IL-22/IL-22RA1通路在口腔鳞状细胞癌恶性进展中的作用及其机制

目的:探讨IL-22/IL-22受体A1(IL-22RA1)通路在口腔鳞状细胞癌(OSCC)恶性进展中的作用及其机制。方法:利用GEO数据库和免疫组化法分析IL-22RA1在OSCC组织及配对癌旁组织中的表达水平,采用组织芯片免疫组化法检测并分析IL-22RA1表达水平与OSCC患者临床病理特征的关系,通过EBI ArrayExpress数据库分析IL-22RA1表达水平与患者预后的关系。采用免疫荧光法检测IL-22和IL-22RA1在OSCC组织中表达水平并分析两者间的相关性。用RNA干扰技术敲减OSCC细胞WSU-HN4和CAL27的IL-22RA1表达,用q PCR法验证敲减效率。采用克隆形成实验、Transwell小室法分别检测IL-22对阴性对照(si NC)组和IL-22RA1敲减(siIL-22RA1)组OSCC细胞克隆形成及迁移能力的影响,WB法检测IL-22对OSCC细胞IL-22RA1表达水平及STAT1、STAT3和ERK1/2磷酸化水平的影响。结果:OSCC组织中IL-22RA1 mRNA的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05)。IL-22RA1表达水平与OSCC患者的肿瘤大小(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.01)及预后不良(P<0.05)有关联。OSCC组织中的IL-22和IL-22RA1表达水平无明显关联,IL-22对OSCC细胞IL-22RA1表达无影响(均P>0.05)。IL-22可显著增强OSCC细胞的克隆形成和迁移能力(均P<0.01),并可激活OSCC细胞的STAT1、STAT3及ERK1/2信号分子;敲减OSCC细胞的IL-22RA1后,IL-22则无法发挥上述作用。结论:IL-22/IL-22RA1可通过调控细胞增殖和迁移促进OSCC的生长和转移,其下游机制可能是激活ERK1/2-STAT1/3信号通路。

