血管内皮生长因子对口腔鳞癌细胞系尿激酶型纤溶酶原激活剂及其抑制剂活性的影响

目的 探讨血管内皮生长因子(VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF)和口腔鳞癌侵袭转移的关系。方法 采用发色底物反应法测量不同浓度VEGF作用于口腔鳞癌TSCCa细胞系及颈淋巴转移癌GNM细胞系后u -PA和PAI- 1的活性,同时用BoydenChamber观察VEGF诱导口腔鳞癌TSCCa细胞转移作用。结果 不同浓度的VEGF (1ng/ml、5ng/ml、1 0ng/ml)作用于GNM细胞2小时后,u -PA和PAI - 1活性与对照组相比,无明显差异;而不同浓度的VEGF作用于TSCCa细胞2小时后,u -PA和PAI- 1活性与对照组相比,有显著性差异,u-PA和PAI- 1活性与VEGF有剂量依赖关系,用VEGF 1ng/ml、5ng/ml、1 0ng/ml培养口腔鳞癌TSCCa细胞系2小时,BoydenChamber小室下室浸润的口腔鳞癌细胞数分别为6 .6 7±1 .78、1 7.1 7±2 .38、2 2 .33±2 .5 4×1 0 4/ml,分别高于对照组2 .4 8±1 .0 2×1 0 4/ml(P <0 .0 5或0 .0 1 )。结论 VEGF可促进口腔鳞癌细胞侵袭转移。

IL-10抑制转化生长因子β_1诱导的大鼠肝星状细胞Ⅰ型胶原合成作用观察

目的探讨IL-10抗纤维化的可能机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞系rHSC-99,分别用不同浓度的IL-10、TGFβ1干预和两者共同干预,用ELISA法检测肝星状细胞(HSC)的Ⅰ型胶原合成的影响。结果TGFβ1显著增强HSC的I型胶原的合成。IL-10单独干预对HSC的I型胶原的合成无明显影响,但IL-10可显著抑制TGFβ1促进HSC的I型胶原的合成。结论TGFβ1显著促进HSC的Ⅰ型胶原的合成,IL-10对TGFβ1的促HSCⅠ型胶原合成有抑制作用,这可能是IL-10发挥抗肝纤维化作用的途径之一。

丹参对大鼠肝星状细胞转化生长因子β_1与Ⅰ型胶原mRNA表达的影响

目的 :探讨丹参抗肝纤维化的可能机制。方法 :链蛋白酶、胶原酶离体灌注大鼠肝脏 ,Nycodenz密度梯度离心分离肝星状细胞 (HSC)体外培养。不同浓度的丹参处理 ,用RT -PCR法半定量检测HSC的转化生长因子 β1(TGF - β1)mRNA与Ⅰ型胶原mRNA的表达。结果 :丹参对HSC的TGF - β1与Ⅰ型胶原mRNA的表达有抑制作用。结论 :丹参抗肝纤维化作用可能与TGF - β1和Ⅰ型胶原mRNA的表达下调有关。

川芎嗪对转化生长因子β1刺激肝星状细胞CTGF及Ⅰ型胶原表达的影响

研究川芎嗪对大鼠肝星状细胞株(hepatic stellate cell-T6,HSC-T6)结缔组织生长因子CTGF(connective tissue growth factor)及Ⅰ型胶原表达的影响.培养HSC-T6细胞,不同浓度川芎嗪与转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)刺激的HSC-T6共同孵育.用MTT(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)法检测HSC-T6增殖;免疫细胞化学法观察川芎嗪对CTGF表达的影响;Western印迹法检测CTGF蛋白的表达.ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)法测定Ⅰ型胶原表达.结果表明,一定浓度(100、200、400、600mg/L)川芎嗪能抑制HSC-T6增殖,且呈剂量依赖性.免疫细胞化学结果显示随着川芎嗪浓度的升高,CTGF表达依次递减,与正常对照组比较,具有显著性差异(t=4.216,P<0.01).川芎嗪还可以明显抑制CTGF蛋白的表达,并可抑制I型胶原合成,二者抑制程度呈正相关关系(r=0.861,P<0.01).川芎嗪可能通过抑制HSC-T6细胞增殖,下调CTGF的表达,阻断Ⅰ型胶原合成,从而发挥其抗肝纤维化的作用.

