不同浓度1,25-二羟维生素D3对高原肺水肿雄性大鼠的防治作用及可能机制

目的探究不同浓度1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)_(2)D_(3)]对高原肺水肿(High altitude pulmonary edema,HAPE)雄性大鼠的防治作用及可能机制。方法将105只雄性SD大鼠随机分为对照组、低氧组和5个不同浓度组(低氧+浓度A-E组)。不同浓度组大鼠每天灌胃[应用1,25-(OH)_(2)D_(3)]一次,5天后,低氧组和5个浓度组均置于模拟海拔6000 m的低压舱48 h,检测大鼠血气指标氧饱和度(Oxygen Saturation,SaO_(2))、氧分压(Partial pressure of oxygen,PaO_(2))及肺动脉压(Pulmonary artery pressure,PAP)后处死大鼠,测定肺组织干湿重比,通过HE染色法观察大鼠肺组织病理学变化,用ELISA法检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)活性含量,用RT-PCR法测定大鼠肺组织中炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞色素1β(IL-1β)、白细胞色素6(IL-6)和CYP27B1、VDR mRNA水平,用蛋白质免疫印迹实验(Western Blot)法检测CYP27B1、VDR蛋白水平。结果1,25-(OH)_(2)D_(3)降低HAPE大鼠PAP、LWC,提高SaO_(2)及PaO_(2),降低肺组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平(P<0.05),升高SOD、GSH-Px酶活性(P<0.05),降低MDA含量,上调VDR蛋白水平,下调CYP27B1水平,可减轻肺水肿程度。预防性给予1,25-(OH)_(2)D_(3)(浓度0.252μg/kg)能够有效预防HAPE的发生。结论初步明确了浓度为0.252μg/kg(浓度D组)的1,25-(OH)_(2)D_(3)对雄性大鼠有较好的防治HAPE的效果;这种预防及保护作用可能与1,25-(OH)_(2)D_(3)下调CYP27B1、上调VDR表达有关。

1,25-二羟维生素D_3负性调控被动致敏人气道平滑肌细胞中的NF-κB信号通路

目的:探讨1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]对被动致敏人气道平滑肌细胞(HASMCs)中核因子κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:原代培养HASMCs并使之被动致敏,以1,25-(OH)2D3作为干预因素。EMSA法检测NF-κB的DNA结合活性;免疫细胞化学染色技术观察NF-κB p65的核易位情况;Western blotting法检测核因子κB抑制蛋白α(IκBα)及p-IκBα蛋白的表达水平;实时荧光定量PCR检测维生素D受体(VDR)、维生素D 24-羟化酶(CYP24)和IκBαmRNA的表达水平;放线菌素D处理实验检测IκBαmRNA的表达。结果:(1)1,25-(OH)2D3显著削弱被动致敏HASMCs中NF-κB的DNA结合活性及其亚单位p65的核易位;(2)1,25-(OH)2D3能通过增加被动致敏HASMCs中IκBα的mRNA稳定性及减少其蛋白磷酸化水平2个途径显著上调细胞中IκBα的表达;(3)1,25-(OH)2D3显著上调被动致敏HASMCs中VDR的mRNA表达并诱发其功能性反应。结论:1,25-(OH)2D3能通过上调被动致敏HASMCs中IκBα的表达抑制细胞NF-κB信号通路,且这一作用与VDR有关,这可能是其调控被动致敏HASMCs的重要作用机制。