三七皂苷R1通过miR-181/IL-8/TLR4通路调控糖尿病性视神经病变的机制研究

目的探究三七皂苷R1(NGR1)通过微小RNA-181/白细胞介素-8/Toll样受体4(miR-181/IL-8/TLR4)通路调控糖尿病性视神经病变(DON)大鼠的作用及抗炎机制。方法尾静脉注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,随机分为模型组(MG)、低剂量NGR1组(LNGR1)、中剂量NGR1组(MNGR1)、高剂量NGR1组(HNGR1),另设对照组(CG),每组8只,共40只。LNGR1、MNGR1、HNGR1组大鼠每2日灌胃1次,剂量依次为15、30、60 mg/kg的NGR1,CG、MG组大鼠灌胃等体积0.9%氯化钠注射液,连续给药6周,期间监测大鼠血糖及体质量。给药完成后苏木精-伊红(HE)染色观察检测大鼠视神经形态,酶联免疫吸附法(ELISA)检测视神经糖化血红蛋白(HbA1c)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测视神经miR-181表达,荧光素酶报告试验检测miR-181和IL-8靶向关系,Western Blot法检测视神经IL-8、TLR4的蛋白表达。结果(1)体重、血糖和HbA1c:与CG组比较,MG大鼠体重降低(t=-3.675,P=0.001),血糖、HbA1c较高(t_(血糖)=67.721,t_(HbA1c)=27.213,均P=0.000);与MG组比较,MNGR1、HNGR1组大鼠体重较高(t_(MNGR1)=4.863,t_(HNGR1)=6.018,均P=0.000),血糖较低(t_(MNGR1)=-29.171,t_(HNGR1)=-43.981,均P=0.000),HbA1c较低(t_(MNGR1)=-18.468,t_(HNGR1)=-22.799,均P=0.000),差异均有统计学意义。(2)炎症因子:与CG组比较,MG组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α和MMP-9表达较高(t_(IL-1β)=22.949,t_(IL-6)=20.732,t_(TNF-α)=12.785,t_(MMP-9)=12.276,均P=0.000);与MG组比较,LNGR1、MNGR1、HNGR1组大鼠血清IL-1β水平较低(t_(LNGR1)=-6.465,t_(MNGR1)=-18.598,t_(HNGR1)=-21.943,均P=0.000)、IL-6水平较低(t_(LNGR1)=-3.765,P=0.001;t_(MNGR1)=-13.274,t_(HNGR1)=-15.405,均P=0.000)、TNF-α水平较低(t_(MNGR1)=-9.221,t_(HNGR1)=-10.523,均P=0.000)、MMP-9水平较低(t_(LNGR1)=-2.934,P=0.006;t_(MNGR1)=-4.343,t_(HNGR1)=-9.991,均P=0.000),差异均有统计学意义。(3)视神经形态:与CG比较,MG组大鼠视神经出现明显的出血和血管扩张、轴突肿胀以及胶质细胞增生,但LNGR1、MNGR1、HNGR1组以上情况较MG随药物剂量较高改善。与CG组比较,MG组大鼠视神经横截面积较低(t=-27.680,P=0.000),胶质细胞数较高(t=5.501,P=0.000);与MG组比较,LNGR1、MNGR1、HNGR1组大鼠视神经横截面积较大(t_(LNGR1)=6.241,t_(MNGR1)=7.853,t_(HNGR1)=10.248,均P=0.000),HNGR1组胶质细胞数较低(t_(HNGR1)=-3.097,P=0.004),差异均有统计学意义。(5)IL-8与miR-181的靶向关系:miR-181与IL-8存在结合位点。(6)miR-181/IL-8/TLR4通路蛋白:与CG组比较,MG组大鼠视神经miR-181、IL-8、TLR4表达较高(t_(miR-181)=33.870,t_(IL-8)=62.851,t_(TLR4)=20.802,均P=0.000);与MG组比较,LNGR1、MNGR1、HNGR1组大鼠视神经miR-181表达较低(t_(LNGR1)=13.476,t_(MNGR1)=14.420,t_(HNGR1)=11.187,均P=0.000)、IL-8表达较低(t_(LNGR1)=2.460,P=0.019;t_(MNGR1)=19.230,t_(HNGR1)=46.383,均P=0.000)、TLR4表达较低(t_(LNGR1)=8.350,t_(MNGR1)=14.185,t_(HNGR1)=11.502,均P=0.000),差异均有统计学意义。结论NGR1可降低DON大鼠血糖,改善视神经病理状况,其机制可能与调控视神经miR-181/IL-8/TLR4通路及相关炎症有关。

IL-22在支气管哮喘患者血清中的表达及其受体IL-22R1在人气道细胞中的表达

目的检测IL-22在支气管哮喘患者血清中的表达,检测IL-22R1在人气道上皮细胞、气道平滑肌细胞、肺成纤维细胞中的表达,寻找IL-22作用的靶细胞。方法应用ELISA法检测36例支气管哮喘患者及20例正常对照者血清IL-22及IL-17的表达,同时检测36例患者肺通气功能,根据1秒率(FEV1/FVC)及FEV1占预计值的百分比将支气管哮喘患者分为支气管激发试验阳性组(17例)和支气管舒张试验阳性组(19例)。应用实时定量PCR检测人气道平滑肌细胞、人肺成纤维细胞、人气道上皮细胞IL-22R1 mRNA的表达,用免疫荧光以及蛋白质印迹法检测IL-22R1蛋白在上述3种细胞中的表达。结果支气管哮喘患者血清IL-22及IL-17水平与正常对照组相比差异无统计学意义,但支气管舒张试验阳性组患者血清IL-22和IL-17水平高于支气管激发试验阳性组(P<0.05)。IL-22R1mRNA及蛋白在上述3种细胞均有表达。结论 IL-22可能涉及支气管哮喘的发生发展过程,气道平滑肌细胞、肺成纤维细胞、人气道上皮细胞可能均是IL-22发挥作用的靶细胞。

