血清NT-proBNP、HMGB1及sTREM-1水平在脓毒症急性肺损伤预后评估中的价值

目的:分析血清N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、可溶性髓系细胞触发受体-1(sICAM-1)水平与在脓毒症急性肺损伤(ALI)预后评估中的价值。方法:选取104例脓毒症ALI患者为研究对象(ALI组),以肺部超声评分(LUS)将其分为轻度组(n=50)、中度组(n=36)、重度组(n=18);另选取80例单纯性脓毒症患者为对照组。采用酶联免疫吸附法检测血清NT-proBNP、HMGB1、sICAM-1水平,以脓毒症ALI患者28 d预后情况将其分为生存组和死亡组,绘制受试者工作特征曲线(ROC)评估NT-proBNP、HMGB1、sICAM-1及联合预测预后的价值。结果:脓毒症ALI组NT-proBNP、HMGB1、sTREM-1水平均高于对照组(P<0.05);不同严重程度的脓毒症ALI组患者NT-proBNP、HMGB1、sTREM-1值比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且均表现为脓毒症ALI轻度组患者<中度组<重度组(P<0.05);Spearman相关性分析显示,NT-proBNP、HMGB1、sTREM-1与严重程度正相关(P<0.05);生存组NT-proBNP、HMGB1、sTREM-1水平均低于死亡组(P<0.05),三者联合检测预测预后的曲线下面积高于单一指标预测。结论:脓毒症ALI患者血清NT-proBNP、HMGB1、sTREM-1水平较高,三者联合检测对于预后有较高的评估价值。

儿童肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液CARDS TX、HMGB1、TLR2表达及临床意义

目的研究肺炎支原体肺炎(MPP)患儿肺泡灌洗液中社区获得性呼吸窘迫综合征毒素(CARDS TX)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)、Toll样受体2(TLR2)表达,探讨其在MPP发病中的临床意义。方法回顾性分析55例MPP病例组及20例对照组临床资料,同时检测两组支气管肺泡灌洗液(BALF)中CARDS TX、HMGB1、TLR2、TLR4、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)及髓样分化因子88(MyD88)表达,体外检测不同浓度CARDS TX刺激下HMGB1、TLR2的表达并进行比较。结果与对照组相比,MPP组LYM绝对值计数、PA、CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、CD3-CD19^(+)、NK cell、CD19^(+)CD23^(+)明显下降,CRP、LDH、D-二聚体、IgA、IgG、IgM、CARDS TX、HMGB1、TLR2、MyD88均升高,差异有统计学意义(P<0.05或0.001)。CARDS TX刺激后HMGB1、TLR2的表达升高,且呈正相关,差异有统计学意义(P<0.001)。结论CARDS TX可能通过HMGB1-TLR2-MyD88途径参与肺炎支原体(MP)的致病。

慢性间断缺氧通过上调大鼠海马HMGB1和NF-κB损伤学习记忆

目的:探索慢性间断缺氧(CIH)导致大鼠学习记忆功能障碍,以及对海马区高迁移率族蛋白1(HMGB1)和核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法:制作CIH大鼠模型,40只SD大鼠分为常氧组(normoxia)、缺氧4周组(CIH4组)、缺氧8周组(CIH8组)和缺氧12周组(CIH12组)。采用Morris水迷宫评估大鼠学习记忆能力,免疫组织化学染色和ELISA法检测大鼠海马区HMGB1和NF-κB的表达。结果:与常氧组相比,CIH12和CIH8组的逃避潜伏期延长,穿越平台次数和平台所在象限停留时间显著缩短,CIH4组的无显著差异。另外,常氧组海马区HMGB1和NF-κB的表达未见明显表达,CIH4组可见少许表达,CIH8组和CIH12组可见明显表达,同时CIH12组的表达显著高于CIH8组。结论:CIH可导致大鼠的学习记忆功能下降,且间断缺氧时间越长对其学习记忆功能的影响越显著。此外,CIH还导致海马区HMGB1和NF-κB的表达水平升高,并且缺氧12周比8周增加更为明显。

PCT、sTREM-1、HMGB1对重症肺炎合并呼吸衰竭患者预后的预测价值

目的探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)、可溶性髓系细胞触发受体-1(soluble myeloid cells trigger receptor-1,sTREM-1)、降钙素原(procalcitonin,PCT)对重症肺炎合并呼吸衰竭患者的预后预测价值。方法选取2020年4月—2023年4月延边大学附属医院收治的78例重症肺炎合并呼吸衰竭患者根据治疗情况将其分为治疗无效组(n=44)与治疗有效组(n=34)。观察2组患者的一般资料、PCT、sTREM-1、HMGB1水平,绘制PCT、sTREM-1、HMGB1及其联合的ROC曲线;分析3项血清指标及其联合与疾病预后的关系。结果治疗无效组呼吸频率、平均动脉压、急性生理与慢性健康状况评分、序贯器官衰竭评分、CRP水平与治疗有效组相应值相比,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗无效组PCT、sTREM-1、HMGB1均高于治疗有效组,差异有统计学意义(P<0.05);3种指标联合的AUC值为0.958,95%CI0.920~0.995,敏感度为97.70%,特异度为71.50%,截断值为0.008。结论PCT、sTREM-1、HMGB1三者联合检验对重症肺炎合并呼吸衰竭患者的预后预测价值,其敏感度与特异度较高。

