老龄2型糖尿病大鼠肾1-α羟化酶与骨密度变化的研究

目的观察老龄2型糖尿病大鼠肾1-α羟化酶改变及其对骨密度的影响。方法用放免法测定老龄2型糖尿病大鼠(糖尿病组)、维生素D3处理的老龄2型糖尿病大鼠(处理1组)、1-α(OH)D3处理的老龄2型糖尿病大鼠(处理2组)和正常老龄大鼠(正常对照组)24h尿白蛋白、血25-(OH)D3和1、25-(OH)2D3水平;用双能X线骨密度测量仪(DEXA)测定各组大鼠腰椎、股骨骨密度。结果糖尿病组24h尿白蛋白高于其他3组,1、25-(OH)2D3和骨密度低于正常对照组和处理2组。处理1组与糖尿病组比较,25-(OH)D3有升高趋势,1、25-(OH)2D3和骨密度无显著差异。处理2组25-(OH)D3和骨密度低于正常对照组,1、25-(OH)2D3与正常对照组差异不显著。处理1组1、25-(OH)2D3和骨密度较处理2组低,25-(OH)D3较处理2组高。结论老年2型糖尿病大鼠肾1-α羟化酶活性降低导致血中1、25-(OH)2D3减少和骨密度下降,1-α(OH)D3显著改善这种变化。

老龄大鼠2型糖尿病肾病对肾1-α羟化酶及骨质密度影响的实验研究

目的观察老龄大鼠2型糖尿病肾病对肾1-α羟化酶及骨密度(BMD)的影响。方法18月龄Wistar大鼠40只,分为正常对照组、糖尿病组、处理1组和处理2组,用放免法测定各组大鼠24h尿白蛋白、血25-(OH)D3和1,25-(OH)2D3水平,双能X线骨密度测量仪(DEXA)测定各组大鼠腰椎、股骨BMD。结果与正常组比较,其他3组24h尿白蛋白显著升高,而BMD显著降低(P<0·05),处理2组BMD高于处理1组和糖尿病组(P<0·05)。处理1组25-(OH)D3有升高趋势,无统计学意义(P>0·05)。处理2组1,25-(OH)2D3与正常对照组相当,高于糖尿病组和处理1组,差异有统计学意义(P<0·05)。糖尿病组大鼠1,25-(OH)2D3与尿白蛋白呈负相关(r=-0·7705,P=0·009),与骨密度呈正相关(股骨r=0·8707,P=0·001,腰椎r=0·8827,P=0·007)。结论老龄大鼠2型糖尿病肾病致肾1-α羟化酶活性下降,肾1-α羟化酶活性下降与BMD降低关系密切。

雷洛昔芬对镉染毒后肾小管上皮细胞存活情况及1-α羟化酶表达的影响

目的观察应用雷洛昔芬对镉染毒的肾小管上皮细胞存活情况及1-α羟化酶表达的影响,探讨雷洛昔芬治疗镉中毒导致肾毒性的机制。方法分离纯化SD大鼠肾小管上皮细胞原代细胞。分别用浓度为2.5、5.0、10.0、20.0、40.0μmol/L的氯化镉对肾小管上皮细胞染毒24 h,采用MTT法测算肾小管上皮细胞的相对存活率。选取20.0μmol/L的氯化镉剂量作用于肾小管上皮细胞,分别用0.05、0.10、0.50、1.00μmol/L的雷洛昔芬干预24h,采用MTT法测算肾小管上皮细胞的相对存活率。将肾小管上皮细胞分为空白对照组、氯化镉组、雷洛昔芬组,空白对照组培养于DMEM培养基,氯化镉组以20.0μmol/L的氯化镉染毒肾小管上皮细胞,雷洛昔芬组以20.0μmol/L的氯化镉染毒后给予雷洛昔芬0.10μmol/L干预,均干预24 h,在显微镜下观察细胞形态,采用RT-PCR法检测肾小管上皮细胞1-α羟化酶mRNA表达。结果 2.5、5.0、10.0、20.0、40.0μmol/L的氯化镉干预24 h后,肾小管上皮细胞的相对存活率均降低(P均<0.01),且氯化镉浓度较高时细胞相对存活率较低。对镉染毒后的肾小管上皮细胞以0.05、0.10、0.50、1.00μmol/L的雷洛昔芬干预24 h后,肾小管上皮细胞的相对存活率均高于镉染毒细胞(P均<0.01)。空白对照组肾小管上皮细胞形态正常,氯化镉组肾小管上皮细胞形态异常、大量细胞死亡,雷洛昔芬组细胞形态异常较氯化镉组明显减轻。氯化镉组肾小管上皮细胞1-α羟化酶mRNA相对表达量低于空白对照组,雷洛昔芬组1-α羟化酶mRNA相对表达量高于氯化镉组(P均<0.05)。结论雷洛昔芬对氯化镉染毒的肾小管上皮细胞具有保护作用,可上调镉染毒后肾小管上皮细胞1-α羟化酶mRNA的表达。