血清TNF-α、IL-1β、sIL-2R水平与溃疡性结肠炎患者肠道菌群改变的相关性

目的:分析血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平与溃疡性结肠炎(UC)患者肠道菌群改变的关联性。方法:选取我院2020年5月-2022年4月收治的107例UC患者为研究对象,根据入院时疾病状态分成活动期组(69例)、缓解期组(38例)。比较两组入院时肠黏膜屏障功能指标及溃疡性结肠炎内窥镜严重指数(UCEIS)评分,比较两组入院时血清TNF-α、IL-1β、sIL-2R水平,比较两组入院时肠道菌群数量,分析血清TNF-α、IL-1β、sIL-2R水平与肠道菌群、肠黏膜屏障功能及UCEIS评分相关性。结果:与缓解期组相比,入院时活动期组血清DAO、LPS、PCT、D-乳酸、TNF-α、IL-1β、sIL-2R水平及UCEIS评分较高(P<0.05);活动期组肠道内大肠埃希菌、拟杆菌、肠球菌数量较缓解期组高,乳酸杆菌、双歧杆菌数量比缓解期组少(P<0.05);入院时血清TNF-α、IL-1β、sIL-2R水平与UCEIS评分、DAO水平、LPS水平、PCT水平、D-乳酸水平、大肠埃希菌、拟杆菌以及肠球菌数量呈正相关,与双歧杆菌、乳酸杆菌数量呈负相关(P<0.05)。结论:不同发病状况UC者的肠道菌群不同,且与炎症状态存在相关性,能作为评估病情的参考指标。

血清ICAM-1、SIL-2R、IL-2水平与急性胰腺炎病情程度的相关性分析

目的:分析血清ICAM-1(细胞间黏附分子)、SIL-2R(白介素2受体)、IL-2(白细胞介素-2)水平变化与急性胰腺炎(AP)病情相关性。方法:选取96例AP患者作为试验组,根据患者病情分为重度组52例、轻度组44例,另选取55例同期健康体检者为对照组。比较两组血清IL-2、SIL-2R、ICAM-1水平、Ranson评分,分析上述血清因子与病情相关性及对AP预后预测价值。结果:与对照组相比,试验组血清SIL-2R、ICAM-1水平较高,血清IL-2水平较低;与轻度组相比,重度组血清SIL-2R、ICAM-1水平、Ranson评分较高,血清IL-2水平较低;Ranson评分与血清SIL-2R、ICAM-1呈正相关,与IL-2呈负相关;与生存组比较,病死组入院1周后血清SIL-2R、ICAM-1水平较高,IL-2水平较低;差异均有统计学意义(P<0.05);入院1周后血清IL-2、SIL-2R、ICAM-1各参数联合预测对AP患者病死预测优于单一参数预测。结论:血清ICAM-1、SIL-2R、IL-2水平变化与AP患者Ranson评分相关,可用于评估AP病情,可作为临床诊断AP病情程度血清学指标,可通过各指标初步预测AP患者预后,以制定相应干预方案。

