桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)的开发现状与前景展望

1-脱氧野尻霉素(DNJ)作为桑资源中特有的物质,具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒等生物活性,有较高的利用价值。为进一步促进DNJ的开发和利用,本文对现阶段DNJ的提取方法、生物活性以及应用领域进行整理,分析和展望了DNJ现阶段及未来的研究状况。发现随着DNJ提取工艺的进步,DNJ的提取效率在逐步提升,并且得益于DNJ所具备的降血糖活性、抗病毒活性、抗肿瘤活性与抗氧化和抗炎活性,使其在动物生产、医药、食品领域有着良好的应用前景。相信随着对DNJ研究与开发的深入,能使DNJ得到更充分的应用,从而推动桑资源的多元化利用。

桂桑优12、沙2×伦109桑叶全年DNJ含量测定及分析

为促进桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)的高效、稳定提取及利用,文章采用柱前衍生化高效液相色谱法对桑叶中DNJ含量进行测定,探讨了不同干燥方法、季节变化以及桑树品种对桑叶中DNJ含量的影响。试验结果表明:超低温真空冷冻干燥处理在保持桑叶中DNJ含量方面优于阴干和50℃热风烘干处理,有利于提高DNJ的提取量;以获取桑叶中DNJ为目的在广西地区种植桑树,品种选择沙2×伦109要更优于桂桑优12;若分阶段看,上半年种植要更优于下半年,冬伐过后种植桂桑优12较沙2×伦109所得桑叶DNJ含量更高,夏伐过后选择种植沙2×伦109较桂桑优12所得桑叶DNJ含量更高。

不同季节桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)含量的测定

建立了柱前荧光衍生-高效液相色谱法测定桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)含量的方法。并对不同生长季节桑叶药材的DNJ含量进行测定。桑叶经0.05mol/L盐酸提取,在pH8.5的硼酸盐缓冲液条件下,用芴甲氧酰氯(FMOC-Cl)与DNJ反应生成荧光产物,然后用高效液相色谱-检测器测定。流动相为乙腈-0.1%醋酸(55:45,V/V);流速:1.0ml/min;柱温25℃;荧光检测器激发波长254nm,发射波长322nm。线性范围为0.567～34μg/ml(r=0.9999),平均回收率为97.2%。测定结果表明,桑叶中DNJ含量与生长季节、温度有关,七、八月份DNJ含量最高。该方法准确、灵敏度高,重现性好,可用于桑叶中DNJ的定量分析。

桑叶提取物1-DNJ对甜菜夜蛾幼虫生长和保护酶活性的影响

为研究桑树活性物质1-DNJ对甜菜夜蛾幼虫生长和体内保护酶活性的影响,将被不同浓度1-DNJ浸泡30 s后的甘蓝小叶饲喂4龄的甜菜夜蛾幼虫。结果表明:甜菜夜蛾4龄幼虫对1-DNJ在24、48 h的拒食率分别为77.20%、92.01%,拒食中浓度AFC50分别为0.48、0.21 g/L;生长抑制检测表明,1-DNJ对于甜菜夜蛾生长的抑制率最高达到92.34%,说明1-NDJ对甜菜夜蛾的生长具有明显抑制作用;1-DNJ对甜菜夜蛾体内保护酶活性具有明显的影响,其中SOD和CAT活性,在各时段的检测结果均呈现先被诱导后被抑制,CAT活性较对照下降幅度明显,与对照组差异达到显著水平(P<0.05),而1-DNJ对甜菜夜蛾体内POD活性影响不大。1-DNJ对甜菜夜蛾幼虫拒食和抑制生长的作用时间上滞后于对保护酶系统的破坏作用,表明甜菜夜蛾幼虫体内保护酶系统对桑树活性物质1-DNJ反应敏感。本研究结果说明:桑树活性物质1-DNJ对甜菜夜蛾的生长和保护酶活性具有一定的影响,其结果可为将桑树作为开发植物源杀虫剂的原料提供基础资料和理论依据。

