卤代烷烃脱卤素酶标签α1A-肾上腺素受体色谱方法的建立与评价

受体色谱技术是将色谱技术的高分离能力和药物-受体间的高特异性识别能力结合起来的一种分析技术,能够对中药等复杂体系中靶向活性成分进行高效筛选与准确辨识。该技术的关键在于发展高效、温和、简便的固定化方法,使得固定化受体活性得以保持。传统的以生物交联剂为核心的随意共价固定化技术存在反应特异性较差、需要纯化蛋白质等不足。针对该问题,本研究将卤代烷烃脱卤素酶(Halo)与6-氯己酸的特异性生物正交反应引入至α_(1A)-肾上腺素受体(α_(1A)-AR)的固定化过程,将Halo标签α_(1A)-AR一步固定至6-氯己酸修饰的氨丙基硅胶表面,无需对α_(1A)-AR进行纯化。采用扫描电子显微镜和色谱法对Halo-α_(1A)-AR色谱固定相进行形貌及活性表征,证明受体已成功固定且具有特异性识别配体的能力,30天内稳定性良好。非线性色谱法研究结果显示:盐酸哌唑嗪、盐酸特拉唑嗪和乌拉地尔通过一类结合位点与Halo-α_(1A)-AR色谱固定相作用,结合常数分别为3.85×10^(5)、5.00×10^(5)和5.90×10^(5)L/mol;甲磺酸酚妥拉明和盐酸坦索罗辛在Halo-α_(1A)-AR色谱固定相上则存在两类位点,前者与受体亲和力分别为3.12×10^(6) L/mol和6.01×10^(5)L/mol,后者则为9.98×10^(5)L/mol和2.11×10^(4) L/mol。与传统物理吸附法或N,N′-羰基二咪唑法制备的α_(1A)-AR色谱柱相比,本文所用固定化方法无需纯化受体,在一定程度上避免了受体活性损失,实现了蛋白质一步固定化方法,亲和力测定值更接近于溶液中受体-药物的真值,为复杂体系靶向活性成分高效筛选与准确测定奠定了基础。

吡格列酮治疗β1肾上腺素能受体自身抗体诱导的大鼠室性心律失常的作用和电生理机制研究

目的:探讨吡格列酮对β1肾上腺素能受体自身抗体(β1AAb)诱导的大鼠室性心律失常治疗作用及电生理机制。方法:将48只SD大鼠按随机数字表法等分为四组:对照组(佐剂注射)、β1AAb组[β1肾上腺素能受体细胞外第二环功能表位肽段(β1AR-ECLⅡ)配以佐剂背部多点注射进行主动免疫,2 mg/(kg·次)]、吡格列酮组[与β1AAb组同等主动免疫8周后,吡格列酮灌胃2周,4 mg/(kg·d)]、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ特异性抑制剂GW9662组[与β1AAb组同等主动免疫8周后吡格列酮灌胃+GW9662腹腔注射2周,其中吡格列酮予以4 mg/(kg·d),GW9662予以1 mg/(kg·d)]。每2周Powerlab多通道生理仪记录心电图,取血。基线和第10周记录超声心动图,10周后进行心电生理、组织病理、免疫组化染色及电镜检查。结果:相较于对照组,β1AAb组室性心律失常诱发率较高、心室有效不应期(VERP)缩短、激动-恢复间期(ARI)延长;左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)低;葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和肉碱棕榈酰转移酶1a(CPT1a)阳性染色面积占比较低;线粒体形态异常及网络损伤明显,P均<0.05。而吡格列酮组较β1AAb组,室性心律失常诱发率降低、VERP延长、ARI缩短;LVEF和LVFS恢复;GLUT1和CPT1a阳性染色面积占比增加;线粒体形态异常及网络损伤改善,P均<0.05。GW9662组较吡格列酮组室性心律失常诱发率较高、VERP缩短、ARI延长;LVEF和LVFS较低;GLUT1和CPT1a阳性染色面积占比低;线粒体形态异常及网络损伤未恢复,P均<0.05。结论:吡格列酮可降低β1AAb诱导的室性心律失常,改善心室电传导和激动恢复时间异质性;并可在组织病理水平缓解β1AAb所致心室重塑,并伴随心室肌糖脂转运通道蛋白的上调和受损线粒体网络的修复。