lncRNA MALAT1/HMGB1在缺血后处理减轻缺血再灌注损伤中的作用

目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肺腺癌转录子1(MALAT1)以及下游调控蛋白高迁移率族蛋白B1(High-mobility group protein box-1,HMGB1)在缺血后处理降低大鼠心肌缺血-再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,IRI)中的作用。方法将24只大鼠饲养7天后,随机分成3组:假手术(Sham)组、缺血再灌注(ischemia/reperfusion,IR)组、缺血后处理(ischemic post-conditioning,IPO)组。模型构建完毕24 h进行检测大鼠血清中心肌肌钙蛋白I(cTnI)和白介素6(IL-6)表达水平,取材检测大鼠心肌梗死面积,检测大鼠心肌组织中MALAT1转录表达水平的差异,HMGB1、Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)蛋白含量差异。结果与Sham组比较,IR、IPO组血清中cTnI、IL-6水平明显升高,心肌梗死面积明显增加,心肌组织中MALAT1表达水平显著上调,HMGB1、TLR4水平明显升高(P<0.05)。与IR组比较,IPO组cTnI浓度显著降低,心肌梗死面积显著减小,心肌组织中lncRNA-MALAT1相对表达量降低,HMGB1、TLR4蛋白含量降低(P<0.05)。结论及时的缺血后处理可有效减缓大鼠心肌缺血-再灌注的损伤程度,其相关机制可能与抑制MALAT1调节控制HMGB1、TLR4表达水平之间有一定的关联。

血清Ang-2、sTREM-1和HMGB1水平与老年重症肺炎合并呼吸衰竭短期转归的关系

目的分析血清Ang-2、sTREM-1和HMGB1水平与老年重症肺炎合并呼吸衰竭患者短期转归的关系。方法本研究纳入2020年1月~2023年5月老年重症肺炎合并呼吸衰竭患者共167例(浙江省永康市中医院70例,浙江省金华市中心医院97例)根据患者28天内转归情况(存活/死亡)将其分为存活组(122例)和死亡组(45例),分析两组血清Ang-2、sTREM-1和HMGB1水平差异,收集患者一般资料,采用多因素Logistic回归模型分析影响老年重症肺炎合并呼吸衰竭患者短期转归情况的影响因素,并采用受试者工作特征(ROC)曲线模型分析血清Ang-2、s TREM-1和HMGB1水平对患者短期转归情况的预测价值。结果本研究纳入患者至观察终点死亡45例,占比26.95%,其中患者死亡时间5~21天,中位时间9(7,14)天;死亡组血清Ang-2、sTREM-1和HMGB1水平高于存活组(均P<0.05);Logistic回归结果显示,吸烟史(β=3.071,OR=21.568,95%CI:1.405—331.121)、高APACHEⅡ评分(β=0.389,OR=1.475,95%CI:1.098—1.982)、高BNP水平(β=0.014,OR=1.014,95%CI:1.007—1.022)、高PCT水平(β=1.748,OR=5.744,95%CI:1.940—17.006)、低PAB水平(β=-0.051,OR=0.950,95%CI:0.914—0.988)、治疗前高Ang-2水平(β=2.381,OR=10.816,95%CI:1.070—109.340)、治疗前高sTREM-1水平(β=0.186,OR=1.204,95%CI:1.068—1.359)、治疗前高HMGB1水平(β=0.238,OR=1.269,95%CI:1.067—1.509)是老年重症肺炎合并呼吸衰竭患者28天内死亡的危险因素(P<0.05);ROC曲线结果显示,治疗前Ang-2水平、治疗前sTREM-1水平、治疗前HMGB1水平及三者联合AUC分别为0.790、0.904、0.917、0.981,敏感度分别为93.3%、77.8%、84.4%、68.9%;特异度分别为87.7%、86.9%、90.2%、94.3%。结论吸烟史、高APACHEⅡ评分、高BNP水平、高PCT水平、低PAB水平、治疗前高Ang-2水平、治疗前高sTREM-1水平、治疗前高HMGB1水平是老年重症肺炎合并呼吸衰竭患者28天内死亡的危险因素。临床Ang-2、sTREM-1及HMGB1水平对老年重症肺炎合并呼吸衰竭患者的28天内转归情况具有一定预测价值。