急性胰腺炎患者血浆IL-22、IFN-γ、IL-10和IL-1ra水平及与疾病严重程度的相关性

目的探讨急性胰腺炎患者血浆白细胞介素-22(IL-22)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1ra)水平与疾病严重程度及坏死感染的相关性。方法选取收治的急性胰腺炎患者60例为研究组,将急性胰腺炎划分为轻度(Ⅰ级,15例)、中度(Ⅱ级,20例)与重度(Ⅲ级,25例),另选取体检正常的59例为对照组,检测2组体内血浆IL-22、IFN-γ、IL-10、IL-1ra水平,观察2组研究对象入院的24 h内行APACHEⅡ评分,48 h内进行Ranson评分,并观察患者有无坏死感染。结果研究组患者血浆IL-22、IFN-γ水平均显著高于对照组(P<0.05),Ⅱ级与Ⅲ级患者体内血浆IL-22、IFN-γ水平均显著高于Ⅰ级患者(P<0.05),且Ⅲ级显著高于Ⅱ级(P<0.05);研究组IL-10与IL-1ra水平均显著低于对照组(P<0.05),Ⅱ级与Ⅲ级患者体内IL-10及IL-1ra水平显著低于Ⅰ级患者(P<0.05),且Ⅲ级较Ⅱ级患者显著降低(P<0.05);血浆IL-22、IFN-γ检测水平均与APACHEⅡ及Ranson评分呈显著正相关(P<0.05);IL-10与IL-1ra检测水平均与APACHEⅡ及Ranson评分呈显著负相关(P<0.05);坏死感染患者体内血浆IL-22、IFN-γ水平均显著高于无坏死感染患者(P<0.05),且IL-10与IL-1ra水平显著低于无坏死感染患者(P<0.05);多因素Logistic回归分析发现血浆IL-22、IFN-γ、IL-10、IL-1ra水平均是坏死感染的危险因素。结论急性胰腺炎患者体内血浆IL-22、IFN-γ、IL-10、IL-1ra水平可随着疾病严重程度而发生变化,同时与坏死感染发生情况相关,可为早期诊断急性胰腺炎提供参考。

IL-27通过信号通路p38 MAPK和PI3K途径调节中性粒细胞Mac-1、fMLP-R及IL-1β表达

本研究探讨IL-27调节人外周血中性粒细胞中黏附分子Mac-1、趋化因子受体fMLP-R和促炎因子IL-1β表达的信号通路。采用Ficoll密度梯度离心及低渗裂解残存红细胞方法分离高纯度的外周血中性粒细胞。用RT-PCR方法检测中性粒细胞IL-27受体(WSX-1/TCCR和gp130)mRNA表达。分别应用IL-27及信号通路p38 MAPK、PI3K和ERK抑制剂SB203580、LY294002、U0126处理中性粒细胞,用实时定量RT-PCR检测作用前后fMLP-R和IL-1βmRNA水平变化;应用放射免疫法检测作用前后培养上清液中IL-1β的水平变化;流式细胞术检测作用前后Mac-1表达水平变化。结果表明:人外周血中性粒细胞协同表达IL-27受体的两个亚单位WSX-1/TCCR和gp130,IL-27下调中性粒细胞表面黏附分子Mac-1表达(p<0.05),SB203580阻断了IL-27对Mac-1的下调作用(p<0.05),而LY294002及U0126无阻断作用(p>0.05)。相反,IL-27上调中性粒细胞中fMLP-R和IL-1βmRNA的表达并能增加IL-1β释放(p<0.05),LY294002阻断了IL-27对fMLP-R和IL-1β的上调作用(p<0.05),而SB203580及U0126无阻断作用(p>0.05)。结论:IL-27与IL-27R相互作用,可能通过p38 MAPK和PI3K信号途径调节人外周血中性粒细胞中Mac-1、fMLP-R及IL-1β表达。

大黄丹参对急性胰腺炎重症化过程中TLR-IL-1R信号系统影响

目的:探讨生大黄和丹参治疗重症急性胰腺炎对机体炎症反应和免疫应答关键信号系统TLR-IL-1R信号通路的调控作用。方法:建立SD大鼠实验性重症急性胰腺炎模型,分正常对照组(SO)、实验对照组(SAP)、大黄丹参干预组(DD);检测脾脏组织中β-arrestin mRNA的表达、肝脏组织TRAF6蛋白含量水平、胰腺组织中NF-κBp65蛋白表达的水平、血清炎性细胞因子TNF-α、IL-6的活性水平。结果:SAP组β-arrestin mRNA、TRAF6蛋白表达均受到显著抑制,NF-κBp65蛋白、TNF-α、IL-6活性水平表达增强,DD组β-arrestin mRNA下降有抑制,TRAF6蛋白表达进一步下降,NF-κBp65蛋白、TNF-α、IL-6活性水平增强有阻抑。结论:生大黄联合丹参有上调TLR-IL-1R信号系统负调控因子β-arrestin mRNA表达的作用;可以阻止急性胰腺炎重症化进程,其机理与调控制TLR-IL-1R信号系统具有相关性。