1-α羟化酶和人成纤维细胞生长因子-23基因修饰小鼠离体股骨及下颌骨X线影像的分形分析研究

目的:初步分析1-α羟化酶(1-alpha-hydroxylase,1α(OH)ase)、人成纤维细胞生长因子-23(fibroblast growth factor-23,FGF23)基因修饰小鼠离体股骨及下颌骨X线平片的分形维数(fractal dimension,FD),为其在骨质疏松症评价中的运用提供实验依据。方法:以6周龄的1α(OH)ase-/-、FGF23+、1α(OH)ase-/-FGF23+小鼠为模型,以同龄的野生型(Wild-Type,WT)小鼠为对照,采集小鼠的股骨和下颌骨,使用离体X-射线摄影评估骨质疏松状况,利用Image J软件测量各组小鼠股骨和下颌骨X-射线影像兴趣区域的FD值,分析其差异及相关性。结果:1)与WT小鼠相比,1α(OH)ase-/-、FGF23+、1α(OH)ase-/-FGF23+小鼠均出现骨质疏松征象,包括股骨和下颌骨骨长度及体积减少、骨密度明显下降,下颌磨牙、切牙及牙槽骨的射线透光度增高、牙髓腔宽大、根管变薄。2)1α(OH)ase-/-、FGF23+、1α(OH)ase-/-FGF23+小鼠的股骨头和股骨远端干骺端的FD值均较WT小鼠明显增加(P<0.05),但股骨腔未见差异;下颌骨升支的FD值在1α(OH)ase-/-、FGF23+、1α(OH)ase-/-FGF23+小鼠中明显增高(P<0.05),而在牙槽骨中未见差异;3)下颌骨升支X平片的FD值与股骨干骺端的FD值显著相关(r=0.541,P=0.049)。结论:FD值可以较好地反映骨质疏松状况,股骨干骺端、下颌骨升支是较合适的兴趣部位,分形分析可运用于下颌骨影像学的再分析。

