血清NF-κB、TIMP-1、IL-8与儿童幽门螺杆菌感染相关性胃炎的关系

目的分析血清核因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)、白细胞介素-8(IL-8)与儿童幽门螺杆菌(H.pylori)感染相关性胃炎的关系。方法选取2021年7月至2023年7月就诊的60例H.pylori感染相关性胃炎患儿设为观察组,另选取同期体检中心的60例健康体检儿童设为健康组,检测、比较2组血清NF-κB、TIMP-1、IL-8水平,比较观察组患者不同炎性活动度组血清NF-κB、TIMP-1、IL-8水平,比较观察组患者治疗前后血清NF-κB、TIMP-1、IL-8水平,绘制受试者工作曲线(ROC),分析血清NF-κB、TIMP-1、IL-8对H.pylori感染相关性胃炎的诊断效能。结果观察组血清NF-κB、TIMP-1、IL-8水平均高于健康组(P<0.05)。重度组血清NF-κB、TIMP-1、IL-8水平均高于中度组、轻度组(P<0.05),中度组血清NF-κB、TIMP-1、IL-8水平均高于轻度组(P<0.05)。治疗后血清NF-κB、TIMP-1、IL-8水平低于治疗前(P<0.05)。血清NF-κB、TIMP-1、IL-8联合检测诊断H.pylori感染相关性胃炎的AUC是0.904,95%CI可信区间是0.856~0.951,联合检测的灵敏度(94.82%)、特异度(90.13%)均高于单一检测(73.82%、71.62%)、(72.26%、68.18%)、(70.18%、64.74%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论H.pylori感染相关性胃炎患儿血清NF-κB、TIMP-1、IL-8呈异常高表达,血清NF-κB、TIMP-1、IL-8表达量与炎性活动度及疗效存在密切联系,联合检测可提高对H.pylori感染相关性胃炎的诊断效能,值得借鉴。

NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌趋化因子单核细胞趋化蛋白1和白细胞介素8的机制

目的:研究幽门螺杆菌NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌趋化因子单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)和白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)的机制。方法:利用NapA蛋白处理巨噬细胞,然后使用ELISA法检测上清中MCP-1和IL-8的表达量。使用C29、ST2825、SB203580、SP600125以及PDTC和巨噬细胞预先共孵育1 h,分别抑制Toll样受体2(toll-like receptors 2,TLR2)、髓样分化因子(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、核糖核酸酶p蛋白亚基p38(ribonuclease p-protein subunit p38,p38)、应激活化蛋白激酶(c-Jun N-terminal kinase,c-Jun)和核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)的活性,然后再加入NapA蛋白孵育4 h,收集上清并检查其中MCP-1和IL-8的表达量。结果:NapA蛋白刺激巨噬细胞后,MCP-1和IL-8的表达量明显高于未处理组。利用抑制剂C29抑制TLR2的活性,NapA蛋白诱导的MCP-1和IL-8表达量降低。使用ST2825、PDTC以及SB203580分别抑制MyD88、NF-κB以及p38的活性,能够降低NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌MCP-1和IL-8的能力,但是抑制c-Jun不影响NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌MCP-1和IL-8。结论:幽门螺杆菌NapA蛋白通过TLR2/MyD88/NF-κB通路诱导巨噬细胞分泌MCP-1和IL-8。

lncRNA FUT8-AS1通过调控miR-142-5p/BCL2轴促进上皮性卵巢癌细胞增殖、侵袭和EMT

目的 观察FUT8-AS1基因在上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer, EOC)组织和细胞株中的表达,探讨影响EOC细胞增殖、侵袭和EMT的机制。方法 采用GEPIA2和Kaplan-Meier Plotter数据库分析FUT8-AS1在EOC组织中的表达及与患者生存期的关系。收集74例EOS组织标本和60例正常组织标本,应用RT-PCR法检测FUT8-AS1、miR-142-5p、BCL2和EMT相关基因的表达;运用CCK-8和Transwell实验检测敲低FUT8-AS1基因表达对EOC细胞CAOV3增殖和侵袭的影响。利用双荧光素酶报告分析FUT8-AS1与miR-142-5p的相互作用。结果 GEPIA2和Kaplan-Meier Plotter数据库分析发现,FUT8-AS1在EOC组织中的表达显著高于正常组织(P<0.05),FUT8-AS1高表达组的总生存率显著低于FUT8-AS1低表达组(P<0.01);FUT8-AS1基因在74例EOC组织中的表达明显高于正常组织[(2.547±1.370)vs(1.330±0.831),P<0.01],与大网膜转移、淋巴结转移、FIGO分期和总生存期均相关(P<0.01或P<0.05),敲低FUT8-AS1基因可以抑制CAOV3细胞的体外增殖、侵袭能力和EMT(P<0.01或P<0.05)。双荧光素酶报告分析系统检测显示,共转染miR-142-5p mimics和野生型FUT8-AS1-WT质粒,CAOV3细胞的荧光素酶活性明显降低(P<0.05),同时转染miR-142-5p mimics可抵消CAOV3细胞中由敲低FUT8-AS1导致的BCL2基因表达下调(P<0.05)。结论 FUT8-AS1基因在EOC中呈高表达且导致预后差,敲低FUT8-AS1基因可以抑制CAOV3细胞的体外增殖、侵袭能力和EMT,FUT8-AS1基因可能通过靶向miR-142-5p/BCL2分子轴促进EOC的进展。

