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黑莓1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶基因RuACO 1a和RuACO 1b的克隆及功能鉴定
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作者 李洁 董金彦 +3 位作者 闾连飞 吴文龙 李维林 张春红 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期14-26,共13页
基于前期黑莓(Rubus spp.)品种‘Navaho’果实转录组测序结果,通过反转录PCR克隆获得2个1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶(ACO)基因,命名为RuACO 1a和RuACO 1b。结果表明:RuACO 1a和RuACO 1b的开放阅读框(ORF)长度分别为939和918 bp,分别含有4... 基于前期黑莓(Rubus spp.)品种‘Navaho’果实转录组测序结果,通过反转录PCR克隆获得2个1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶(ACO)基因,命名为RuACO 1a和RuACO 1b。结果表明:RuACO 1a和RuACO 1b的开放阅读框(ORF)长度分别为939和918 bp,分别含有4和3个外显子。系统进化分析结果显示RuACO1a和RuACO1b与月季(Rosa chinensis Jacq.)、蕨麻〔Argentina anserina(Linn.)Rydb.〕和野草莓(Fragaria vesca Linn.)ACO1蛋白的亲缘关系均较近,且分别属于蔷薇科(Rosaceae)植物中2类ACO1蛋白。RuACO 1a在果实着色后28 d响应乙烯利诱导,其相对表达量急剧升高,而RuACO 1b在果实着色后21 d响应乙烯利诱导,早于RuACO 1a。脱落酸处理后,RuACO 1a和RuACO 1b的相对表达量在果实着色后14和28 d较高。RuACO 1a和RuACO 1b具有组织表达特异性,RuACO 1a在幼果、花蕾和花中的相对表达量较高,RuACO 1b在幼果和幼根中的相对表达量较高。与野生型相比,RuACO 1a和RuACO 1b过量表达转基因拟南芥〔Arabidopsis thaliana(Linn.)Heynh.〕植株均表现为叶片中叶绿素相对含量和氮含量升高、开花和角果成熟提前、ACO含量升高。综上所述,黑莓RuACO 1a和RuACO 1b基因均促进拟南芥角果提前成熟。 展开更多
关键词 黑莓 1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶(ACO) 果实成熟 乙烯 脱落酸 克隆 功能鉴定
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冷藏后不同处理对1-MCP处理南果梨酯类物质及乙烯合成关键酶的影响 被引量:6
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作者 张丽萍 纪淑娟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第24期285-288,共4页
研究1-MCP处理的南果梨冷藏3个月后,乙烯利、水杨酸和茉莉酸甲酯处理对果实常温货架期间酯类物质和1-氨基环丙酸-1-羧酸合成酶(ACS)以及1-氨基环丙酸-1-羧酸氧化酶(ACO)变化的影响。结果表明:经过乙烯利处理的果实丁酸己酯、乙酸庚酯、... 研究1-MCP处理的南果梨冷藏3个月后,乙烯利、水杨酸和茉莉酸甲酯处理对果实常温货架期间酯类物质和1-氨基环丙酸-1-羧酸合成酶(ACS)以及1-氨基环丙酸-1-羧酸氧化酶(ACO)变化的影响。结果表明:经过乙烯利处理的果实丁酸己酯、乙酸庚酯、乙酸乙酯、丁酸乙酯、己酸乙酯、己酸己酯、乙酸己酯的相对含量均明显高于对照果实;比较3种不同处理果实中ACS和ACO酶活性发现,乙烯利处理的果实ACS酶活性极显著高于对照果实,水杨酸处理果实ACS酶活性显著高于对照果实,而茉莉酸甲酯处理对果实的ACS酶活性无显著影响;乙烯利、水杨酸、茉莉酸甲酯3种处理果实ACO活性与对照差异不显著。由此可知,经1-MCP处理的南果梨冷藏后用乙烯利进行复醒处理可有效提高ACS酶活性,从而提高果实的酯类物质相对含量,使果实表现出浓郁的香气。 展开更多
关键词 南果梨 乙烯利 水杨酸 茉莉酸甲酯 香气 1-氨基环丙酸-1-羧酸合成酶 1-氨基环丙酸-1-羧酸氧化酶
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高糖和游离脂肪酸诱导胰岛INS-1细胞线粒体呼吸链改变的研究 被引量:1
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作者 毛睿睿 薛耀明 +1 位作者 沙建平 林占 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第11期1730-1732,共3页
