Preproorexin和OX1R m RNA在苏钟猪发情周期下丘脑-垂体-卵巢轴中的表达

选取苏钟种母猪16头,在第2个发情期后,按发情前期、发情期、发情后期和间情期随机分成4组。用RT-PCR检测苏钟猪发情周期不同时期preproorexin和orexin 1受体(OX1R) m RNA在下丘脑-垂体-卵巢轴中的表达。结果显示:发情周期不同时期preproorexin m RNA在下丘脑、垂体和卵巢中变化趋势一致,preproorexin m RNA在猪的发情前期表达最高,随后其表达量开始下降,在发情后期其表达最少,在间情期时又开始上升。下丘脑中OX1R m RNA在发情前期开始上升,在发情后期达到最高,随后在间情期又开始下降。垂体和卵巢中OX1 R m RNA的变化与下丘脑中OX1R m RNA的变化趋势一致。上述结果表明:orexin可能参与调控动物生殖过程。

天王补心丹加减通过orexin A/OX1R对慢性睡眠剥夺小鼠糖脂代谢的干预作用

目的:从食欲素A(orexin A)/食欲素受体1(OX1R)信号通路探讨天王补心丹加减改善慢性睡眠剥夺小鼠糖脂代谢异常的作用机制。方法:6周龄雄性C57BL/6小鼠50只,随机分为空白组,模型组,艾司唑仑组及天王补心丹加减低、高剂量组,每组10只。对除空白组外采用多平台水环境法睡眠剥夺8周,后4周予天王补心丹水煎剂(8.5,17 g·kg^(-1))与艾司唑仑溶液(9.1 mg·kg^(-1))灌胃,空白、模型组灌服等体积纯水。每周测量2次小鼠摄食量与体质量;第49天尾静脉采血进行葡萄糖耐受实验(GTT),第52天尾静脉采血进行胰岛素耐受实验(ITT);应用全自动生化分析仪检测血清中总胆固醇(TCH),甘油三酯(TG)与游离脂肪酸(FFA)表达;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清及下丘脑中orexin A表达量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测下丘脑中OX1R mRNA和蛋白表达水平。结果:给药后各组小鼠的食物摄入量出现差异;与空白组比较,模型组体质量明显降低(P<0.05),糖耐量出现明显异常,TCH,TG,FFA水平显著升高(P<0.01),同时血清及下丘脑中orexin A表达量显著升高(P<0.01),下丘脑中OX1R mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,天王补心丹加减各组体质量明显升高(P<0.05),具有更好的葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性,TCH,TG,FFA水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),并伴有血清及下丘脑中orexin A表达量明显下降(P<0.05,P<0.01),OX1R的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:天王补心丹加减可以保护慢性睡眠剥夺诱导的小鼠糖脂代谢异常,推测其机制可能与orexin A/OX1R信号表达下调有关。

加味半夏秫米汤对失眠模型大鼠下丘脑食欲素及其受体的调控作用

【目的】观察加味半夏秫米汤对对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导的失眠模型大鼠的治疗作用及机制。【方法】将48只雄性SD大鼠随机分成6组,即正常组,模型组,中药低、中、高剂量组和地西泮组,每组8只。造模前连续7 d,中药低、中、高剂量组大鼠分别给予加味半夏秫米汤进行预防性治疗。除正常组外,其余各组大鼠均构建PCPA诱导失眠模型。第1天造模后,各组继续对应给药,连续7 d。监测体质量,进行旷场试验行为学检测,采用酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清中食欲素A(OXA)和食欲素B(OXB)含量,免疫组织化学法检测下丘脑食欲素受体1(OX1R)的表达,苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠下丘脑的病理变化。【结果】(1)造模前各组大鼠体质量增长趋势平稳,组间无明显差异;造模后除正常组外,其余各组大鼠体质量增长速度减缓甚至下降;给予加味半夏秫米汤14 d后,与模型组比较,中药中剂量组大鼠体质量上升显著(P<0.01)。(2)与正常组比较,模型组大鼠在旷场中活动总距离、中央区域的活动距离及进入中央区域的次数增加(P<0.01),血清OXA和OXB含量显著升高(P<0.01),下丘脑OX1R的表达显著升高(P<0.01),HE染色显示下丘脑胶质细胞轻度增生;与模型组比较,中药中剂量组和地西泮组大鼠在旷场中活动总距离、中央区域的活动距离及进入中央区域的次数减少(P<0.01),血清OXA和OXB含量显著降低(P<0.01),下丘脑OX1R的表达显著降低(P<0.01),HE染色显示大量神经元周围间隙增大,局部胶质细胞轻度增生。【结论】加味半夏秫米汤可通过下调血清中OXA和OXB的含量及下丘脑中OX1R的表达来改善大鼠失眠,减轻大鼠焦虑状态。

促醒针法对颅脑损伤昏迷大鼠额叶、顶叶及下丘脑食欲素A及其受体表达变化的影响

【目的】探讨促醒针法对颅脑损伤昏迷大鼠的促醒作用及其可能机制。【方法】将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、促醒针法组,每组8只。模型组和促醒针法组大鼠应用脑立体定位精密打击仪制作颅脑损伤昏迷模型。促醒针法组施予针刺。治疗后,评估大鼠觉醒程度,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠脑顶叶组织的病理变化,并计算正常神经元数目,Western Blot法检测大鼠额叶、顶叶和下丘脑组织的食欲素A(Orexin-A)、食欲素受体1(OX1R)表达。【结果】与假手术组比较,模型组大鼠意识状态评分降低(P<0.05),脑顶叶损伤区组织可见水肿、神经元细胞损伤,正常神经元数目减少(P<0.05),额叶、顶叶和下丘脑Orexin-A及OX1R蛋白表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,促醒针法组大鼠意识状态评分升高(P<0.05),脑顶叶损伤区组织病理改变明显改善,正常神经元数目增多(P<0.05),额叶、顶叶和下丘脑Orexin-A及OX1R蛋白表达水平升高(P<0.05)。【结论】促醒针法可有效促醒颅脑损伤后昏迷大鼠,其机制可能与上调额叶、顶叶及下丘脑部位Orexin-A、OX1R表达,减轻神经元损伤有关。