炎症性肠病患者105例血清25羟基维生素D、肠黏膜组织维生素D受体和维生素D1-α羟化酶的表达

目的分析IBD患者血清25羟基维生素D[25（OH）D]、肠黏膜组织维生素D受体（VDR）和维生素D1-α羟化酶（CYP27B1）的表达情况。方法纳入2014年1月1日至12月31日就诊的105例IBD患者，其中UC 49例，CD 56例；缓解期20例，轻度活动26例，中度活动37例，重度活动22例；病变位于左半结肠50例，右半结肠55例。另纳入同期疑似IBD后经排查为健康的45名健康者，作为对照组。检测所有纳入对象的乳果糖和甘露醇的吸收比（LMR），血清内毒素、TNF-α和25（OH）D水平，肠黏膜组织VDR和CYP27B1的表达情况。统计学方法采用t检验、单因素方差分析和卡方检验。 结果UC组LMR、内毒素、TNF-α分别为（63.2±13.9）%、（118.9±19.7） EU/mL、（109.6±18.4） ng/L，分别高于健康对照组的（3.3±1.2）%、（34.2±5.6） EU/mL、（0.6±0.3） ng/L，25（OH）D水平为（36.6±9.7） nmol/L，低于健康对照组的（49.6±10.9） nmol/L，差异均有统计学意义（t＝28.796、29.284、27.817、6.118，P均〈0.05）；CD组LMR、内毒素、TNF-α分别为（52.9±11.3）%、（96.4±10.6） EU/mL、（83.0±16.1） ng/L，均高于健康对照组，25（OH）D水平为（44.4±9.4） nmol/L，低于健康对照组，差异均有统计学意义（t＝34.555、39.716、34.293、0.012，P均〈0.05）。健康对照组、缓解期组、轻度活动组、中度活动组和重度活动组的LMR、内毒素、TNF-α和25（OH）D水平差异均有统计学意义（F＝286.731、385.690、657.830、18.932，P均〈0.01），呈活动性依赖关系。与健康对照组相比，左半结肠组和右半结肠组的LMR、内毒素和TNF-α水平增高，25（OH）D水平降低。UC组和CD组的VDR高表达率分别为36.7%（18/49）和55.4%（31/56），均低于健康对照组的80.0%（36/45），差异均有统计学意义（χ2＝38.574、13.837，P均〈0.05）；UC组和CD组的CYP27B1高表达率分别为26.5%（13/49）、35.7%（20/56），均高于健康对照组的22.2%（10/45），差异均有统计学意义（χ2＝6.499、4.430，P均〈0.05）。健康对照组、缓解期组、轻度活动组、中度活动组和重度活动组的VDR、CYP27B1高表达率差异均有统计学意义（F＝33.470、27.142，P均〈0.01），呈活动性依赖关系。与健康对照组相比，左半结肠组和右半结肠组的VDR高表达率降低，CYP27B1高表达率增高。结论IBD患者存在维生素D代谢失衡，血清25（OH）D水平偏低，结肠黏膜组织VDR高表达率偏低，CYP27B1高表达率偏高。

IBD患病人群肠道菌群分布特征及其与血清IIRPCs、MPO、CYP27B1水平的关系

目的探讨炎症性肠病(IBD)患病人群肠道菌群分布特征及其与血清免疫炎症相关蛋白复合物(IIRPCs)、髓过氧化酶(MPO)、维生素D1-α羟化酶(CYP27B1)水平的关系。方法选取2016年7月至2020年4月在该院消化科门诊和住院治疗的106例IBD患者作为病例组,其中溃疡性结肠炎(UC组)58例,克罗恩病(CD组)48例;选取同期在该院接受治疗的60例非IBD肠道疾病患者作为疾病对照组;另选取在该院同期进行结肠镜检查的60例体检健康者作为健康对照组。采集所有受试者的血清标本和新鲜粪便标本,分别进行血清IIRPCs、MPO、CYP27B1水平检测和粪便细菌培养,比较不同组研究对象的肠道菌群分布特征及血清IIRPCs、MPO、CYP27B1水平,分析其相关性。结果UC、CD组患者的肠道肠球菌、肠杆菌、消化球菌、拟杆菌、酵母菌数量较疾病对照组和健康对照组均明显增加,而乳酸杆菌、双歧杆菌、真杆菌则明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。106例IBD患者中,缓解期与活动期患者上述肠道菌群数量比较也存在明显差异,其中重度活动期患者与轻度、中度活动期患者比较,差异均有统计学意义(P<0.05),轻度活动期患者与中度活动期患者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。UC、CD组血清IIRPCs、MPO、CYP27B1水平均明显高于疾病对照组和健康对照组;缓解期与活动期血清IIRPCs、MPO、CYP27B1水平比较存在明显差异,其中重度活动期与轻度、中度活动期患者血清IIRPCs、MPO、CYP27B1水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);轻度活动期患者与中度活动期患者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。相关性分析显示,IBD患者的血清IIRPCs、MPO、CYP27B1水平与肠道肠球菌、肠杆菌、拟杆菌、酵母菌数量呈正相关,与乳酸杆菌、双歧杆菌数量呈负相关(P<0.05)。结论IBD患病人群肠道菌群分布的变化与血清IIRPCs、MPO、CYP27B1水平的变化存在一定相关性,均与患者疾病活动性有关,二者之间可能共同作用,参与并影响IBD的发生、发展。血清IIRPCs、MPO、CYP27B1可作为无创性生物标志物用于IBD患者与非IBD肠道疾病患者的鉴别诊断及IBD患者疾病活动性的评估。

