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白菜病程相关蛋白1基因cDNA全长的克隆与分析 被引量:8
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作者 王彦华 侯喜林 申书兴 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期985-988,共4页
以水杨酸处理后的‘苏州青’白菜为材料,通过RT—PCR和RACE技术,获得了白菜病程相关蛋白PR-1基因的cDNA全长序列。该基因与甘蓝型油菜PR-1基因氨基酸序列的同源性为91%,与拟南芥的同源性为78%,与其它植物的同源性为57%~60%。So... 以水杨酸处理后的‘苏州青’白菜为材料,通过RT—PCR和RACE技术,获得了白菜病程相关蛋白PR-1基因的cDNA全长序列。该基因与甘蓝型油菜PR-1基因氨基酸序列的同源性为91%,与拟南芥的同源性为78%,与其它植物的同源性为57%~60%。Southern杂交表明该基因在白菜基因组中的拷贝数至少为2个。半定量RT—PCR分析表明,2mmol/L的水杨酸处理后12h,该基因的表达量达到高峰。 展开更多
关键词 白菜 病程相关蛋白1 水杨酸 RT—PCR
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基于ITS-1基因的菜粉蝶地理种群遗传分化研究 被引量:3
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作者 毛增辉 郝家胜 +4 位作者 王晨 于芳 司曼曼 夏靖 朱朝东 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1144-1152,共9页
为了探讨我国不同地区菜粉蝶种群之间的遗传分化情况,本研究运用克隆测序法,对我国16个地区79只菜粉蝶Pieris rapaerDNA的ITS-1基因序列进行测定并分析;同时,以东方菜粉蝶Pieris canidia为外群,重建了它们的系统发生树,初步探讨了它们... 为了探讨我国不同地区菜粉蝶种群之间的遗传分化情况,本研究运用克隆测序法,对我国16个地区79只菜粉蝶Pieris rapaerDNA的ITS-1基因序列进行测定并分析;同时,以东方菜粉蝶Pieris canidia为外群,重建了它们的系统发生树,初步探讨了它们的生物地理学分化格局。序列分析结果显示:所测菜粉蝶的ITS-1序列长度介于337~458bp之间。经序列比对后,在347个位点中共有281个保守位点,63个变异位点,16个简约信息位点和47个单突变位点;AMOVA软件分析其核苷酸多态性指数(nucleotide diversity)Pi为0.014,每位点Theta(per site)Eta为0.041,遗传分化指数(FST)为0.351(P<0.05);DnaSP软件共检测出48个单倍型(haplotype)序列,单倍型多样性(haplotype diversity)的频率为0.989。系统发生分析结果表明:现存的菜粉蝶各地理种群与其地理分布没有直接的对应关系根据系统发生树结果推测,该蝶种在我国的最早建群可能发生于辽宁、内蒙古及北京一带,其后,通过幼虫寄主植物的水陆运输以及成虫的迁飞向我国的不同地区扩散。 展开更多
关键词 菜粉蝶 地理种群 遗传分化 系统地理发生 ITS-1序列
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甘蓝型和白菜型油菜肉桂酰辅酶A还原酶1基因的克隆与表达 被引量:4
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作者 侯维海 王建林 +1 位作者 旦巴 胡单 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第11期27-35,共9页
【目的】分别克隆甘蓝型油菜(Brassica napus L.)和白菜型油菜(Brassica rapa L.)肉桂酰辅酶A还原酶1(cinnamoyl-CoA reductase 1,CCR1)基因,并进行生物信息学和表达模式分析。【方法】基于甘蓝型油菜和白菜型油菜转录组测序信息,分别从... 【目的】分别克隆甘蓝型油菜(Brassica napus L.)和白菜型油菜(Brassica rapa L.)肉桂酰辅酶A还原酶1(cinnamoyl-CoA reductase 1,CCR1)基因,并进行生物信息学和表达模式分析。【方法】基于甘蓝型油菜和白菜型油菜转录组测序信息,分别从contig文库中获得了一个CCR1基因mRNA转录本片段,利用RACE技术分别获得一个CCR1基因的cDNA全长,对其进行生物学分析,并用实时定量PCR方法分析CCR1基因在甘蓝型和白菜型油菜开花期根、茎、叶、花中的表达差异。【结果】所克隆的甘蓝型油菜和白菜型油菜CCR1基因序列经同源序列比对分析后,将其分别命名为BnCCR1(登录号:KX138521)和BrCCR1(登录号:KX138522)。BnCCR1全长1 388bp,开放阅读框(ORF)长为1 032bp,编码343个氨基酸,分子质量11.56ku,等电点4.99;BrCCR1全长1 366bp,ORF长为1 026bp,编码341个氨基酸,分子质量为11.36ku,等电点5.0。2物种CCR1编码蛋白质二级结构无信号肽和跨膜结构域;亚细胞定位显示该蛋白在细胞质中存在的可能性最大。