不同中医证型特应性皮炎患者外周血Th1、Th2、Th17细胞及miR-155表达分析

目的:分析研究不同中医证型特应性皮炎(AD)患者外周血辅助性T细胞1(Th1)、Th2、Th17细胞及微小RNA-155(miR-155)表达。方法:回顾性选取2021年6月~2022年6月我院收治的AD患者作为AD组(n=112),根据不同中医证型将患者分为脾虚湿蕴组(n=46)、湿热内蕴组(n=37)和血虚风燥组(n=29),另选60例本院同期体检健康人群为对照组(n=60)。比较各组外周血Th1、Th2、Th17细胞百分比差异、Th1类细胞因子(IFN-γ)、Th2类细胞因子(IL-4)、Th17类细胞因子(IL-17)及miR-155表达。结果:AD组外周血Th1、IFN-γ水平低于对照组,Th2、Th17、IL-4、IL-17、miR-155表达均高于对照组(P<0.05);不同中医证型的AD患者外周血Th1、IFN-γ水平比较差异无统计学意义(P>0.05);不同中医证型的Th2、Th17、IL-4、IL-17表达水平相比,湿热内蕴组>脾虚湿蕴组>血虚风燥组(P<0.05);不同中医证型的miR-155表达水平相比,湿热内蕴组>脾虚湿蕴组>血虚风燥组(P<0.05)。结论:不同中医证型AD患者外周血Th2、Th17细胞及相关细胞因子与miR-155表达存在差异性,检测其表达水平有助于指导AD中医辨证分型和治疗。

基膜聚糖通过抑制1型辅助T细胞分化提高耐药性卵巢癌治疗效果

目的探讨基膜聚糖(LUM)在卵巢癌顺铂耐药中的作用机制,并初步探索其对1型辅助T(Th1)细胞分化的影响。方法通过基因表达数据集(GEO)筛选卵巢癌顺铂耐药株及敏感株中差异表达的基因,通过实时定量PCR检测其表达水平。利用小干扰RNA(siRNA)敲低人卵巢癌细胞中LUM表达,并用Western blot法验证敲低效率。通过流式细胞术检测敲低LUM对顺铂处理后的卵巢癌细胞系周期及凋亡的影响。通过蛋白质相互作用(PPI)网络筛选LUM潜在靶蛋白,并用分子对接验证其相互作用。肿瘤免疫评估资源数据库(TIMER)筛选LUM对卵巢癌系分泌细胞因子的影响,并利用ELISA与实时定量PCR验证。流式细胞术分析LUM对共培养的CD4^(+)T细胞分化的调控作用。结果GEO数据显示LUM在顺铂耐药株中显著上调,且其表达水平与患者预后相关。LUM在卵巢癌顺铂耐药细胞株中表达水平较高,且顺铂治疗能促进LUM的表达。敲低LUM增加顺铂诱导的卵巢癌细胞的凋亡和细胞周期阻滞,提高药物敏感性。靶基因筛选表明,LUM可能通过与Src同源域磷酸酶2(SHP2)相互作用调控卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。另外,TIMER分析结果提示高表达LUM抑制Th1细胞分化,在卵巢癌耐药株中敲低LUM促进Th1细胞分化,通过调控γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素12(IL-12)分泌影响免疫细胞的肿瘤杀伤力。结论LUM在卵巢癌顺铂耐药中表达上调,可能通过调控SHP2相关信号通路降低卵巢癌细胞顺铂敏感性。LUM还通过调控卵巢癌细胞细胞因子分泌,进而抑制Th1细胞分化,促进肿瘤耐药性产生,可能是卵巢癌治疗新的潜在靶点。