丙丁酚抑制氧化型低密度脂蛋白诱导系膜细胞转化生长因子-β_1表达

目的 观察丙丁酚对ox- LDL诱导系膜细胞AP -1活性和TGF -β1 表达的作用 ,探讨抗氧化剂治疗脂质肾损伤的分子机制。方法 大鼠系膜细胞随机分为正常细胞组、ox- LDL处理组和ox- LDL +丙丁酚处理组。运用凝胶迁移率实验检测AP-1活性变化 ,Western杂交检测c- Jun、JNK/SAPK磷酸化及TGF- β1 蛋白表达水平的改变。运用Northern杂交检测TGF- β1- mRNA表达。结果 丙丁酚 5 0 μmol/L预处理系膜细胞 2 0h ,显著降低ox LDL诱导系膜细胞AP 1活性。丙丁酚浓度为 5 0、1 0 0、2 0 0 μmol/L时 ,均显著抑制ox- LDL诱导JNK ,/SAPK磷酸化 ;且ox LDL +丙丁酚处理组的c Jun蛋白表达分别为ox- LDL处理组的 6 0 %、5 1 %和 4 6 %。Northern杂交显示 :ox LDL为 1 0 μg/mL时并不激活TGF- β1 mRNA表达 (P >0 .0 5 ) ;而当ox-LDL浓度增至 5 0、1 0 0 μg/mL时 ,TGF -β1 mRNA表达分别增加 1 .8和 1 .9倍。Western杂交显示ox -LDL呈剂量依赖方式增加TGF β1 蛋白质表达。加入丙丁酚后显著降低ox LDL诱导系膜细胞的TGF -β1- mRNA和蛋白质表达 (P <0 .0 5 )。结论 丙丁酚可能通过抑制JNK1 /SAPK磷酸化和AP 活性下调ox- LDL诱导系膜细胞TGF- β1 表达。

肝素对大鼠肝星状细胞中转化生长因子β1和Ⅰ型胶原的影响

目的：研究肝素与大鼠肝星状细胞（hepatic stellate cells，HSC）作用后转化生长因子β1（transforming growth factor β1，TGF-β1）和I型胶原表达的变化及意义。方法：大鼠肝星状细胞以1×10^8／L浓度接种于96孔培养板，每孔100uL。实验分组为肝素I组、肝素Ⅱ组、肝素Ⅲ组，加入肝素使各组培养液中肝素浓度分别是10，100，1000mg／L，加生理盐水为对照组（每组6孔重复3次）培养48h。培养终止后吸取上清液-20℃冰冻保存，ELISA法检测其上清液TGF-β1和I型胶原水平，MTT法观察细胞增殖情况。结果：肝素Ⅱ组和Ⅲ组HSC培养上清液TGF-β1水平均显著低于对照组（4.59±1.27ng／L，3.34±1.13ng／L VS 5.95±1.72ng／L，P〈0．01），肝素各组I型胶原水平均低于对照组（87．20±9．30ng／L．73．17±12．04ng/L VS 95．61±12．55ng／L，63．31±10．93ng／L VS 95．61±12．55ng／L，P均〈0．05），肝素Ⅲ组平均吸光度低于肝素I组和对照组（0．29±0．07 VS 0．42±0．12，0．46±0．17，P均〈0．05）。结论：大鼠肝星状细胞在肝素作用TTGF-β1和I型胶原分泌受抑制，其增殖减少。

不同灭菌方式与羊膜上皮细胞活性:以组织形态及肝细胞生长因子和金属蛋白酶组织抑制剂1为标准的评价

背景:羊膜作为一种生物材料广泛运用于眼表疾病的治疗并取得积极疗效,现其灭菌方式有抗生素浸泡、过氧乙酸/乙醇混合液灭菌法、γ射线照射3种方式,但哪种方法灭菌效果最好,对羊膜损伤最小尚不清楚。目的:探讨现有常用不同灭菌方式对羊膜生物活性的影响。方法:取健康剖宫产产妇胎盘羊膜,分别以抗生素、过氧乙酸/乙醇混合液、γ射线、碘伏灭菌,苏木精-伊红染色观察羊膜上皮细胞形态,免疫荧光和RT-PCR检测羊膜上皮细胞肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、金属蛋白酶组织抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)蛋白和mRNA的表达。结果与结论:经过氧乙酸/乙醇混合液和抗菌药处理的羊膜上皮细胞形态完好,而经γ射线处理的细胞形态损害较大。经灭菌处理后,羊膜细胞的HGF和TIMP-1蛋白表达均有所下降(P<0.05),其表达量由高到低依次为过氧乙酸/乙醇混合液组、抗菌药组、碘伏组和γ射线组;HGF和TIMP-1的mRNA表达也有下降(P<0.05),其中γ射线处理组下降趋势更明显(P<0.05),其余3个处理组间差异无显著性意义(P>0.05)。因此,就现行常用的灭菌方式而言,过氧乙酸/乙醇混合液对羊膜的损伤最小。