β_(1)肾上腺素受体自身抗体激活对心室空间电生理特性的影响及其干预研究

目的室性心律失常的发生与β_(1)肾上腺素受体自身抗体(β_(1)AAbs)有关。本研究旨在探讨β_(1)AAbs对大鼠心室空间电生理特性的作用及干预效果。方法将30只6~8周龄雄性SD大鼠(体重180~220 g)随机分为3组(每组n=10):对照组、β_(1)AAbs组和比索洛尔组。在0、2、4、6周经背部多点注射β_(1)肾上腺素受体第二细胞外环抗原肽建立主动免疫室性心律失常易感模型。测定不同时间节点的血清β_(1)AAbs水平验证模型。在心室不同区域测量电生理参数心室有效不应期、有效不应期离散度、传导速度和传导异质性。马松染色检测心室组织不同区域的纤维化水平。结果与对照组相比,β_(1)AAbs组与比索洛尔组自第2~8周β_(1)AAbs水平显著增高(P<0.05)。与对照组和比索洛尔组相比,β_(1)AAbs组的心率显著增加,RR间期、QT间期和QTc间期明显缩短(P<0.05);不同区域心室有效不应期均明显缩短,有效不应期离散度显著增加(P<0.05),不同区域传导速度减慢、传导异质性增加(P<0.05),不同部位胶原容积百分比明显升高(P<0.05),以上参数改变在中间部最为明显,均可被比索洛尔逆转(P<0.05)。结论β_(1)AAbs可增加心室空间电生理特性改变,其潜在机制可能与不同区域纤维化程度有关,比索洛尔具有潜在治疗价值。

基于β1-AR/TGF-β1/Smad2通路探讨稳心颗粒对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨稳心颗粒通过β1-AR/TGF-β1/Smad2通路对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导大鼠心肌纤维化的影响。方法雄性SD大鼠60只,随机分为对照组、ISO组与稳心颗粒低、中、高剂量组以及胺碘酮组,每组10只,连续给药14天。第15天起,ISO组、各药物组大鼠以ISO 5 mg/(kg•d)皮下多点注射构建大鼠心肌纤维化模型。检测大鼠心脏质量指数的变化;采用苏木素—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察心肌形态学变化,Masson染色观察心肌胶原分布和含量变化;检测心肌组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测大鼠心肌组织交感神经系统-β1肾上腺素能受体(β1 adrenoceptor,β1-AR)、转化生长因子β1(transforming growth factor-β,TGF-β1)、p-Smad2蛋白表达变化。结果ISO组大鼠心脏质量指数明显升,细胞结构紊乱,胶原沉积和心肌纤维化明显,心肌HYP含量显著增多,GSH含量减少,β1-AR、TGF-β1与p-Smad2表达水平显著升高(P<0.01);与ISO组相比,各治疗组心脏质量指数降低,细胞结构损伤与胶原沉积减轻,心肌纤维化改善,HYP含量降低,GSH含量增多,β1-AR、TGF-β1与p-Smad2表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。稳心颗粒高剂量组效果较稳心颗粒低剂量组更为明显(P<0.05),与胺碘酮组相比无明显差异(P>0.05)。结论稳心颗粒能够改善ISO引起的心肌纤维化,减轻心肌细胞损伤与胶原纤维堆积,其机制可能与β1-AR/TGF-β1/Smad2通路有关。

