改良1,9-二甲基亚甲基蓝法定量检测岩藻多糖

岩藻多糖是一类硫酸化多糖,主要提取自海参、褐藻等,其具有抗凝血、抗肿瘤、抗血栓等多种生物活性,在医药和食品行业具有广阔的应用前景。目前,1,9-二甲基亚甲基蓝(1,9-dirnethyl-methylene blue,DMMB)比色法是岩藻多糖定量检测的常用方法之一,但存在灵敏度差、操作繁琐、耗时长等问题。优化了DMMB法的显色液浓度、pH、显色反应时间等条件,改良后检测方法的线性范围、精密度、回收率和定量限均有显著改善。改进后DMMB法检测岩藻多糖的最佳反应条件为:DMMB溶液浓度为42.8 mg·mL^(-1)、pH 3.3,避光反应在10~15 min之间进行检测。方法学考察结果表明,改良后的DMMB比色方法提高了岩藻多糖定量检测方法的灵敏度,将检测浓度范围拓宽至0.0125~0.3000 mg·mL^(-1),这为岩藻多糖定量分析提供了快捷有效的手段,有利于岩藻多糖的开发与利用。

分光光度法测定海洋河弧菌510脂多糖

本文研究了直接测定海洋河弧菌 (vibrio fluvailis) 5 10脂多糖的分光光度法。利用 1,9-二甲基亚甲蓝 (DMB) ,在适当条件下同脂多糖发生染色反应 ,在 5 5 0 nm波长下 ,反应体系的吸光值同脂多糖含量呈线性相关。相关系数为 0 .9993,最低检出限为 10 μg/m L,相对标准偏差为 1.6 2 ,平均回收率为 (10 5± 2 .18) %。

蜗牛糖胺聚糖的含量测定及方法学验证

目的:采用1,9-二甲基亚甲蓝光度法测定4种蜗牛制品中糖胺聚糖的含量,并对检测方法进行方法学验证。方法:采用1,9-二甲基亚甲蓝光度法测定蜗牛糖胺聚糖含量,对该方法的专属性、线性、重复性、精密度、准确度、稳定性及耐用性进行考察,并采用该方法测定4种蜗牛制品中糖胺聚糖的含量。结果:该方法测定蜗牛中糖胺聚糖含量具有良好的专属性,最大吸收波长为520 nm;在520 nm波长下测定白玉蜗牛干制品、光亮大蜗牛干制品、白玉蜗牛黏液冻干品、光亮大蜗牛黏液冻干品中糖胺聚糖的含量分别为4.10%、1.90%、15.85%、9.31%。结论:该方法经考察后其专属性、线性、重复性、精密度、加样回收率、稳定性及耐用性均符合相关规定,且操作简便。

一种新型的大鼠血浆中硫酸软骨素含量测定方法

目的建立血液中硫酸软骨素含量测定的新方法。方法采用链霉蛋白酶E和水饱和酚处理血浆,然后采用改良的1,9-二甲基亚甲基蓝法测定血浆中硫酸软骨素的含量。结果在0~10μg/ml的范围内具有良好的线性关系,回归方程为y=0.014x+0.245,R^2=0.998。该方法的日内精密度和日间精密度的RSD均小于4%,回收率在102.0%~105.0%之间,CS提取回收率在80%以上(n=5)。结论所建方法成本低、快速、简便、灵敏,适用于血液中硫酸软骨素的含量测定。

古糖酯的分光光度法测定

应用二甲美兰分光光度法测定溶液中古糖酯（ＰｒｏｐｙｌｅｎｅｇｌｕｃｏｌＧｕｌｕｒｏｎａｔｅＳｏｄｉｕｍＳｕｌ－ｆａｔｅＰＧＳＳ）的含量。有色化合物最大吸收波长为５２０ｎｍ，方法检测限为２．５～５０μｇ／ｍＬ，回收率为９８．４２±１．３７％，ＣＶ＜２％，该方法准确，快速，重现性好。

尿粘多糖定量测定及其临床应用

【目的】建立一种快速、简便、可靠的尿粘多糖定量检测方法,用于临床筛查粘多糖病(mucopolysacchari-dosis,MPS)患者。【方法】采用1,9-二甲基亚甲蓝(1,9-dimethylmethylene blue,DMB)在碱性条件下与尿中粘多糖(glycosaminoglycan,GAG)反应生成粉红色产物及分光光度计比色原理,检测267例正常人、12例MPS患儿及30例非MPS患儿的尿GAG含量,并同时检测尿肌酐(creatinine,Cr),计算GAG/Cr比值。【结果】正常人尿GAG水平常低于70 mg/L,且与年龄无显著相关。而GAG/Cr比值随年龄的递增呈递减趋势。除1例IVA型MPS患者外,其余11例MPS患儿尿GAG浓度及GAG/Cr比值均显著高于同龄正常儿童参考值,而非MPS患儿的尿GAG及GAG/Cr比值均在正常范围内。GAG测定的批内变异系数为1.3%,批间变异系数为3.6%,硫酸类肝素的回收率为(102±6.0)%。【结论】DMB-Tris比色法测定尿GAG是一种快速、简便、标本用量少、特异性和敏感性均较高的定量检测方法,可作为MPS的筛查方法在临床上推广应用。