急性髓系白血病中医证型与Dkk-3、Wif-1基因甲基化水平相关性研究

目的:研究急性髓系白血病(Acute Myeloid Leukemia,AML)患者不同中医证型与焦磷酸测序法检测的Dkk-3和Wif-1基因启动子甲基化水平的关系,比较不同证型Dkk-3和Wif-1基因甲基化水平与AML患者生存时间的差异,为AML中医辨证分型提供参考依据及评估预后。方法:选取45例2020年6月-2021年6月福建中医药大学附属人民医院血液病科门诊或住院初诊AML患者(病例组)和20例缺铁性贫血患者(对照组),比较焦磷酸测序法检测的两组Dkk-3、Wif-1基因甲基化表达水平差异,并比较组内气阴两虚证、瘀血痰结证、毒热炽盛证三种不同证型与Dkk-3和Wif-1基因启动子甲基化水平的关系,并以AML患者死亡或随访终点(1年)为终止时间点,比较各证型患者的生存时间差异。结果:AML患者中气阴两虚证者最多,瘀血痰结证者次之,毒热炽盛证者最少,各中医证型与性别、FAB分型、骨髓原始细胞比例的差异无统计学意义(P>0.05),但不同中医证型患者年龄的差异有统计学意义(P<0.05)。AML患者的Dkk-3、Wif-1基因甲基化表达水平均比对照组高,差异有统计学意义(P<0.01)。各证型AML患者Dkk-3基因甲基化表达水平的差异无统计学意义(P>0.05);各证型AML患者Wif-1基因甲基化表达水平的差异有统计学意义(P<0.05),气阴两虚证患者的表达水平最高,瘀血痰结证次之,毒热炽盛证最小。对AML患者进行随访,中位随访0.3~24个月,中位生存时间为(11.80±6.29)个月,各个证型患者总体生存时间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:AML患者的Dkk-3、Wif-1基因甲基化阳性率较无恶性血液病患者高,Dkk-3、Wif-1基因甲基化可能与AML发病有相关性。AML患者中医证型与Wif-1基因甲基化表达有相关性,气阴两虚证、瘀血痰结证患者的Wif-1甲基化表达明显高于毒热炽盛证患者,其可能可以作为AML中医辨证分型的参考指标。各中医证型AML患者生存时间的差异无统计学意义(P>0.05),今后应采用大样本、多中心的临床试验来进一步验证中医证型与生存时间的相关性。

SFRP1基因甲基化及其蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达

目的探讨SFRP1基因甲基化及其蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达情况。方法用免疫组化SP法和甲基化特异性PCR法检测60例非小细胞肺癌组织,21例肺良性疾病肺组织中SFRP1基因甲基化及SFRP1蛋白的表达情况。结果肺癌组织SFRP1基因甲基化阳性高于肺良性疾病肺组织,差异有显著性(P=0.001);SFRP1基因甲基化与非小细胞肺癌细胞分化程度及淋巴结转移情况有明显的相关性(P<0.05);非小细胞肺癌中SFRP1蛋白阳性率低于肺良性疾病肺组织,差异有显著性(P=0.004);SFRP1蛋白表达与非小细胞肺癌临床分期、细胞分化程度及淋巴结转移情况有明显的相关性(P<0.05);SFRP1甲基化和SFRP1蛋白表达缺失存在相关性(P=0.002)。结论 SFRP1基因甲基化可能是导致SFRP1蛋白表达降低的重要机制,进而导致非小细胞肺癌的发生发展。