1,25-二羟维生素D_3对棕榈酸诱导巨噬细胞炎症因子表达的影响

目的研究1,25-二羟维生素D_3(1,25(OH)_2D_3)对棕榈酸(PMA)诱导THP-1巨噬细胞炎症因子表达的影响及其机制。方法用1,25(OH)_2D_3(10 nmol/L)和/或PMA(250μmol/L)处理THP-1巨噬细胞6 h,采用荧光定量PCR和酶联免疫吸附法(ELISA)法检测肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-10的表达水平;用1,25(OH)_2D_3和/或PMA处理THP-1巨噬细胞60 min,采用免疫印迹(Western-blot)法检测AMPKα1和磷酸化AMPKα1(p-AMPKα1)水平。结果 1,25(OH)_2D_3(10μmol/L))明显抑制PMA(250μmol/L)作用下THP-1巨噬细胞TNFα、IL-1β和IL-6的表达,并上调IL-10的表达;1,25(OH)_2D_3显著上调THP-1巨噬细胞AMPKα1的磷酸化水平。结论 1,25(OH)_2D_3抑制PMA诱导的THP-1巨噬细胞炎症因子表达,该效应可能与其激活AMPKα1有关。

应用抑制性消减杂交分析全反式维甲酸和1,25-二羟维生素D_3诱导结肠癌细胞的相关基因

为探讨结肠癌细胞诱导分化的机制 ,采用抑制性消减杂交 (suppression subtractivehybridization,SSH)研究联合使用全反式维甲酸和 1 ,2 5-二羟维生素 D3诱导分化结肠癌 Lo Vo细胞前、后差异表达的基因 .经比较消减 c DNA文库的序列与基因库的序列 ,发现 :有 1个基因的序列与正常鳞状上皮细胞中的 1个表达序列标签 (expressed sequence tag,EST)高度同源 ,同时发现6个新 EST (基因库登录号为 AW2 66492、AW2 66493、AW2 66494、AW58751 8、AW58751 9和AW58752 0 ) .说明诱导分化涉及到多个基因的表达 ,结肠癌的发生是多基因综合作用的结果 .进一步研究这些基因和 EST的功能对于结肠癌的防治将有重要意义 .

血清1,25(OH)_2D和25(OH)D的测定及正常值的建立

目的 建立 1,2 5 (OH) 2 D和 2 5 (OH)D的长沙居民正常值。 方法 选择长沙居民 13 7例 ,年龄 3 0～ 75岁 ,使用RIA方法测定血清上述指标正常值。 结果 两项指标皆随年龄下降 ,对于 2 5 (OH )D ,<40岁 ,40～ 60岁以及>60岁 ,三年龄组分别为 (2 5 .5± 3 .6) ,(2 1.3± 3 .3 )以及 (18.9± 3 .3 )ng/ml ,1,2 5 (OH) 2 D三年龄组分别为 (3 2 .2± 3 .1) ,(2 7.4± 3 .4)以及 (2 5 .7± 3 .7) pg/ml组间有显著差异。 结论 1,2 5 (OH) 2 D和 2 5 (OH)D血清正常值随增龄而下降 ,必须按年龄段分别确定正常值 .

维生素D及其活性形式1,25-二羟维生素D_3与糖尿病的关系

糖尿病的发病机制正在研究中,近些年的研究发现,维生素D及其活性形式1,25-二羟维生素D3除传统的调节钙、磷代谢的作用外,还通过刺激胰岛素分泌和减少细胞因子介导的β细胞凋亡途径,在糖尿病的发生、发展中起着关键作用。

1,25-二羟基维生素D_3对环磷酰胺处理的NOD小鼠糖尿病的影响

目的 探讨 1,2 5 -二羟基维生素 D3 对环磷酰胺促发的 NOD鼠 1型糖尿病的预防作用。方法 N OD鼠从离乳后隔日接受 1,2 5 -二羟基维生素 D3 治疗 ,第 10周龄给予环磷酰胺 30 0 m g/ kg,观察 1,2 5 -二羟基维生素 D3 对环磷酰胺处理的 NOD鼠糖尿病发病率和胰岛炎的影响 ,及对 Th1、Th2细胞因子 m RNA表达的影响。结果 1,2 5 -二羟基维生素 D3 处理组糖尿病发病率为 17% ,明显低于对照组 6 7% (P<0 .0 5 ) ,且胰岛炎严重程度也明显减轻。处理组胰腺 TNT- α、IFN- γ m RNA的表达较对照组明显降低 ,而 IL- 10 m RNA的表达无明显改变。结论 1,2 5 -二羟基维生素 D3 可以预防 NOD鼠环磷酰胺诱发的糖尿病的发生 ,其机制可能与纠正 Th1型细胞因子与