β_(1)-肾上腺素能受体基因多态性对STEMI患者室性心律失常和短期预后的影响

目的:分析β_(1)-肾上腺素能受体基因多态性对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者室性心律失常以及6个月预后的影响。方法:采用回顾性队列研究方式,按照纳入与排除标准选择云浮市人民医院2021年1月至2023年2月间收治的STEMI患者为研究对象,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析患者β_(1)-肾上腺素能受体Arg389Gly基因型多态性,并根据β_(1)-肾上腺素能受体Arg389Gly基因型多态性类别分为CC组(Arg389Arg,87例)、CG组(Arg389Gly,73例)和GG组(Gly389Gly,18例)三组。对比三组患者收集的入院临床资料[包括Killip分级、心率、收缩压、舒张压、左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末径(LVDD),以及血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、N末端B型利钠肽前体(NT-proBNP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)等]和出院后通过门诊或电话对其进行6个月随访的结果(包括心率、NT-proBNP、CK-MB、LVEF、LVDD及主要心脏不良事件)的差异。结果:研究共纳入178例STEMI合并室性心律失常的患者,其中CC组有87例(48.9%),CG组有73例(41.0%),GG组有18例(10.1%);三组患者的年龄、性别、体重、BMI、吸烟史、饮酒史、合并疾病、收缩压、舒张压、心率、Killip分级(Ⅲ和Ⅳ级)以及血清TNF-α、NT-proBNP、CK-MB、hs-CRP及LVEF和LVDD均没有显著差异(P>0.05);随访6个月GG组和CG组心功能各项指标结果均显著优于CC组(P<0.05),而GG组的NT-proBNP和CK-MB结果显著低于CG组(P<0.05);统计三组患者随访期间主要心脏不良事件的发生情况,显示CC组的总发生数为17例(19.5%),CG组的总发生数为5例(6.9%),GG组的总发生数为1例(5.6%),组间差异显著(χ^(2)=6.887,P<0.05)。结论:β_(1)-肾上腺素能受体Arg389Gly基因多态性与STEMI合并室性心律失常患者的病情严重程度无关,但与治疗后心功能改善情况以及短期预后有关。

α_(1A)-肾上腺素能受体与增强型绿色荧光蛋白标记的活化T细胞核因子2稳定共表达细胞的构建

目的建立α_(1A)-肾上腺素能受体(α_(1A)-AR)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的活化T细胞核因子2(NFAT2)稳定共表达细胞。方法①将pcDNA3.1-α_(1A)-AR-3×FLAG重组质粒转染至U2OS-EGFPNFAT2细胞,经潮霉素B(Hygro-B)200 mg·L^(-1)压力筛选后加入α_(1A)-AR激动剂去甲肾上腺素(NE,10μmol·L^(-1))孵育30 min,通过高内涵筛选系统检测细胞核内绿色荧光强度,验证EGFP-NFAT2核转位,筛选得到稳定表达α_(1A)-AR的U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞。②采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western印迹法检测该细胞和对照细胞U2OS-EGFP-NFAT2中α_(1A)-AR mRNA和蛋白的表达水平。③将U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞接种于96孔板,分别加入NE(10^(-8)~10^(-5) mol·L^(-1))或α2-AR激动剂右美托咪定(DMED,10^^(-8.8)~10^(-5) mol·L^(-1))孵育30 min,通过高内涵筛选系统检测EGFP-NFAT2核转位。④将U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞分为溶剂对照组、α1-AR拮抗剂萘派地尔(1μmol·L^(-1))组、NE(1μmol·L^(-1))组、萘派地尔+NE(各1μmol·L^(-1)共孵育)组、α2-AR拮抗剂阿替美唑(0.1μmol·L^(-1))组、DMED(0.1μmol·L^(-1))组、阿替美唑+DMED(各0.1μmol·L^(-1)共孵育)组和萘派地尔+DMED(萘派地尔1μmol·L^(-1)与DMED 0.1μmol·L^(-1)共孵育)组,药物孵育时间均为30 min,通过高内涵筛选系统检测EGFP-NFAT2核转位,验证该细胞α_(1A)-AR功能的特异性。结果①Hygro-B压力筛选得到58株U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞,NE 10μmol·L^(-1)孵育后,其中50号细胞核内绿色荧光强度最强,故选定其为稳定共表达α_(1A)-AR和EGFPNFAT2的U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞。②Western印迹法结果显示,U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞可明显表达α_(1A)-AR蛋白,而对照细胞U2OS-EGFP-NFAT2中未见α_(1A)-AR蛋白表达。RT-qPCR结果显示,该细胞在传代5~20代内α_(1A)-AR mRNA均稳定表达,其表达水平为对照细胞的500~800倍。③NE或DMED使U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞中EGFP-NFAT2核转位明显增加,半数有效浓度(EC50)分别为5.94×10^(-7)和6.15×10^(-8) mol·L^(-1)。④与溶剂对照组和萘派地尔组比较,NE组U2OS-EGFP-NFAT2-α_(1A)-AR细胞EGFP-NFAT2核转位明显增强(P<0.01),而萘派地尔+NE组EGFP-NFAT2核转位较NE组明显减弱(P<0.01)。与溶剂对照组和阿替美唑组比较,DMED组EGFP-NFAT2核转位明显增强(P<0.01),阿替美唑+DMED组EGFP-NFAT2核转位与DMED组比较无明显差别,而萘派地尔+DMED组EGFP-NFAT2核转位较DMED组明显减弱(P<0.01)。结论成功构建稳定共表达α_(1A)-AR和EGFP-NFAT2的U2OS-EGFPNFAT2-α_(1A)-AR细胞,可用于靶向α_(1A)-AR化合物筛选和受体分子机制研究。