IRAK-4:TLR/IL-1R家族共同信号转导系统中的关键因子

最近发现的一种新的白细胞介素1受体相关激酶4(interleukin1receptorassociatedkinase4,IRAK4)不仅可促使白细胞介素1受体相关激酶1(IRAK1)磷酸化,还是IRAK1募集于TLR/IL1R复合物的必要条件,从而成为调控IRAK1生物活性以及内毒素胞内信号转导的最关键分子。充分认识IRAK4的作用机制,将有助于设计出新的针对感染性疾病的治疗策略。

芍药软肝方对荷肝癌H_(22)小鼠肿瘤组织TGF-β_1 RⅡ、NF-κB、VEGF表达的影响

目的:观察芍药软肝方对小鼠H22肝癌肿瘤组织TGF-β1RⅡ、NF-κB、VEGF基因表达的影响。方法:ICR荷H22肝癌小鼠50只,随机分生理盐水对照组,芍药软肝方低、中、高剂量组,环磷酰胺组,停药次日处死小鼠,取皮下肿瘤组织。采用荧光定量RT-PCR法测定芍药软肝方对小鼠H22肝癌组织TGF-β1RⅡ、NF-κB、VEGF基因的表达。结果:芍药软肝方能上调小鼠H22肝癌组织TGF-β1RⅡ表达水平,以中剂量组最明显,与生理盐水组相比有显著性差异(P<0.01)。芍药软肝方各给药组均能明显下调荷H22肝癌实体瘤小鼠肿瘤组织中NF-κB的表达水平,与生理盐水组相比均有显著性差异(P<0.01)。芍药软肝方中、高剂量组能明显降低ICR小鼠H22肝癌肿瘤组织中VEGF的表达水平,以高剂量组最明显,中、高剂量组与生理盐水组均有显著差异(P<0.01)。结论:芍药软肝方抑瘤作用的机理可能是通过下调荷瘤小鼠肿瘤组织NF-κB、VEGF表达,并上调TGF-β1RⅡ的表达水平,从而抑制肿瘤组织新生血管生成,抑制肿瘤细胞增殖,实现其抗肿瘤作用。

Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb抑制由IL-23诱导PBMCIFN-γ的产生

目的:探讨重组人白介素23(IL-23)诱导正常人PBMC IFN-γ的产生,细胞亚群和调节因素。方法:正常人PBMC在不同条件下与IL-23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中IFN-γ的水平。同时采用流式细胞仪,分析IL-23诱导PBMC IFN-γ表达的细胞亚群。结果:IL-23呈剂量依赖性诱导PBMC IFN-γ产生,并可与IL-2协同诱导IFN-γ的产生。细胞亚群分析的结果表明,IL-23诱导高表达CD56+NK细胞产生IFN-γ,对CD4+和CD8+T细胞无明显作用。Th2细胞因子和抗IL-12受体β1mAb(IL-12Rβ1)抑制IL-23诱导IFN-γ产生。结论:IL-23可直接作用于CD3-CD56+NK细胞,诱导产生IFN-γ。Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb抑制IL-23诱导IFN-γ产生,提示可以用于由IL-23引起自身免疫病的治疗。