高效液相色谱-荧光检测法测定桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)含量

目的:建立桑叶药材中1脱氧野尻霉素(DNJ)的高效液相色谱荧光检测法的含量测定方法。并对不同生长季节和生长环境桑叶药材的DNJ含量进行测定。方法:桑叶经0.05mol·L-1盐酸提取,在pH8.5的硼酸盐缓冲液条件下,用芴甲氧酰氯(FMOC Cl)与DNJ反应生成荧光产物,然后用高效液相色谱荧光检测器测定。液相条件为HiQSiLC18分析柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈0.1%醋酸(55∶45),流速1.0mL·min-1,柱温25℃,荧光检测器激发波长254nm,发射波长322nm。结果:DNJ与其他组分分离效果较好,线性范围为0.567～34μg·mL-1(r=0.9998),加样回收率为97.2%。结论:桑叶中DNJ含量与环境因素、温度及生长季节有关,该方法可作为桑叶药材的质量控制方法。

9个桑树品种的硒、类黄酮、1—DNJ含量的分析

桑树被国家卫生部确认为"药食同源"植物。基于开发桑树药食功能的目的,选取安康9个栽培桑树品种,检测桑叶中硒、类黄酮、1-DNJ含量。结果表明:桑树的桑芽叶硒含量比桑片叶含量低,桑树芽(片)叶硒含量品种之间存在差异,桑树芽(片)叶富硒能力强;桑树芽叶类黄酮含量与片叶类黄酮含量因桑树品种不同有差异,桑叶类黄酮含量比茶叶低;桑树的桑芽叶1-DNJ含量比桑片叶高,桑树芽(片)叶1-DNJ含量品种之间存在差异,桑叶的1-DNJ含量比茶叶高。

1-脱氧野尻霉素(DNJ)的研究进展

1-脱氧野尻霉素(DNJ)是桑叶中的一种生物碱,它也存在于其他植物或细菌中。DNJ作为α-葡萄糖苷酶的抑制剂,具有降血糖、抗病毒、抗肿瘤转移等作用。另外,DNJ还是α-葡萄糖淀粉酶的有效的抑制剂。DNJ作为载体,可用于高纯度麦芽糖的酶合成。本文综述了DNJ的化学结构、来源及用途。

桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)的研究进展

桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)是一种糖苷酶抑制剂,具有降血糖、抗病毒和抗肿瘤转移的作用,是目前蚕桑综合利用研究的一个重要方向。本文综述了DNJ的来源、分子结构、检测提取方法、生物活性评价和产业化的研究进展,并提出了DNJ研究的发展趋势。

桑叶提取物1-DNJ对小菜蛾幼虫生物活性的影响

为研究桑树叶片生物活性物质1-DNJ的杀虫作用机理,以小菜蛾(Plutella xylostella L.)为研究对象,利用桑树叶片提取物1-DNJ饲喂小菜蛾3龄幼虫,研究1-DNJ对小菜蛾拒食、触杀、胃毒和生长等生物活性的影响。结果表明,1-DNJ处理后,小菜蛾48 h和72 h的拒食率分别是93.33%和89.25%,拒食中浓度为0.34和0.58 g/L。同时,1-DNJ对小菜蛾幼虫的生长发育具有明显抑制,小菜蛾化蛹率随着1-DNJ浓度增加而显著下降,但对小菜蛾的蛹重作用不大。1-DNJ对小菜蛾的触杀和胃毒作用效果没有拒食和生长抑制的作用明显。结果说明,桑树叶片中的1-DNJ主要通过拒食作用影响小菜蛾生长,进而达到防控的目的。

超声波提取桑叶中1-DNJ的响应曲面法优化研究

为了探索超声法对桑叶中1-DNJ(1-脱氧野尻霉素)进行提取的最佳方案,利用超声波取技术,依次用响应面法考查料液比、提取温度、提取时间以及超声功率对桑叶中1-DNJ提取率的影响,优选出桑叶1-DNJ(1-脱氧野尻霉素)在使用超声法提取装置时提取的最佳工艺。结果显示:响应面法的最佳提取条件为:液料比1∶21.98、提取温度52.11℃、时间34.89min、超声功率75w,预期的1-DNJ得率0.743%。

1-Deoxynojirimycin Content and Alfa-Glucosidase Inhibitory Activity and Heat Stability of 1-Deoxynojirimycin in Silkworm Powder