PAX1基因甲基化定量检测在宫颈癌及癌前病变诊断中的应用价值

目的 探讨PAX 1基因甲基化定量检测在宫颈癌及癌前病变诊断中的应用价值。方法 100例高危型人乳头状瘤病毒(HPV)感染者为研究对象,依据病理分级不同及国际妇产科联盟(FIGO)对宫颈癌的临床分期准则分为正常宫颈组(25例)、低级别病变组(30例)、高级别病变组(35例)及癌变组(10例)。对四组患者收集宫颈组织标本、宫颈刮片,用反转录聚合酶链式反应(PCR)及焦磷酸测序技术定量分析PAX 1基因9个点甲基化水平。对比四组病变组织中HPV阳性率与PAX1基因甲基化发生率,宫颈刮片和宫颈组织中PAX1基因甲基化水平。结果 正常宫颈组、低级别病变组、高级别病变组、癌变组HPV阳性率分别为36.0%、80.0%、91.4%、100.0%,PAX1基因甲基化发生率分别为0、6.7%、40.0%、100.0%,四组对比,差异均有统计学意义(P<0.05)。四组宫颈刮片和宫颈组织中PAX1基因甲基化水平对比,差异均有统计学意义(P<0.05)。癌变组宫颈刮片和宫颈组织中PAX1基因甲基化水平均明显高于正常宫颈组、低级别病变组、高级别病变组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 在诊断高级别宫颈癌前病变方面定量检测宫颈组织内PAX1基因甲基化水平有效,且表达程度与疾病严重程度有关。

阴道镜与PAX1基因甲基化对宫颈上皮内瘤病变的临床应用价值研究

目的:探讨宫颈上皮内瘤变(CIN)患者使用阴道镜检查与PAX1基因甲基化检验的临床价值。方法:选取200例行宫颈疾病检查的女性患者展开研究,所有患者均实施单独阴道镜检查、单独PAX1基因甲基化检测和阴道镜检查+PAX1基因甲基化检测,观察其临床学应用价值,使用阴道镜检查和PAX1基因甲基化检验患者的宫颈病变,联合两种检查方式同时检验,以病理学检验结果作为金标准,比较3种检查方式的检验灵敏度、特异度、诊断符合率以及漏诊率。结果:阴道镜检查阳性结果为24例(占12%),PAX1基因甲基化检验阳性结果为20例(占10%),阴道镜+PAX1基因甲基化检验阳性结果为36例(占18%)。其中,阴道镜+PAX1基因甲基化检验的灵敏度为100%,明显高于其他两种检测方式,无漏诊率。应用PAX1基因甲基化检测方式诊断宫颈癌与CIN的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)为0.88,P<0.001。结论:PAX1基因甲基化检验诊断CIN疾病的效果较为显著,具有良好的临床应用价值,若在临床中联合阴道镜同时进行检查,可进一步提高诊断准确性。

PAX1基因甲基化用于子宫颈癌临床应用价值探讨

目的探讨PAX1基因甲基化、液基薄层细胞学、高危型人乳头瘤病毒(hrHPV),与HPV16或HPV18型阳性在女性患者宫颈脱落细胞中筛查宫颈鳞状上皮内病变的临床应用价值。方法选取2016年1月至2019年8月就诊于本院的女性患者465例,收集宫颈脱落细胞并行PAX1基因甲基化、液基薄层细胞学、高危型HPV检测(hrHPV)、(HPV16/18)检测,以阳性患者进行阴道镜下活检病理诊断为金标准,比较宫颈脱落细胞中不同检测方法学。结果 PAX1基因甲基化灵敏度、特异度分别为81.3%(95%CI:70.3%, 89.1%)和96.6%(95%CI:92.5%, 98.6%),四种检测比较中,PAX1具有最高特异度96.63%,细胞学与hrHPV检测特异度在17%~70%。细胞学(ASCUS+)的灵敏度为94.7%(95%CI:86.2%, 98.3%)显著高于PAX1基因甲基化检测(P=0.013),但ASCUS+的特异度为18.0%(95%CI:12.8%, 24.6%)显著低于PAX1基因甲基化检测(P<0.001)。以PAX1、HPV16/18与hrHPV作为ASCUS分流时,PAX1具最高特异性(100%at cut off CIN2与98.9%at cut off CIN3),其次为HPV16/18。结论本院结合细胞学与PAX1基因甲基化检测,可以降低HPV感染需长期随访人群的恐慌,此结果尤其对于育龄妇女或欲保留生育人群,可提供一种有效的检测与随访方法。

