小鼠1-细胞胚胎体外培养条件的研究

目的 检验培养基（Ｗｈｉｔｔｅｎ、ＣＺＢ、ＳＯＭ 和ＫＳＯＭ）、培养器皿（进口、国产新旧平皿）与配制培养基的水质对小鼠胚胎体外发育的影响。 方法 采用微滴培养法培养昆明种小白鼠１－细胞胚胎，以胚胎发育到囊胚的比例为判断培养效果的标准。 结果 Ｗｈｉｔｔｅｎ、ＣＺＢ、ＳＯＭ 和ＫＳＯＭ 培养基中２－细胞发育率分别为１００％ 、１００％ 、１００％ 和９８．６％ ，而囊胚发育率却分别为０％ 、７８．３％ 、４．８％ 和９．５％ ；用三蒸水、五蒸水和去离子水配制的ＣＺＢ培养基，培养囊胚发育率分别为４０．８％ 、５４．１％ 和５２．４％ ；国产和进口新平皿的囊胚发育率分别为６８．０％ 和７２．２％ ；国产和进口旧平皿的培养囊胚发育率为２７．２％ 和４６．１％ 。 结论 昆明小白鼠早期胚胎存在体外发育阻断现象；ＣＺＢ培养基培养昆明小白鼠早期胚胎效果最好；用三蒸水、五蒸水和去离子水配制的ＣＺＢ培养基培养结果无显著差别；进口和国产新平皿的培养效果相近，但再次使用时培养效果显著下降。

黄芪多糖对小鼠1-细胞胚胎体外发育效果的初步研究

目的探讨黄芪多糖对小鼠1-细胞胚胎体外发育的作用。方法以mCZB添加抗生素为对照组,以添加不同浓度黄芪多糖(Astragulus Polysacharin,Aps)为试验组,观察胚胎体外发育率、孵化胚胎细胞数目及切割取样后桑椹胚发育率和细胞数目。结果体外培养96 h,试验组囊胚发育率(86.0%、85.8%、89.5%)均显著高于对照组(75.8%)(P<0.05),各试验组间差异无显著性(P>0.05);体外培养144 h,试验组胚胎孵化率(28.9%、31.0%、25.4%)均高于对照组(22.6%),以Aps2(100μg/mL)组孵化率为最高(31.0%)。孵化胚胎细胞数试验各组(76.00±6.25、81.73±7.01、75.89±4.54)均极显著高于对照组(69.06±5.15)(P<0.01)。切割取样(≤5或>5个)后桑椹胚体外培养72 h,试验组发育率和细胞数分别为(≤5组为50%和44±2.7、50%和53±2.7、44.4%和55±2.7;>5组为23.1%和42±1.6、20.0%和44±1.0、14.3%和41±1.0)均高于对照组(33.3%和41±1.7;0%和0)。结论中药有效成分黄芪多糖能促进小鼠早期胚胎的体外发育及胚胎细胞增殖,并对切割取样后胚胎的体外培养有一定促进作用,且切割样本数≤5对胚胎发育比较有利。

乳酸钠对小鼠1—细胞胚胎体外发育的影响

小鼠 1-细胞胚胎在含10.8,16.2,21.6和32.4 mM 乳酸钠不同 Whitten's 液中培养时,分别有2.6%,172%,8.5%和0%的胚胎发育到扩展囊胚。在4种培养液中均有60%以上的胚胎完成了第1次卵裂,发育到2-细胞期,但以后的发育则有明显差异。培养液中较高浓度乳酸钠的存在,可能是造成小鼠胚胎体外培养的“2-细胞早期阻断”的原因之一。

清洗后石蜡油对昆明小鼠胚胎培养及其发育的影响

目的建立有效而简便的石蜡油清洗回收系统,并检验其对昆明白小鼠胚胎培养的效果。方法石蜡油分为:对照组、回收组、医用组及化学纯组。除对照组之外各组均行清洗石蜡油三步处理回收法。手术收集小鼠1-细胞阶段的胚胎,用TE培养液培养,观察胚胎发育情况并进行胚胎移植。结果石蜡油回收组培养,从2-细胞到囊胚的比例均高于对照组,囊胚的形成速度比对照组快。囊胚率回收组为23%,对照组17%。回收组胚胎移植的产仔率为44%、对照组为16%;清洗与未清洗医用石蜡油都能支持胚胎发育到囊胚;化学纯轻质石蜡油经清洗后可有效提高囊胚的发育率。并提高胚胎及胎盘的重量。结论本石蜡油清洗回收系统效果良好,适用于胚胎培养。