血管紧张素Ⅱ 1型受体和血小板源性生长因子在原发性肝细胞癌中的表达和意义

目的:探讨血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)和血小板源性生长因子(PDGF)在原发性肝细胞癌的表达及与临床特征之间的关系。方法:免疫组化法检测36例原发性肝细胞癌组织中AT1和PDGF表达,并以17例正常肝组织为对照。结果:肝癌组织中AT1和PDGF阳性率分别为88.9%和80.5%;2者在低分化组表达强度均高于高分化组(P<0.001);有转移者表达强度([8.17±0.75)和(6.67±0.82)]高于无转移者([4.23±2.23)和(3.80±2.44);]术前化疗组([6.86±1.35)和(6.57±0.98)]高于未化疗组([4.41±2.51)和(3.72±2.43);]AT1和PDGF二者呈正相关关系(r=0.883,P<0.001)。结论:AT1和PDGF在原发性肝细胞癌中高表达,可能在肝细胞癌的增殖、转化和转移过程中起重要作用。

前列腺素E_1对1型糖尿病大鼠肾组织肝细胞生长因子的调节

目的 探讨前列腺素E1对链尿佐菌素诱导的 1型糖尿病大鼠肾组织肝细胞生长因子 (HGF)的调节。方法 将大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和前列腺素E1(PGE1)治疗组。于模型成功后第 7、14、2 8天分别取各组 5只大鼠 ,检测肾功能和组织病理改变 ,用免疫组化法检测肾小球和肾小管 -间质中HGF的表达 ,并用ELISA法比较各组肾组织分泌的HGF。结果 PGE1治疗 7、14、2 8天时 ,治疗组HGF的表达及分泌均较糖尿病模型组增高 ,并于第 14天达高峰。结论 PGE1可以上调 1型糖尿病大鼠肾组织HGF的分泌 ,加强HGF的肾保护作用 。

2型糖尿病患者肝细胞生长因子与转化生长因子β1的测定及其意义

目的探讨血清肝细胞生长因子（HGF）、转化生长因子β1（TGF-β1）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9及金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）在糖尿病不同肾损害期中的差异及其临床意义。方法将113例2型糖尿病患者根据尿微量白蛋白含量分为正常白蛋白尿组（NA组）38例、微量白蛋白尿组（MA组）40例和大量自蛋白尿组（CP组）35例，同时随机分为糖耐量受损（IGT）组40例和正常对照（NC）组30例，并采用ELISA法检测血清HGF、TGF-β1、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和Ⅳ型胶原（IVC）含量。结果IGT组和NA组HGF含量显著高于NC组（P〈0.01），而MA组与CP组含量显著低于NC组（P〈0．01），以CP组含量最低；NA、MA和CP组TGF—β1含量显著高于NC组与IGT组（均P〈0．01），以CP组含量最高；2型糖尿病3组间HGF和TGF-9、含量的差异均有统计学意义（P〈0.01或0.05）；CP组和MA组MMP-2、MMP-9含量显著低于NC、IGT及NA组（P〈0．01），而TIMP-1与IVC含量显著高于NC、IGT和NA组（均P〈0.01）。结论糖尿病不同肾损害期患者存在HGF与TGF—β1、及MMP／TIMP系统的失衡，与糖尿病肾病的进展有关。