细菌性支气管炎患儿25-羟基维生素D-1α羟化酶CYP27B1与抗菌肽LL-37表达的研究

文章研究25-羟基维生素D-1α羟化酶CYP27B1与抗菌肽LL-37在细菌性支气管炎患儿的外周血中的表达及临床意义。收集2019年4月—2019年12月东南大学附属中大医院溧水分院住院的细菌性支气管炎患儿血清样本,其中急性细菌性支气管炎(ABB)患儿30例,迁延性细菌性支气管炎(PBB)患儿30例,30例在本医院体检的健康志愿者血清样本作为血清对照。采用免疫比浊法检测血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平;采用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群;采用ELISA法检测血清25-(OH)D3和1,25-(OH)2D3水平及CYP27B1、LL-37含量。结果显示,三组研究对象免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平不具有统计学意义(P>0.05),与对照组比较,ABB组及PBB组T淋巴细胞水平差异具有统计学意义(P<0.05)。三组研究对象25-(OH)D3水平比较(P>0.05);1,25-(OH)2D3水平ABB组和PBB组低于对照组,PBB组低于ABB组(P<0.05)。CYP27B1的表达量PBB组低于ABB组和对照组(P<0.05),ABB组和对照组比较无显著差异(P>0.05)。结果表明CYP27B1表达与LL-37表达之间具有相关性,CYP27B1表达不足可能导致LL-37的表达不足,致使急性细菌性支气管炎发展为迁延性细菌性支气管炎。

从现代医学角度认识中医“肾主骨”之理论内涵

有关"肾主骨"的论点,出自中医最早的经典著作《黄帝内经》中,认识到肾与人体骨骼的生长发育有着密切关系,并提出"肾藏精""骨者髓之府""肾生骨髓,髓生血"等论述。人体随着年龄的增长,肾精日暂亏虚,肾气不足,从而影响体内骨骼的正常发育,而导致骨质疏松、增生、退化等相关的肾性骨病。因此说明肾对人体的生长、发育,骨骼的健康有其重要的营养、促进、合成等作用。

活性维生素D缺乏导致牙齿和下颌骨的发育障碍

目的:为了检测活性维生素D缺乏及其母乳成分的改变是否影响小鼠下颌骨以及牙齿的发育。方法:通过采用X线摄影、微CT和组织学等方法比较分析25羟维生素D3的1α羟化酶杂合子[1α(OH)ase+/-]和纯合子[1α(OH)ase-/-]母鼠所喂养的纯合子和杂合子小鼠下颌骨以及牙齿的表型差异。结果:母乳中的钙水平在1α(OH)ase-/-母鼠较1α(OH)ase+/-母鼠为低。1α(OH)ase-/-仔鼠的牙量和骨量较同窝1α(OH)ase+/-仔鼠明显下降,而由1α(OH)ase-/-母鼠所喂养仔鼠的牙量和下颌骨骨量比由1α(OH)ase+/-母鼠喂养的仔鼠要低。由1α(OH)ase+/-母鼠所喂养的1α(OH)ase+/-仔鼠牙量和下颌骨量最高,而由1α(OH)ase-/-母鼠所喂养的1α(OH)ase-/-仔鼠牙量和下颌骨量最低。结论:活性维生素D和高乳钙摄入各自具有刺激下颌骨和牙齿矿化和发育的作用,又具有协同作用。