肝豆状核变性患者FBN1基因甲基化及蛋白表达水平与临床病理特征的相关性研究

目的探讨原纤维蛋白-1(fibrillin-1,FBN1)基因甲基化及蛋白表达水平与肝豆状核变性患者临床病理特征及预后的关系。方法选取2013年2月至2016年2月79例肝豆状核变性患者肝病变组织为研究对象(肝豆状核变性组),选取其肝脏正常组织(距离病变组织>2 cm)作为正常对照组。采用直接测序法检测肝组织中FBN1基因甲基化水平,采用免疫组织化学法检测肝组织FBN1蛋白表达水平,收集患者年龄、性别、肝豆状核变性家族史、病程及天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、铜蓝蛋白(ceruloplasmin,CP)、尿铜(urine copper,u-Cu)水平等基线资料;采用卡方检验分析肝豆状核变性患者FBN1基因甲基化及蛋白表达水平与临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier法分析肝豆状核变性患者FBN1基因甲基化及蛋白表达水平与预后的关系;采用多因素Cox回归分析影响肝豆状核变性患者预后的因素。结果肝豆状核变性组FBN1蛋白阳性表达率显著高于正常对照组,而FBN1基因甲基化率显著低于正常对照组(P<0.05)。FBN1基因甲基化及蛋白表达与性别、病程及AST、ALT水平无相关性(P>0.05),与年龄、肝豆状核变性家族史及CP、u-Cu水平有相关性(P<0.05)。FBN1蛋白阳性表达肝豆状核变性患者5年生存率低于FBN1蛋白阴性表达患者(χ^(2)=6.269,P<0.05),而FBN1基因甲基化肝豆状核变性患者5年生存率高于FBN1基因非甲基化患者(χ^(2)=5.281,P<0.05)。FBN1蛋白阳性表达是影响肝豆状核变性患者死亡的独立危险因素(P<0.05),FBN1基因甲基化是影响肝豆状核变性患者死亡的保护因素(P<0.05)。结论FBN1基因非甲基化及蛋白高表达可能与肝豆状核变性的发生、发展及预后有关。

阿帕替尼靶向治疗联合TACE对晚期原发性肝癌患者的疗效及外周血RASSF1A基因甲基化的影响

目的分析阿帕替尼靶向治疗联合肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗晚期原发性肝癌患者疗效及对外周血Ras相关区域家族1A(RASSF1A)基因甲基化的影响。方法64例晚期肝细胞癌(HCC)患者分为单一组(n=32)与联合组(n=32),单一组行TACE治疗,联合组行阿帕替尼靶向治疗联合TACE治疗,两组患者均行标准疗程TACE治疗,于治疗1个月(1 mo)及3个月(3 mo)评估临床疗效,比较治疗前后肝功能[白蛋白(ALB)、总胆红素(TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)]、血清标志物[甲胎蛋白(AFP)、血管内皮生长因子(VEGF)、半胱氨酰天冬氨酸蛋白酶8(Caspase-8)]、外周血RASSF1A基因甲基化、不良反应及TACE抵抗发生率。结果单一组治疗3 mo时的客观缓解率(ORR)较治疗1 mo时下降(P<0.05),且低于联合组(P<0.05);两组患者治疗3 mo时的ALT、AST均较治疗前下降(P<0.05),且联合组低于单一组(P<0.05),两组患者治疗3 mo时的AFP均较治疗前显著降低(P<0.05);联合组治疗3 mo时的VEGF较治疗前降低(P<0.05)、Caspase-8较治疗前升高(P<0.05),联合组治疗3 mo时AFP、VEGF低于单一组(P<0.05),Caspase-8高于单一组(P<0.05);联合组治疗3 mo时RASSF1A基因甲基化阳性率明显低于治疗前(P<0.05),而单一组组内比较差异无统计学意义(P>0.05);联合组手足综合征、高血压发生率高于单一组(P<0.05),TACE抵抗发生率略低于单一组、但差异无统计学意义(P>0.05)。结论阿帕替尼靶向治疗联合TACE对晚期HCC效果及安全性良好,且对减少RASSF1A基因甲基化有利。