目的:通过研究观察体外慢性高糖和游离脂肪酸(FFA)对培养的胰岛INS-1细胞线粒体琥珀酸脱氢酶、细胞色素C氧化酶活性及细胞内ATP含量的影响,初步探讨高糖和FFA损害胰岛β细胞功能的可能机制。方法:实验分为对照组(C组)(含5.5mmol/L葡萄糖... 目的:通过研究观察体外慢性高糖和游离脂肪酸(FFA)对培养的胰岛INS-1细胞线粒体琥珀酸脱氢酶、细胞色素C氧化酶活性及细胞内ATP含量的影响,初步探讨高糖和FFA损害胰岛β细胞功能的可能机制。方法:实验分为对照组(C组)(含5.5mmol/L葡萄糖)、高糖组(HG组)(含16.7mmol/L葡萄糖)、高脂组(PA组)(含0.4mmol/L棕榈酸)、高糖高脂联合组(HG+PA组)(含16.7mmol/L葡萄糖及0.4mmol/L棕榈酸)。将INS-1细胞分别接种于上述不同浓度的葡萄糖和FFA中作用48h后,用分光光度法测定INS-1细胞线粒体琥珀酸脱氢酶及细胞色素C氧化酶活性,用荧光素酶方法检测细胞内ATP含量。结果:与C组相比,HG组、PA组和HG+PA组INS-1细胞线粒体琥珀酸脱氢酶及细胞色素C氧化酶活性明显下降,差异有显著性(均P<0.05);HG组、PA组和HG+PA组明显降低细胞内ATP含量(均P<0.05)。结论:在胰岛INS-1细胞中,高糖及FFA可能通过损伤线粒体呼吸链功能,产生对胰岛功能的损害作用。 展开更多
关键词 脂肪酸类 非酯化 INS-1细胞 线粒体呼吸链 琥珀酸脱氢酶 细胞色素C氧化酶
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1-芘丁酸/石墨烯复合物的电化学性质及其在葡萄糖传感器上的应用(英文) 被引量:1
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作者 王敏 王炯 +1 位作者 王凤彬 夏兴华 《电化学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期450-456,共7页
本文采用一步法制备了1-芘丁酸/石墨烯复合物(PBA/G),并研究了它的电化学性质.采用铁氰化钾和亚铁氰化钾电化学探针测定了其电化学阻抗滴定曲线,确定了PBA/G的表观pKa为6.2.此外,将葡萄糖氧化酶(GOD)共价键合在PBA/G表面构建了葡萄糖电... 本文采用一步法制备了1-芘丁酸/石墨烯复合物(PBA/G),并研究了它的电化学性质.采用铁氰化钾和亚铁氰化钾电化学探针测定了其电化学阻抗滴定曲线,确定了PBA/G的表观pKa为6.2.此外,将葡萄糖氧化酶(GOD)共价键合在PBA/G表面构建了葡萄糖电化学传感器,其电化学响应与葡萄糖浓度(5 mmol.L-1浓度范围内)呈线性关系,检测限为0.085 mmol.L-1.实验还测定了固定在PBA/G表面的GOD的表观米氏常数为5.40mmol.L-1,表明固定化的GOD对葡萄糖有较高的催化活性. 展开更多
关键词 1-芘丁酸 石墨烯 葡萄糖氧化酶 电化学生物传感器 葡萄糖
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阿托伐他汀钙对急性脑梗死患者血清ET-1、PAO、H-FABP、VEGF、S100β、炎症因子及神经功能的影响 被引量:23
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作者 刘伟 邵胜敏 +1 位作者 李晟 肖建新 《中国生化药物杂志》 CAS 2015年第3期134-137,共4页
目的探讨阿托伐他汀钙对急性脑梗死患者血清内皮素(endothelin-1,ET-1)、多胺氧化酶(polyamine oxidase,PAO)、心型脂肪酸结合蛋白(heart-type fatty acid binding protein,H-FABP)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth fact... 目的探讨阿托伐他汀钙对急性脑梗死患者血清内皮素(endothelin-1,ET-1)、多胺氧化酶(polyamine oxidase,PAO)、心型脂肪酸结合蛋白(heart-type fatty acid binding protein,H-FABP)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、S100β、炎症因子及神经功能的影响。方法根据随机数字表法将本组纳入的113例患者随机分为观察组(n=61)和对照组(n=52)。对照组采用常规方法治疗,观察组在对照组基础上结合阿托伐他汀钙治疗。2组疗程均2周。对比分析2组治疗前、治疗7d和14d血清ET-1、PAO、H-FABP、VEGF、S100β、炎症因子水平及NIHSS评分。结果观察组血清ET-1、PAO、H-FABP水平治疗7 d、治疗14 d后显著低于对照组(P<0.05);观察组VEGF水平治疗7、14 d后显著高于对照组(P<0.05);观察组S100β水平治疗7、14 d后显著低于对照组(P<0.05);观察组hs-CRP、IL-8、TNF-α水平治疗7、14 d后显著低于对照组(P<0.05);观察组NIHSS评分治疗后显著低于对照组(P<0.05)。结论阿托伐他汀钙可通过降低血清ET-1、PAO、H-FABP、S100β水平,改善患者脑损伤及神经功能,通过促进VEGF高表达,促进血管新生,通过降低患者血清炎性因子水平,减轻炎症反应和缺血再灌注损伤,促进患者神经功能恢复。 展开更多