血清hs-CRP、HMGB1、sTREM-1与革兰阴性菌肺部感染患者亚胺培南治疗效果的关系

目的 分析研究血清超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)与可溶性人髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)与革兰阴性菌肺部感染患者亚胺培南治疗效果的关系。方法 选取2021年1月至2023年4月安徽省和县人民医院收治的100例革兰阴性菌肺部感染患者作为研究对象,对患者使用亚胺培南治疗7 d,根据治疗效果将患者分为有效组(n=71)与无效组(n=29)。比较两组治疗前后的hs-CRP、HMGB1与sTREM-1水平;采用多因素Logistic回归分析革兰阴性菌肺部感染患者亚胺培南治疗效果的影响因素,并绘制ROC曲线分析治疗前血清hs-CRP、HMGB1、sTREM-1水平对革兰阴性菌肺部感染患者亚胺培南治疗效果的预测价值。结果 有效组治疗前的血清hs-CRP、HMGB1、sTREM-1水平均低于无效组,差异均具有统计学意义(t=8.125、6.111、5.863,均P<0.05);有效组治疗后的血清hs-CRP、HMGB1、s TREM-1水平均低于无效组,差异均具有统计学意义(t=9.469、11.563、9.607,均P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,治疗前hs-CRP水平升高(OR=1.941)、HMGB1水平升高(OR=2.100)及sTREM-1水平升高(OR=1.972)均是革兰阴性菌肺部感染患者亚胺培南治疗效果的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,治疗前血清hs-CRP、HMGB1、sTREM-1水平及联合评估革兰阴性菌肺部感染患者亚胺培南治疗效果优于单一检测(P<0.05)。结论 血清hs-CRP、HMGB1、sTREM-1水平与革兰阴性菌肺部感染患者亚胺培南治疗效果密切相关。

EPO对糖尿病肾病大鼠NK细胞活化性受体及HMGB1/Beclin-1信号通路的影响

目的:基于HMGB1/Beclin-1信号通路探究EPO对糖尿病肾病大鼠NK细胞活化性受体的作用机制。方法:40只SPF级SD雄性大鼠随机分为正常(A)组、模型(B)组、二甲双胍(C)组、EPO(D)组,每组10只,对B、C、D组采用高脂饲料及链脲佐菌素进行糖尿病肾病建模。建模成功后,对C组灌胃100 mg/kg二甲双胍,对D组腹腔内注射100 U/kg EPO,A组、B组同期灌胃等体积生理盐水;另取20只大鼠建模,建模成功后,随机分为E组、F组,E组灌胃给予30 mg/kg HMGB1抑制剂,F组灌胃给予30 mg/kg HMGB1抑制剂和腹腔内注射100 U/kg EPO;取HK-2细胞,分为高糖+HK-2细胞(HH)组、EPO+高糖+HK-2细胞(EH)组、甘草酸苷L+高糖+HK-2细胞(LH)组,葡萄糖培养后进行细胞实验。血糖仪检测大鼠血糖,全自动生化分析仪检测大鼠生化指标,PAS染色法检测大鼠肾组织病理形态,免疫印迹法检测HMGB1/Beclin-1蛋白表达,RT-PCR及免疫组化法检测NK细胞活化性受体表达。结果:与A组比较,B组血糖及血糖曲线、血液及尿液中BUN、Scr、UAlb含量、NKp30、NKp44、NKp46的mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05),体质量明显降低(P<0.05);与B组比较,C组、D组血糖及24 h尿量、血糖曲线、血液及尿液中BUN、Scr、UAlb含量、NKp30、NKp44、NKp46 mRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.05),体质量明显升高(P<0.05),肾脏病理学明显改善,且D组较C组变化显著(P<0.05);与A组比较,B组大鼠肾组织中HMGB1/Beclin-1蛋白表达显著升高(P<0.05),与B组相比,C、D、E、F组大鼠肾组织中HMGB1/Beclin-1蛋白表达均显著降低(P<0.05),且D组HMGB1/Beclin-1蛋白表达与C组相比降低明显(P<0.05),E组与D组无明显差异,F组较E组降低明显;HMGB1/Beclin-1蛋白表达与NKp30、NKp44、NKp46mRNA均呈正相关(P<0.05);与HH组相比,EH、LH组细胞增殖率显著升高(P<0.05),凋亡率及HMGB1/Beclin-1蛋白表达均显著降低(P<0.05),而LH组与EH组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:EPO可有效降低糖尿病肾病大鼠NK细胞活化性受体表达,抑制HMGB1/Beclin-1信号通路,提示EPO可能通过调控NK细胞活化性受体及HMGB1/Beclin-1信号通路发挥作用,而NK细胞活化性受体表达与HMGB1/Beclin-1信号通路呈正相关。