肝细胞生长因子对动脉粥样硬化模型兔巨噬细胞M1、M2亚型及斑块成分的影响

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)对动脉粥样硬化(AS)模型兔血脂、巨噬细胞M1型标志物诱导性一氧化氮合酶(iNOS)、巨噬细胞M2型标志物精氨酸酶Ⅰ(ArgⅠ)表达和AS斑块成分的影响。方法 24只4月龄雄性新西兰大白兔随机分为正常组、AS模型组、重组腺病毒-肝细胞生长因子(Ad-HGF)组,分别给予普通饲料、高胆固醇饲料、高胆固醇饲料喂养。其中Ad-HGF组分别于喂养4、5、6周后肌肉注射1 ml Ad-HGF(5×109PFU/ml),正常组和AS模型组同时给予生理盐水(1 ml/只)肌肉注射。12周后处死模型兔,分别测定血脂、主动脉内膜/中膜厚度比值(IMT)、胶原纤维、血管平滑肌细胞(VSMCs)和巨噬细胞的含量,主动脉HGF、间质-上皮转化因子(c-Met)、iNOS、ArgⅠ的蛋白表达。结果与正常组比较,AS模型组血脂水平、主动脉iNOS表达、IMT、胶原纤维及巨噬细胞含量明显增加(P<0.05),主动脉HGF、c-Met、ArgⅠ的蛋白表达、VSMCs含量明显降低(P<0.05);与AS模型组相比,Ad-HGF组血脂水平无明显差别,主动脉iNOS表达、IMT及巨噬细胞含量明显降低(P<0.05),主动脉HGF、c-Met、ArgⅠ的蛋白表达及胶原纤维含量、VSMCs含量明显增加(P<0.05)。结论 HGF通过抑制M1型巨噬细胞浸润,诱导M2型巨噬细胞分化,增加斑块胶原纤维和VSMCs含量而促进斑块稳定,抑制AS进展。

免疫球蛋白A1和肝细胞生长因子与腹型过敏性紫癜患儿胃组织损伤关系的研究

目的探讨IgA1和肝细胞生长因子(HGF)在腹型过敏性紫癜(HSP)患儿胃肠道损伤中的作用。方法取临床有持续或反复腹痛的腹型HSP患儿胃黏膜组织的病例为腹型HSP组,取胃镜检查明确诊断为急性胃炎患儿胃黏膜组织的病例为非HSP胃炎组;取胃肿瘤患儿切除部分胃的远离肿瘤部分、并经病理证实为正常胃黏膜组织的病例为正常对照组。运用免疫组织化学非生物素二步法检测IgA、IgA1和HGF蛋白在各组胃黏膜组织中的表达情况。结果腹型HSP组20例,非HSP胃炎10例,正常对照组4例。①腹型HSP组胃黏膜组织IgA、IgA1蛋白主要表达于胃黏膜上皮的表面黏液细胞内和固有层管状腺间的间质细胞、炎症细胞内;其免疫分数显著高于非HSP胃炎组和正常对照组,IgA蛋白:(0.61±0.02)vs(0.55±0.04)和(0.14±0.03),IgA1蛋白:(0.58±0.05)vs(0.38±0.03)和(0.13±0.05);腹型HSP组IgA1/IgA免疫分数比值(0.94±0.02)亦显著高于非HSP胃炎组(0.69±0.06);②腹型HSP组胃黏膜组织中HGF蛋白主要表达于胃黏膜固有层的管状腺细胞内,其免疫分数显著高于非HSP胃炎组和正常对照组,(0.16±0.03)vs(0.39±0.08)和(0.50±0.01),差异有统计学意义;③腹型HSP组胃黏膜组织中IgA1与HGF蛋白的表达水平呈正相关(r=0.892,P<0.01)。结论对于无典型皮疹的腹型HSP患儿,IgA1及HGF可能作为病理学指标对HSP诊断及鉴别提供新的依据。

巨噬细胞抑制因子-1及尿激酶型纤容酶原激活剂在胃癌组织中的表达及临床病理意义

目的:探讨巨噬细胞抑制因子-1(macrophageinhibitory cytokine-1,MIC-1)及尿激酶型纤容酶原激活剂(urokinase plasminogen activator,uPA)在胃癌组织中的蛋白表达及其临床意义.方法:收集郑州大学第一附属医院2009-01/2010-05胃癌存档蜡块55例,采用免疫组织化学方法检测55例胃癌及正常胃黏膜上皮组织中MIC-1及uPA的蛋白表达情况,并分析其表达与胃癌临床病理特征的关系.结果:MIC-1蛋白在胃癌组织中的阳性表达率显著高于正常胃黏膜上皮,组间比较差异均具有统计学意义(56.4%vs20.0%,χ2=7.792,P<0.05),并且其在胃癌组织中的阳性表达率与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移均相关(χ2=6.781,11.071,12.806,均P<0.05).uPA蛋白在胃癌组织中的阳性表达率显著高于正常胃黏膜上皮,组间比较差异均具有统计学意义(61.8%vs25.0%,χ2=7.965,P<0.05),并且其在胃癌组织中的阳性表达率与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移均相关(χ2=13.803,14.561,10.668,均P<0.05).MIC-1与uPA蛋白表达呈正相关关系(γp=0.591,P<0.05).结论:MIC-1及uPA的过表达可能与胃癌的发生发展有关,并对判断胃癌患者的生物学行为具有一定的意义.

