猪囊尾蚴病重组DNA疫苗pcDNA3.1-TSO45-4B在小鼠体内的表达及诱导的细胞免疫效应

目的观察基于六钩蚴期的猪囊尾蚴病基因疫苗pcDNA3.1-TSO45-4B在小鼠体内的表达及诱导的小鼠细胞免疫应答。方法将真核重组表达质粒pcDNA3.1-TSO45-4B肌注小鼠,RT-PCR方法扩增出目的条带;ELISA方法检测小鼠血清细胞因子IL-2、IL-4及IFN-γ含量。结果RT-PCR产物为单一条带,大小为456bp,与TSO45-4B大小一致。免疫小鼠第2周细胞因子含量达到较高水平,第4周达到最高水平,第8周开始下降。结论基于猪囊尾蚴保护性抗原TSO45-4B的DNA疫苗能在小鼠体内表达并有效诱导细胞免疫效应。

人胎盘来源的间充质干细胞诱导CD4^+CD45RA^-CD49b^+LAG3^+Tr1细胞增殖研究

目的研究人胎盘来源的间充质干细胞(MSC)是否能诱导正常人外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD45RACD49b+LAG3+Tr1细胞增殖。方法分离、纯化、表型鉴定人胎盘来源的MSC。实验分组如下:PBMC组、PBMC+MSC组、CD3+CD28+PBMC组和MSC+CD3+CD28+PBMC组。相同条件下培养24 h后,流式细胞术检测各组CD4^+CD45RA^-CD49b^+LAG3^+Tr1细胞比例;ELISA法检测各组上清中白细胞介素10(IL-10)水平,并对MSC+CD3+CD28+PBMC组中的CD4^+CD45RA^-CD49b^+LAG3^+Tr1比例和其上清中IL-10含量作相关性分析。结果MSC+CD3+CD28+PBMC组中CD4^+CD45RA^-CD49b^+LAG3^+Tr1细胞比例为(6.66±2.80)%,PBMC组为(1.01±0.44)%,PBMC+MSC组为(1.14±0.78)%,CD3+CD28+PBMC组为(4.20±2.58)%,差异有统计学意义(P<0.05)。MSC+CD3+CD28+PBMC组上清中的IL-10含量为(14.45±3.14)pg/m L,PBMC组为(0.90±0.05)pg/m L,PBMC+MSC组为(11.00±3.02)pg/m L,CD3+CD28+PBMC组为(6.04±1.90)pg/m L,差异有统计学意义(P<0.05)。MSC+CD3+CD28+PBMC组中的CD4+CD45RACD49b+LAG3+Tr1比例与其上清中IL-10含量成正相关(r=0.880,P<0.01)。结论 MSC可以诱导CD3、CD28活化的PBMC细胞中的CD4^+CD45RA^-CD49b^+LAG3^+Tr1细胞增殖,CD4^+CD45RA^-CD49b^+LAG3^+Tr1细胞比例增加与上清中IL-10水平升高有关。