血清1,25-双羟维生素D3水平与绝经期哮喘急性发作的相关性研究

目的探讨血清1,25-双羟维生素D3(1,25-(OH)2-VitD3)水平与绝经期哮喘急性发作的相关性。方法收集2017年1月至2018年5月于我院住院符合纳入标准的绝经期哮喘急性发作患者40例作为实验组,同期收集符合纳入标准的我院健康体检者40例作为对照组。均采集空腹血标本,实验组于入院后次日晨采集,离心并收集血清,置于-70℃冰箱保存,后用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清1,25-(OH)2-VitD3水平。入院当天对实验组各研究对象进行ACT量表评分并当场收回,同时收集其入院时肺功能并记录FEV 1、FEV 1%预、FEV 1%FVC值。结果实验组血清1,25-(OH)2-VitD3水平明显低于对照组(P<0.05)。绝经期哮喘急性发作患者血清1,25-(OH)2-VitD3水平与其ACT量表评分、肺功能(FEV 1、FEV 1%预、FEV 1%FVC)呈正相关(P<0.05)。结论绝经期哮喘急性发作患者血清1,25-(OH)2-VitD3水平明显降低。血清1,25-(OH)2-VitD3水平越低,绝经期哮喘急性发作程度越重,肺功能越差。

血清1,25-(OH)_(2)D_(3)水平与盆腔子宫内膜异位症的相关性研究

目的探讨106例盆腔子宫内膜异位症(EMs)患者血清1,25-二羟基维生素D_3[1,25-(OH)_(2)D_(3)]水平及其与EMs的相关性。方法选取2018年1月至2019年7月温州市人民医院妇产科收治的106例盆腔EMs患者纳入观察组,另选取同期具有EMs临床表现但经病理检查确诊为卵巢其他良性肿瘤的57例患者纳入对照组。观察两组血清Ca^(2+)、维生素D和1,25-(OH)_(2)D_(3)水平等指标,观察组收集患者临床症状,并根据美国生殖医学会(ASRM)分期标准进行分期。分析血清1,25-(OH)_(2)D_(3)水平与ASRM评分的相关性。结果观察组ASRM分期Ⅰ期14.15%(15例),Ⅱ期13.21%(14例),Ⅲ期42.45%(45例),Ⅳ期30.19%(32例);两组血清Ca^(2+)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组血清维生素D和1,25-(OH)_(2)D_(3)水平均低于对照组(P<0.05);ASRM不同分期患者血清Ca^(2+)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);ASRMⅢ期患者血清维生素D和1,25-(OH)_(2)D_(3)水平均低于Ⅰ期和Ⅱ期患者,Ⅳ期患者血清维生素D和1,25-(OH)_(2)D_(3)水平均低于Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期患者(P<0.05);Pearson相关性分析显示,血清1,25-(OH)_(2)D_(3)水平与ASRM评分呈负相关(r=-0.800,P<0.001)。结论盆腔EMs患者血清1,25-(OH)_(2)D_(3)水平降低,与病情严重程度呈正相关。1,25-(OH)_(2)D_(3)对盆腔EMs的发生发展具有一定评估价值。

1,25双羟维生素D_3对成骨样细胞骨架和基因表达的影响

用荧光免疫法研究了１，２５双羟基维生素Ｄ３对大鼠成骨样细胞（ＲＯＳ１７／２．８）细胞骨架的影响和用斑点杂交技术研究了１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对人成骨样细胞（ＯＳ－７３２）基因表达的影响。结果表明：在１０－７ｍｏｌ／Ｌ１，２５（ＯＨ）２Ｄ３连续作用４ｄ后，大鼠ＲＯＳ１７／２．８细胞的微管蛋白和波形纤维蛋白明显改善，纤粘蛋白荧光明显增强。而在１，２５（ＯＨ）２Ｄ３作用前后ＯＳ－７３２细胞ｃ－ｍｙｃ和ｍｅｔＤ基因均处于高度活跃表达状态。本文还讨论了细胞分化与细胞骨架及基因表达的关系。