HPV DNA负荷量、辅助性T细胞17、FoxP3+调节性T细胞及炎症因子与高危型HPV感染的相关性分析

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)DNA、辅助性T细胞17(Th17)、叉头状转录因子3阳性(FoxP3^(+))调节性T细胞(Treg)及宫颈灌洗液中炎症因子与高危型HPV感染的相关性,为高危型HPV感染防治提供新思路。方法将2020年9月至2021年2月该院收治的高危型HPV感染患者100例纳入研究作为研究组,然后将其中50例高危型HPV16/18阳性患者作为HPV16/18组,50例其他12种高危型阳性病例作为其他亚型组。另外,选取同期体检的健康女性作为对照组(n=50)。比较研究组和对照组HPV DNA负荷量、Th17、FoxP3^(+)Treg及宫颈灌洗液中炎症因子[白细胞介素(IL)-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-17A]水平,比较HPV16/18组和其他亚型组各项指标水平,比较不同宫颈病变患者各项指标水平。分析各项指标与高危型HPV感染、宫颈病变的相关性,以及对宫颈病变患者高危型HPV感染的诊断价值。结果研究组HPV DNA负荷量、Th17、FoxP3^(+)Treg及宫颈灌洗液中IL-10、TNF-α、IL-17A水平均高于对照组(P<0.05),HPV16/18组各项指标水平均高于其他亚型组(P<0.05)。不同宫颈病变患者各项指标水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HPV DNA负荷量、FoxP3^(+)Treg、Th17及宫颈灌洗液中IL-10、TNF-α、IL-17A水平与高危型HPV感染分型(HPV16/18=1,其他亚型=2)均呈负相关(P<0.05),与宫颈病变(宫颈上皮内瘤变Ⅰ级=1,宫颈上皮内瘤变Ⅱ级=2,宫颈上皮内瘤变Ⅲ级=3,宫颈癌=4)均呈正相关(P<0.05)。各项指标联合诊断高危型HPV16/18阳性的曲线下面积(AUC)为0.911(95%CI:0.837~0.959),大于各指标单独诊断。结论高危型HPV感染患者HPV DNA负荷量、Th17、FoxP3^(+)Treg及炎症因子水平异常,与高危型HPV感染分型、宫颈病变密切相关,而且HPV DNA负荷量与Th17、FoxP3^(+)Treg、炎症因子相关,各项指标联合检测可为临床防治高危型HPV持续感染提供可靠依据。

克拉霉素对铜绿假单胞菌慢性肺部感染小鼠辅助性T淋巴细胞1型/辅助性T淋巴细胞2型免疫平衡的调节作用

目的探讨克拉霉素对铜绿假单胞菌(PA)慢性肺部感染小鼠肺组织辅助型T淋巴细胞(Th)1/Th2免疫平衡的调节作用。方法将54只小鼠随机分入克拉霉素组、0.9%氯化钠溶液组和对照组。克拉霉素组和0.9%氯化钠溶液组通过小鼠气道接种由包裹PA的琼脂糖珠方法建立的PA慢性肺部感染模型,自建模后第7天起分别给予克拉霉素和0.9%氯化钠溶液治疗,对照组小鼠经气道接种无菌琼脂糖珠给予0.9%氯化钠溶液。分别于建模后第7、10、14天处死小鼠。标本进行肺组织细菌培养、病理学检查、支气管肺泡灌洗液(BALF)中γ-干扰素(IFN-γ)/白细胞介素(IL)-4水平测定和肺组织转录因子T-betmRNA/GATA-3mRNA表达水平分析。结果克拉霉素组小鼠在治疗后慢性肺部感染的症状明显改善。经气道接种后第7天,0.9%氯化钠溶液组和克拉霉素组BALF中IFN-γ、IL-4水平均显著高于对照组(P值均<0.05)。气道接种后第14天,克拉霉素组的IFN-γ水平显著低于0.9%氯化钠溶液组(P<0.05)。气道接种后第10、14天,克拉霉素组BALF中IL-4水平均显著高于0.9%氯化钠溶液组和对照组同时间点(P值均<0.05),而IFN-γ/IL-4比值均显著低于0.9%氯化钠溶液组同时间点(P值均<0.05)。气道接种后第7、10天,克拉霉素组与0.9%氯化钠溶液组的Th1、Th2细胞转录因子T-betmRNA、GATA-3mRNA表达水平相近,均显著高于对照组(P值均<0.05)。气道接种后第14天,克拉霉素组T-betmRNA表达水平、T-betmRNA/GATA-3mRNA比值均显著低于0.9%氯化钠溶液组(P值均<0.05)。结论在PA慢性肺部感染初期采用克拉霉素治疗可使小鼠肺组织的Th1/Th2平衡向Th2偏移,有利于缓解气道炎症。

