径雷达(synthetic aperture radar,SAR)图像杂波统计建模领域最为重要的模型之一,在SAR图像解译方面有着广泛的应用.然而,G0分布参数的快速准确估计一直是制约其实际应用的主要技术瓶颈,至今尚无理想的解决方案.针对这一问题,首先详细分析了经典矩估计和最大似然估计应用于G0分布参数估计的理论缺陷,在此基础上,提出了一种基于Mellin变换的G0分布参数估计方法.该方法以Mellin变换为出发点,详细推导了G0分布对应的第一个、第二个第二类型的特征函数和它们各自对应的对数矩和对数累积量,最终获得了G0分布参数估计简洁的迭代表达式.该方法不但解决了矩估计所面临的参数不能实现全范围估计的难题,更重要的是把等效视数同形状参数、尺度参数一样视为待估计参数,且能够快速准确地迭代出它们的估计值,保证了G0分布的拟合精度.以KL(Kullback-Leibler)度量、MSE(mean square error)度量和K-S(Kolmog-orov-Smirnov)检验为定量评估准则,对不同分辨率、不同视数的实测SAR图像分别采用文中方法、矩估计、最大似然估计方法进行拟合实验,实验结果的全面对比分析证明了所提方法的有效性.

正常人面部表情肌双侧面神经交叉支配神经电图研究

目的 测定面神经各支对侧支配发生率及其EN0 G正常值范围 ,探讨周围性面瘫恢复过程中对侧代偿支配问题。方法 测定了 3 0例正常人同侧及对侧刺激EN0 G的潜伏时、持续时间、波幅和最大积分面积 ,并对面神经各支对侧支配发生率、电反应强弱 ,同侧与对侧刺激EN0 G各指标 ,对侧刺激各支间EN0 G各指标进行比较分析。结果 正常人面神经各支对侧支配发生率不同 ,Ⅰ支为 67% ,Ⅱ支为 0 ,Ⅲ、Ⅳ支均为 1 0 0 % ,各支间电反应强弱不同 ;左侧刺激右侧记录与右侧刺激左侧记录比较各项指标之间无明显差异 ;对侧刺激EN0 G四项指标Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ支间比较 ,LT、DT三者无差别 ,S及AⅠ支均小于Ⅲ、Ⅳ支 ,Ⅲ、Ⅳ支之间各项指标间差异无显著性 ,同侧与对侧刺激EN0 G各指标间比较各支潜伏时LT、DT同侧与对侧刺激间差异无显著性 ,S及A对侧刺激均小于同侧刺激。结论 结果证明了面部表情肌面神经双侧交叉支配的存在 ,为周围性面瘫恢复机理研究提供了新的依据。

应急作战下导弹技术测试优化方法研究

应急作战条件下,技术测试流程的优化对于提高导弹快速反应能力具有十分重大的意义。首先,提出了技术测试可靠性指标,并基于技术测试特点,运用一种新的可靠性分析方法——Go法对技术测试可靠性进行评定。然后在此基础上,采用GERT网络技术进行优化方案的论证。基于定量与定性分析相结合的手段,充分考虑了技术测试过程中的随机因素。最后,给出了仿真示例。优化方法的提出,给作战决策部门提供了可靠的理论依据。

鬼针草提取物对Hela细胞及A549细胞增殖及细胞周期的影响

目的研究鬼针草提取物(BPE)对Hela细胞及A549细胞体外增殖的抑制作用及对细胞周期的影响。方法常规MTT法分析BPE对Hela细胞及A549细胞体外增殖的抑制作用并计算IC50;Hochest33342染色分析10μg/mLBPE对肿瘤细胞的凋亡诱导作用;流式细胞术分析BPE对肿瘤细胞周期的影响。结果BPE能抑制Hela细胞及A549细胞的体外增殖并呈剂量依赖性,IC50分别为10.34μg/mL及8.31μg/mL;Hochest染色证实BPE能诱导肿瘤细胞凋亡;流式细胞术分析证实BPE能将肿瘤细胞阻滞在G0/G1期。结论鬼针草能使细胞停滞于G0/G1期,并能诱导肿瘤细胞凋亡从而抑制肿瘤细胞的增殖。