β2肾上腺素受体通过TGF-β1/Smad3信号通路调控创面愈合中的纤维增生

目的探讨β2肾上腺素受体(β2 adrenergic receptor,ADRB2)在创面愈合过程中对纤维增生的调控机制。方法将12只小鼠背部皮肤随机注射非特异性敲减ADRB2基因的腺相关病毒(AAV-ADRB2组,n=6)和对照病毒(AAV-NC组,n=6)21 d后,在背部建立全层皮肤缺损创面愈合模型。记录术后第1、3、5、7天创面愈合率;采用H-E染色、Masson染色和免疫组化染色观察创面组织结构、纤维化程度及α-平滑肌肌动蛋白表达;定量PCR检测ADRB2、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)mRNA水平;Western印迹法检测胶原纤维1A1、胶原纤维3A1、TGF-β1、Smad3蛋白表达水平。结果术后第5、7天,AAV-ADRB2组创面愈合率显著下降(P<0.05),伴随表皮增厚、炎症细胞增多、纤维细胞减少、胶原沉积降低;α-SMA水平显著下降(P<0.05);COL1A1/COL3A1比例减少(P<0.05);ADRB2 mRNA水平显著降低(P<0.01),MMP-1和MMP-8 mRNA水平升高(P<0.01);TGF-β1/Smad3蛋白水平显著下降(P<0.05)。结论ADRB2敲减通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路,减少创面纤维化反应和结缔组织含量,提高MMP mRNA水平,降低Ⅰ型/Ⅲ型胶原比例。

β_(1)肾上腺素能受体Arg389Gly基因多态性与心肌梗死后心室重构的关系

目的探讨β_(1)肾上腺素能受体(β_(1)-AR)Arg389Gly基因多态性与心肌梗死后心室重构的关系。方法选取2014年1月至2015年12月本院收治的120例ST段抬高心肌梗死患者作为研究对象,采用聚合酶链式反应-限制性酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测患者β_(1)-ARArg389Gly多态性位点基因型,采用超声心动图测量左心室舒张末期内径(LVDD)及左心室射血分数(LVEF)。分析β_(1)-ARArg389Gly多态性基因型频率分布,比较不同β_(1)-ARArg389Gly基因型患者一般情况及LVDD、LVEF。结果Arg389纯合子患者与Gly389等位基因携带患者年龄、性别、吸烟、高血压、糖尿病、前壁心肌梗死、梗死相关血管开通比例及总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平比较差异无统计学意义。梗死后1周,Arg389纯合子患者与Gly389等位基因携带患者LVDD、LVEF比较差异无统计学意义;梗死后6个月,Arg389纯合子患者与Gly389等位基因携带患者LVDD均长于梗死后1周,LVEF均低于梗死后1周,但Arg389纯合子患者LVDD短于Gly389等位基因携带患者,LVEF高于Gly389等位基因携带患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论β_(1)-AR Arg389Gly基因多态性与心肌梗死后左心室重构有关,临床应及早给予患者再灌注治疗、开通梗死相关血管,以改善患者预后。