血清IL-8、ESM-1、VAP-1在慢性阻塞性肺疾病临床诊断及病情评估中的应用

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清白细胞介素-8(IL-8)、内皮特异性分子-1(ESM-1)、血管黏附蛋白-1(VAP-1)表达水平,分析其与病情程度相关性及其对COPD的诊断价值。方法选取2021年11月至2022年8月郑州大学第一附属医院收治的153例COPD患者为研究对象,其中COPD稳定期42例(设为SCOPD组)、COPD急性加重期111例(设为AECOPD组),同时选取同期于医院体检的健康志愿者51例为对照组。比较两组临床资料及血清IL-8、ESM-1、VAP-1水平。对比不同病情程度患者血清IL-8、ESM-1、VAP-1水平。分析血清各指标与肺功能、生化指标、病情程度相关性。评价血清各指标对SCOPD、AECOPD的诊断价值。结果AECOPD组、SCOPD组血清IL-8、ESM-1、VAP-1水平高于对照组,且AECOPD组高于SCOPD组(P<0.05);IL-8、ESM-1、VAP-1与生化指标、COPD评估测试表(CAT)、病情程度呈正相关,与肺功能呈负相关(P<0.05);血清各指标联合诊断SCOPD与AECOPD的曲线下面积(AUC)大于单独指标诊断(P<0.05)。结论血清IL-8、ESM-1、VAP-1与COPD病情严重程度相关,联合检测其水平对COPD具有一定诊断价值,可能作为疾病诊断、病情评估的重要指标。

急性胆囊炎患者胆囊切除术后血清CCK-8、TREM1水平与发生感染的关系

目的分析急性胆囊炎(AC)患者胆囊切除术后血清胆囊收缩素-8(CCK-8)、髓系细胞触发受体1(TREM1)水平与发生感染的关系。方法将该院2020年12月至2022年12月收治的70例胆囊切除术后发生感染的AC患者纳入研究组,66例胆囊切除术后未发生感染的AC患者纳入对照组。采用酶联免疫吸附试验检测血清CCK-8、TREM1水平。采用Pearson相关分析胆囊切除术后发生感染AC患者血清中CCK-8、TREM1水平与炎症因子水平的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CCK-8、TREM1水平对AC患者胆囊切除术后发生感染的诊断价值。采用多因素Logistic回归分析AC患者胆囊切除术后感染的影响因素。结果研究组与对照组有胆囊结石、胆囊周边积液比例比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,研究组血清CCK-8水平明显降低,TREM1水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。胆囊切除术后发生感染的AC患者血清CCK-8水平与CRP、IL-8、TNF-α水平均呈负相关(P<0.05),TREM1水平与CRP、IL-8、TNF-α水平均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清CCK-8与TREM1联合检测诊断AC患者胆囊切除术后发生感染的曲线下面积(AUC)明显大于CCK-8、TREM1单独检测的AUC(Z=5.703,P<0.001;Z=4.584,P<0.001)。有胆囊结石、胆囊周边积液及血清CCK-8水平降低、血清TREM1水平升高均为AC患者胆囊切除术后发生感染的危险因素(P<0.05)。结论胆囊切除术后发生感染的AC患者血清CCK-8水平降低,TREM1水平升高,二者联合检测能够提高对AC患者胆囊切除术后发生感染的诊断价值。