宫颈癌前病变PAX1基因DNA甲基化检测与HPV-DNA分型检测的效果比较

目的 分析PAX1基因甲基化与HPV-DNA分型检测在宫颈癌前病变诊疗中的特征及潜在关联。方法 选择2021-06至2022-03在解放军总医院第三医学中心妇产科行液基薄层细胞检测(TCT)和人乳头瘤病毒-DNA(HPV-DNA)分型检测的患者。纳入研究TCT结果异常,意义不明的非典型鳞状细胞(ASCUS)和(或)HR-HPV阳性患者194例,宫颈组织病变筛查结果异常并转诊阴道镜下取病理活检的患者共130例。所有患者进行TCT、HPV-DNA分型检测、定量PAX1基因甲基化检测。结果 CIN3+(CIN3和宫颈癌)患者的PAX1基因甲基化数值显著高于正常、CIN1、CIN2患者,按照活检病理级别从高到低PAX1基因甲基化数值依次分别为18.21(17.56,18.66)和20.5(20.07,20.80),20.41(20.19,20.72),20.21(19.77,20.42);TCT结果提示ASCUS的患者共45例,CIN2+(CIN2、CIN3和宫颈癌)PAX1基因甲基化数值显著高于正常/CIN1,按照活检病理级别从高到低PAX1基因甲基化数值依次分别为18.87(17.80,20.26)和20.51(20.19,20.73);HPV16、18阳性患者的PAX1基因甲基化数值均显著高于非HPV16/18阳性患者,HPV16阳性和高危型非HPV16/18阳性患者PAX1基因甲基化数值分别为19.10(17.97,19.88)和20.33(20.00,20.50),HPV18阳性和非HPV16/18阳性患者PAX1基因甲基化水平分别为19.49(18.65,20.31)和20.33(20.00,20.50)。但单一HPV16阳性与单一HPV18阳性患者的PAX1基因甲基化数值相比,二者间的数值则无统计学差异。结论 PAX1基因甲基化检测有助于早期识别CIN3+和ASCUS宫颈高级别病变,也有助于降低ASCUS患者的阴道镜转诊率。

PAX1基因启动子甲基化用于子宫颈癌临床应用价值探讨

目的探讨PAX1基因甲基化、宫颈液基细胞学(LBC)、高危型人乳头瘤病毒(hrHPV)与HPV16或HPV18型阳性在妇女宫颈脱落细胞中筛查宫颈鳞状上皮内病变的临床应用价值。方法选取2016年1月至2016年12月就诊于福州市第一医院的妇女103例,收集宫颈脱落细胞并行PAX1基因甲基化、LBC、hrHPV检测、HPV16或HPV18型检测,以阴道镜下活检病理诊断为金标准,比较子宫颈脱落细胞中不同检测方法学。结果 PAX1基因甲基化的灵敏度、特异度与准确度分别为78.6%、97.8%和95.1%。PAX1基因甲基化作为非典型鳞状上皮细胞(ASCUS)与hrHPV分流生物标记时具有最佳临床应用结果。以hrHPV作为第一线筛查时,PAX1基因甲基化较LBC细胞学法减少20.6%阴道镜检率,以LBC、hrHPV、PAX1基因甲基化比较医院机会性筛查的经济分析中得到PAX1基因甲基化挽救一个寿命成本较其他两种方法学筛查成本低,为11 942元。结论 PAX1基因甲基化可用于监测宫颈癌病变,并具较低筛查的经济成本,可作为细胞学ASCUS与hrHPV筛查分流的临床应用。

LKB1基因启动子甲基化与一例Peutz–Jegher综合征癌变的发生

目的:探讨一例Peutz-Jeghers息肉癌变的病因学分子机制。方法:提取患者大肠正常粘膜、非癌变息肉组织和癌变息肉组织石蜡切片的DNA,采用MSP检测LKB1基因启动子区域甲基化,免疫组化检测LKB1基因在组织中的表达。结果:发生癌变的息肉组织DNA检测到LKB1基因的甲基化,LKB1基因在息肉和正常肠粘膜组织未见甲基化。结论:甲基化状态的改变导致的基因表达沉默可能是其息肉发生癌变的机制。