局部晚期宫颈癌患者血清双肾上腺素样激酶1、黏蛋白1的表达及与放疗预后的关系

目的探讨局部晚期宫颈癌患者血清双肾上腺素样激酶1(DCLK1)、黏蛋白1(MUC1)的表达及与放疗预后的关系。方法收集102例局部晚期宫颈癌患者的临床资料,分析不同临床特征、临床疗效和预后患者血清DCLK1、MUC1表达水平,比较放疗前后患者血清DCLK1、MUC1表达水平。结果不同肿瘤直径、淋巴结转移情况、临床分期和分化程度局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。放疗后,局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平均明显低于放疗前,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同临床疗效局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01),且放疗前局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1水平均随着疾病发展逐渐升高。3年生存局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1水平均明显低于1年生存患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平与肿瘤直径、淋巴结转移情况、临床分期和分化程度有关,放疗前血清DCLK1、MUC1水平与患者临床疗效和预后密切相关,可作为判断肿瘤转归和评估放疗预后的重要指标。

不同浓度β_(1)肾上腺素能受体自身抗体对大鼠心电指标和心肌病理的早期影响

目的探讨不同浓度β_(1)肾上腺素能受体自身抗体(β_(1)-adrenergic receptor autoantibodies,β_(1)AAbs)对大鼠心电指标及心肌细胞病理的早期影响。方法24只雄性SD大鼠随机分为对照组,免疫组(低浓度组、中浓度组、高浓度组),免疫组经尾静脉注射β_(1)AAbs建立被动免疫β_(1)AAbs升高模型,通过酶联免疫吸附试验测定大鼠心肌组织中环磷酸腺苷(cAMP)含量,验证造模是否成功。各组大鼠均佩戴穿戴式心电传感器在自然状态下连续监测5 d,分析心率,昼夜节律;使用LEAD-7000心电生理仪记录大鼠基线、免疫第一天、第三天、第五天的6导心电图,免疫5 d后行大鼠心肌细胞HE染色。结果(1)各组大鼠夜间心率均高于白天,各免疫组5 d内平均心率较对照组增快(P<0.05);(2)免疫低浓度组在免疫第四天达到心率高峰;中浓度组在免疫5 d内心率持续增快;高浓度组在免疫第二天达到心率高峰,第三天开始下降(P<0.05);(3)各免疫组P波时限延长,免疫中、高浓度组P波振幅增高,免疫低浓度组QTc间期延长,免疫低、中浓度组QRS波振幅增高(P<0.05);(4)免疫低、中浓度组心肌细胞完整性降低,免疫高浓度组心肌细胞明显碎裂,细胞核空泡状。结论β_(1)AAbs增高早期可增加大鼠心率,延长P波时限;低浓度β_(1)AAbs延长QTc间期;低、中浓度β_(1)AAbs可使心肌细胞完整性降低,高浓度使心肌细胞碎裂。

β1肾上腺素能受体关联交感神经与T细胞耗竭

CD8^(+)T细胞是针对病毒感染和肿瘤的免疫反应的重要组成部分,能够消除感染细胞和癌细胞。然而,当抗原不能被清除时,T细胞进入一种被称为耗竭的状态。尽管很清楚慢性抗原会导致CD8^(+)T细胞的耗竭,但对组织中的应激反应如何调节T细胞功能知之甚少。在这里,研究人员通过β1肾上腺素能受体ADRB1展示了应激相关儿茶酚胺和T细胞耗竭进展之间的新关联。

内镜直视下多点注射1∶10000肾上腺素治疗非静脉曲张性上消化道出血(附32例报告)

目的:评价内镜直视下注射1∶10 000肾上腺素治疗非静脉曲张性上消化道出血的临床疗效。方法:对32例上消化道出血患者均行急诊内镜检查,充分暴露出血部位后在病灶周围或溃疡基底部多点注射1∶10 000 肾上腺素,所有病例注射后停镜观察5 min,镜下治疗后,均进行内科溃疡病标准治疗。结果:32 例中只有1 例治疗失败;首次止血成功30例(96.8%),另有1例在治疗2 d后因再出血转外科手术治疗,余30例内科治疗7 d无再出血,止血率为93.7%。结论:1∶10 000肾上腺素注射治疗,操作比较简单、控制出血迅速有效,并发征发生率低,且成本低廉。