关键词 阿托伐他汀钙 急性脑梗死 内皮素 多胺氧化酶 心型脂肪酸结合蛋白 血管内皮生长因子 slooβ 炎症因子 神经 功能
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COPPER AMINE OXIDASE1 (CuAO1) of Arabidopsis thaliana Contributes to Abscisic Acid- and Polyamine-lnduced Nitric Oxide Biosynthesis and Abscisic Acid Signal Transduction 被引量:13
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作者 Rinukshi Wimalasekera Corina Villar +1 位作者 Tahmina Begum Giinther F. E. Scherer 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2011年第4期663-678,共16页
Polyamines (PA), polyamine oxidases, copper amine oxidases, and nitric oxide (NO) play important roles in physiology and stress responses in plants. NO biosynthesis as a result of catabolism of PA by polyamine oxi... Polyamines (PA), polyamine oxidases, copper amine oxidases, and nitric oxide (NO) play important roles in physiology and stress responses in plants. NO biosynthesis as a result of catabolism of PA by polyamine oxidases and copper amine oxidases may explain in part PA-mediated responses. Involvement of a copper amine oxidase gene, COPPER AMINE OXIDASEI (CuAO1), of Arabidopsis was tested for its role in stress responses using the knockouts cuao1-1 and cuaol-2. PA-induced and ABA-induced NO production investigated bY fluorometry and fluorescence microscopy showed that the cuaol-1 and cuaol-2 are impaired in NO production, suggesting a function of CuAO1 in PA and ABA-mediated NO production. Furthermore, we found a PA-dependent increase in protein S-nitrosylation. The addition of PA and ABA also resulted in H2O2 increases, cuao1-1 and cuao1-2 showed less sensitivity to exogenous ABA supplementation during germination, seedling establishment, and root growth inhibition as compared to wild-type. In response to ABA treatment, expression levels of the stress-responsive genes RD29A and ADH1 were significantly lower in the knockouts. These observations characterize cuao1-1 and cuao1-2 as ABA-insensitive mutants. Taken together, our findings extend the ABA signal transduction network to include CuAO1 as one potential contributor to enhanced NO production by ABA. 展开更多
关键词 COPPER AMINE oxidase1 polyamines nitric oxide abscisic acid signal transduction germination.