CCR蛋白多重比对分析显示,BnCCR1和BrCCR1均具有CCR蛋白典型的一个NAD(P)结合域和一个底物结合域(NWYCY)。系统进化树分析结果表明,BnCCR1和BrCCR1与同属十字花科的菘蓝、亚麻荠、拟南芥CCR形成了一个独立分支,且亲缘关系较近;其蛋白质三级结构均与矮牵牛CCR1(PDB:4r1t.1A)蛋白质三级结构相似,结构稳定。实时荧光定量PCR分析结果表明,CCR1基因在白菜型油菜和甘蓝型油菜根、茎、叶、花各器官中均有表达,其中在木质化程度较高的根和茎中表达丰度明显高于叶和花。【结论】从白菜型油菜和甘蓝型油菜中分别克隆到CCR1基因cDNA全长,该基因主要在木质化程度较高的根和茎器官中表达。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 白菜型油菜 肉桂酰辅酶A还原酶1 基因表达 生物信息学分析
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The E3 ubiquitin ligase seven in absentia homolog 1 may be a potential new therapeutic target for Parkinson's disease
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作者 Zeng-lin Cai Jing Xu +6 位作者 Shou-ru Xue Yuan-yuan Liu Yong-jin Zhang Xin-zhi Zhang Xuan Wang Fang-ping Wu Xiao-min Li 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2015年第8期1286-1291,共6页
In this study, we investigated the effect of an antibody against E3 ubiquitin ligase seven in absentia homolog 1(SIAH-1) in PC12 cells. 1-Methyl-4-phenylpyridinium(MPP+) treatment increased α-synuclein, E1 and S... In this study, we investigated the effect of an antibody against E3 ubiquitin ligase seven in absentia homolog 1(SIAH-1) in PC12 cells. 1-Methyl-4-phenylpyridinium(MPP+) treatment increased α-synuclein, E1 and SIAH-1 protein levels in PC12 cells, and it reduced cell viability; however, there was no significant change in light chain 3 expression. Treatment with an SIAH-1 antibody decreased m RNA expression levels of α-synuclein, light chain 3 and SIAH-1, but increased E1 m RNA expression. It also increased cell viability. Combined treatment with MPP+ and rapamycin reduced SIAH-1 and α-synuclein levels. Treatment with SIAH-1 antibody alone diminished α-synuclein immunoreactivity in PC12 cells, and reduced the colocalization of α-synuclein and light chain 3. These findings suggest that the SIAH-1 antibody reduces the monoubiquitination and aggregation of α-synuclein, promoting its degradation by the ubiquitin-proteasome pathway. Consequently, SIAH-1 may be a potential new therapeutic target for Parkinson’s disease. 展开更多
关键词 nerve regeneration neurodegeneration Parkinson’s disease ubiquitin-proteasome system autophagy E3 ubiquitin ligase seven in absentia homolog 1 1-methyl-4-phenylpyridinium rapa-mycin neural regeneration
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基于Nrf2/HO-1信号通路调控的恰玛古多糖抗多柔比星心肌毒性的机制研究
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作者 郭君婷 赵婷婷 +2 位作者 叶斯木·塔拉甫别克 高瑞娟 刘桂花 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期930-938,共9页