α_1肾上腺素能受体激动剂围术期应用专家共识(2017版)

α1肾上腺素能受体（α1-AR）激动剂（以下简称α1激动剂）是临床常用的血管活性药物之一,但在围术期的应用缺乏规范。近年来,随着围术期容量治疗研究的深入,围术期容量管理由开放性或限制性补液策略转变为目标导向液体治疗（goal-directed fluid therapy,GDFT）策略。

β1肾上腺素受体与心衰、高血压和心肌纤维化之间的关系研究进展

β1肾上腺素受体(β1 adrenergic receptor,β1-AR)是心脏组织中肾上腺素受体的主要亚型。β1-AR基因表达变化与心衰、高血压等心血管疾病的发生、发展及治疗密切相关。β1-AR激活后,启动经典的G蛋白-腺苷酸环化酶-环磷酸腺苷-蛋白激酶A(Gs-AC-cAMP-PKA)信号转导通路。但当机体发生病理性改变时,β1-AR信号通路发生变化。持久兴奋β1-AR,从而激活CaMKII,使心肌收缩增强,心率加快,诱发心肌细胞肥大及凋亡,最终导致心肌重塑、心肌收缩及舒张功能下降。深入了解β1-AR调控在心衰、高血压等心血管疾病发病过程中的分子机制及β1-AR基因多态性和甲基化对个体化治疗的影响,将为临床治疗心血管疾病制定合理化用药方案提供依据和指导。

去甲肾上腺素引起的α_1肾上腺素受体三种亚型脱敏过程的差异

将含有α1肾上腺素受体（α1－AR）三种亚型的全长cDNA质粒分别转染到人胚胎肾脏细胞（HEK293），α1A－，α1B-和α1D－AR在HEK293细胞株上得到高水平稳定表达（Bmax达pmol／mg水平），用3H－inositol标记和柱层析法测定细胞磷酸肌醇蓄积。观察在去甲肾上腺素（NE）长期作用下α1三种受体亚型介导磷酸肌醇蓄积敏感性降低的差别。结果表明，α1三种受体亚型介导的磷酸肌醇蓄积效应的减弱与NE预温育的时间和浓度呈依赖关系。在激动剂持续作用下α1三种受体亚型发生脱敏的过程不同，其中α1－AR脱敏发生最快，脱敏所需NE的浓度最低；α1D－AR脱敏最慢，所需NE的浓度最高；α1B－AR介于上述两者之间。

(±)DDPH的拆分和(±)及(-)DDPH的α_1肾上腺素受体的拮抗活性

本文将α_1受体拮抗剂(±)DDPH用(+)酒石酸和(-)二苯甲酰酒石酸为拆分剂拆分为(+)DDPH和(-)DDPH。(-)DDPH和(±)DDPH拈抗α_1受体激动剂苯肾上腺素作用强度相近,拮抗参数值PA_2分别为7.69和7.55。

游泳训练对大鼠心肌α_1肾上腺素受体及其亚型的影响

采用放射配体结合实验观察大鼠游泳训练8周后心肌中α_1肾上腺素受体(α_1受体)及其亚型的变化。^(125)I-BE 2254 Scatchard分析显示α_1受体的B_(max)由对照组(n=5)的43.3±5.5fmol/mg增加到训练组(n=5)的75.0±8.2fmol/mg,(P<0.02),K_D值无显著改变。WB4101竞争抑制曲线显示大鼠心肌中的α_1受体可分成与WB 4101 高亲和性的α_(1a)亚型与低亲和性的α_(1b)亚型,训练组心肌中α_(1a)亚型所占比例由对照组的28.5%增加到39.5%。结果提示,运动后心肌中α_1受体尤其α_(1a)亚型数量增加,这种改变可能与运动性心肌肥大有关。