高氏盆炎方二号方对慢性盆腔炎大鼠的抗炎抗粘连作用及对ICAM-1和caspase-8表达的影响

目的探讨高氏盆炎方二号方对慢性盆腔炎(CPID)大鼠的抗炎抗粘连作用及对细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和半胱天冬酶-8(caspase-8)表达的影响。方法首先通过体外抑菌试验观察高氏盆炎方二号方药液的最低抑菌浓度(MIC)。将75只雌性SD大鼠随机分为空白组(n=10)和造模组(n=65)。造模10 d后,在造模组随机抽取5只大鼠处死,进行子宫组织HE染色后镜下呈慢性炎症改变,提示造模成功。随后将60只大鼠再随机分为模型组、中药组、中成药组及人胎盘组织液组,其中中药组又分为低、中、高剂量组,每组10只。模型组给予生理盐水2 mL/只灌胃,中药低、中、高剂量组分别给予高氏盆炎方二号方7、14、28 g/kg灌胃,中成药组给予蒲苓盆炎康颗粒3 g/kg灌胃,人胎盘组织液组给予人胎盘组织液1 mL/kg腹腔注射。以上各给药组均每日1次给药,连续给药20 d。末次给药24 h后处死大鼠并取子宫组织称重,计算子宫肿胀度及子宫系数;光镜下观察大鼠子宫组织病理学改变情况;用免疫组化法及Western-blot法检测大鼠子宫组织中ICAM-1和caspase-8蛋白表达水平。结果高氏盆炎方二号方对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及乙型溶血性链球菌有明显的抑菌作用。与空白组比较,模型组的子宫肿胀度升高,子宫系数降低(P<0.05),提示模型建立成功;与模型组比较,各给药组的子宫肿胀度降低(P<0.05),尤以中药组高、中剂量组及人胎盘组织液组改善显著。与模型组比较,各给药组大鼠子宫组织中的ICAM-1蛋白表达水平降低,caspase-8蛋白表达水平升高(P<0.05),提示给药治疗有效;空白组与中药高剂量组、中药中剂量组及人胎盘组织液组的ICAM-1、caspase-8蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),说明以上三组疗效相当。结论高氏盆炎方二号方具有抑菌的作用,能够有效改善疾病症状、控制宫腔粘连的发展,修复受损的子宫组织形态及结构,其治疗机制可能与ICAM-1表达下调、caspase-8表达上调相关,可促进炎症细胞凋亡,增强机体抵抗力。

高迁移率族蛋白B1对甲苯二异氰酸酯诱导的支气管上皮细胞中性粒细胞趋化因子CXCL12、IL-8表达的影响

目的通过体外实验探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)在甲苯二异氰酸酯(toluene diisocyanate,TDI)所致的职业性哮喘中趋化中性粒细胞的作用机制。方法制备TDI-人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)偶联物(TDI-HSA),并通过Gutmann法与BCA法分别测定偶联物中TDI及HSA含量。分别以0、40、80、120 mg/L TDI-HSA染毒人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBECs)12 h,ELISA法检测细胞培养上清中白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、趋化因子12(C-X-C motif chemokine 12,CXCL12)的水平;Western blot法检测细胞中HMGB1、CXCL12及核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)相关蛋白的表达;活细胞荧光探针法检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平;免疫荧光法观察HMGB1的核转位情况。使用不同浓度(100、200 mmol/L)甘草素(glycyrrhizin,GL)预处理HBECs细胞24 h抑制HMGB1后,继续用TDI-HSA染毒12 h,检测细胞培养上清中IL-8水平,HMGB1、CXCL12及NF-κB相关蛋白表达,ROS释放水平及HMGB1的核转位情况。结果不同浓度TDI-HSA染毒HBECs 12 h后,随着染毒浓度的升高,HBECs细胞内HMGB1发生明显核转位,细胞中ROS和细胞上清中IL-8水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,120 mg/L染毒组HBECs细胞HMGB1、磷酸化P65蛋白表达显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。以含有不同浓度GL的培养基联合120 mg/L TDI-HSA处理HBECs细胞12 h后,与对照组相比,GL作用于HBECs细胞可显著抑制TDI-HSA导致的HMGB1的核转位,抑制HBECs细胞中的ROS和上清液中的IL-8水平的升高,显著减少细胞中HMGB1、磷酸化P65蛋白的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TDI可通过增加HBECs细胞HMGB1蛋白表达和核转位,激活NF-κB,促进IL-8的释放,不影响CXCL12的表达。GL可通过降低HMGB1表达,抑制NF-κB活化,减少IL-8释放水平。

