1-苯基2-硫脲对Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼肿瘤多重耐药相关基因表达的影响

目的探讨去色素药物1-苯基2-硫脲(PTU)对Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼肿瘤多重耐药相关基因abcb4及其标记基因egfp表达的影响及可能机制。方法选取受精后24 h(24 hpf)Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼胚胎做药物暴露实验,分为Control、PTU以及PTU+RES 3个组;持续用药96 h,通过荧光显微镜拍照检测各组斑马鱼胃肠道荧光强度;RT-qPCR检测abcb4、egfp及pxr基因mRNA,Western Blot检测abcb4、egfp蛋白(Abcb4、eGFP)的表达,罗丹明B积累实验检测不同组Abcb4功能。结果与Control组相比,PTU组Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼荧光表达增强(P<0.01),PTU+RES组荧光变化不明显(P>0.05);PTU组abcb4、egfp及pxr基因mRNA表达均增加(P<0.005),PTU+RES组pxr基因mRNA表达增加(P<0.005),abcb4、egfp基因mRNA表达无明显变化(P>0.05);PTU组abcb4、egfp蛋白表达均增加(P<0.005),PTU+RES组无明显变化(P>0.05);PTU组Abcb4功能增强(P<0.01),PTU+RES组无明显变化(P>0.05)。结论PTU可诱导Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼abcb4和egfp表达增加,核因子pxr可能参与PTU对abcb4和egfp的诱导调节过程,在应用PTU去色素处理的Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼进行药物筛选时需注意PTU对abcb4和egfp表达的影响。

1-苯基-2-硫脲对斑马鱼胚胎发育与黑色素生成的影响

目的 1-苯基-2-硫脲(PTU)可抑制斑马鱼胚胎黑色素的产生,保持斑马鱼透明,便于形态观察和信号检测。本文研究了PTU对斑马鱼胚胎发育的影响和抑制斑马鱼胚胎黑色素生成,保持斑马鱼透明性的最佳浓度。方法用不同浓度PTU处理23 hpf(受精后,hours post fertilization,hpf)斑马鱼胚胎,作用57 h后观察80 hpf斑马鱼的形态学、生理学改变,计算死亡率和孵化率,测量心率和静脉窦-动脉球之间的距离。结果浓度为0.197mmol/L、0.296 mmol/L PTU可以有效抑制黑色素生成,保持斑马鱼整体透明,对斑马鱼心血管系统结构和生理功能无影响,且不影响斑马鱼正常孵化过程。随着PTU浓度的增加,斑马鱼死亡率增加,孵化率下降,出现心包水肿,心脏畸形等改变,心率下降,静脉窦-动脉球之间的距离增大。结论浓度不高于0.296 mmol/L的PTU溶液能有效抑制斑马鱼黑色素生成,对斑马鱼心血管毒性研究无影响。

1-苯基-2-硫脲抑制flk1型斑马鱼黑色素生成的最佳浓度

【目的】探讨1-苯基-2-硫脲（PTU）对抑制血管荧光转基因型flk1斑马鱼黑色素生成的能力,探索在不影响斑马鱼正常生长发育条件下,能保持斑马鱼透明性的最佳浓度。【方法】用0.0125～1.0 mmol/L浓度区间的PTU与24 hpf（hours post fertilization）斑马鱼胚胎共同孵育,观测PTU抑制黑色素生成情况,通过观察斑马鱼形态学变化、记录80 hpf后的孵化率和死亡率、测量心率和静脉窦-动脉球间距等生理学变化,评价PTU处理对斑马鱼生长发育的影响。【结果】随着PTU浓度的增加,黑色素抑制能力增强,毒性逐渐增加,表现为斑马鱼死亡率增加、孵化率下降、心率下降、静脉窦-动脉球之间的距离增大。浓度为0.0125-0.025 mmol/L的PTU对斑马鱼活性基本无影响,浓度≥0.05 mmol/L的PTU能完全抑制黑色素的生成。当PTU浓度为0.025 mmol/L时,生成的黑色素不影响斑马鱼血管观察,当PTU浓度为0.05 mmol/L时,斑马鱼的心率和静脉窦-动脉球间距基本不受影响。【结论】对于72 hpf前的flk1型斑马鱼实验,应根据具体实验要求,在浓度≤0.05 mmol/L范围内选择适当的PTU浓度,使黑色素的生成既不影响实验观察和信号检测,同时对生长发育的影响减至最小。

缩氨基(硫)脲席夫碱化合物的自发对称性破缺研究

制备了4-苯基-1-(吡啶-2-亚甲基)氨基脲(PPMSC)和4-苯基-1-(吡啶-2-亚甲基)氨基硫脲(PPMTC).用元素分析、MS、1HNMR、UV吸收光谱、X射线单晶衍射和固体CD光谱等对其进行了表征.晶体结构数据显示PPMSC属于Sohncke P212121空间群,单个分子之间通过氢键形成一个一维螺旋链状结构,沿a轴形成左手螺旋结构.固体CD光谱和重结晶实验证明,PPMSC手性晶体的形成是结晶诱导的绝对不对称合成.PPMTC的固体CD光谱和重结晶实验具有与PPMSC类似现象.