T-bet重组腺病毒调节哮喘小鼠辅助性T细胞1型/2型免疫平衡

目的研究静脉注射T-bet重组腺病毒(AdT-bet)对小鼠哮喘模型过敏性气道炎症及辅助性T细胞1型/2型(Th1/Th2)免疫失衡的影响。方法随机将36只C57BL/6小鼠分为AdT-bet治疗(A)组、模型对照(B)组、正常对照(C)组。以卵蛋白、氢氧化铝免疫建立哮喘模型,A组激发前尾静脉注射1×10~8 pfu/100μL的AdT-bet,各组激发后进行肺泡灌洗分析细胞组分,分离肺T淋巴细胞测定细胞因子分泌水平,以流式细胞仪检测CD3^+、CD4^+T细胞比例及表达γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素(IL)-4、IL-5的比例,比较各组肺组织学改变。结果A组与B组相比:①明显抑制抗原激发后气道内嗜酸性粒细胞的浸润(0.004±0.003比0.221±0.067,P<0.01);②明显抑制肺T淋巴细胞产生IL-4[(22±12)pg/mL比(170±28)pg/mL]、IL-5[(16±13)pg/mL比(330±30)pg/mL],增加了IFN-γ[(2100±360)pg/mL比(60±50)pg/mL]的产生,差异均有统计学意义(P值均<0.01);③肺T淋巴细胞CD4^+IFN-γ%及IFN-γ^+/IL-4^+明显升高(P值均<0.01),而CD4^+IL-4^+%明显下降(P<0.01);④明显抑制哮喘鼠气道内及肺泡内的过敏性炎症反应。结论激发前静脉应用AdT-bet对哮喘小鼠过敏性气道炎症有明显的防治作用,其机制可能与表达的T-bet上调Th1/Th2比值,从而调整了免疫平衡有关。

循环滤泡型辅助性T淋巴细胞及IL-21在自身免疫性肝炎中的初步研究

目的检测外周血滤泡型辅助性T淋巴细胞百分率(Tfh)及细胞上CCR7、PD-1、IL-21R等分子的表达水平,血清IL-21的表达水平,为进一步研究Tfh细胞及其相关分子在自身免疫性肝炎发病机制中的作用提供实验依据。方法收集20例自身免疫性肝炎患者与20例健康志愿者外周抗凝血,流式细胞仪检测循环Tfh细胞百分率与细胞膜上CCR7,PD-1,IL-21R等分子的表达水平,并进一步分析CCR7+Tfh亚型细胞上PD-1、IL-21R等分子的表达水平,同时ELISA检测外周血血清IL-21的水平;统计分析健康对照与自身免疫性肝炎患者的外周血Tfh细胞百分率、细胞膜上PD-1与IL-21R分子表达水平,血清IL-21表达水平的差异。结果 1)循环Tfh细胞百分率在健康对照(4.793%±1.5609%)与自免肝患者(8.915%±3.235%)具有显著性差别;循环Tfh细胞表达的PD-1分子(健康对照:91.173%±5.032%,自免肝患者:5.177%±3.267%)与IL-21R(健康对照97.625%±1.137%,自免肝患者27.800%±7.918%)具有显著性差别;2)外周血血清IL-21水平[健康对照(:444.75±75.05)pg/ml,自免肝患者(:862.80±109.83)pg/ml]也具有显著性差别;3)自身免疫性肝炎患者循环Tfh细胞百分率与血清GGT、ALP呈正相关与细胞上的PD-1表达水平呈负相关,后者与血清TB呈正相关。结论 Tfh细胞及其表达的相关分子(PD-1,IL-21R)在健康人与自免肝患者的表达水平是不同的,可能参与介导了自身免疫性肝炎的发生与发展。

食管鳞癌组织微小RNA-138、微小RNA-145表达水平与1型/2型辅助性T细胞漂移和预后的关系

目的 分析食管鳞癌组织中微小RNA(miR)-138、miR-145的表达水平及两者与1型辅助性T细胞(Th1)/2型辅助性T细胞(Th2)漂移和预后的关系。方法 2015年5月~2018年5月间我院收治的112例食管鳞癌病人为食管鳞癌组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测食管鳞癌组织及癌旁组织中miR-138、miR-145的表达水平。同期70例健康体检人群作为对照组,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测食管鳞癌组及对照组血清Th1型细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2和Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平。分析癌组织中miR-138、miR-145表达水平与临床病理参数关系。Pearson相关性分析癌组织中miR-138、miR-145与Th1型、Th2型细胞因子的相关性。分析不同miR-138、miR-145表达情况食管鳞癌病人生存情况。结果 食管鳞癌组织中miR-138、miR-145的表达水平分别为(1.155±0.232)、(1.110±0.217),癌旁组织分别为(4.155±0.732)、(3.910±0.617),食管鳞癌组织中miR-138、miR-145的表达水平明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤分期的食管鳞癌组织中miR-138、miR-145表达水平差异具有统计学意义(P<0.05)。癌组织中miR-138、miR-145的表达水平均与IFN-γ、IL-2呈正相关(r=0.451、0.543;0.520、0.401,P<0.05),与IL-4、IL-10呈负相关(r=-0.391、-0.510;-0.402、0.553,P<0.05)。miR-138高表达病人的3年总体生存率(overall survival, OS)为58.49%(31/53),明显高于低表达病人17.24%(P<0.05);miR-145高表达3年OS为52.73%(29/55),明显高于低表达病人21.43%(12/56)(P<0.05)。结论 食管鳞癌组织中miR-138、miR-145表达水平降低,且与病人不良预后有关。miR-138、miR-145可能通过影响Th1/Th2漂移促进食管鳞癌恶性进展。