CircSLC8A1_005通过编码蛋白抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用

【目的】探究环形RNA circSLC8A1_005调控心肌成纤维细胞纤维化表型的作用及可能机制。【方法】利用腺病毒介导在小鼠心肌成纤维细胞(mCFs)中过表达circSLC8A1_005,并检测mCFs中纤维化相关因I型胶原α1链(Col1a1)、Ⅲ型胶原α1链(Col3a1)和平滑肌肌动蛋白α2(Acta2)基因表达,通过EdU和划痕实验检测不同干预对mCFs的增殖和迁移能力的影响。双萤光素酶报告基因实验检测circSLC8A1_005包含的潜在核糖体进入序列(IRES)的活性。通过Western blot实验检测circSLC8A1_005翻译蛋白SLC8A1-605aa及其在细胞内分布情况。双萤光素酶报告基因实验检测SLC8A1-605aa对超氧化物歧化酶2(Sod2)的转录激活作用。通过RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验检测SLC8A1-605aa与Sod2 mRNA的结合作用。放线菌素D实验检测SLC8A1-605aa对Sod2 mRNA稳定性的影响。【结果】利用腺病毒可在mCFs中有效介导过表达circSLC8A1_005,过表达circSLC8A1_005可显著抑制mCFs中纤维化相关基因表达,抑制mCFs的增殖和迁移能力。双萤光素酶报告基因实验结果提示circ⁃SLC8A1_005包含的2个IRES具有活性。Western blot检测结果显示circSLC8A1_005可翻译预期大小为70 ku的SLC8A1-605aa蛋白,并主要分布于细胞核内。过表达SLC8A1-605aa和circSLC8A1_005可一致地抑制mCFs的纤维化表型。SLC8A1-605aa可特异上调超氧化物歧化酶2(Sod2)表达,但并不能转录激活Sod2表达;RIP实验结果显示SLC8A1-605aa与Sod2 mRNA有特异结合作用,而放线菌素D实验结果显示SLC8A1-605aa能够增强Sod2 mRNA的稳定性。【结论】CircSLC8A1_005通过翻译蛋白SLC8A1-605aa发挥抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用,SLC8A1-605aa可能是潜在的用于心肌纤维化治疗的靶点。

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子1在小鼠急性肝损伤中的作用及机制

目的探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子1(TNFAIP8L1)在小鼠急性肝损伤中的作用及机制。方法选择C57BL/6J雄性野生型(WT)小鼠和C57BL/6J雌性TNFAIP8L1^(+/-)小鼠杂交繁殖的第2代TNFAIP8L1^(+/-)小鼠和WT小鼠,进一步自交繁殖出第3代雄性TNFAIP8L1^(-/-)小鼠和第3代WT雄性小鼠。分别取5只正常第3代雄性WT小鼠和5只正常第3代雄性TNFAIP8L1^(-/-)小鼠,检测比较2种正常小鼠的血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,苏木精-伊红(HE)染色观察2种正常小鼠肝组织中炎症细胞浸润及细胞坏死情况,采用流式细胞术检测2种正常小鼠肝组织髓系细胞亚群中性粒细胞(Neu)、嗜酸性粒细胞(EOS)、树突状细胞(DC)、骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs)、骨髓来源的单核细胞(BMNCs)所占百分比。另取5只第3代雄性WT小鼠和4只第3代雄性TNFAIP8L1^(-/-)小鼠,采用脂多糖(LPS)/D-半乳糖胺(D-Gal)诱导制备急性肝损伤小鼠模型,24 h后采取上述方法检测比较2种急性肝损伤小鼠血清ALT水平,观察2种急性肝损伤小鼠肝组织中炎症细胞浸润及细胞坏死情况,并检测2种急性肝损伤小鼠肝组织髓系细胞亚群Neu、EOS、DC、BMDMs、BMNCs所占百分比。结果正常WT小鼠和TNFAIP8L1^(-/-)组小鼠肝组织中髓系细胞亚群Neu、EOS、DC、BMDMs、BMNCs百分比及血清ALT水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。正常WT小鼠和TNFAIP8L1^(-/-)小鼠的肝组织HE染色结果均显示肝小叶结构完整清晰,肝细胞形态正常、排列整齐,无明显炎症细胞浸润及细胞坏死。急性肝损伤24 h后,TNFAIP8L1^(-/-)小鼠肝组织髓系细胞亚群中Neu、BMNCs百分比及血清ALT水平显著高于WT小鼠(P<0.05);2组小鼠肝组织髓系细胞亚群EOS、DC、BMDMs百分比比较差异无统计学意义(P>0.05)。急性肝损伤WT小鼠肝组织中肝小叶结构模糊,肝细胞肿胀、散在空泡样脂肪变性,有少量炎症细胞浸润。急性肝损伤TNFAIP8L1^(-/-)小鼠肝组织中肝小叶结构几乎不存在,肝细胞损伤严重且大量坏死,并有大量炎症细胞浸润。结论TNFAIP8L1基因缺陷不影响小鼠肝组织中髓系细胞的发育和小鼠肝脏稳态。TNFAIP8L1在急性肝损伤的发生发展过程中起抑制作用。TNFAIP8L1基因缺陷加重LPS/D-Gal诱导的急性肝损伤,有可能是通过增加Neu和BMNCs浸润而招募其他类型的免疫细胞浸润入肝组织,从而加重肝细胞的坏死。