急性胰腺炎患者血清IL-15IL-18和sTNF-1R的变化意义

目的:本实验通过测定急性胰腺炎(AP)患者血清白介素-15(IL-15)、白介素-18(IL-18)及可溶性肿瘤坏死因子受体-1(sTNF-1R)的水平,探讨他们与AP的关系.分析他们之间的相关性.研究对重症急性胰腺炎(SAP)的发生可能有预测作用的指标.探讨炎性递质在急性胰腺炎发病机制中的作用.方法:选择AP患者26例,按照急性胰腺炎的临床诊断及分级标准分组,其中SAP患者7例,轻型急性胰腺炎(MAP)患者19例,正常对照组10例.用ELISA法检测血清IL-15、IL-18及STNF-1R浓度.结果:血清中IL-15、IL-18及sTNF-1R浓度在MAP和SAP两组患者之间存在显著差异,SAP组明显高于MAP组,SAP同MAP组比较:IL-18:78±15vs28±13ng/l,(P<0.01);IL-15:42±19vs6±2ng/l,(P<0.01);sTNF-1R:6327±3655vs832±329ng/l,(P<0.01);sTNF-1R在SAP和MAP组显著高于正常对照组,SAP同对照组比较6327±3655vs545±123ng/l,(P<0.01);MAP同对照组比较832±329vs545±123ng/l,(P<0.01);IL-15同IL-18有相似的结果,即MAP组显著低于正常对照组,MAP同对照组比较:IL-18:28±13vs66±10ng/l,(P<0.01);IL-15:6±2vs53±13ng/l,(P<0.01);SAP组同正常对照组之间无显著性差异(P>0.05).轻型急性胰腺炎患者血清sTNF-1R同IL-18呈显著正相关(r=0.98,P<0.01);sTNF-1R同IL-15呈显著正相关,(r=0.823,P<0.01);IL-18同IL-15呈显著正相关,(r=0.95,P<0.01).重型急性胰腺炎患者血清IL-18同IL-15呈显著正相关,(r=0.906,P<0.01);sTNF-1R同IL-15呈显著正相关,(r=0.93,,P<0.01);sTNF-1R同IL-18呈显著正相关,(r=0.953,P<0.01).结论:血清IL-15、IL-18及sTNF-1R参与了急性胰腺炎的炎症反应过程,可能是预测急性胰腺炎的严重程度的指标.

内毒素预处理对大鼠全脑缺血后海马内生性IL-1Rα的影响

目的 探讨内毒素预处理对大鼠全脑缺血 再灌注后海马内生性白细胞介素 1受体拮抗剂 (IL 1Rα)的影响及意义。方法 采用大鼠全脑 缺血再灌注模型 ,动态观察内毒素预处理后海马组织IL 1Rα的表达、含量及CA1区神经元计数的变化。结果 内毒素预处理后脑组织内生性IL 1Rα表达及含量显著增加 ,海马CA1区神经元计数下降幅度减少。结论 内毒素预处理对全脑缺血 再灌注后神经元的损伤有明显保护作用 ;其机制可能与诱导了中枢神经系统内生性抗损伤蛋白IL 1Rα的合成有关。

益气活血软坚解毒方对荷H22肝癌小鼠抑瘤作用及肿瘤组织VEGF、TGF-β1RⅡ表达影响的研究

目的:探讨益气活血软坚解毒方对H22肝癌小鼠的抑瘤作用,并初步探索其作用机制。方法:采用H22肝癌移植瘤小鼠模型,分荷瘤阴性对照组、益气活血软坚解毒方低、中、高剂量组和阳性对照组,观察益气活血软坚解毒方对荷H22肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用,并运用荧光定量RT-PCR法评价益气活血软坚解毒方对H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤组织VEGF、TGF-β1RⅡ表达的作用。结果:益气活血软坚解毒方低、中、高剂量组和CTX组对移植性荷H22肝癌小鼠的抑瘤率分别为17.72%、33.99%、23.73%、43.95%;与生理盐水组相比,益气活血软坚解毒方低、中、高剂量组和CTX组瘤重均有显著性差异(P<0.01)。益气活血软坚解毒方能下调H22肝癌小鼠肿瘤组织VEGF、上调TGF-β1RⅡ的表达水平,且低剂量组或中剂量组与生理盐水组相比有显著差异,高剂量组与生理盐水组相比差异非常显著。结论:益气活血软坚解毒方对H22肝癌荷瘤小鼠有明显的抑瘤作用,其抑瘤作用可能与下调肿瘤组织VEGF,上调TGF-β1RⅡ表达水平有关。