血清中IL-33在1型糖尿病患儿中的表达情况及其与部分Th1/Th2细胞因子的相关性研究

目的 检测1型糖尿病患儿血清中白细胞介素33(IL-33)的表达水平,研究其与部分Ⅰ型T辅助细胞/Ⅱ型T辅助细胞(Th1/Th2)细胞因子的相关性。方法 选取2020年3月至2022年3月在秦皇岛市妇幼保健院内分泌科接受治疗的125例1型糖尿病患儿为研究对象,将其纳入1型糖尿病患儿组,另选取120例同期健康体检儿童作为对照组。两组研究对象血清IL-33、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)表达水平通过酶联免疫吸附(ELISA)法检测;比较两组研究对象TNF-α/IL-4、TNF-α/IL-10、IL-2/IL-4、IL-2/IL-10的比值;Pearson相关性分析患儿血清IL-33的表达水平与部分Th1/Th2细胞因子平衡的相关性;采用logistic回归分析患儿发生1型糖尿病的影响因素。结果 与对照组相比,1型糖尿病患儿组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FBG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平降低(P<0.05)。与对照组相比,1型糖尿病患儿组IL-33、IL-4、IL-10表达水平降低,TNF-α、IL-2表达水平及TNF-α/IL-4、TNF-α/IL-10、IL-2/IL-4、IL-2/IL-10值升高(P<0.05)。Pearson相关性分析结果发现,1型糖尿病患儿血清IL-33表达水平与TNF-α/IL-4、TNF-α/IL-10、IL-2/IL-4、IL-2/IL-10呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,IL-33表达水平(OR=0.725,95%CI:0.571~0.921,P=0.008)、IL-4表达水平(OR=0.694,95%CI:0.533~0.904,P=0.007)、IL-10表达水平(OR=0.715,95%CI:0.559~0.915,P=0.008)是患儿发生1型糖尿病的保护因素,FBG水平(OR=1.445,95%CI:1.116~1.872,P=0.005)、TNF-α表达水平(OR=1.463,95%CI:1.145~1.869,P=0.002)、IL-2表达水平(OR=2.007,95%CI:1.322~3.047,P=0.001)是患儿发生1型糖尿病的危险因素。结论 血清IL-33水平与部分Th1/Th2细胞因子平衡状态具有相关性,且IL-33、IL-4、IL-10、FBG、TNF-α、IL-2等表达水平是儿童发生1型糖尿病的影响因素。

乳酸杆菌对新生鼠和成年鼠辅助性T细胞1/辅助性T细胞2平衡及肺树突状细胞表型的影响

目的:探讨乳酸杆菌对新生鼠和成年鼠辅助性T细胞(Th)1/Th2平衡及肺树突状细胞(DC)表型的影响。方法:新生鼠从出生后连续7 d每天经口给予109 CFU/mL浓度乳酸杆菌10μL,成年鼠选取满6周的小鼠连续7 d每天经口给予109 CFU/mL浓度乳酸杆菌50μL,实验第8天进行盲肠内容物培养以确定乳酸杆菌肠道定植情况。干预3周后,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4和IL-10水平,流式细胞仪检测肺树突状细胞亚型和成熟度。结果:(1)乳酸杆菌干预的新生鼠乳酸杆菌数量较对照组增加,而肠球菌和肠杆菌数量降低(P<0.01),乳酸杆菌干预的成年鼠肠道乳酸杆菌数量较对照组增加(P<0.01),但肠道肠球菌和肠杆菌数量没有变化。(2)乳酸杆菌干预的新生鼠IFN-γ和IL-10水平较对照组高(P<0.05),IL-4水平两组比较差异无统计学意义。乳酸杆菌干预的成年鼠IFN-γ、IL-4和IL-10水平与对照组比较差异无统计学意义。(3)乳酸杆菌干预的新生鼠肺CD11c^(+)CD8α^(-)水平为92.34%±0.94%,较对照组降低(P<0.05),干预组CD11c^(+)CD8α^(+)水平较对照组增加(P<0.05)。经过乳酸杆菌干预后,新生鼠肺部14.03%±1.14%的DC表达MHCⅡ类分子,较对照组明显增加。成年鼠乳酸杆菌干预组CD11c^(+)CD8α^(-)、CD11c^(+)CD8α^(+)和CD11c^(+)MHCⅡ+水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:乳酸杆菌干预可以促进新生鼠Th1/Th2平衡向Th1方向偏移,而对成年鼠没有影响。