抗β1肾上腺素受体自身抗体的致心律失常效应

目的:观察抗β1肾上腺素受体自身抗体(β1AA)在心律失常患者血清中的分布特征并探究该抗体是否具有致心律失常作用。方法:选择临床各型心律失常、冠心病患者和正常健康体检者,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中β1AA的滴度;提纯抗体阳性患者血清中的IgG抗体,给予正常大鼠,动态监测心电图的变化,观察心律失常发生频率。结果:β1AA在心律失常患者血清中的阳性率为52.8%,明显高于冠心病对照组(24.0%,P<0.01)与正常对照组(5.0%,P<0.01);β1AA可引发正常大鼠发生心律失常,其中以室性心律失常多见。结论:β1AA在心律失常患者血清中的分布呈高阳性率,并可致大鼠发生心律失常。

一种新的α_(1A)肾上腺素受体选择性拮抗剂Sertindole

本工作分别在稳定表达α１Ａ，α１Ｂ和α１Ｄ肾上腺素受体（ａｄｒｅｎｏｃｅｐｔｏｒ，ＡＲ）的人胚胎肾脏细胞（ｈｕｍａｎｅｍｂｒｙｏｎｉｃｋｉｄｎｅｙ２９３，ＨＥＫ２９３）和大鼠离体血管上，用放射配体结合实验和离体血管收缩功能实验方法以确定ｓｅｒｔｉｎｄｏｌｅ对α１ＡＲ亚型的选择性拮抗作用。结果显示ｓｅｒｔｉｎｄｏｌｅ与克隆α１ＡＡＲ的亲和性分别是与克隆α１ＢＡＲ和克隆α１ＤＡＲ的６９倍和１３２倍。Ｓｅｒｔｉｎｄｏｌｅ拮抗去甲肾上腺素引起的主动脉和肾动脉收缩反应的ｐＡ２值分别与其对α１Ｄ和α１Ａ亚型的ｐＫＩ值相符。分别稳定表达３种亚型受体的ＨＥＫ２９３细胞膜标本经与ｓｅｒｔｉｎｄｏｌｅ预温育３０ｍｉｎ后，受体与１２５ＩＢＥ２２５４结合的Ｂｍａｘ值显著降低，ＫＤ值无显著变化；而在ｓｅｒｔｉｎｄｏｌｅ存在条件下，α１ＡＲ３种亚型与１２５ＩＢＥ２２５４结合的ＫＤ值显著增大，但Ｂｍａｘ值无显著改变。上述结果表明ｓｅｒｔｉｎｄｏｌｅ为不可逆性竞争性α１ＡＲ拮抗剂。

人参皂苷单体Rb1、Re及Rg1对肾上腺素所致小鼠耳廓微循环障碍的改善作用

目的:观察人参皂苷单体Rb1、Re及Rg1对肾上腺素所致小鼠耳廓微循环障碍的影响。方法:昆明种小鼠40只分为4组(每组10只),对照组、人参皂苷单体Rb1组、人参皂苷单体Re组及人参皂苷单体Rg1组。除对照组外,各组按10mg·kg-1·d-1腹腔注射给药一次,对照组腹腔注射同体积的生理盐水。连续给药4d,末次给药30min时将小鼠固定于微循环观测分析系统显微镜下,观测小鼠正常及腹腔注射盐酸肾上腺素(1mg·kg-1)10、20和30min时小鼠耳廓微血管的管径、血流速度及毛细血管交叉网开放数目。结果:与对照组比较,人参皂苷单体Re组及Rg1组小鼠在腹腔注射盐酸肾上腺素(10、20和30min)小鼠耳廓微血管管径均明显扩张(P<0.05或P<0.01),微血管血流速度均明显加快(P<0.05或P<0.01),微血管交叉网开放数目均明显增加(P<0.05);Re组与Rg1组比较差异无显著性(P>0.05)。人参皂苷Rb1组对肾上腺素所致微循环障碍无显著影响。结论:人参皂苷单体Re及Rg1对肾上腺素所致小鼠微循环障碍具有明显的改善作用。