绞股蓝皂苷调节HMGB1-RAGE信号通路对骨肉瘤细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨绞股蓝皂苷(Gyp)调节高迁移率族蛋白B1-晚期糖基化终产物受体(HMGB1-RAGE)信号通路对骨肉瘤细胞恶性生物学行为的影响及其机制。方法使用不同浓度(0~400μmol/L)绞股蓝皂苷处理MG63细胞,CCK-8检测细胞活力。将MG63细胞分为对照组(Control组)、绞股蓝皂苷低、中、高浓度组(Gyp-L组、Gyp-M组、Gyp-H组,50、100、200μmol/L Gyp)、绞股蓝皂苷高浓度+过表达HMGB1阴性对照组(Gyp-H+pcDNA-NC组,200μmol/L Gyp+转染pcDNA-NC质粒)和绞股蓝皂苷高浓度+过表达HMGB1组(Gyp-H+pcDNA-HMGB1组,200μmol/L Gyp+转染pcDNA-HMGB1质粒)。Edu检测细胞增殖水平;Transwell小室和划痕愈合实验检测细胞侵袭和迁移能力;ELISA检测转化生长因子-β(TGF-β)、基质金属蛋白酶(MMP-9)和白介素-6(IL-6)水平;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测通路、凋亡及EMT相关蛋白。随后建立骨肉瘤移植小鼠模型,在体检验绞股蓝皂苷对骨肉瘤移植瘤生长的影响。结果25~400μmol/L的绞股蓝皂苷能降低MG63细胞活力。与Control组相比,Gyp-L组、Gyp-M组和Gyp-H组细胞Edu阳性率、细胞侵袭数、划痕愈合率、TGF-β、MMP-9和IL-6水平及Bcl-2、HMGB1、RAGE、N-cadherin和VEGF蛋白表达显著降低(P<0.05);细胞凋亡率及Bax和E-cadherin蛋白表达显著增加(P<0.05),且呈浓度依赖性。过表达HMGB1可部分逆转绞股蓝皂苷对骨肉瘤细胞恶性生物学行为的抑制作用(P<0.05)。小鼠移植瘤实验结果表明,绞股蓝皂苷可显著抑制小鼠骨肉瘤移植瘤的生长(P<0.05)。结论绞股蓝皂苷对骨肉瘤细胞恶性生物学行为的抑制作用可能与抑制HMGB1-RAGE信号通路有关。

急性冠脉综合征患者血清HMGB1、LP-PLA2、IMA的表达水平及其与预后的关系

目的探讨急性冠脉综合征(ACS)患者的血清高迁移率蛋白1(HMGB1)、脂蛋白相关磷脂酶A2(LP-PLA2)、缺血修饰蛋白(IMA)的表达水平及其与预后的相关性。方法选取2020年1~12月期间西安高新医院收治的116例ACS患者作为观察组,选取同期体检中心体检健康者100例作为对照组。比较两组受检者的血清HMGB1、LP-PLA2、IMA的表达水平,利用受试者工作曲线(ROC)分析其诊断ACS的效能,采用Pearson相关性分析HMGB1、LP-PLA2、IMA与心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)的相关性。根据患者预后情况分为预后不良组34例和预后良好组82例,采用多因素Logistic回归分析影响患者预后不良的独立危险因素。结果观察组患者的血清HMGB1、LP-PLA2、IMA、cTnT、CK-MB水平分别为(9.21±1.77)ng/mL、(330.58±65.7)g/mL、(85.47±17.22)U/mL、(3.23±0.78)μg/L、(23.48±5.39)U/L,明显高于对照组的(3.25±0.48)ng/mL、(131.47±32.29)g/mL、(52.37±9.79)U/mL、(0.05±0.01)μg/L、(2.14±0.55)U/L,差异均有统计学意义(P<0.05);三者联合检测的曲线下面积(AUC)为0.863,灵敏度和特异度分别为88.1%、90.0%;经Pearson相关性分析结果显示,HMGB1、LP-PLA2、IMA与cTnT、CK-MB呈正相关(P<0.05);预后不良组患者的HMGB1、LP-PLA2、IMA分别为(10.56±2.01)ng/mL、(378.44±72.69)ng/mL、(96.33±20.02)U/mL,明显高于预后良好组的(8.64±1.59)ng/mL、(310.73±61.88)ng/mL、(80.96±15.52)U/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);经Logistic回归分析结果显示,HMGB1、LP-PLA2、IMA是ACS患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论急性冠脉综合征患者血清HMGB1、LP-PLA2、IMA表达水平明显升高,是患者预后不良的独立危险因素,联合检测有助于早期诊断和预后评估。