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桃果实成熟软化过程中α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶活性和乙烯合成相关因子的变化 被引量:9
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作者 金昌海 阚娟 +3 位作者 索标 汪志君 陆兆新 郁志芳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期61-64,共4页
以‘雨花三号’水蜜桃果实为试材,采用气相色谱法测定了桃果实成熟过程中乙烯释放量、氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)氧化酶活性和ACC含量的变化,同时分析了α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-Afa)活性的变化。探讨了乙烯合成的相关因子和α-Afa对桃果... 以‘雨花三号’水蜜桃果实为试材,采用气相色谱法测定了桃果实成熟过程中乙烯释放量、氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)氧化酶活性和ACC含量的变化,同时分析了α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-Afa)活性的变化。探讨了乙烯合成的相关因子和α-Afa对桃果实成熟软化的影响。结果表明:在桃果实成熟软化过程中,乙烯释放量、ACC氧化酶活性和ACC含量同时于成熟度Ⅳ出现高峰,α-Afa活性在成熟前期变化平缓,而在成熟中后期明显上升。本实验初步探明了α-Afa与乙烯的相互作用关系及其对桃果实成熟后期快速软化的作用机理。 展开更多
关键词 果实软化 乙烯 氧化酶 ACC α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶
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猕猴桃果实乙烯代谢的研究 被引量:13
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作者 王贵禧 韩雅珊 于梁 《北京农业大学学报》 CSCD 北大核心 1994年第4期408-412,共5页
刚采收的猕猴桃硬果不产生乙烯,也无 ACC 氧化酶活性,但有少量 ACC 存在。随着果实的软化,乙烯开始出现并很快达到释放高峰,乙烯的释放与 ACC 氧化酶的活性及 ACC的含量变化一致。用外源乙烯或机械伤处理加速了猕猴桃果实内源乙烯释放... 刚采收的猕猴桃硬果不产生乙烯,也无 ACC 氧化酶活性,但有少量 ACC 存在。随着果实的软化,乙烯开始出现并很快达到释放高峰,乙烯的释放与 ACC 氧化酶的活性及 ACC的含量变化一致。用外源乙烯或机械伤处理加速了猕猴桃果实内源乙烯释放的原因,是这些处理促进了 ACC 的合成并增加了 ACC 氧化酶的活性。与冷藏相比,气调贮藏强烈地抑制了ACC 氧化酶的活性和乙烯的释放。浸钙处理对猕猴桃果实的乙烯释放、ACC 氧化酶活性及ACC 含量影响不大,因此浸钙处理后减缓猕猴桃果实软化的作用可能是通过其他途径实现的。 展开更多
关键词 猕猴桃 乙烯 ACC氧化酶 代谢
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甘蔗ACC氧化酶全长cDNA的克隆及序列分析 被引量:4
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作者 王爱勤 杨丽涛 +3 位作者 王自章 韦宇拓 何龙飞 李杨瑞 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期194-199,共6页
ACC氧化酶是高等植物乙烯生物合成途径中的限速酶。根据报道的植物ACC氧化酶基因序列设计特异引物,从甘蔗cDNA文库中克隆到-ACC氧化酶基因片段,命名为GZ-AC0,该基因长792bp,与甘蔗基因组文库中克隆的ACO基因片段仅18个碱基之差。根... ACC氧化酶是高等植物乙烯生物合成途径中的限速酶。根据报道的植物ACC氧化酶基因序列设计特异引物,从甘蔗cDNA文库中克隆到-ACC氧化酶基因片段,命名为GZ-AC0,该基因长792bp,与甘蔗基因组文库中克隆的ACO基因片段仅18个碱基之差。根据该cDNA片段序列,设计两对末端扩增的特异引物,利用RACE-PCR技术,获得GZ-ACO片段的5’端和3’端序列。用VectorNTI7.0软件对三个序列进行拼接和分析,结果得到全长的甘蔗GZ-ACO氧化酶基因。GZ-ACO cDNA核苷酸序列长1307bp,具有一个972bp完整的读码框,启动子ATG位于126bp,终止子TAA位于1097bp,推导编码323个氨基酸。系统进化分析表明,GZ-ACO基因氨基酸序列与其它植物已报道的ACC氧化酶基因具有65%~86%的同源率,且与单子叶禾本科植物首先聚类,其次与单子叶芭蕉科、兰科植物聚类,最后与双子叶植物聚类,与植物形态的系统进化结果一致。该基因已在DDBJ/EMBL/GenBank基因数据库注册,注册号为AY521566。 展开更多