Silkworm powder containing 1-deoxynojirimycin (DNJ) has α-glucosidase inhibitory activity and is promising as a complementary and alternative medicine (CAM) agent in Japan. Silkworm powder produced in Korea was extracted with 75% ethanol. The extract was derivatized with 9-fluorenylmethyl chloroformate (FMOC-Cl), and DNJ-FMOC content was measured by HPLC. Then, alfa-glucosidase inhibition by silkworm and mulberry powder in pig liver crude enzyme was assayed using 4-nitrophenyl-alfa-D-glucopyranoside as a substrate. Silkworm powder DNJ content (0.39 to 0.58%) was higher than that in mulberry powder (0.08 to 0.12%). The alfa-glucosidase inhibitory activity of silkworm powder was more potent than that of mulberry leaves and green tea. Silkworm powder DNJ was stable upon heating to 121?C for up to 15 min.

桑树资源中1-脱氧野尻霉素的测定及其生物活性分析

目的测定桑树资源中1-脱氧野尻霉素(DN J)并分析其生物活性。方法以氯甲酸芴甲酯(FM OC-C l)柱前衍生RP-HPLC荧光检测法对DN J进行分析;在酶水平测定样品的α-糖苷酶抑制曲线,在离体水平用反转肠囊实验测定样品的α-糖苷酶抑制活性。结果建立了DN J的定量方法,并应用于桑树资源中DN J的定量;这些中药材与DN J对照品呈现了平行的α-糖苷酶抑制曲线,对淀粉水解和葡萄糖吸收具有较好的抑制作用。结论桑树资源可以作为α-糖苷酶抑制剂治疗糖尿病。

反相高效液相色谱法检测不同品种和叶位桑叶中1-脱氧野尻霉素

建立以芴甲氧酰氯(FMOC-Cl)为衍化剂的柱前衍生化-反相高效液相紫外线检测法测定桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)含量的方法,并对不同品种、不同叶位桑叶中DNJ含量进行检测。结果表明:以0.05mol/LHCl为溶剂提取桑叶粉中的DNJ,用芴甲氧酰氯(FMOC-Cl)为衍生化试剂,在pH8.50硼酸盐缓冲液条件下,衍生化和RP-HPLC检测效果最好。反相高效液相色谱-紫外检测法检测DNJ时,流动相中乙腈:0.1%醋酸为55:45(V/V)时色谱分离效果最好,DNJ-FMOC的峰面积与DNJ浓度呈高度正相关关系,相关系数为0.9852。不同品种的桑叶中DNJ含量不同,本研究的15个样品中青阳青桑的DNJ含量最高,达到0.1486%,皮桑含量最低,为0.04291%。不同叶位桑叶的DNJ含量不同,第1叶位至第5叶位桑叶的DNJ含量逐渐降低,说明桑叶随着发育成熟,DNJ的含量逐渐降低。结果显示该方法快捷、稳定、灵敏、准确度高,适合桑叶中DNJ含量的检测。

不同产地桑叶的1-脱氧野尻霉素含量比较

目的:比较不同产地桑叶中1-脱氧野尻霉素的含量。方法:采用HPLC法,色谱柱:HiQSiLC18(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相:乙腈-0.1%醋酸(55∶45,V/V);流速:1.0 ml/min;柱温25℃;荧光检测器激发波长254nm,发射波长322 nm。结果:不同产地桑叶中1-脱氧野尻霉素的含量有较大差异,且同一产地不同品种相差也较大。结论:本测定结果可为开发利用桑叶资源提供依据。

柱前衍生化高效液相色谱-荧光检测法测定桑叶中的1-脱氧野尻霉素

采用柱前衍生化高效液相色谱-荧光检测法测定了桑叶中的1-脱氧野尻霉素(DNJ)。用0.05mol/LHCl提取桑叶中的DNJ,采用6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)试剂在pH8.5硼酸盐缓冲液下对DNJ进行衍生化,以0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH5.0)-乙腈(体积比为85∶15)为流动相,利用C18色谱柱(5μm,250mm×4.6mm)分离,在激发波长为250nm、发射波长为395nm条件下进行荧光检测,DNJ的AQC衍生物与衍生化试剂的水解产物分离良好。方法的线性范围为0.5～25mg/L,检出限为0.02mg/L(S/N=3)。实验测得桑叶中DNJ含量为0.12%;回收率为96.1%～98.6%。