红鳍东方鲀AFP、CIRP、HMGB1和YB-1基因对低温胁迫的响应

鱼类的生长和繁殖受环境条件的调节,冬季的低温会给红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)产业带来不利影响。为研究红鳍东方鲀耐低温机制,本研究利用实时荧光定量PCR技术,分析抗冻蛋白(AFP)基因、冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)基因、高速迁移蛋白家族蛋白(HMGB1)基因、Y-box结合蛋白(YB-1)基因在不同温度条件下(18℃、13℃、8℃和5℃),在红鳍东方鲀的肝、脾、肾、脑、心、肠、肌肉、性腺和皮肤中的表达情况。结果显示,AFP基因呈广泛性表达,在肌肉中表达量最高(P<0.05),随着温度的降低,各组织中AFP基因的表达量基本呈显著升高的趋势,在5℃组达到最高值,显著高于对照组(P<0.05)。CIRP基因在肌肉中表达量最高(P<0.05),随着温度的降低,各组织中CIRP基因的表达量的升降程度有所不同,在肝、肾、脑、心、肠、皮肤中的表达量呈先升高后降低再升高的趋势,在脾、肌肉和性腺中表达量呈上升趋势。HMGB1基因在肌肉中表达量最高(P<0.05),在脑、心、肝和皮肤中也有较高的表达量;随着温度的降低,除肝脏外,各组织中HMGB1基因的表达量基本呈先升高后降低的趋势,并在8℃组达到最大值,显著高于其他各组(P<0.05)。YB-1基因在肌肉中表达量最高(P<0.05),在其他组织中表达量较低;随着温度的降低,大部分组织中(脑、心、肠、肾、肝、肌肉和脾)表达量呈先升高后降低再升高的趋势,在8℃组达到最小值(P<0.05)。以上结果表明,4种基因表达水平因组织、温度的不同而不同,反映了这4种基因的功能特异性;在低温胁迫下,4种基因积极响应,表达量均发生不同程度的变化,表明4种基因在红鳍东方鲀低温环境适应中可能具有潜在的重要作用。另外,从表达变化规律来看,8℃可能是红鳍东方鲀应对低温胁迫的关键调控点,过低的温度会造成其调控紊乱,这可为研究红鳍东方鲀低温应答调控机制提供相关依据。

新型生物标志物MDW HMGB1及OSM在脓毒症中的应用价值

虽然脓毒症在诊断和治疗方面有所改进,但重症监护病房(ICU)住院患者的发病率和病死率仍然很高。临床尚不能完全做到及早发现脓毒症,但对于已确诊的脓毒症患者,就应及早干预脓毒症进展,降低其病死率。因此,目前需要及早识别、较好预测脓毒症结局的生物标志物,以帮助临床医生解决其实际问题。近年来脓毒症相关生物标志物的研究广受外界关注,现重点对脓毒症早期诊断、风险预测相关标志物单核细胞分布宽度(MDW)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及抑癌蛋白M(OSM)的最新研究进展做一综述。

miR-186-5p通过抑制HMGB1信号通路改善脊髓损伤后神经修复

目的探究miR-186-5p在脊髓损伤(SCI)中的变化及对神经修复的影响。方法①将小胶质细胞分为对照组(正常培养)、脂多糖(LPS)组(1μg/ml LPS刺激24 h)、LPS+miR-186-5p-mimic组(转染miR-186-5p-mimic后1μg/ml LPS刺激24 h)和LPS+miR-186-5p-inhibitor组(转染miR-186-5p-inhibitor后1μg/ml LPS刺激24 h)。通过RT-PCR检测细胞中miR-186-5p水平,通过RT-PCR和Western blot检测细胞中高迁移率族蛋白1(HMGB1)mRNA和蛋白表达水平,通过ELISA检测细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的水平。②将大鼠分为假手术组、SCI+LV-NC组和SCI+LV-miR-186-5p组,每组10只大鼠,假手术组大鼠仅行椎板切除术,其余组采用脊髓打击器建立SCI模型。建模后,假手术组大鼠正常饲养,SCI+LV-NC组和SCI+LV-miR-186-5组大鼠分别脊髓注射空载体慢病毒和过表达miR-186-5p的重组慢病毒。通过RT-PCR检测脊髓组织中miR-186-5p水平。通过Western blot检测脊髓组织中HMGB1、Toll样受体4(TLR4)、p-p65、total p65、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血红素加氧酶-1(HO-1)、超氧化物歧化酶1(SOD-1)、Bax和Bcl-2的蛋白水平。ELISA检测脊髓组织中的TNF-α和IL-6的水平;免疫荧光检测脊髓组织中的离子钙结合接头蛋白分子1(IBA-1)、iNOS、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经丝蛋白-200(NF-200)的表达;通过BBB评分评价大鼠的运动功能;通过尼氏染色测定脊髓前角运动神经元数量。结果①与对照组相比,LPS组miR-186-5p表达降低(P<0.05),而HMGB1、iNOS、TNF-α和IL-6水平升高(P<0.05)。与LPS组相比,LPS+miR-186-5p-mimic组miR-186-5p表达升高(P<0.05),而HMGB1、iNOS、TNF-α和IL-6水平降低(P<0.05)。与LPS组相比,LPS+miR-186-5p-inhibitor组miR-186-5p水平降低(P<0.05),而HMGB1、iNOS、TNF-α和IL-6水平升高(P<0.05)。②与假手术组相比,SCI+LV-NC组大鼠脊髓出现明显损伤,iNOS/IBA-1比例升高(P<0.05),TNF-α和IL-6水平升高(P<0.05),Bax蛋白表达上调(P<0.05),Bcl-2、HO-1和SOD-1蛋白表达下调(P<0.05),GFAP和IBA-1的阳性染色比例增加(P<0.05),HMGB1和TLR4的蛋白水平及NF-κB p65的磷酸化水平增加(P<0.05),BBB评分降低(P<0.05),脊髓前角运动神经元数量减少(P<0.05)。与SCI+LV-NC组相比,SCI+LV-miR-186-5p组脊髓损伤区域减少,iNOS/IBA-1比例降低(P<0.05),TNF-α和IL-6水平降低(P<0.05),Bax蛋白表达下调(P<0.05),Bcl-2、HO-1和SOD-1蛋白表达上调(P<0.05),GFAP和IBA-1的阳性染色比例降低(P<0.05),HMGB1和TLR4的蛋白水平及NF-κB p65的磷酸化水平降低(P<0.05),BBB评分升高(P<0.05),脊髓前角运动神经元数量增多(P<0.05)。结论上调miR-186-5p通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路提高了脊髓损伤大鼠的运动功能和神经修复。