关键词 ACC氧化酶 CDNA克隆 甘蔗 基因
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麦洼牦牛初乳期乳腺中2个特异表达EST片段的克隆与分析 被引量:3
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作者 江明锋 刘勇涛 +3 位作者 李生伟 陈艳 叶煜辉 陈敏 《畜牧与兽医》 北大核心 2009年第5期37-42,共6页
为研究牦牛初乳期乳腺特异表达的基因,采用抑制消减杂交和斑点杂交法对麦洼牦牛初乳期(产犊后2 d)和常乳期(产犊后18 d)特异表达的基因进行了分离鉴定。结果发现2个在初乳期间特异表达的EST片段,并命名为LAO和COL1α1。测序结果LAO片段... 为研究牦牛初乳期乳腺特异表达的基因,采用抑制消减杂交和斑点杂交法对麦洼牦牛初乳期(产犊后2 d)和常乳期(产犊后18 d)特异表达的基因进行了分离鉴定。结果发现2个在初乳期间特异表达的EST片段,并命名为LAO和COL1α1。测序结果LAO片段长698 bp,GenBank比对,其核苷酸序列与西藏黄牛(Bos taurus)、小家鼠(Mus musculus)、家犬(Canis familiaris)等的L-氨基酸氧化酶基因有较高的序列相似性,其序列一致性分别达到96%、73%、72%;COL1α1片段长337 bp,比对结果,其序列与Bos taurus、马鹿(Cervus elaphus)、家犬(Canis lupus fa-miliaris)等的Ⅰ型胶原蛋白α1有较高的序列相似性,其序列一致性分别为100%、100%、99%。2个序列与牛基因组的Blast分析表明,LAO片段定位于3号染色体LOC782545区,该区域编码1个L-氨基酸氧化酶基因;另一片段定位于19号染色体LOC615867区,该区域编码1个Ⅰ型胶原α1基因。研究表明,L-氨基酸氧化酶基因和Ⅰ型胶原蛋白α1基因是牦牛初乳期乳腺特异表达蛋白,这2个基因在牦牛初乳期乳腺组织中较高的表达水平可能与初乳期乳腺特殊的生理状态有关。 展开更多
关键词 麦洼牦牛 乳腺组织 L-氨基酸氧化酶 Ⅰ型胶原蛋白α1 抑制性削减杂交
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外源ABA和乙烯利胁迫下斑茅ACO基因表达的实时PCR分析 被引量:3
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作者 郭春芳 张积森 +1 位作者 张木清 陈如凯 《中国农学通报》 CSCD 2008年第2期48-52,共5页
研究了外源ABA和乙烯利胁迫处理对斑茅1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶基因(ACO基因)表达情况的影响。在项目组克隆斑茅ACO基因的基础上,应用实时荧光PCR技术分析斑茅ACO基因在A-BA、乙烯利胁迫下的表达。结果表明,斑茅ACO基因在ABA的胁迫下,... 研究了外源ABA和乙烯利胁迫处理对斑茅1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶基因(ACO基因)表达情况的影响。在项目组克隆斑茅ACO基因的基础上,应用实时荧光PCR技术分析斑茅ACO基因在A-BA、乙烯利胁迫下的表达。结果表明,斑茅ACO基因在ABA的胁迫下,在3h有微弱上调表达,而6h时明显抑制,其后表达趋向平缓;在乙烯利的胁迫下,ACO基因在前期受抑制,其后呈明显上调表达,在24h后ACO基因的表达趋向平缓。斑茅ACO基因的表达受乙烯利诱导,而不受外源ABA诱导。 展开更多
关键词 斑茅 1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶基因(ACO基因) 脱落酸 乙烯利 实时荧光PCR