1,25二羟维生素D3在老年类风湿关节炎治疗中的作用

目的探讨1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]在老年类风湿关节炎治疗中的作用。方法将72例初诊类风湿关节炎的老年患者随机分为观察组和对照组,观察组给予甲氨蝶呤、雷公藤多甙及1,25(OH)2D3治疗,对照组给予甲氨蝶呤及雷公藤多甙治疗。应用酶联免疫吸附双抗体夹心法测定两组在治疗前、治疗后12周、24周血清25羟基维生素D[25(OH)D]的水平,记录关节表现、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、疾病活动度评分(DAS28)等临床指标变化,并评价25(OH)D与疾病活动指标的相关性。结果两组血清25(OH)D水平在治疗后24周均较治疗前升高(P<0.05),且观察组高于同期对照组(P<0.05);观察组在治疗后12周关节压痛数、晨僵时间与对照组比较有改善(P<0.05),治疗后24周关节压痛数、ESR、CRP及DAS28评分改善与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);观察组血清25(OH)D水平变化与ESR、CRP、DAS28评分呈负相关(P<0.05)。结论观察组较对照组炎症指标下降明显,临床症状改善也较显著,1,25(OH)2D3在老年类风湿关节炎治疗中具有一定价值。

外周血1,25-二羟基维生素D_(3)水平与胃癌患者临床特征的关系

目的 探讨外周血1, 25-二羟基维生素D_(3)[1, 25(OH)_(2)D_(3)]水平与胃癌患者临床特征的关系。方法 选取98例胃癌患者作为观察组,100例健康体检者作为对照组,检测两组受试者血清1, 25(OH)_(2)D_(3)、Ca^(2+)水平,分析不同基线特征胃癌患者血清1, 25(OH)_(2)D_(3)水平的差异,相关性分析采用Pearson相关分析。结果 淋巴结转移、分化程度为低分化、TNM分期为Ⅲ期、远处转移和肿瘤直径≥4 cm的胃癌患者血清1, 25(OH)_(2)D_(3)水平分别低于无淋巴结转移、分化程度为中高分化、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、无远处转移和肿瘤直径﹤4 cm的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。胃癌患者血清1, 25(OH)_(2)D_(3)水平与TNM分期、分化程度均呈负相关(P﹤0.01)。结论 胃癌患者外周血1, 25(OH)_(2)D_(3)水平较低,其水平与分化程度、TNM分期均呈负相关。

1,25-二羟维生素D(1,25-(OH)2D)和CYP27A1 mRNA表达与肺结核的相关性研究

目的 探讨肺结核(PTB)患者中1,25-二羟维生素D(1,25-(OH)_(2)D)水平和CYP27A1 mRNA表达水平的变化,并分析其与炎症指标、免疫细胞亚群及细菌负荷的相关性。方法 本研究纳入90名确诊的PTB患者和45名健康对照者,进行了全面的临床评估和样本收集。采用高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定1,25-(OH)_(2)D水平,定量实时反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)技术测定CYP27A1 mRNA表达水平。酶联免疫吸附试验(ELISA)用于测定血清中的炎症指标,包括C-反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)和白细胞介素-6(IL-6)。流式细胞仪用于分析免疫细胞亚群,包括CD4+T细胞、CD8+T细胞、自然杀伤(NK)细胞和调节性T细胞(Treg)。细菌负荷通过痰液中的结核分枝杆菌(Mtb)计数来评估。结果 研究发现,与健康对照组相比,PTB患者组的1,25-(OH)_(2)D水平显著降低(P<0.01),而CYP27A1 mRNA表达水平则显著升高(P<0.01)。1,25-(OH)_(2)D水平与CRP、ESR和IL-6水平呈负相关(分别为r=-0.701,P<0.01;r=-0.465,P<0.01;r=-0.715,P<0.01),与CD4+T、CD8+T、NK、Treg细胞计数呈正相关(分别为r=0.356,P<0.01;r=0.213,P<0.05;r=0.313,P<0.05;r=0.430,P<0.01)。CYP27A1 mRNA水平与炎症指标呈正相关(分别为r=0.774,P<0.01;r=0.619,P<0.01;r=0.799,P<0.01),与CD8+T细胞计数呈负相关(r=-0.230,P<0.05)。此外,1,25-(OH)_(2)D水平与细菌负荷呈负相关(r=-0.327,P<0.01),而CYP27A1 mRNA水平与细菌负荷呈正相关(r=0.430,P<0.01)。结论 1,25-(OH)_(2)D和CYP27A1 mRNA在PTB患者中的表现与健康对照组存在显著差异,并与炎症、免疫和细菌负荷具有密切的相关性。这些生物标志物可能在肺结核的发病机制和治疗反应评估中发挥作用,为未来的研究和临床应用提供了新的视角。