YY1/GOLGA8B调控轴在肝细胞癌进展中的表达意义及潜在分子机制

目的:探讨Golgin A8家族成员B(GOLGA8B)在肝细胞癌中的临床病理学意义及潜在分子功能。方法:利用免疫组织化学染色评估GOLGA8B蛋白在肝细胞癌、非癌对照组织的相对表达水平及其区分能力。基于全球基因芯片及高通量测序数据,探究GOLGA8B的mRNA综合表达水平,鉴定肝细胞癌过表达基因和GOLGA8B共表达基因,对其交集基因进行功能注释。本研究利用染色质免疫共沉淀测序分析,预测了阴阳1转录因子(YY1)对GOLGA8B的特异性调控机制,并从组织、单细胞层面验证YY1转录因子的表达水平及与GOLGA8B的Spearman相关性。根据TIMER反卷积算法探究GOLGA8B及YY1转录因子与免疫微环境的关联。结果:GOLGA8B蛋白在肝细胞癌组织呈强阳性表达(285例肝细胞癌VS 89例非癌对照,P<0.001),对肝细胞癌具有较强区分能力(曲线下面积=0.997)。基于2151例非癌对照肝组织、3091例肝细胞癌组织、26个不同平台,GOLGA8B的过表达在mRNA层面得到验证(标准平均差=0.26,95%可信区间:0.12~0.41)。537个GOLGA8B共表达基因在表观遗传调控信号中显著富集;其中,染色质免疫共沉淀测序分析结果提示GOLGA8B受YY1转录因子正性调控。全球基因芯片、高通量测序分析结果支持YY1在肝细胞癌组织显著高表达(SMD=0.29,95%可信区间:0.14~0.45)且与GOLGA8B表达水平呈显著正相关(P<0.05)。单细胞测序结果亦证实YY1/GOLGA8B在肝细胞癌恶性上皮细胞亚群内过表达。YY1与肝细胞癌免疫微环境显著正相关。结论:YY1/GOLGA8B轴可能在肝细胞癌中发挥促癌作用。

增强子RNA RASSF8-AS1在胃腺癌中的临床意义与分子机制

目的 探究增强子RNA RASSF8-AS1在胃腺癌(STAD)中的表达和关键靶基因预测,分析RASSF8-AS1与临床病理特征、预后的关系,探索RASSF8-AS1在STAD发生发展中的作用机制。方法在UCSC Xena数据库中下载33类肿瘤的表达数据、生存数据和临床数据。采用Kaplan-Meier生存分析和相关性分析确定关键eRNA及其调控基因为eRNA-靶基因对。使用R语言ggboxplot命令分析RASSF8-AS1表达与患者临床病理的相关性,利用GO和KEGG富集分析探索RASSF8-AS1在STAD中参与的信号途径。使用逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)验证RASSF8-AS1在正常和胃腺癌细胞系中的表达量。结果 RASSF8-AS1的表达水平与患者的年龄、临床分级、临床分期显著相关(χ^(2)=4.356、4.166、6.452,P均<0.05)。RT-qPCR结果表明,与正常细胞相比,胃癌细胞中RASSF8-AS1和RASSF8的表达水平显著降低,差异有统计学意义(HR=0.044,95%CI:0.032~0.056,P<0.05)。RASSF8-AS1高表达组患者的总体生存率显著低于低表达组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。GO分析结果表明,RASSF8-AS1参与了细胞外基质组织构建、细胞黏附、化学突触传递的调节、胶原代谢等多种生物过程。KEGG通路分析中,间质发展、细胞外基质组织、膜电位的调节等信号途径被富集。结论 RASSF8-AS1是胃癌中与生存相关的关键eRNA,可能成为胃癌患者早期诊断的潜在生物标志物和潜在的治疗靶点。