食管鳞状细胞癌患者血清HMGB1和IDO水平的变化及其临床意义

目的:检测食管鳞状细胞癌(ESCC)患者血清中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)的表达水平并探讨两者与临床病理特征及淋巴细胞亚群的相关性。方法:选取2021年3月至2022年8月在河北医科大学第四医院初次住院治疗的95例ESCC患者作为ESCC组,另选取40例健康体检人群作为对照组。ELISA法检测全部研究对象的血清HMGB1和IDO水平及不同组ESCC细胞培养上清中HMGB1、IDO和p65水平,流式细胞术检测全部研究对象外周血淋巴细胞亚群水平。WB法检测仅敲低HMGB1基因表达或敲低HMGB1后再加入NF-κB信号通路激活剂对ESCC细胞HMGB1、IDO和p65表达的影响。结果:ESCC组患者血清HMGB1和IDO水平明显高于对照组(均P<0.01);血清HMGB1和IDO表达水平升高是ESCC临床进展的独立危险因素(均P<0.01),二者联合检测对ESCC临床进展预测价值更高(P<0.01);血清HMGB1和IDO与ESCC患者的T分期、N分期和临床分期有明显关联(均P<0.05);ESCC组患者血清HMGB1与外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、B细胞和NK细胞绝对计数值呈显著负相关,而与Treg细胞百分率呈显著正相关(均P<0.05),血清IDO与外周血CD3+T细胞百分率和绝对计数值、CD4+T细胞百分率和绝对计数值、CD8+T细胞和B细胞绝对计数值呈显著负相关,而与Treg细胞百分率呈显著正相关(均P<0.05);血清HMGB1和IDO表达水平呈显著正相关(P<0.01)。si-HMGB1组KYSE30和ECA109细胞及其培养上清液中IDO和p65表达水平明显低于si-NC组和si-HMGB1+PMA组(均P<0.05)。结论:血清HMGB1和IDO与ESCC临床进展和机体免疫功能密切相关,具有成为ESCC肿瘤标志物和免疫治疗新靶点的潜力。HMGB1可能通过NF-κB信号通路促进IDO表达,进行双靶点联合治疗可能会取得更好的疗效。

重组人HMGB1调控内皮细胞成血管作用的机制初探

目的探讨重组人高迁移率族蛋白1(rhHMGB1)在调控内皮细胞成血管过程中可能涉及的机制。方法将内皮细胞分为对照组、骨髓间充质干细胞(MSC)上清组以及rhHMGB1组。采用细胞计数试剂(CCK)-8法检测内皮细胞的增殖、存活情况;采用蛋白质印迹法检测血管内皮生长因子(VEGF)、Yes相关蛋白(YAP)、CD31、缺氧诱导因子(HIF)-1α的蛋白相对表达量;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测VEGF、YAP、CD31、HIF-1α的信使RNA(mRNA)相对表达量;采用Transwell实验检测内皮细胞迁移水平;免疫荧光实验检测YAP定位情况。结果与对照组比较,rhHMGB1组内皮细胞迁移率增加(P<0.05),且细胞迁移率随着时间的延长而增加。与对照组比较,MSC上清组VEGF蛋白相对表达量增加,p-YAP蛋白表达增多,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组比较,rhHMGB1组的VEGF和HIF-1α蛋白相对表达量以及VEGF和CD31 mRNA相对表达量均增加,YAP和p-YAP蛋白表达均增多,YAP/p-YAP比值增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与MSC上清组比较,rhHMGB1组的CD31 mRNA相对表达量增加,YAP蛋白表达增多,YAP/p-YAP比值增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论外源高浓度rhHMGB1可能通过介导YAP入核促进内皮细胞的迁移能力,并上调血管生成相关蛋白的表达。