成人急性髓性白血病患者血清Th1/Th2型细胞因子、PCT、CRP检测及其临床意义

目的 检测成人急性髓性白血病患者血清辅助性T细胞1/T细胞2(Th1/Th2)型细胞因子、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)水平并探讨其临床意义。方法 选取2021年1月至2023年12月曲靖市第一人民医院收治的98例成人急性髓性白血病感染患者为研究组,按照不同感染程度分为17例脓毒症组与81普通感染组;同期选取98例成人急性髓性白血病无感染患者为非感染组;同期选择98例门诊健康体检者作为对照组。比较研究组、非感染组及对照组的血清白介素-2、干扰素-γ、白介素-4、白介素-10、PCT、CRP水平,比较脓毒症组与普通感染组患者的血清白介素-2、干扰素-γ、白介素-4、白介素-10、PCT、CRP水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析以上指标对成人急性髓性白血病感染的诊断价值。结果 研究组患者的血清白介素-2、干扰素-γ、PCT、CRP水平分别为(30.27±3.02) pg/mL、(280.16±31.59) pg/mL、(2.57±0.52) ng/mL、(89.42±10.36) mg/L,依次高于非感染组的(13.29±1.42) pg/mL、(229.47±23.15) pg/mL、(0.43±0.06) ng/mL、(13.28±1.54) mg/L和对照组的(6.09±1.26) pg/mL、(150.29±16.58) pg/mL、(0.21±0.03) ng/mL、(7.04±1.40) mg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组患者的血清白介素-4、白介素-10分别为(32.39±3.75) pg/m L、(2.96±0.45) pg/m L,依次低于非感染组的(51.03±7.28) pg/m L、(4.21±0.72) pg/m L和对照组的(78.29±10.45) pg/m L、(6.50±0.51) pg/m L,差异均有统计学意义(P<0.05);脓毒症组患者的血清白介素-2、干扰素-γ、PCT、CRP水平分别为(45.93±8.15) pg/m L、(340.17±40.21) pg/m L、(6.95±1.28) ng/m L、(134.73±12.81) mg/L,明显高于普通感染组的(26.98±2.57) pg/mL、(267.57±29.78) pg/mL、(1.65±0.36) ng/mL、(79.91±9.85) mg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);脓毒症组患者的血清白介素-4、白介素-10水平分别为(18.87±1.65) pg/mL、(1.29±0.31) pg/mL,明显低于普通感染组的(35.88±4.19) pg/mL、(3.31±0.48) pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,白介素-2、干扰素-γ、白介素-4、白介素-10、PCT、CRP单独及联合检测对成人急性髓性白血病感染诊断的曲线下面积(AUC)分别为0.817、0.789、0.798、0.827、0.786、0.766、0.962,联合检测的AUC大于各指标单独检测。结论 成人急性白血病感染患者Th1细胞因子、PCT及CRP水平明显上升,Th2细胞因子水平明显下降,临床通过检测血清Th1/Th2细胞因子、PCT、CRP水平能够辅助成人急性髓性白血病感染的早期诊断,值得推广。