新疆维吾尔族妇女宫颈癌组织中WT1基因启动子甲基化分析

目的探讨WT1基因启动子甲基化与新疆维吾尔族妇女宫颈癌的相关性。方法采用PCR方法检测HPV16和HPV18感染率;甲基化特异性PCR方法检测43例新疆维吾尔族妇女正常宫颈组织、30例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和48例宫颈癌组织的WT1基因启动子两个区域甲基化状况,并分析启动子甲基化与宫颈癌的相关性。结果正常宫颈组、CIN和宫颈癌组中的WT1基因甲基化率分别为6.98%、36.67%和89.58%;HPV16和HPV18的感染率分别为13.95%、33.33%和68.75%,3组差异均有统计学意义(P<0.01)。WT1甲基化与HPV16和HPV18感染相关(P<0.05)。结论 WT1基因启动子甲基化与HPV16和HPV18感染相关且与维吾尔族宫颈癌发生相关。

新疆维吾尔族妇女子宫颈癌DBC1基因启动子甲基化分析

背景与目的:近年来,表观遗传学研究已经成为癌症研究的一个新方向。大量研究结果显示,表观遗传修饰的异常改变与癌症有着十分密切的联系,全基因组范围内的表观遗传修饰改变已经成为癌症的新标志。该研究旨在探讨膀胱癌缺失基因1(deleted in bladder cancer 1,DBC1)启动子甲基化与新疆维吾尔族妇女子宫颈癌的关系及与人类乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染的相关性,分析其能否作为高敏感性及特异性的工具用于子宫颈癌筛选。方法:用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法对43例正常子宫颈组织、35例子宫颈上皮内瘤样变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)组织以及54例子宫颈癌组织进行HPV16、HPV18感染的检测;运用甲基化特异性PCR方法检测上述组织DBC1基因启动子甲基化状况;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)方法检测10例甲基化阴性的正常子宫颈组织和10例甲基化阳性的子宫颈癌组织中DBC1基因m RNA表达情况。结果:正常子宫颈组织、CIN组织及子宫颈癌组织中HPV16的感染率分别为18.6%、34.3%和68.5%;HPV18的感染率分别为2.3%、8.6%和16.7%;DBC1基因发生甲基化率分别为23.3%、40.0%和87.0%;在79例高级别宫颈损伤及子宫颈癌样本中,其中50例HPV16/18感染阳性,29例HPV16/18感染阴性;阳性组中DBC1基因发生甲基化率88.0%,阴性组甲基化率为55.2%(P<0.05);10例甲基化阳性子宫颈癌组织中DBC1基因m RNA表达水平明显低于10例甲基化阴性正常子宫颈组织(P<0.05)。结论:DBC1基因甲基化可能作为新疆维吾尔族妇女子宫颈癌的分子标志物,结合HPV16/18感染检测有助于子宫颈癌的诊断。

RASSF1A基因甲基化和SCC联合检测在非小细胞肺癌转移监测中的应用

目的探讨Ras相关结构域蛋白家族1A(ras association domain family 1A,RASSF1A)基因甲基化和鳞状上皮细胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC)联合检测对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者术后转移评价的价值。方法选择2014年1月至2015年6月在龙岩市第二医院就诊的57例NSCLC患者,测定患者术前血浆RASSF1A基因甲基化、血清SCC水平,同时检测患者术后肿瘤组织RASSF1A基因甲基化水平。出院后随访12个月,根据随访结果分为转移组和非转移组,分析两组血浆及组织RASSF1A基因甲基化阳性率、术前血清SCC水平与术后转移的关系。结果发生转移的患者术前血清SCC水平、术后组织和术前血浆RASSF1A甲基化阳性率均高于未发生转移的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。根据肿瘤组织RASSF1A基因甲基化、术前血清SCC水平对NSCLC患者术后转移判定的ROC曲线,NSCLC患者肿瘤组织RASSF1A基因甲基化、术前血清SCC水平符合预测NSCLC术后转移的条件。将SCC水平4.05 ng/m L、RASSF1A甲基化阳性作为危险分层界值,绘制Kaplan-Meier生存曲线显示,高危组与低危组两组术后转移比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 NSCLC患者肿瘤组织RASSF1A基因甲基化、术前血清SCC水平越高,发生术后转移的风险越高,检测NSCLC患者肿瘤组织RASSF1A基因甲基化、术前血清SCC水平对NSCLC患者危险分层及术后转移评估具有一定的临床价值。