沉默lncRNA PSMB8-AS1通过调控miR-144-5p表达对甲状腺癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)PSMB8-AS1通过靶向miR-144-5p对甲状腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法研究时间为2023年3月至2024年5月,地点:青岛大学附属医院科研中心。采用GeneCards数据库分析PSMB8-AS1在甲状腺癌组织中的表达。采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测PSMB8-AS1在人正常甲状腺上皮细胞HTori-3以及甲状腺癌细胞系(8505C、FTC-133、KTC-1、TPC-1)中的表达。采用LncRBase和Cancer LncRNA Census数据库预测PSMB8-AS1的靶基因,用双荧光素酶基因报告实验验证。将FTC-133细胞根据转染物的不同分为si-NC组和si-PSMB8-AS1组,CCK-8法和划痕实验分别检测低表达PSMB8-AS1对FTC-133细胞增殖和迁移的影响,PSMB8-AS1与miR-144-5p的靶向关系。qPCR检测低表达PSMB8-AS1对FTC-133细胞中miR-144-5p和ITGA3 mRNA表达的影响。Western blot法检测低表达PSMB8-AS1对FTC-133细胞中ITGA3、Cyclin A、CDK2、FOXC2、Hedgehog蛋白表达的影响。结果PSMB8-AS1在甲状腺癌组织中表达高于癌旁组织(P<0.01)。PSMB8-AS1在甲状腺癌细胞质8505C、FTC-133、KTC-1、TPC-1中表达均高于HTori-3细胞(均P<0.01)。PSMB8-AS1能够靶向结合miR-144-5p(P<0.01)。si-PSMB8-AS1组FTC-133细胞中PSMB8-AS1表达低于si-NC组[(1.07±0.54)比(6.69±1.16),t=8.78,P<0.01]。低表达PSMB8-AS1后,si-PSMB8-AS1组FTC-133细胞的增殖水平均低于si-NC组(均P<0.01)。si-PSMB8-AS1组FTC-133细胞的迁移率低于si-NC组[(27.89±6.01)%比(68.08±6.16)%,t=4.67,P<0.01]。si-PSMB8-AS1组细胞中miR-144-5p表达高于si-NC组,ITGA3 mRNA表达低于si-NC组(t=7.45、3.13,均P<0.01)。低表达PSMB8-AS1能够抑制FTC-133细胞中ITGA3、Cyclin A、CDK2、FOXC2、Hedgehog蛋白表达(均P<0.01)。结论PSMB8-AS1在甲状腺癌组织和细胞系中表达显著上调,低表达PSMB8-AS1可通过靶向调控miR-144-5p抑制FTC-133细胞的增殖和迁移。

PD-L1和CD8在HER2阳性乳腺癌患者中的表达及其与病理参数相关性分析

目的通过评估程序性死亡受体配体1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)和分化群8(cluster of differentiation 8,CD8)在肿瘤微环境中的表达情况及其与患者临床病理特征的相关性,明确PD-L1和CD8在判断人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阳性乳腺癌患者预后方面的作用。方法选取2016年10月至2018年10月山东省滕州市中心人民医院收治的HER2阳性乳腺癌患者65例,所有患者均为女性。癌组织切片经免疫组织化学方法标记PD-L1和CD8;收集患者的临床病理资料,包括年龄、组织学分级、P53、KI-67、雌激素受体、孕激索受体、肿瘤淋巴结转移分类(tumor node metastasis classification,TNM)分期在内的7项与预后相关的临床病理参数。分别分析PD-L1和CD8的表达是否和上述临床病理参数相关。结果PD-L1阳性表达率为21.5%,PD-L1阳性表达与组织学分级和TNM分期相关,差异有统计学意义(χ^(2)=6.250,P=0.044;χ^(2)=13.730,P=0.001);CD8阳性表达率为21.5%,CD8表达与组织学分级和TNM分期相关,差异有统计学意义(χ^(2)=8.023,P=0.018;χ^(2)=6.117,P=0.047)。结论PD-L1和CD8表达与乳腺癌组织学分级和TNM分期相关,可能是HER2阳性乳腺癌患者重要的预后标志物。