维生素D滴剂联合门冬胰岛素治疗妊娠期糖尿病的疗效及对血清1,25(OH)_(2)D_(3)、RBP_(4)水平的影响

目的探讨维生素D滴剂联合门冬胰岛素治疗妊娠期糖尿病(GDM)的临床疗效以及对患者血清1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)_(2)D_(3)]、视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平的影响。方法选取保定市第二中心医院2019年3月至2021年3月收治的94例GDM患者,使用随机数字表法将其分成观察组与对照组各47例。其中对照组皮下注射门冬胰岛素治疗,在此基础上,观察组口服维生素D滴剂治疗。连续治疗4周后观察两组血糖控制效果和不良反应情况。比较治疗前后两组糖代谢指标[空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)]及血清1,25(OH)_(2)D_(3)、RBP4、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平。所有患者均随访至妊娠结束,统计两组母婴不良结局情况。结果观察组FPG和2 h PG的达标时间及两者全部达标的时间均显著短于对照组(均P<0.05)。观察组黎明现象、低血糖发生率与对照组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。两组治疗后FPG、2 h PG较治疗前均显著降低(均P<0.05);但治疗后,组间比较差异无统计学意义(均P>0.05)。与治疗前对比,两组治疗后HOMA-IR均显著下降(均P<0.05),HOMA-β则均显著升高(均P<0.05);且均以观察组改善更显著(均P<0.05)。观察组治疗后血清1,25(OH)_(2)D_(3)水平较治疗前显著上升(P<0.05),但对照组治疗前后无明显改变(P>0.05)。两组治疗后血清RBP4、Lp-PLA2和VCAM-1水平较治疗前均显著下降(均P<0.05);且治疗后,观察组血清RBP4、Lp-PLA2和VCAM-1水平低于对照组(均P<0.05)。观察组产妇不良结局及新生儿不良结局发生率分别为14.9%(7/47)、10.6%(5/47),均低于对照组[34.0%(16/47)、27.7%(13/47)](均P<0.05)。94例患者中出现8例低血糖(观察组3例,对照组5例),无其他不良事件发生。结论维生素D滴剂联合门冬胰岛素治疗GDM能安全、有效、快速且平稳地控制患者血糖,改善IR及胰岛β细胞功能,降低母婴不良结局发生率,其作用可能与升高血清1,25(OH)_(2)D_(3)水平及下调血清RBP4、Lp-PLA2和VCAM-1的表达水平有关。