胃癌患者CDH1基因甲基化与幽门螺旋杆菌感染的相关性研究

目的探讨胃癌患者中CDH1基因甲基化与幽门螺杆菌感染之间的相关性,为临床诊断该病提供参考。方法选取医院2014年1月-2015年12月62例胃癌患者为研究对象,选择胃癌组织作为观察组,胃癌周围的正常胃组织为对照组,采取PCR法测定两组CDH1基因甲基化情况,观察其表达与幽门螺杆菌感染相关性,数据采用SPSS19.0软件进行统计分析。结果 CDH1基因甲基化阳性率观察组为72.6%,高于对照组的11.3%,差异有统计学意义(P<0.05);CDH1基因甲基化阳性表达与胃癌患者的年龄、肿瘤组织分化程度和淋巴结转移以及TNM分期有关,差异有统计学意义(P<0.05);幽门螺杆菌阳性患者CDH1基因甲基化阳性率为90.5%,高于幽门螺杆菌阴性患者35.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CDH1基因甲基化在胃癌的发生发展中起到关键性的作用,且表达与幽门螺杆菌感染有着紧密的联系。

胆囊癌患者癌组织及其血清CDO1基因启动子甲基化水平变化及与预后的关系研究

目的:研究胆囊癌患者癌组织及血清半胱氨酸双加氧酶-1(CDO1)基因启动子甲基化水平与预后的关系。方法:回顾性分析2016年1月至2017年1月内蒙古包钢医院收治的90例胆囊癌患者的临床资料,依据患者预后情况分为预后良好组(生存时间≥3年,n=40)与预后不良组(生存时间<3年,n=50)。比较两组临床资料(性别、年龄、淋巴结转移情况、组织学类型、TNM分期、肝脏侵犯及胆管侵犯情况)及癌组织和血清CDO1基因启动子甲基化情况,采用单因素及多因素Logistic回归分析法明确胆囊癌患者预后不良的危险因素,并对癌组织及血清CDO1基因启动子完全、部分、无甲基化患者3年生存率进行分析。结果:预后不良组女性、年龄>60岁、淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、癌组织及血清CDO1基因启动子完全甲基化所占百分比均显著高于预后良好组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,上述因素均为胆囊癌患者预后不良的独立危险因素(均P<0.05)。癌组织及血清CDO1基因启动子无甲基化患者3年生存率高于癌组织及血清CDO1基因启动子完全、部分甲基化患者。结论:CDO1基因启动子甲基化水平与胆囊癌预后有关,其可能作为预测胆囊癌患者预后的生物学指标。