老年直肠癌伴2型糖尿病患者Dixon术后吻合口瘘发生与血清肝细胞生长因子、糖化血红蛋白水平的关系

目的探讨血清肝细胞生长因子（HGF）、糖化血红蛋白（HbA1c）水平对老年直肠癌伴2型糖尿病（T2DM）患者行Dixon术后吻合口瘘发生情况的影响。方法接受Dixon术治疗的老年直肠癌伴T2DM患者34例作为观察组，31例行Dixon术的老年直肠癌不伴T2DM患者作为对照组。比较两组术中及术后情况。结果观察组血清HGF（t=6．673，P〈0．001）、HbA1c（t=8．114，P〈0．001）的水平均高于对照组（P〈0．05）；观察组术后住院时间（拉3．559，P=0．001）、术后吻合口瘘的发生率（x2=3．947，P=0．047）均大于对照组（P〈0．05）；观察组术后2年累积生存率明显低于对照组（44．12％，15／34vs80．65％，25／31；Log-rank，=6．050，p=0．014）。结论降低老年直肠癌伴T2DM患者的血清HGF、HbA1c水平，可以有效减少老年患者Dixon术后吻合口瘘的发生，改善老年患者的术后恢复情况。

抗纤复方对大鼠肝贮脂细胞产生转化生长因子β_1的影响(摘要)

目的:研究抗纤复方抑制胶原生成的细胞机制,观察抗纤复方对大鼠传代培养肝贮脂细胞自分泌产 生转化生长因子β1（TGFβ1）的影响。方法:采用血清药理学方法处理贮脂细胞,以貂肺上皮细胞（Mvl-lu）生长抑制MTT法,检测培养上清中TGFβ1活性,并以小牛血清、正常鼠血清和秋水仙碱药物血清为对照。结果:抗纤复方药物血清和秋水仙碱药物血清均能明显抑制贮脂细胞产生TGFβ1。

糖尿病肾病不同时期血浆肝细胞生长因子及转化生长因子β_1水平

目的观察糖尿病肾病不同时期患者血浆肝细胞生长因子(HGF)及转化生长因子β1(TGFβ-1)水平。方法分别检测单纯2型糖尿病患者30例(A组),糖尿病肾病肾功能正常患者25例(B组)和糖尿病肾病终末期肾功能衰竭患者25例(C组)的外周血HGF及TGF-β1水平,并对相关数据进行统计学分析。结果A组外周血HGF及TGFβ-1分别为(285.33±80.27)ng/L,(94.25±27.45)μg/L;B组为(2 000.23±835.65)ng/L,(138.96±26.75)μg/L;C组为(985.44±92.23)ng/L,(183.78±45.68)μg/L,各组间比较差别有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论糖尿病患者随着肾损害的出现,其HGF及TGFβ-1水平亦逐渐增高,但进入终末期肾功能衰竭后HGF水平明显降低,而TGF-β1水平仍持续高水平存在。

可溶性环氧化物水解酶抑制剂对小鼠内皮祖细胞分泌血管内皮生长因子及缺氧诱导因子-1α的促进作用

目的探讨可溶性环氧化物水解酶抑制剂(t-AUCB)能否促进小鼠来源内皮祖细胞(EPCs)分泌内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α),及可能的相关机制。方法提取小鼠长骨骨髓,离心分离培养,取得高纯度EPCs,不同浓度可溶性环氧化物水解酶抑制剂(t-AUCB)和过氧化体增殖物激活型受体γ(PPAR-γ)阻断剂GW9662单独或联合干预EPCs,Western blot检测上述EPCs体外分泌VEGF及HIF-1α情况。结果从0~100μmol/L,t-AUCB呈浓度依赖性增强EPCs体外分泌VEGF、HIF-1α能力,而5μmol/L t-AUCB阻断剂GW9662可抑制EPC上述功能。1、10、50、100μmol/L t-AUCB促进EPCs分泌VEGF、HIF-1α能力与0μmol/L t-AUCB相比,差异均具有统计学意义(P<0.05);GW9662+100μmol/L t-AUCB与100μmol/L t-AUCB比较,差异具有统计学意义(P<0.05),与0μmol/L tAUCB比较,差异也具有统计学意义(P<0.05)。结论t-AUCB可促进EPCs分泌VEGF及HIF-1α,其机制可能与激活PPAR-γ通路有关。