1,25-二羟维生素D_3对于哮喘大鼠及其肺泡巨噬细胞中VDUP1/TRX的影响

目的探讨1,25-二羟维生素D3(1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25(OH)2D3)对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fuluid,BALF)中维生素D上调蛋白1(vitamin D up-regulated protein 1,VDUP1)和硫氧还蛋白(thioredoxin,TRX)表达及气道炎症的影响。方法将28只Wistar大鼠随机分为4组,以卵白蛋白(ovalbumin,OVA)诱导哮喘发作,并给予1,25(OH)2D3和地塞米松干预,同时设对照组。测定BALF中IL-4和IL-10水平,细胞总数和肺组织病理变化。同时提取7只哮喘模型大鼠BALF中的巨噬细胞,体外给予1,25(OH)2D3干预。用逆转录-聚合酶链反应检测肺组织及BALF中巨噬细胞表达VDUP1和TRX的水平。结果 1,25(OH)2D3治疗组BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞计数和IL-4水平降低,IL-10水平增高。肺组织及肺泡巨噬细胞中VDUP1和TRX表达增加。结论给予哮喘大鼠1,25(OH)2D3可抑制气道炎症,增加TRX和VDUP1的表达,两者可作为哮喘氧化应激的监测指标。

1，25-二羟维生素D3对于哮喘大鼠及其肺泡巨噬细胞中VDUP1／TRX的影响

目的探讨1，25二羟维生素D3（1，25-dihydroxyvitaminD3，1，25（0H）2D3）对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolarlavagefuluid，BALF）中维生素D上调蛋白1（vitamin Dupregulatedproteinl，VDUPl）和硫氧还蛋白（thioredoxin，TRX）表达及气道炎症的影响。方法将28只Wistar大鼠随机分为4组，以卵白蛋白（ovalbumin，OVA）诱导哮喘发作，并给予1，25（OH）：D3和地塞米松干预，同时设对照组。测定BALF中IL-4和IL-10水平，细胞总数和肺组织病理变化。同时提取7只哮喘模型大鼠BALF中的巨噬细胞，体外给予1，25（OH）2D3干预。用逆转录一聚合酶链反应检测肺组织及BALF中巨噬细胞表达VDUP1和TRX的水平。结果1，25（OH）2D3治疗组BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞计数和IL-4水平降低，IL—10水平增高。肺组织及肺泡巨噬细胞中VDUP1和TRX表达增加。结论给予哮喘大鼠1，25（OH）2D3可抑制气道炎症，增加TRX和VDUP1的表达，两者可作为哮喘氧化应激的监测指标。

过敏性紫癜患儿血浆1，25（OH）2D3、维生素D受体和24-羟化酶表达的意义

目的研究1，25（OH）2D3、VitD受体（VDR）和24-羟化酶（CYP24A1）在过敏性紫癜（HSP）患儿外周血中的表达，探讨1，25（0H）2D3及其相关分子在HSP发病机制中的作用。方法1．空腹采集35例HSP患儿和14例健康儿童外周血，离心分离血浆，采用ELISA法检测血浆中1，25（OH）2D3水平。2．分离2组儿童外周血单个核细胞，抽提总RNA并反转录成cDNA，采用实时荧光定量聚合酶链反应（Real—timePCR）方法检测VDR和CYP24AI的表达。结果1．HSP患儿血浆1，25（OH）2D3水平为（13．29±10．12）μg/L，低于健康对照组[（29．51±23．06）μg／L]（P〈0．01）。2．HSP患儿外周血VDRmRNA表达增高，但CYP24A1mRNA表达低于健康对照组（P〈0．05）。结论HSP患儿活性VitD合成及对VDR的应答异常，可能参与HSP的发病。

1,25二羟维生素D_3对小鼠成骨细胞增殖分化及维生素D受体表达的影响

目的研究不同浓度1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对小鼠成骨细胞增殖分化及维生素D受体(VDR)表达的影响,探讨VDR在成骨细胞增殖分化中的作用。方法在成骨细胞株MC3T3E1培养液中加入不同浓度的1,25(OH)2D3(10-8、10-9、10-10mol/L),培养48h后应用噻唑蓝(MTT)比色法检测其对成骨细胞增殖的影响,采用细胞培养上清中骨钙素(OC)水平分析方法检测1,25(OH)2D3对成骨细胞分化的影响;采用SYBR Green荧光定量PCR方法检测细胞VDR基因mRNA表达,Western blot法检测细胞VDR蛋白水平表达。结果1.小鼠成骨细胞在1,25(OH)2D3处理48h后,各实验组(10-8、10-9、10-10mol/L组)吸光度均低于对照组,差异均有统计学意义(Pa<0.05);2.1,25(OH)2D3处理后,10-8、10-9mol/L组细胞上清中OC水平均高于对照组(Pa<0.05),而10-10mol/L组OC水平及VDR基因mRNA表达量与对照组比较差异均无统计学意义(Pa>0.05);3.荧光定量PCR及Westernblot结果显示10-8、10-9mol/L处理组细胞VDR基因mRNA及蛋白表达均显著高于对照组(Pa<0.05),10-10mol/L组与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论1,25(OH)2D3可显著抑制成骨细胞增殖、促进成骨细胞分化,且可促进成骨细胞VDR表达,提示VDR信号通路在成骨细胞的增殖分化中可能起一定作用。