食管鳞癌中hMLH1、E-cadherin、p16^INK4a基因启动子甲基化及其意义

背景与目的:目前认为抑癌基因启动子甲基化导致转录抑制是恶性肿瘤发生的重要机制之一,hMLH1、E-cadherin及p16INK4a基因在多种恶性肿瘤中都已被证实存在较高频率的甲基化。本研究通过检测食管鳞癌组织及癌旁组织中hMLH1、E-cadherin、p16INK4a基因启动子甲基化的发生情况,探讨hMLH1、E-cadherin、p16INK4a基因启动子甲基化在食管鳞癌发生发展中的作用。方法:采用酚-氯仿法提取105例食管鳞癌组织及癌旁组织的基因组DNA,应用甲基化特异性PCR对所提DNA进行hMLH1、E-cadherin、p16INK4a基因甲基化检测。采用EnVison免疫组织化学二步法对癌组织中上述3种基因蛋白表达进行检测。结果:癌组织中E-cadherin、hMLH1、p16INK4a基因启动子甲基化的阳性率分别为57.1%(60/105)、20.9%(22/105)和50.5%(53/105),而癌旁食管组织中相应的3个基因的甲基化率分别为10.5%(11/105)、1.9%(2/105)和7.6%(8/105),均显著低于癌组织。E-cadherin(P=0.021)及p16INK4a(P=0.026)基因甲基化与蛋白表达缺失密切相关,而hMLH1基因甲基化与蛋白表达无显著相关性。E-cadherin基因启动子甲基化与淋巴结转移有关(P=0.016),p16INK4a基因启动子甲基化与低分化癌有关性(P=0.024)。hMLH1基因甲基化与各项临床病理特征均无关。结论:食管鳞癌中p16INK4a基因启动子甲基化与相应蛋白表达缺失密切相关,且在低分化癌中更多见;E-cadherin基因启动子甲基化与相应蛋白质表达缺失有相关性,并且有淋巴结转移多见的显著特征,这2个基因的甲基化位点与食管鳞癌密切相关。hMLH1基因甲基化可能并不直接参与食管鳞癌的发生、发展。

AGTR1基因甲基化及其与超重、腹型肥胖联合作用对糖尿病患病影响

目的了解AGTR1基因甲基化及其与超重、腹型肥胖联合作用对糖尿病患病的影响,为糖尿病的防治提供科学依据。方法于2015年4—9月采用分层随机抽样方法在福建省福清市、长乐市和南安市抽取60个社区共8 371名常住居民进行问卷调查和体格检查;采用高分辨率熔解曲线(HRM)方法抽取其中在福清市3个社区按性别、年龄、文化程度、婚姻状况进行1:4病例对照匹配的205名居民进行AGTR1基因甲基化水平测定,并采用叉生分析表结合logistic回归模型与Delta法分析AGTR1基因甲基化与超重、腹型肥胖联合作用对糖尿病患病的影响。结果福建省福清市、长乐市和南安市8 371名居民中,患糖尿病者705例,糖尿病患病率为8.42%;经性别、年龄、文化程度、婚姻状况、吸烟情况、饮酒情况、参加体育锻炼情况、规律饮食情况等混杂因素调整后,多因素非条件logistic回归分析结果显示,超重者患糖尿病的风险为正常体重者的1.999倍(OR=1.999,95%CI=1.671~2.392),腹型肥胖者患糖尿病的风险为非腹型肥胖者的1.272倍(OR=1.272,95%CI=1.060~1.527);经吸烟情况、饮酒情况、参加体育锻炼情况、规律饮食情况、体质指数(BMI)、腰臀比(WHR)等混杂因素调整后,多因素条件logistic回归分析结果显示,AGTR1基因低甲基化者患糖尿病的风险为高甲基化者的2.222倍(OR=2.222,95%CI=1.093~4.518);联合作用分析结果显示,超重且AGTR1基因低甲基化者患糖尿病的风险为非超重且AGTR1基因非低甲基化者的3.584倍(OR=3.584,95%CI=1.175~10.928),腹型肥胖且AGTR1基因低甲基化者患糖尿病的风险为非腹型肥胖且AGTR1基因非低甲基化者的4.141倍(OR=4.141,95%CI=1.138~15.075);交互作用分析结果显示,超重和腹型肥胖与AGTR1基因低甲基化均不存在相乘和相加交互作用(均P> 0.05)。结论 AGTR1基因低甲基化水平与超重、腹型肥胖联合作用均可增加糖尿病的患病风险。