本研究主要探讨了恰玛古多糖(polysaccharides of Brassica rapa L.,BRPs)对多柔比星(doxorubicin,DOX)心脏毒性的作用及相关机制,研究选用H9c2细胞作为研究对象,采用Cell counting kit-8(CCK-8)法检测BRPs对DOX致H9c2细胞损伤的影响;将... 本研究主要探讨了恰玛古多糖(polysaccharides of Brassica rapa L.,BRPs)对多柔比星(doxorubicin,DOX)心脏毒性的作用及相关机制,研究选用H9c2细胞作为研究对象,采用Cell counting kit-8(CCK-8)法检测BRPs对DOX致H9c2细胞损伤的影响;将H9c2细胞分成对照组、模型组和药物组(0.5~3 mg·mL^(-1)),对照组于正常条件下培养,其余各组在处理后进行1μmol·L^(-1) DOX诱导24 h。通过流式细胞仪检测各组细胞凋亡;分别测定各组细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量;检测细胞内活性氧(ROS)和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP);Western blot检测凋亡及转录因子NF-E2相关因子(NF-E2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)通路相关蛋白表达。与对照组相比,DOX致H9c2细胞损伤的细胞活力下降、凋亡率增加,LDH、MDA水平升高,SOD活性降低,ROS水平显著增多,MMP显著下降;B淋巴细胞瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白水平降低,Bcl-2关联X蛋白(Bcl associated X protein,Bax)水平显著升高;且模型组Nrf-2、HO-1、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)蛋白表达水平降低,Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶蛋白表达水平显著升高。与模型组相比,BRPs各组在0.5~3 mg·mL^(-1)对DOX致H9c2细胞损伤具有保护作用,降低细胞凋亡及LDH、MDA和细胞内ROS水平,增强SOD活性,升高MMP;同时,BRPs可上调凋亡相关Bcl-2,并下调Bax水平;而且,BRPs可使Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达水平升高,Keap1和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶水平降低。本研究认为BRPs能够保护H9c2细胞,抑制细胞凋亡,可能与其调节Nrf2/HO-1通路拮抗氧化应激有关。 展开更多
关键词 恰玛古多糖 多柔比星 心肌毒性 氧化应激 Nrf2/HO-1信号通路
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瑞香狼毒素对菜粉蝶幼虫的拒食活性及其作用机制 被引量:8
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作者 何义国 张可君 +1 位作者 肖波 侯太平 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2006年第S1期33-37,共5页
瑞香狼毒素1,5-二苯基-3-羟基-1-戊酮,是本室从杀虫植物瑞香狼毒中分离得到的一个高活性化合物。本文研究了该活性成分对菜粉蝶幼虫的拒食作用和对乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响。采用浸渍叶碟饲喂法测得:在48h时瑞香狼毒素对3龄幼虫的... 瑞香狼毒素1,5-二苯基-3-羟基-1-戊酮,是本室从杀虫植物瑞香狼毒中分离得到的一个高活性化合物。本文研究了该活性成分对菜粉蝶幼虫的拒食作用和对乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响。采用浸渍叶碟饲喂法测得:在48h时瑞香狼毒素对3龄幼虫的非选择性和选择性拒食作用的拒食中浓度(AFC50)分别为15.1mg/L和16.9mg/L。采用点滴法测得瑞香狼毒素对5龄幼虫的拒食作用的拒食中量(AFD50)为0.565μg/头。瑞香狼毒素对AChE活性的抵制率高达78.5%,表明该活性成分可显著抑制AChE活性。 展开更多
关键词 瑞香狼毒 1 5-二苯基-3-羟基-1-戊酮 菜粉蝶 拒食作用 乙酰胆碱酯酶
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化学杀雄剂对白菜型冬油菜陇油6号的杀雄效果 被引量:6
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作者 赵彩霞 刘自刚 +5 位作者 孙万仓 武军艳 何丽 史鹏辉 张喜平 金璞余 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期394-399,共6页