糜酶抑制剂对肝纤维化大鼠肝组织中转化生长因子β1及其Ⅰ、Ⅱ型受体表达的影响

[目的]探讨糜酶抑制剂(Chy-I)对肝纤维化大鼠肝组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、TGF-β1Ⅰ型受体(TβRⅠ)及TGF-β1Ⅱ型受体(TβRⅡ)表达的影响.[方法]取Wistar雄性大鼠,随机分为正常组、模型组和Chy-I组,模型组和Chy-I组注射给予四氯化碳制作肝纤维化大鼠模型,Chy-I组在建立模型的同时灌胃给予Chy-I(每日10 mg/kg).实验第56天时,采用免疫组织化学染色法检测各组大鼠肝组织中TGF-β1、TβRⅠ及TβRⅡ阳性细胞数;采用Western blot法检测各组大鼠肝组织中TGF-β1、TβRⅠ及TβRⅡ蛋白表达水平.[结果]与模型组比较,Chy-I组TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ阳性细胞数明显减少(P<0.05,P<0.01).Chy-I组肝组织中TGF-β1、TβRⅠ及TβRⅡ蛋白表达较模型组明显减少(P<0.05).[结论]Chy-I对大鼠肝纤维化具有改善作用,其机制认为可能与调节TGF-β1、TβRⅠ及TβRⅡ水平有关系.

纤溶酶原激活物抑制因子-1对肝星状细胞活化及细胞外基质合成的影响

目的探讨外源性纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)对人肝星状细胞(LX-2)活化及细胞外基质合成的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测培养液中加入PAI-1后LX-2细胞的增殖变化,确定PAI-1的最佳干预浓度。将LX-2培养液中加入PAI-1培养12h,ELISA法检测细胞上清液中转化生长因子(TGFβ1)、透明质酸(HA)的变化;免疫细胞化学法检测LX-2细胞内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、尿激酶型纤溶酶原刺激物(PLAU)及PAI-1蛋白变化;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测LX-2细胞内TGFβ1 mRNA和PAI-1 mRNA变化,分析其相关关系。结果 PAI-1对LX-2细胞增殖刺激作用明显,PAI-1浓度为10ng/mL时刺激作用最为明显(F=11.697,P<0.01)。加入PAI-112h后(刺激组)较未加入PAI-1(对照组),细胞上清液中TGFβ1、HA表达显著增加(t=5.474,t′=5.785,P<0.01);LX-2细胞内ɑ-SMA、TIMP-1、PAI-1蛋白表达均显著增加(t=5.438、9.511、4.857,P<0.01),而MMP-2、PLAU蛋白表达差异无统计学意义(t=0.473、0.581,P>0.05);LX-2内TGFβ1 mRNA、PAI-1 mRNA增加显著(t=4.683,t′=4.135,P<0.01),TGFβ1与PAI-1 mRNA呈显著正相关(r=0.827,P<0.05)。结论 PAI-1可通过活化LX-2,刺激LX-2TGFβ1蛋白及mRNA的表达,促进细胞外基质生成,从而促进肝纤维化、肝硬化的形成和发展。

Wnt抑制因子-1对肝星状细胞活化的影响

目的观察wnt抑制因子-1(WIF)对转化生长因子β1(TGF-β1)活化肝星状细胞(HSC)的影响。方法构建真核表达质粒pEGFP-C1-WIF并通过脂质体介导方法,将pEGFP-C1-WIF转染体外培养的HSC-T6细胞株,用TGF-β1刺激转染(试验组)和未转染的HSC-T6细胞株(对照组),并用逆转录PCR(RT-PCR)和Western blot法检测各组细胞(包括正常细胞组)smad3、β-连环蛋白(β-catenin)mRNA及其蛋白质的表达。结果试验组HSC-T6细胞株smad3、β-catenin mRNA及蛋白质表达明显低于正常组HSC-T6细胞株,更低于对照组HSC-T6细胞株(P<0.05)。β-catenin和smad3蛋白质的表达均与α-肌动蛋白(α-SMA)蛋白质的表达显著相关(r=0.800,P<0.01;r=0.743,P<0.01)。结论 WIF能通过下调wnt/β-catenin以及TGF-β1/smads信号通路的生物学效应抑制HSC-T6细胞的活化,从而延缓肝纤维化的发展。