辅助性T细胞1/辅助性T细胞2标志性细胞因子与晚期肺腺癌化疗近远期疗效的关联性分析

目的分析辅助性T细胞(TH)1/TH2标志性细胞因子与晚期肺腺癌化疗近远期疗效的关联性。方法选取2021年1月至2023年12月江苏省徐州市中医院收治的82例晚期肺腺癌患者为研究对象,均给予培美曲塞+顺铂或卡铂治疗,21 d为1个周期,连续治疗3个周期。比较不同近期临床疗效者化疗前及化疗3个周期后血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10变化及不良反应发生情况,并记录化疗后2年生存与死亡者化疗3个周期后血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10差异。结果82例晚期肺腺癌患者均完成3个周期的化疗,其中完全缓解(CR)1例,部分缓解(PR)34例,疾病稳定(SD)28例,疾病进展(PD)19例,晚期肺腺癌患者化疗3个周期后血清IFN-γ、IL-2均高于本组化疗前,血清IL-4、IL-10均低于本组化疗前,差异有统计学意义(P<0.05);CR+PR患者化疗后血清IFN-γ、IL-2高于SD+PD者,差异有统计学意义(P<0.05),血清IL-4、IL-10低于SD+PD者,差异有统计学意义(P<0.05)。CR+PR患者与SD+PD患者的化疗期间不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。42例获得随访终点的晚期肺腺癌患者中死亡8例(19.05%),生存34例(80.95%),化疗后2年死亡者化疗3个周期血清IFN-γ、IL-2低于生存者,差异有统计学意义(P<0.05),血清IL-4、IL-10高于生存者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TH1/TH2平衡不仅与晚期肺腺癌患者化疗近期疗效有关,也与患者远期预后生存情况有关。

血必净注射液对脓毒症大鼠Claudin4蛋白和辅助性T淋巴细胞1型表达的影响

目的探讨血必净注射液对脓毒症大鼠肺组织Claudin4蛋白表达的影响。方法健康成年Sprague-Dawley大鼠100只,体重(250±25)g,随机分入4组,每组25只:假手术组大鼠只开腹、关腹和复苏,不行盲肠结扎穿孔术(CLP);脓毒症组大鼠行CLP;血必净3h组大鼠于CLP后3h腹腔内注射血必净注射液2mL/kg;血必净12h组大鼠于CLP后12h腹腔内注射血必净注射液2mL/kg。每组随机留取8只大鼠进行生存率分析。假手术组、脓毒症组、血必净3h组大鼠在术后6、15和24h,血必净12h组大鼠在术后15和24h各随机处死5只,分别留取血液和肺组织标本,测定肺组织湿/干质量比(肺水肿指数),对肺组织进行病理学观察并进行肺损伤病理学评分,测定血清促炎细胞因子IL-6和TNF-α水平,采用免疫组织化学方法测定肺组织骨架蛋白Claudin4蛋白表达情况,采用流式细胞术检测辅助性T淋巴细胞1型(Th1)在外周血单核细胞中的表达情况。结果假手术组、脓毒症组、血必净3h组和血必净12h组大鼠的术后72h存活率分别为8/8、0、1/8和0,血必净3h组显著高于脓毒症组(P<0.01),血必净12h组与脓毒症组的差异无统计学意义(P>0.05)。假手术组大鼠术后各项检测指标均基本不变。脓毒症组、血必净3h组和血必净12h组大鼠术后15和24h的肺水肿指数,以及术后6、15和24h的肺损伤病理学评分、血清IL-6和TNF-α水平、肺组织Claudin4蛋白表达阳性率均显著高于假手术组同时间点(P值均<0.01);脓毒症组大鼠术后6、15和24h,以及血必净12h组大鼠术后15和24h的肺水肿指数、肺损伤病理学评分、血清IL-6和TNF-α水平、肺组织Claudin4蛋白表达阳性率均显著高于血必净3h组同时间点(P值分别<0.05、0.01);脓毒症组与血必净12h组术后同时间点间上述指标的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。脓毒症组和血必净3h组大鼠术后各时间点的外周血单核细胞中Th1的表达率均显著高于假手术组同时间点(P值均<0.01);脓毒症组大鼠术后6和15h的外周血单核细胞中Th1的表达率均显著高于血必净3h组同时间点(P值均<0.01),术后24h的外周血单核细胞中Th1的表达率显著低于血必净3h组同时间点(P<0.05)。结论早期使用血必净治疗可以有效地抑制脓毒症大鼠肺组织的炎性反应,减轻肺损伤,提高大鼠存活率,其可能机制与抑制肺组织Claudin4蛋白表达,降低肺泡通透性有关。