通过两年大田试验,研究了化学药剂GSC、SX-1和麦极对北方寒区白菜型冬油菜陇油6号的化学杀雄技术。结果表明,不同种类化学杀雄剂对雄蕊的影响不同,SX-1和GSC对陇油6号均有较好的杀雄效果,麦极对雄蕊基本无影响;不同种类杀雄剂的最佳杀... 通过两年大田试验,研究了化学药剂GSC、SX-1和麦极对北方寒区白菜型冬油菜陇油6号的化学杀雄技术。结果表明,不同种类化学杀雄剂对雄蕊的影响不同,SX-1和GSC对陇油6号均有较好的杀雄效果,麦极对雄蕊基本无影响;不同种类杀雄剂的最佳杀雄浓度不同,杀雄时期和方法、单株受药量对杀雄效果也有较大影响,以喷施2次杀雄剂的杀雄效果最佳。SX-1以浓度9.0~10.0mg/L于现蕾期和现蕾后10~12d左右各喷1次、单株受药量分别为3~4mL、5~6mL效果较好,诱导雄性不育株率达到95%;GSC以浓度为0.6mg/L左右、现蕾期和现蕾后10~12d左右各喷1次、单株受药量分别为9~10mL、15~16mL效果较好,诱导雄性不育株率达到98%;当SX-1和GSC的单株受药量分别超过8和20mL时,无论是在植株发育的哪个时期处理,均产生药害现象。 展开更多
关键词 冬油菜 白菜型油菜 化学杀雄剂 SX-1 GSC 雄性不育
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高危产妇剖宫产后切口感染外周血CD36/mTORC1通路表达及细胞免疫炎症因子水平分析
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作者 莫匡颖 姚丽娜 顾柳芬 《中国卫生检验杂志》 CAS 2023年第23期2881-2885,共5页
目的分析高危产妇剖宫产后切口感染外周血分化抗原36(CD36)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)通路表达及细胞免疫炎症因子水平。方法选取2018年6月-2022年6月在本院行剖宫产的107例高危产妇,根据产后是否发生切口感染分为感染组2... 目的分析高危产妇剖宫产后切口感染外周血分化抗原36(CD36)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)通路表达及细胞免疫炎症因子水平。方法选取2018年6月-2022年6月在本院行剖宫产的107例高危产妇,根据产后是否发生切口感染分为感染组21例和未感染组86例。分析感染组切口分泌物培养菌种分布特征,logistic回归分析影响剖宫产后切口感染的危险因素;采用蛋白免疫印迹法(WB)检测外周血中CD36/mTORC1通路相关蛋白[CD36、Toll样受体4(TLR4)、黏着斑激酶(FAK)、mTORC1]表达水平,采用酶联免疫吸附反应(ELISA)检测外周血中细胞免疫炎症因子[白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平。采用Spearman相关性分析外周血中CD36、mTORC1蛋白表达与细胞免疫炎症因子的相关性。结果切口感染分离菌株以革兰阴性菌(67.44%)为主;logistic回归分析,手术时间≥60min、抗生素使用种类≥3种、侵入性操作≥3次均为影响剖宫产后切口感染的独立危险因素(P<0.01);感染组外周血CD36/mTORC1通路相关蛋白以及免疫炎症因子水平高于未感染组(P<0.05),且外周血IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α水平与CD36、mTORC1蛋白表达水平均成正相关关系(P<0.001)。结论高高危产妇剖宫产后切口感染外周血CD36/mTORC1通路表达明显增加,且与细胞免疫炎症因子水平成正相关关系。 展开更多
关键词 高危产妇 剖宫产 切口感染 分化抗原36 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1 细胞免疫炎症因子
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犬高危穿透性角膜移植术后使用1% RAPA滴眼液对体内TNF-α含量的影响
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作者 杨萍 郑之琬 +1 位作者 李浇 郑小波 《世界科技研究与发展》 CSCD 2013年第6期733-735,共3页
目的通过观察肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)变化情况,评价犬高危穿透性角膜移植后RAPA滴眼液抗免疫排斥反应效果。方法选择36只健康犬建立角膜高危病理模型后进行高危穿透性角膜移植手术,并分组用复方氯化钠或1... 目的通过观察肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)变化情况,评价犬高危穿透性角膜移植后RAPA滴眼液抗免疫排斥反应效果。方法选择36只健康犬建立角膜高危病理模型后进行高危穿透性角膜移植手术,并分组用复方氯化钠或1%RAPA点眼,4次/d,18只未手术犬为空白对照组。同时进行外周血和角膜组织中TNF—α含量检测。结果术后7~42d复方氯化钠组和治疗组TNF-α浓度明显比对照组高(P〈0.01),在术后28d治疗组TNF-α浓度逐渐降低,复方氯化钠组仍维持较高含量。结论RAPA滴眼液能降低角膜移植手术后TNF-α含量,有效抗免疫排斥反应。 展开更多
关键词 高危穿透性角膜移植术 1%rapa TNF-Α
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