五酯胶囊对健康受试者咪哒唑仑及其代谢物1′-羟基咪哒唑仑药动学的影响

目的:研究健康受试者合用中药制剂五酯胶囊(Wuzhi-capsule,WZ)前后CYP3A4探针药咪哒唑仑(Midazolam,MDZ)及其代谢物1′-羟基咪哒唑仑(1′-hydroxymidazolam,1′-OH-MDZ)的动力学过程,以证实WZ是否影响MDZ的代谢过程,从而间接证明WZ对CYP3A4的影响。方法:研究分两期,12名健康男性志愿者在第一周期单剂量口服MDZ15mg后,开始连续服用WZ3粒,bid×7d,在第二周期依然单剂口服MDZ15mg,同时服用WZ3粒。每期口服MDZ后即按设计的时间采血,用LC/MS/MS法测定血浆MDZ及1′-OH-MDZ浓度,并分别计算药动学参数。结果:合用WZ前后MDZ的主要药动学参数:AUC0-24分别为(578±227)和(1186±320)μg·L-1·h;t1/2分别为(3.4±1.0)、(3.6±1.1)h;CL(s)分别为(31±17)、(14±6)L/h;tmax分别为(0.8±0.5)、(1.6±1.2)h;Cmax分别为(171±70)、(282±152)μg/L;V/F(C)分别为(149±98)、(67±24)L。合用WZ前后1′-OH-MDZ的主要药动学参数:AUC0-24分别为(141±699)、(129±49)μg.L-1.h;t1/2分别为(5.6±3.3)、(5.0±2.1)h;CL(s)分别为(130±68)、(134±72)L/h;tmax分别为(0.8±0.3)、(1.6±1.2)h;Cmax分别为(48±23)、(36±28)μg/L;V/F(C)分别为(918±499)、(935±544)L。结论:与使用WZ前相比,使用WZ后MDZ的AUC0-24和Cmax分别增加119.4%、85.6%,CL(s)降低52.1%,tmax延迟1倍。WZ能显著增加MDZ的血浓度和生物利用度。推测WZ可能是一种CYP3A4抑制剂或含有具有CYP3A4抑制作用的成分。

固相萃取-高效液相色谱法同时测定人血浆中地西泮、咪达唑仑及其代谢产物的浓度和临床应用

目的:建立同时测定人血浆中地西泮、奥沙西泮、咪达唑仑和1′-羟基咪哒唑仑浓度的固相萃取-高效液相测定方法,并将其应用于临床中地西泮、咪达唑仑及其代谢产物血药浓度的测定。方法:以卡马西平为内标,血浆样品经Cleanert C18固相萃取柱净化处理。色谱柱为WondaSil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水=55∶45,柱温:30℃,流速:1.2mL·min-1,检测波长:308 nm,进样量:30μL。结果:地西泮、奥沙西泮、咪达唑仑和1’-羟基咪哒唑仑标准曲线范围分别为0.5~20,0.2~10,0.5~40,0.5~20 mg·L^(-1),最低定量限分别为0.5,0.2,0.5,0.5 mg·L^(-1),方法回收率分别为88.32%~93.77%,86.14%~91.80%,87.55%~92.53%,88.69%~92.30%,日内、日间精密度均小于7%。结论:该方法简便快速,灵敏准确,测定结果可靠,适用于地西泮、咪达唑仑及其代谢产物血药浓度的检测。

大鼠肝细胞色素P4503A活性测定及其孵育条件的优化

目的：测定大鼠肝微粒体中细胞色素P4503A（CYP3A）的活性，并对其体外孵育条件进行优化。方法：采用1＇-羟基咪哒唑仑的生成量表示肝中CYP3A的活性，高效液相色谱法测定肝微粒体中1’-羟基咪哒唑仑的浓度，用单因素试验法对其体外孵育条件进行优化，用线性Lineweaver-Burk双倒数作图法研究肝CYP3A酶促动力学。结果：1’-羟基咪哒唑仑在18.20～1820．00ug·L-1范围内线性关系良好；体外优化的孵育条件为5umol·L-1咪哒唑仑、0．102mg肝微粒体、孵育15min；肝CYP3A酶促动力学参数Km为1．67umol·L-1，Vmax为95．15pmol·min-1·mg-1。结论：HPLC法操作简便、灵敏、快速，适用于肝微粒体中1’-羟基咪哒唑仑的浓度测定，肝CYP3A孵育条件及其酶促动力学研究为研究经CYP3A代谢的药物相互作用及其他物质对CYP3A酶的影响提供理论依据。