不同分期老年2型糖尿病肾病患者外周血调节性和辅助性T细胞的表达

目的分析不同分期老年2型糖尿病肾病(DN)患者外周血调节性和辅助性T细胞的表达水平。方法选择老年DN患者38例(早期DN23例和中、晚期DN15例),另择同期老年糖耐量异常(IGT)患者19例,同期健康老年人21例为对照组,入选对象均接受了外周血调节性T细胞(CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg)和辅助性T细胞(CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8)检测。结果不同分期的老年DN患者外周血CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg水平均明显低于IGT组和对照组,而前两者的外周血CD+4水平和CD+4/CD+8比值均显著高于对照组,CD+8水平显著低于对照组(P<0.05,P<0.01)。中、晚期DN患者的外周血CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg水平均明显低于早期DN组,而CD+4水平和CD+4/CD+8比值均显著高于早期DN组(P<0.05,P<0.01)。结论老年DN患者存在明确的外周血调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达,并随病情分期升级而进一步失衡。

辅助性T细胞17/调节性T细胞失衡在儿童激素敏感型原发性肾病综合征发病机制中的研究

原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome,PNS)约占小儿时期NS总数的90%[1],临床上≥85%PNS患儿的肾脏病理改变为微小病变,对糖皮质激素治疗敏感.现阶段对儿童激素敏感型原发性肾病综合征(steroid-sensitive nephrotic syndrome,SSNS)的病因和发病机制尚不明确.有学者认为,可能与淋巴细胞免疫功能紊乱有关[2],主要表现为T细胞数目异常和各亚群间的比例失衡[3].因此,本研究通过检测SSNS患儿在激素治疗前后与健康对照者外周血的辅助性T细胞(Th/17)调节性T细胞(Treg)水平,旨在研究Th17/Treg细胞失衡在儿童SSNS发病过程中的作用机制以及糖皮质激素对Th17/Treg细胞免疫平衡的影响.

复方甘草酸苷对寻常型银屑病患者外周血辅助性T细胞17相关细胞因子影响的研究

银屑病是一种由T细胞介导的免疫性皮肤病，主要与辅助性T细胞（Th）1、Th17相关。而近年来研究发现白细胞介素（IL）-23／Th17轴在银屑病的发病中起重要作用，Th17细胞分泌IL-17、IL-22等细胞因子，

高糖激活p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路诱导CD8^+T淋巴细胞表达辅助性T淋巴细胞1型趋化因子受体3

目的探讨高糖对CD8+T淋巴细胞中辅助性T淋巴细胞(Th)1型趋化因子受体3(CXCR3)表达水平的影响及其可能的机制。方法体外不同浓度葡萄糖(5、10、25、50mmol/L)培养CD8+T淋巴细胞,检测其CXCR3mRNA及蛋白的表达水平变化。同时检测高糖环境下(50mmol/L葡萄糖)CD8+T淋巴细胞氧化应激信号通路相关蛋白P65、P38、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、c-jun氨基末端激酶(JNK)蛋白表达及磷酸化水平,并观察使用相应抑制剂阻断各氧化应激信号通路对CXCR3mRNA及蛋白表达的影响。结果随着培养基中葡萄糖浓度的升高,5、10、25、50mmol/L葡萄糖处理的CD8+T淋巴细胞中CXCR3mRNA及蛋白表达水平逐渐升高,两两比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05),该作用呈浓度依赖性增强。高糖组(50mmol/L葡萄糖)磷酸化的P65、P38、ERK、JNK表达水平均显著高于与正常组(5mmol/L葡萄糖,P值均<0.05)。加入P38信号通路抑制剂SB203580后,高糖环境下CD8+T淋巴细胞的CXCR3mRNA及蛋白的表达水平显著低于高糖组(P值均<0.05),至正常组水平(P值均>0.05);而加入P65信号通路抑制剂BAY11-7082、ERK信号通路抑制剂PD98059、JNK信号通路抑制剂SP600125后,高糖环境下CD8+T淋巴细胞的CXCR3mRNA及蛋白的表达水平仍显著高于正常组(P值均<0.05),与高糖组的差异无统计学意义(P值均>0.05)。结论高糖可能通过激活p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路诱导CD8+T淋巴细胞表达CXCR3,参与糖尿病周围神经病变发病中CD8+T淋巴细胞的趋化过程。