Exendin-4改善Aβ31-35所致小鼠海马HT22神经细胞Per2节律基因/蛋白异常表达

目的探讨Exendin-4对β淀粉样蛋白31-35(Aβ31-35)所致HT22细胞Per2节律基因/蛋白表达的影响及机制。方法 HT22细胞分为Aβ31-35处理组(0,2.5,5.0,10.0μmol/L),Exendin-4单独处理组,Exendin-4预处理组,Exendin-4+Exendin(9-39)预处理组,Exendin-4+Exendin(9-39)处理组,Exendin(9-39)单独处理组,以完全培养基培养的细胞为对照组。光镜下观察HT22细胞形态,MTT法检测细胞存活率,实时荧光定量PCR检测Per2基因的表达,免疫荧光染色观察GLP-1R及PER2蛋白表达。结果 5,10μmol/L Aβ31-35处理后,细胞存活率较对照组显著降低(P<0.05)。Exendin-4预处理后,5μmol/L Aβ31-35引起的细胞形态结构的改变明显改善,细胞存活率显著提高(P<0.05)。Exendin-4预处理后,Per2基因/蛋白表达在CT(circadian time)16时较Aβ31-35处理显著提高(P<0.05);Exendin-4+Exendin(9-39)处理后,GLP-1R表达在CT16时较Exendin-4处理显著降低(P<0.05)。Exendin-4+Exendin(9-39)预处理后,CT16时PER2蛋白荧光强度较Exendin-4预处理显著降低(P<0.05)。结论Exendin-4可能通过上调GLP-1R,改善Aβ31-35所致HT22细胞Per2节律基因/蛋白异常表达。

共聚物-1对慢性高眼压模型大鼠视网膜神经节细胞凋亡及IL-6R表达的影响

目的 :观察共聚物 1(copolymer 1,COP 1)诱导的自身免疫反应对慢性高眼压 (elevatedintraocularpressre,EIOP)模型SD大鼠视网膜神经节细胞 (retinalganglioncell,RGC)凋亡和白细胞介素 6受体 (IL 6R)表达的影响。方法 :将SD大鼠随机分为正常对照组、安慰剂免疫的EIOP组和COP 1免疫的EIOP组。应用烧灼巩膜静脉的方法制作大鼠慢性EIOP模型。于COP 1免疫的EIOP组动物的后足皮下注射COP 1,安慰剂免疫的EIOP组动物注射生理盐水 ,对照组动物不做任何处理。用免疫组化染色法检测RGC上IL 6R的表达 ,用TUNEL染色法检测各组RGC的凋亡。结果 :COP 1免疫的EIOP组的RGC凋亡数较安慰剂免疫的EIOP组减少 (P <0 .0 5 )。IL 6R在正常大鼠RGC上有表达 ,安慰剂免疫的EIOP组表达增强 (P <0 .0 5 ) ,COP 1免疫的EIOP组表达水平最高 (P <0 .0 5 )。结论 :COP 1诱导的自身免疫对慢性EIOP条件下的RGC具有保护作用 ,并可使RGC表达IL 6R的水平升高。推测COP 1诱导的RGC上IL 6R表达水平的增高 ,可能与自体免疫反应的神经元保护作用有关。本研究结果对青光眼患者视网膜损伤的治疗具有一定的意义。

系统性红斑狼疮患者血清IL-1,SIL-2R,IL-6,IL-8的变化及临床意义

目的 通过检测系统性红斑狼疮 (SL E)患者血清白细胞介素 - 1、- 6、- 8(IL - 1、- 6、- 8)可溶性白细胞介素 - 2受体(SIL - 2 R)水平 ,探讨细胞因子和 SL E活动性的关系。方法 选择 46例活动性 SL E患者 ,并将其分成轻 ,中 ,重三组及狼疮肾(L N)和非 L N两类 ,采用 EL ISA法测定其血清 IL- 1,SIL- 2 R,IL- 6 ,IL- 8水平。结果 SL E患者血清 IL- 1,SIL- 2 R,IL- 6 ,IL- 8水平显著高于正常对照组 (P<0 .0 1) ,且和 SL E的活动度呈正相关 ,L N患者血清 SIL- 2 R,IL- 6 ,IL- 8则高于非 L N组 (P<0 .0 5 )。结论 异常增高的细胞因子可引起免疫系统网络的紊乱 ,导致免疫损伤。监测血清细胞因子可有助于了解患者狼疮活动程度 ,指导临床治疗。