多发伤患者血清高迁移率族蛋白B1及可溶性髓样细胞触发受体-1水平变化及预后意义

目的·检测多发伤患者不同时间点的血清高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)及可溶性髓样细胞触发受体-1(soluble triggering receptor expressed on myeloid cell-1,sTREM-1)水平,并分析其与病情严重程度、并发症及预后的相关性。方法·选取2020年12月至2022年12月在苏州市第九人民医院急诊科收治的多发伤患者92例,根据患者入院时的损伤严重程度评分将患者分为轻伤组(n=24)、重伤组(n=58)、严重伤组(n=10);依据入院后是否合并多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)将患者分为MODS组(n=20)和非MODS组(n=72);根据创伤发生后28 d内结局将患者分为死亡组(n=13)和存活组(n=79)。检测患者入院后静脉血炎症因子指标。采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测创伤发生后24 h、72 h及7 d的血清HMGB1、sTREM-1水平。分析不同分组间血清HMGB1、sTREM-1水平的差异,并采用多因素Logistic回归分析多发伤患者不良结局的影响因素。运用受试者工作特征(receiver operating characteristics,ROC)曲线评估HMGB1、sTREM-1对不良结局的预测价值。结果·重伤和严重伤组各时间点HMGB1、sTREM-1水平明显高于轻伤组(均P<0.05),严重伤组创伤发生后72 h和7 d的HMGB1水平及24 h和72 h的sTREM-1水平明显高于重伤组(均P<0.05)。各时间点HMGB1与sTREM-1水平呈正相关性(r=0.645,r=0.942,r=0.722;均P<0.05)。MODS组创伤发生后72 h和7 d的HMGB1水平及24 h和72 h的sTREM-1水平明显高于非MODS组(均P<0.05);死亡组创伤发生后72 h和7 d的HMGB1水平及24 h、72 h的sTREM-1水平明显高于存活组(均P<0.05)。Logistic回归分析显示,创伤发生后7 d的HMGB1水平及入院时间、超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)水平是多发伤患者不良结局的独立影响因素(均P<0.05)。ROC曲线显示,创伤发生后7 d的HMGB1水平预测不良预后的曲线下面积为0.890,敏感度为83.5%,特异度为92.3%。结论·多发伤患者创伤发生后不同时间点HMGB1及sTREM-1水平与MODS及生存结局相关,且创伤发生后7 d的HMGB1水平是多发伤患者不良结局的独立影响因素。

血清PGRN、SIRT3、HMGB1水平与新生儿重症肺炎病情相关性及对预后的影响

目的探讨血清颗粒蛋白前体(PGRN)、沉默信息调节因子相关酶3(SIRT3)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平与新生儿重症肺炎病情相关性及对预后的影响。方法选取2019年7月至2021年7月保定市儿童医院新生儿重症肺炎患儿108例为研究对象,根据随访30d后预后情况分为预后良好组(80例)与预后不良组(28例),比较两组入院当天(D0)、入院1d(D1)、入院3d(D3)、入院5d(D5)、入院7d(D7)血清PGRN、SIRT3、HMGB1水平、小儿危重病例评分(PCIS)、急性生理慢性健康(APACHEⅡ)评分,并计算D7/D1的比率,以ratio值表示,分析各血清指标水平变化与病情变化的相关性及对预后的影响。结果预后不良组D0~D7血清PGRN、HMGB1水平及APACHEⅡ评分高于预后良好组,血清SIRT3水平及PCIS评分低于预后良好组(t值介于3.726~18.683之间,P<0.05);血清PGRN-ratio值、HMGB1-ratio值与PCIS-ratio值呈负相关(r值分别为-0.850、-0.785,P<0.05),与APACHEⅡ-ratio值呈正相关(r值分别为0.840、0.815,P<0.05);SIRT3-ratio值与PCIS-ratio值呈正相关(r=0.689,P<0.05),与APACHEⅡ-ratio值呈负相关(r=-0.815,P<0.05);血清PGRN、HMGB1-ratio高值患儿预后不良风险是低值患儿的4.253倍、3.370倍,SIRT3-ratio低值患儿预后不良风险是高值患儿的8.030倍;血清PGRN、SIRT3、HMGB1的ratio值预测预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.771、0.783、0.751,三者联合预测的AUC为0.916。结论血清PGRN、SIRT3、HMGB1水平变化与新生儿重症肺炎病情显著相关,对预后有明显影响,联合检测可作为预测预后不良的重要辅助途径。

芒果苷通过Nrf-2/HO-1/HMGB1/NF-κB通路减轻链脲佐菌素诱导的大鼠视网膜病变的机制探讨

目的:探讨芒果苷对链脲佐菌素(STZ)诱导的大鼠视网膜病变的影响。方法:采用1%STZ腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。采用酶联免疫吸附法检测血清和视网膜组织细胞因子水平,并采用试剂盒测量口服葡萄糖耐量(OGTT),以及血清和视网膜组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。采用苏木精伊红染色法(HE)染色评价视网膜组织病理变化。Western blot检测糖尿病大鼠视网膜组织核因子相关因子2(Nrf-2)及其下游信号通路的变化。结果:芒果苷可显著改善糖尿病大鼠OGTT,增加血清和视网膜组织中的SOD,降低MDA水平。芒果苷还可显著降低糖尿病大鼠的血清和视网膜组织细胞因子水平,调节视网膜组织中Nrf-2、血红素加氧酶-1(HO-1)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)和核转录因子-κB(NF-κB)蛋白的表达。结论:芒果苷可能通过Nrf-2/HO-1/HMGB1/NF-κB通路改善STZ诱导的大鼠视网膜组织视网膜病变、氧化应激和炎性反应。