配对盒家族基因1甲基化与人乳头瘤病毒E6/E7mRNA检测在子宫颈病变患者诊断中的应用

目的:分析配对盒家族基因1(PAX1)甲基化检测与人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA检测在子宫颈癌及癌前病变患者诊断中的临床应用价值。方法:回顾性分析2018年3月至2019年9月在郑州大学第一附属医院就诊的子宫颈病变406例患者。根据病理检查结果分为4组:子宫颈炎组(145例)、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)组(76例)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)组(119例)和子宫颈癌组(66例)。所有患者均行PAX1甲基化检测,其中同时行HPV E6/E7mRNA检测的患者有159例,比较两种检测方法在诊断子宫颈癌及癌前病变(高级别子宫颈上皮内瘤变)患者中的诊断效能。结果:子宫颈炎组、LSIL组、HSIL组、子宫颈癌组的PAX1甲基化率分别为10.3%、13.2%、39.5%、83.3%,HPV E6/E7mRNA阳性率分别为50.0%、68.6%、84.0%、87.8%,差异均有统计学意义(P<0.05)。两种方法单独用于诊断子宫颈癌及癌前病变时,HPV E6/E7mRNA的敏感度为86.36%,特异度为43.01%;PAX1甲基化的敏感度为55.14%,特异度为88.69%;两者联合检测时敏感度为80.30%,特异度为88.18%。结论:PAX1甲基化在诊断子宫颈癌及癌前病变患者中具有较高的特异度,且在联合HPV E6/E7mRNA检测时具有更高的临床应用价值。

乳腺癌WIF-1基因表达及其临床病理特征与该基因启动子区域甲基化的关联

目的:研究WIF-1(Wnt inhibitory factor-1)mRNA在乳腺癌组织中的表达及其启动子区域甲基化情况,进一步探讨WIF-1基因甲基化与乳腺癌临床病理特征的关系。方法:收集2009年9月1日至2009年12月30日青岛大学附属医院乳腺外科手术切除新鲜组织标本69例,其中良性病变组织9例,乳腺癌及癌旁组织各30例,应用RT-PCR及甲基化特异性PCR(methyla tion specific PCR,MSP)检测乳腺癌组织、相应癌旁组织和乳腺良性病变组织中WIF-1mRNA表达及其启动子甲基化情况。结果:癌组织中WIF-1基因表达率明显低于相应癌旁组织及乳腺良性病变组织,具有显著性差异(χ2=41.786,P<0.05);与其他两组相比甲基化率在癌组织中明显升高(矫正χ2=16.484,P<0.05);WIF-1基因表达下降与其异常甲基化存在明显关联(P=0.023);WIF-1异常甲基化与乳腺癌发病年龄、肿瘤分级、组织分型和淋巴结转移无相关性(P>0.05)。结论:异常甲基化可能是乳腺癌WIF-1基因表达下降的重要原因,是乳腺癌发生、发展的重要机制。

蒙古族结核病患者CYP2E1基因多态性及其启动子区甲基化水平与抗结核药物致肝损伤的关系

目的抗结核药物致肝损伤(ADIH)的发生与CYP2E1基因多态性及甲基化水平是否相关的研究甚少。文中旨在探讨蒙古族结核病患者CYP2E1基因多态性及启动子区甲基化水平与ADIH的关系。方法选取2015年11月至2018年6月于内蒙古通辽市结核病防治所标准化治疗的135例蒙古族结核病患者。根据ADIH判定标准选取发生肝损伤的蒙古族结核病患者为ADIH组(n=45),按照1∶2比例匹配未发生肝损伤的蒙古族结核病患者为对照组(n=90)。进行DNA提取,聚合酶链反应(PCR)扩增CYP2E1基因,确定CYP2E1 rs2031920基因型,分析CYP2E1基因多态性及启动子区甲基化水平与ADIH之间的关系。结果CYP2E1 rs2031920基因型、C1和C2基因频率在ADIH组和对照组中分布差异无统计学意义(P>0.05)。ADIH组CYP2E1基因启动子区总体甲基化水平较对照组明显降低[(0.711±0.085)vs(0.759±0.062)],差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归显示CYP2E1基因启动子区总体甲基化水平是ADIH发生的影响因素(P<0.005),甲基化水平每升高0.1个单位,ADIH发生风险降低0.388倍,其OR(95%CI)值为0.388(0.204~0.739)。结论蒙古族ADIH患者的CYP2E1基因启动子区总体甲基化水平降低,但CYP2E1基因多态性与ADIH的发生无关,提示CYP2E1基因甲基化可应用于结核病患者ADIH的预防和治疗。