人IL-1RⅡ基因腺病毒载体的构建及在子宫内膜异位症细胞中的表达

目的:利用AdEasy XL系统,构建并鉴定IL-1RII基因重组腺病毒载体,并在子宫内膜异位症(EM)细胞中表达。方法:PCR扩增含有IL-1RII全长cDNA的片段,亚克隆到pShuttle-CMV穿梭质粒,经酶切和测序验证无误后,再经电转化与pAdEasy-1质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组产生腺病毒载体质粒。经过抗性筛选、酶切鉴定以及再次测序验证无误后得到阳性的重组质粒,经PacI酶切线性化再在293细胞中进行包装扩增,用ELISA检测IL-1RII蛋白的表达。利用Adeasy XL系统的对照载体pShuttle-CMV-LacZ同上操作作为对照。收集的重组腺病毒感染原代培养的EM基质细胞,并以免疫组化法鉴定IL-1RII表达。结果:测序证实连接后IL-1RII序列完全正确;抗性筛选及酶切鉴定均表明重组腺病毒载体构建成功;pShuttle-CMV-LacZ转染293细胞3d后X-gal染色阳性,回收病毒可以重复感染293细胞,ELISA鉴定表达IL-1RII可溶性蛋白,证明病毒包装成功。重组的腺病毒感染EM基质细胞后,免疫组化法证实IL-1RII表达。结论:成功地构建了IL-1RII基因重组腺病毒载体,并且在EM基质细胞中表达,为进一步研究IL-1RII基因在EM中的作用乃至生物治疗都奠定了基础。

MRL 小鼠 IL-10R1 对 B 淋巴细胞功能影响的研究

目的:研究MRL小鼠IL-10R1对B淋巴细胞功能的影响。方法:分别将克隆有MRL小鼠和C57BL/6小鼠IL-10R1基因的载体转染至Ba/F3细胞稳定表达,经IL-10刺激后,用MTT法检测细胞增殖情况,用流式细胞术检测CD16/32和LECAM-1的表达情况。结果:随着IL-10的浓度增加,表达MRL IL-10R1的B细胞的增殖能力递增,而表达C57BL/6 IL-10R1的B细胞递减;接受IL-10刺激后表达MRL IL-10R1的B细胞CD16/32表达水平较表达C57BL/6 IL-10R1的B细胞低,LECAM-1表达水平前者却较后者高。结论:MRL小鼠IL-10R1丧失了对B细胞活化、增殖及趋向性迁移的抑制作用,这可能与系统性红斑狼疮的发生及发展有关。

急性冠脉综合征患者血清炎症标记物IL-6R及ADAMTS-1的研究

冠状动脉内易损粥样斑块破裂、血小板聚集和继发血栓形成是急性冠脉综合征（ACS）发生最主要原因［1］。炎症因子及炎症反应是导致冠脉内稳定斑块向易损斑块进展的重要环节。IL-6和 IL-6R 复合物通过心肌细胞丰富的 gp130信号转导受体发挥负性肌力作用和细胞毒作用，IL-6R 作为一种参与炎症信号通路蛋白是冠心病的致病原因之一［2，3］。ADAMTS-1可以参与细胞外基质的降解与重组，并且还能激活不同的细胞表面分子，其独特的羧基端具备血小板凝血酶敏感蛋白基序，能使其被分泌后结合到细胞外基质上参与冠状动脉粥样硬化的形成与进展、细胞凋亡、炎症发生［4］。因此，监测患者ADAMTS-1、IL-6R 血清学水平具有重要研究价值，尽早发现易损斑块并及时对其进行干预治疗，使降低 ACS 发病率与死亡率成为可能。