1，25-二羟维生素D3对初诊类风湿关节炎患者核因子κB受体活化因子配体／骨保护素通路及相关细胞因子的影响

【摘要】目的探讨1，25-二羟维生素D3[1，25（OH），D，]对初诊RA患者NF—KB受体活化因子配体／骨保护素（RANKL／OPG）通路及相关绑胞因子的作埔及其渝疗RA潜在的机制？方法选取初诊RA患者l8例，符合1987年ACR分类标准。健康对照18辊，来自我院医务人员的健康志愿者，其性圳和年龄均j-jRA患者相匹配、允离RA患者PBMCs，加抗CD3和CI）28刺激，l，25（OH），D，和（或）甲氨蝶呤共培养，流式细胞仪微球捕获芯片技术（CBA）检测IL-4、IL-6、TNF-α、IL-17A、[FN-γ，ELISA检测细胞RANKL骨保护素水平。采用正态性柃验和方差齐性检验，满足正态性和方差齐性条件，采用完全随机两样书，检验和单因素方差分析进行统计学处理。结果RA组lJ0【清RANKL[（100＋22）pmool／L、TNF—di（5．91±2．53）1）pg/ml] IL-17[（43±6）vg／mt]、IL-61（16．6±12．0）pg／m1]水平显著高于对照组，2组比较差异打统计学意义（P〈O．05）；RA组RANKL、TNF-d、IL-17、IL-6水平经不同浓度1，25（01f），D，处理的效果差异存统计学意义（P〈O．05），各组组问经多重比较差异无统计学意义；1，25（OH），I）、降低RA组IL-17／IL-4、TNF-α、IL-17A、[FN-γ 的比值.结论1，25（OH）2D3作为一种免疫渊节剂，对于RA软骨/骨损伤可能具有治疗作用．

Effect of 1,25(OH)_2D_3 on the growth and apoptosis of breast cancer cell line MCF-7

Objective To study the effect of 1,25 dihydroxyvitamin D 3 (1,25(OH) 2D 3) on the growth and apoptosis of breast cancer cell line MCF 7 Methods Cell number was determined using the MTT method Flow cytometric analysis was performed on cell cycles, and the percentage of apoptosis was counted Apoptotic cells were quantified by terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling (TUNEL), and bcl 2 protein expression was estimated with Western blotting Results After incubation with 1,25(OH) 2D 3 10 7 mol/L for 48 hours, MCF 7 cells exhibited significant growth in a dose and time dependent manner Flow cytometric analysis indicated that cell numbers in G 0/G 1 increased along with increasing apoptotic peak and percentage With microscope and electron microscope observation, characteristics of apoptosis such as typical apoptotic bodies were commonly found TUNEL also showed that 1,25(OH) 2D 3 10 8 mol/L and 10 7 mol/L groups had significantly high apoptosis percentage than control group with dose dependence on induction apoptosis And Western blot showed that 1,25(OH) 2D 3 10 8 mol/L could down regulate bcl 2 protein and 10 7 mol/L could almost block bcl 2 protein expression Conclusions 1,25(OH) 2D 3 can inhibit cell growth with G 0/G 1 arrest, enhance the proliferation inhibition action of adriamycin, and induce apoptosis which may result from the down regulation of the anti apoptotic bcl 2 protein