慢性丙型肝炎患者外周血滤泡辅助性T淋巴细胞表面PD-1受体表达及意义研究

目的探讨不同血清病毒载量的慢性丙型肝炎(CHC)患者外周血滤泡辅助性T淋巴细胞(Tfh)表面程序性死亡受体-1(PD-1)表达情况。方法根据血清HCV RNA水平不同,将180例CHC患者分为低病毒载量组76例,3 lg copies/ml≤血清HCV RNA <6 lg copies/ml和高病毒载量组104例,血清HCV RNA≥6 lgcopies/ml。比较两组外周血Tfh细胞百分比、Tfh细胞表面PD-1阳性率、外周血T、B淋巴细胞亚群、外周血CD4^+T淋巴细胞和CD8^+T淋巴细胞表面PD-1表达和血清白细胞介素21(IL-21)水平的差异。结果低病毒载量组和高病毒载量组血清HCV RNA水平分别为(4.5±1.2)lg copies/ml和(6.4±0.7)lg copies/ml,Tfh细胞表面PD-1阳性百分比分别为(26.2±2.2)%和(37.2±1.1)%,Tfh细胞百分比分别为(7.9±0.7)%和(5.1±0.4)%,血清IL-21水平分别为(46.8±1.3) ng/L和(21.7±1.1) ng/L,差异均有统计学意义(P<0.01);低病毒载量组和高病毒载量组外周血CD4^+T细胞百分比分别为(51.1±4.6)%和(37.6±4.4)%,CD8^+T细胞百分比分别为(24.0±3.1)%和(31.7±3.9)%,CD4^+T/CD8^+T细胞比值分别为(3.3±0.2)和(2.3±0.1),CD19^+B细胞百分比分别为(16.7±3.9)%和(11.8±3.2)%,差异具有统计学意义(P<0.01);低病毒载量组和高病毒载量组外周血CD4^+T细胞表面PD-1阳性率分别为(10.1±2.3)%和(2.4±0.6)%],CD8^+T细胞表面PD-1阳性率分别为(6.3±2.2)%和(1.0±0.3)%,差异也具有统计学意义(P<0.01)。结论不同血清病毒载量的CHC患者外周血Tfh和T淋巴细胞亚群以及血清白细胞介素21水平存在显著差异,进一步探讨它们对病情、抗病毒治疗应答和预后的关系,将具有十分重要的临床意义。

辅助性T细胞17/调节性T细胞及相关细胞因子与寻常型天疱疮相关性研究

目的:探讨辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)在寻常型天疱疮(PV)发病中的意义。方法:用流式细胞仪分选PV组(感染组、未感染组)和正常对照组外周血中CD3^+CD8^-白介素(IL)-17^+标记Th17细胞及CD4^+CD25^+Foxp3^+标记Treg细胞占CD4^+T细胞中的比例。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中IL-17和转化生长因子(TGF)-β的水平。结果:PV组外周血Th17细胞占CD4^+T细胞的百分比[(29.52±7.60)%]高于正常对照组[(20.06±1.82)%](P<0.05),PV感染组[(29.63±8.43)%]和未感染组[(28.57±6.13)%]比较,差异无统计学意义(P>0.05);PV组血清IL-17水平[(860.07±313.60)ng/L]、外周血Treg细胞百分比[(17.22±6.17)%]及血清TGF-β水平[(0.625±0.078)μg/L]均高于正常对照组[(383.45±120.95)ng/L、(3.03±0.33)%及(0.343±0.098)μg/L](P均<0.05);PV感染组Treg细胞百分比[(19.07±6.02)%]高于未感染组[(14.38±5.45)%](P<0.05)。结论:Th17/IL-17在PV发病过程中起重要作用,PV患者并发感染可引起外周血Treg细胞增加。

辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2、载脂蛋白A1、T-钙黏蛋白在早发型重度子痫前期期待治疗中的动态变化及其对终止妊娠的指导作用

目的探讨辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2(Th1/Th2)、载脂蛋白A1(ApoA1)、T-钙黏蛋白(T-cadherin)在早发型重度子痫前期(S-PE)期待治疗中的动态变化及其对终止妊娠的指导作用。方法选取2018年3月至2021年3月成都市双流区第一人民医院收治的88例早发型S-PE患者作为研究对象,根据期待治疗是否有效分为有效组(n=47)和无效组(n=41)。比较两组基线资料及治疗前后Th1/Th2、ApoA1、T-cadherin水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)分析治疗前Th1/Th2、ApoA1、T-cadherin水平预测治疗无效的价值。结果无效组治疗前后的Th1/Th2水平高于有效组,治疗前后的ApoA1、T-cadherin水平低于有效组(P<0.05);Th1/Th2、ApoA1、T-cadherin水平预测治疗无效的AUC分别为0.679、0.756、0.840,各指标联合预测为0.915。结论早发型S-PE患者治疗前Th1/Th2、ApoA1、T-cadherin水平与期待治疗效果有关,联合检测可作为预测疗效的有效方法,并可对终止妊娠起到指导作用。