SLC16A8通过正调控FN1促进结直肠癌细胞增殖、迁移及血管生成

目的探讨溶质载体家族16成员8(SLC16A8)通过上调纤维连接蛋白1(FN1)表达促进结直肠癌(CRC)细胞增殖和血管生成的作用机制。方法通过癌症基因体图谱(TCGA)的数据分析SLC16A8在CRC中的表达及与患者预后的关系,通过CancerSEA数据库对SLC16A8的功能进行分析。实时定量PCR法(RT-qPCR)检测CRC细胞中SLC16A8的表达水平,将培养CRC细胞分为SLC16A8过表达组,空白对照组和阴性对照组;CCK8法检测细胞增殖;Transwell法检测细胞迁移能力;小管形成实验检测血管生成能力。通过生物信息学方法分析SLC16A8的下游基因,蛋白质免疫印迹法(Western blot)分析SLC16A8对FN1蛋白表达的影响。过表达SLC16A8并抑制FN1表达,将培养CRC细胞分为SLC16A8过表达组,SLC16A8过表达+FN1 siRNA组,空白对照组和阴性对照组,分析SLC16A8是否通过正调控FN1促进CRC细胞增殖和血管生成。结果SLC16A8在CRC中高表达,并且高表达SLC16A8的CRC患者预后较差。SLC16A8功能主要与血管生成相关。SLC16A8在CRC细胞中高表达并可促进CRC细胞增殖、迁移和血管生成。FN1可能是SLC16A8的下游基因并且两者表达呈正相关。SLC16A8可促进FN1蛋白表达,并且SLC16A8通过正调控FN1促进CRC细胞增殖、迁移和血管生成。结论SLC16A8在CRC中高表达,并且SLC16A8通过正调控FN1促进CRC细胞增殖、迁移和血管生成。

血清Caspase-8、sICAM-1表达与动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者介入栓塞术后脑血管痉挛的相关性分析及预测价值

目的探讨血清半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-8(Caspase-8)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)表达与动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者介入栓塞术后脑血管痉挛的关系。方法选取2019年8月至2021年10月间新乡医学院附属南阳市第二人民医院收治的动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者208例,根据介入栓塞术后不同程度脑血管痉挛将患者分为无脑血管痉挛组121例,轻度脑血管痉挛组25例,中度脑血管痉挛组42例,重度脑血管痉挛组20例。酶联免疫吸附法测定各组患者介入栓塞术前、术后3 d、术后7 d的血清Caspase-8、sICAM-1水平。结果动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者介入栓塞术后3 d、术后7 d血清Caspase-8、sICAM-1水平均明显高于术前,术后7 d血清Caspase-8、sICAM-1水平明显低于术后3 d,差异有统计学意义(P<0.05)。组间比较,术后3 d和术后7 d,重度脑血管痉挛组患者血清Caspase-8、sICAM-1水平明显高于中度脑血管痉挛组和轻度脑血管痉挛组,轻度脑血管痉挛组、中度脑血管痉挛组以及重度脑血管痉挛组患者血清Caspase-8、sICAM-1水平均明显高于无脑血管痉挛组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,介入栓塞术后3 d、7 d的血清Caspase-8与sICAM-1呈正相关。ROC曲线分析显示,介入栓塞术后3 d血清Caspase-8、sICAM-1单独和联合检测在预测脑血管痉挛方面均具有较高的应用价值(P<0.01);其中Caspase-8与sICAM-1联合检测的AUC值和灵敏度最高。结论介入栓塞术后脑血管痉挛的动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者血清Caspase-8、sICAM-1表达水平明显增加,联合检测对脑血管痉挛有较高的预测价值。