颅脑损伤后HMGB1-RAGE介导血管周细胞脱离血管和血脑屏障损伤的机制研究

目的观察颅脑损伤后皮层血管周细胞的反应性变化并探讨其机制。方法使用可控性皮层撞击动物模型模拟颅脑损伤,通过蛋白免疫印迹检测外伤后不同时间点皮层周细胞标记物表达情况,并通过透射电镜确定颅脑损伤后血管周细胞的生物学行为。通过Western blotting检测外伤后高迁移率族蛋白1(highmobilitygroupbox 1,HMGB1)、晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end product,RAGE)、核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)表达水平,并将实验动物分为FPS-ZM1(一种特异性RAGE受体阻滞剂)注射组和野生型组,利用干湿脑重和透射电镜的方法检测外伤后HMGB1-RAGE对周细胞的影响。培养原代小鼠脑微血管周细胞,添加HMGB1重组蛋白并以同时添加FPS-ZM1的培养周细胞作为对照,离体水平探索HMGB1-RAGE通路对血管周细胞的影响。结果外伤后早期皮层周细胞标记物血小板源性生长因子受体B(platelet-derived growth factor receptor beta,PDGFR-β)、NG2蛋白聚糖(NG2 proteoglycan,NG2)表达水平降低(PDGFR-β,Control vs.CCI 3D P<0.05;NG2,Control vs.CCI 6H P<0.05,Control vs.CCI 1D P<0.05),并发现周细胞脱离血管,同时伴有局部血脑屏障开放。外伤后早期皮层HMGB1-RAGE-NF-κB信号通路表达升高(HMGB1,Control vs.CCI 6H P<0.05,Control vs.CCI 1D P<0.05;RAGE,Control vs.CCI 6H P<0.05,Control vs.CCI 1D P<0.05,Control vs.CCI 3D P<0.05,Control vs.CCI 5D P<0.05,Control vs.CCI 7D P<0.05;NF-κB,Control vs.CCI 6H P<0.05,Control vs.CCI 1D P<0.05),阻断RAGE与配体结合后皮层水肿减轻(CCI 6H、CCI 1D均P<0.05)、神经血管单元损伤降低。HMGB1重组蛋白可增加培养周细胞的迁移能力(Control vs.HMGB1 P<0.05,Control vs.HMGB1+FPS-ZM1 P<0.05),且能被FPS-ZM1逆转(HMGB1 vs.HMGB1+FPS-ZM1 P<0.05)。结论颅脑损伤后高水平的HMGB1通过周细胞上RAGE受体介导周细胞脱离血管,并导致局部脑水肿的发生。

迷迭香酸对H_(2)O_(2)诱导的视网膜色素上皮细胞衰老及HMGB1,Caveolin-1通路的影响

目的探讨迷迭香酸(RA)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)衰老的作用及可能机制。方法首先用不同浓度(100,200,400,800,1600μmol/L)H_(2)O_(2)处理ARPE-19细胞,CCK-8法检测细胞增殖,筛选合适的H_(2)O_(2)浓度构建细胞衰老模型。然后将ARPE-19细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组(200μmol/L)和不同浓度(20,40,80μmol/L)RA预处理+H_(2)O_(2)(200μmol/L)组,CCK-8法检测细胞增殖,筛选最佳RA干预浓度。最后将ARPE-19细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组(200μmol/L)、H_(2)O_(2)(200μmol/L)+RA(80μmol/L)组,用倒置显微镜观察各组细胞形态,SA-β-gal染色法检测细胞衰老情况,Western blotting检测衰老标志蛋白P16、P21的表达以及HMGB1,Caveolin-1的表达。结果ARPE-19细胞增殖率随H_(2)O_(2)刺激浓度的增加而降低(各浓度组两两比较,均P<0.01),随着RA浓度的增加而增加(各浓度组两两比较,均P<0.01)。倒置显微镜观察显示,与对照组相比,H_(2)O_(2)组ARPE-19细胞数量明显减少,细胞衰老率明显增加(均P<0.05);与H_(2)O_(2)组相比,H_(2)O_(2)+RA组ARPE-19细胞数量明显增多,细胞衰老率明显降低(均P<0.05)。Western blotting检测显示,H_(2)O_(2)组细胞P16,P21蛋白表达较对照组明显增加(P<0.05);H_(2)O_(2)+RA组细胞P16,P21蛋白表达较H_(2)O_(2)组明显降低(P<0.05);H_(2)O_(2)组细胞HMGB1和Caveolin-1的蛋白表达较对照组明显增加(P<0.05);H_(2)O_(2)+RA组细胞HMGB1和Caveolin-1的蛋白表达较H_(2)O_(2)组明显降低(均P<0.05)。结论RA可以减轻H_(2)O_(2)诱导的ARPE-19细胞衰老,其机制可能与RA抑制HMGB1和Caveolin-1的激活有关。