响应面法优化提高发酵桑叶茶中1-脱氧野尻霉素含量工艺

为优化提高发酵桑叶茶中1-脱氧野尻霉素含量工艺,采用响应面分析法,以发酵温度、发酵时间及接种量为自变量,1-脱氧野尻霉素含量为响应值,设计三因素三水平响应面回归分析。结果表明:提高发酵桑叶茶中1-脱氧野尻霉素含量工艺的最佳工艺条件为发酵温度30℃、发酵时间5.6 h、黑曲霉∶日本根霉∶绿色木霉=2∶1∶2菌液接种量3.75×107 CFU/100 g,在此条件下发酵桑叶茶中1-脱氧野尻霉素含量为133.882 mg/100 g。

桑树DNJ提取、纯化和检测的研究进展

1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)是存在于桑树中的一种多羟基哌啶生物碱,因其通过抑制α-葡萄糖苷酶活性,进而具有降血糖、抗病毒、抗肿瘤等生理活性和药理活性。DNJ广泛存在于桑树的各种组织中,不同桑树类型和品种中DNJ含量不同,采取的每一种提取、测定方法均具有选择性和特异性,只适用于某种类型或某种桑树品种样品的纯化和检测。同时,DNJ在桑树体内的含量较低,而且桑树体内其他次生代谢物质的干扰增加了DNJ提取和测定的难度。因此,目前文献中报道的DNJ提取、分离纯化和检测方法较多。针对已报道的DNJ的提取、分离纯化和检测方法,综述了近年来DNJ研究方面的最新进展,为更好利用和开发DNJ制品,为DNJ的工业化生产提供参考和借鉴。

高效液相色谱-串联四极杆质谱法测定桑叶中1-脱氧野尻霉素

目的:建立高效液相色谱-串联四级杆质谱联用测定桑叶中1-脱氧野尻霉素含量的方法。方法:以乙腈-0.1%甲酸水溶液(12∶88,v/v)为流动相,SHIMADZUHRC-NH2柱分离,采用大气压化学电离源(APCI),164.1/146.1,164.1/110.2两对离子,多反应监测(MRM)。结果:1-脱氧野尻霉素保留时间为2.87min,标准曲线在482～2410μg/L范围内线性关系良好(r=0.9993),平均加样回收率为95.8%,最低检测限为53.6μg/L。结论:该方法选择性强、灵敏度高,可为桑叶中1-脱氧野尻霉素的含量测定提供参考。

桑白皮药材中1-脱氧野尻霉素的两种含量测定方法的比较

目的:建立和比较两种测定桑白皮中1-脱氧野尻霉素(1-Deoxynojirimycin,简称DNJ)的方法。方法:方法1:采用Hypersil NH2柱,以乙腈-水(78∶22)为流动相;ELSD检测器。方法2:采用ZORBAX SB-C18柱,以乙腈-0.1%醋酸溶液(25∶75)为流动相;DAD检测器,检测波长为265nm。结果:两种HPLC法测定结果基本一致,经t检验无显著性差异(P>0.05)。结论:两种方法的重现性好,灵敏度高,均可有效控制桑白皮中DNJ的含量。

桑枝提取物中1-脱氧野尻霉素的稳定性研究

1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)是桑树中的一种含氮糖类化合物,具有高效的降血糖活性、巨大的保健和药用潜力,其稳定性研究非常必要。本实验借助高效液相色谱仪测定DNJ含量的变化,分别研究微波、超声波、酸碱、加热、紫外光和自然光6个因素对桑枝提取物中DNJ稳定性的影响。结果表明微波可以明显破坏DNJ,800 W功率处理1 h可使DNJ的损耗率达65%,而超声波对DNJ稳定性的影响不大,且在不同功率的一定时间点还可以增加提取物中DNJ的含量;加热对DNJ的稳定性有一定程度的影响;p H值与光照对DNJ的稳定性影响较微弱。这些结果可为天然DNJ的生产和储存工艺的研究以及桑枝的开发利用提供有效参考。