无托槽隐形矫治器与固定矫治器对口腔正畸治疗患者口腔微生物菌群和龈沟液sICAM-1、MMP-8水平的影响

目的探究无托槽隐形矫治器与固定矫治器对口腔正畸治疗患者口腔微生物菌群和龈沟液可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、基质金属蛋白酶-8(MMP-8)水平的影响。方法前瞻性纳入2020年2月至2023年3月在山西省儿童医院接受正畸治疗的106例患者为研究对象,按照随机数字表法对患者分为对照组和研究组,每组各53例。对照组采用固定矫治器,研究组采用无托槽隐形矫治器。比较两组患者矫正前和矫正后3个月口腔微生物菌群情况(卟啉单胞菌、具核梭杆菌、福塞斯坦氏菌和中间型普里沃菌)、牙周健康情况(牙龈指数、龈沟出血指数、菌斑指数及龈沟探诊深度)、龈沟液sICAM-1和MMP-8水平、患者满意度及并发症情况。结果矫正后3个月,两组各菌群水平均较矫正前升高,但研究组卟啉单胞菌、具核梭杆菌、福塞斯坦氏菌、中间型普里沃菌水平分别为0.29±0.06、0.33±0.06、0.33±0.08、0.27±0.06,均低于对照组(0.35±0.07、0.44±0.08、0.45±0.09、0.37±0.09),差异均有统计学意义(P<0.05)。两组组内矫正后3个月的牙龈指数和龈沟探诊深度与矫正前比较,以及组间矫正后3个月的牙龈指数和龈沟探诊深度比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组矫正后3个月的龈沟出血指数及菌斑指数均较矫正前升高,且研究组出血指数及菌斑指数分别为(0.65±0.06)、(0.99±0.12)分,均低于对照组[(0.72±0.08)、(1.23±0.15)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。矫正后3个月,两组龈沟液sICAM-1水平均较矫正前升高,MMP-8水平均较矫正前降低,研究组龈沟液sICAM-1、MMP-8水平分别为(166.26±21.02)、(22.12±3.39)ng/mL,均低于对照组[(178.52±23.05)、(26.77±4.12)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组患者矫正后3个月的咀嚼、固定、美观、舒适性、方便程度、言语功能的满意度均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组患者牙龈红肿、牙龈萎缩、局部拥挤等总并发症发生率为7.55%,低于对照组(22.64%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论相比固定矫治器矫正,采用无托槽隐形矫治器矫正对口腔微生物菌群和龈沟液中sICAM-1、MMP-8水平具有积极影响,能够提高患者的满意度,降低牙周疾病的发生。

寒喘祖帕颗粒对甲型流感病毒H1N1/PR8株感染致小鼠肺炎的作用

目的探讨寒喘祖帕颗粒对甲型流感病毒H1N1/PR8株感染小鼠肺炎的影响。方法小鼠随机分为正常组、模型组、达菲组(27.5 mg/kg)、连花清瘟颗粒组(3.3 g/kg)和寒喘祖帕低、中、高剂量组(0.38、0.76、1.52 g/kg)。除正常组外,其余组小鼠均采用甲型流感病毒H1N1/PR8株病毒液经滴鼻感染建立肺炎模型。各组连续给予相应药物4 d,取样。测定小鼠体质量、肺指数及抑制率、流感病毒载量、14 d内小鼠死亡率、生存时间;ELISA法检测肺组织中IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α水平,HE染色观察肺组织病理改变并评分。结果寒喘祖帕颗粒中、高剂量组可降低感染后小鼠肺指数,其肺指数抑制率分别为24.01%、32.63%;可降低死亡率,其死亡保护率分别为44.44%、50%。寒喘祖帕低、中、高剂量组均可降低小鼠肺组织中IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ水平,改善小鼠肺部病变,延长平均存活天数,生命延长率分别为17.84%、24.32%、19.46%。结论寒喘祖帕颗粒可改善流感病毒H1N1/PR8株感染致小鼠肺炎症状,可降低死亡率、延长平均存活天数。

中国乐派8+1、思政+X课程体系视域下的二胡主课课程标准建构与思考

为实现建设中国音乐教育体系,中国音乐学院自2019年起加快建设中国乐派8+1、思政+X课程体系的步伐。本文从中国乐派8+1、思政+X课程体系中对二胡主课课程标准的建构,分析中国乐派概念对其形成的指导意义。系统阐述在整个课程体系视域下对二胡主课课标中的课程目标的设定、学生学习质量标准与实施的建议、教学内容的安排、评价与考核方案的规定等内容的建设与思考。

基于STC8G1K17单片机的温湿度控制器

基于STC8G1K17单片机进行系统设计,采用SHT30温湿度传感器获取温湿度数据,通过LCD1602液晶屏实时显示当前温度、湿度以及工作状态。该系统由硬件和软件两部分组成,硬件部分包括STC8G1K17单片机、SHT30、LCD1602等硬件电路,软件部分主要包括单片机嵌入式程序设计。单片机通过温湿度传感器获取数据,液晶屏通过外部按键操作实现数据显示及工作状态的设置,系统可以实现温湿度的自动控制。

鄂尔多斯盆地延安气田周长区域山1盒8段沉积微相及储层特征研究

延安气田周长区域以山1盒8作为上古开发主要层系,针对山1盒8段有利储层发育主控因素缺乏研究这一问题,为助推研究区快速建产,本次研究结合区域动静态资料,通过利用取芯井的岩心相标志,结合测井相研究,建立了山1盒8段的沉积相模式。通过综合运用测试分析手段,精细研究了山1盒8段地层与构造特征、储层特征、孔隙类型及组合等。基于研究成果明确了有利储层发育的主要控制因素,建立了储层的分类标准,对山1盒8段各小层各类储层展布进行划定,初步圈定了山1盒8段有利储层发育的范围,为后续区域高效开发提供了依据。