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二苯乙烯苷对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用 被引量:15
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作者 李彩蓉 甘受益 +1 位作者 黄红霞 蔡飞 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期410-415,共6页
目的探讨二苯乙烯苷(TSG)对糖尿病大鼠心肌损伤的作用及对沉默信息调节因子2的哺乳动物同源体1(SIRT1)和磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)蛋白影响。方法建立2型糖尿病大鼠模型,分组给药,16周时处死大鼠,生化法测定血糖、血脂、肝功能及肌... 目的探讨二苯乙烯苷(TSG)对糖尿病大鼠心肌损伤的作用及对沉默信息调节因子2的哺乳动物同源体1(SIRT1)和磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)蛋白影响。方法建立2型糖尿病大鼠模型,分组给药,16周时处死大鼠,生化法测定血糖、血脂、肝功能及肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和心肌组织游离脂肪酸(NEFA);酶联免疫吸附法测定心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、心肌组织脂代谢相关酶脂肪酸跨膜转运载体蛋白(FATPs)和脂肪酸β氧化酶(FA-β-oxidase)的含量;放射免疫法测定血浆炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)的含量,Western blot检测心肌组织中TNF-α、IL-6、IL-1β、SIRT1和AMPK蛋白的表达;并测定左心室胶原含量。结果TSG干预后能减低血脂水平,对血糖和胰岛素水平无明显影响。TSG能减低糖尿病大鼠心肌组织中胶原含量,减少心脏游离脂肪酸含量,增加心肌组织脂代谢相关酶(FATPs和FA-β-oxidase)含量,抑制外周血和心肌组织中炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)的分泌。TSG能明显增加糖尿病大鼠心脏SIRT1和p AMPK蛋白表达。结论 TSG对糖尿病大鼠心肌具有保护作用,其机制可能与抑制心肌炎症因子和改善能量代谢有关。 展开更多
关键词 糖尿病心肌病 二苯乙烯苷 沉默信息调节因子2的哺乳动物同源体1 磷酸腺苷活化的蛋白激酶 脂肪酸β氧化酶 肿瘤坏死因子
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介体型双酶D-氨基酸传感器的制备 被引量:2
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作者 纪学锋 章咏华 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1993年第6期625-629,共5页
用一种全氟代磺酸酯阳离子交换树酯(East-man AQ-55),将D-氨基酸氧化酶(DAAO),辣根过氧化物酶(HRP)以及1,1′-二(α-羟基乙基)二茂铁(BHFc)同时包埋在玻碳电极(GCE)表面,制成双酶D-氨基酸电流式传感器。电极的工作电位为+0.18V(vs.SCE)... 用一种全氟代磺酸酯阳离子交换树酯(East-man AQ-55),将D-氨基酸氧化酶(DAAO),辣根过氧化物酶(HRP)以及1,1′-二(α-羟基乙基)二茂铁(BHFc)同时包埋在玻碳电极(GCE)表面,制成双酶D-氨基酸电流式传感器。电极的工作电位为+0.18V(vs.SCE)响应时间小于50s。对于D-丙氨酸来说,测定的最适宜pH为7.8,测定的线性范围为0.05~0.75mmol/L该电极具有良好的重现性,可以连续使用200次。 展开更多
关键词 双酶 氨基酸 传感器 电流式
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将最新的科学研究转化药理学教学实验的尝试
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作者 马爱妞 王永祥 《海峡药学》 2014年第8期142-145,共4页
在进行药理学实验教学改革的探索中,我们尝试将最新的科学研究转化为药理学实验教学,取得了较好的教学效果。我们将新发现的慢性疼痛靶点分子D-型氨基酸氧化酶(DAAO)抑制剂苯甲酸钠引入药物镇痛实验;将新型降糖药GLP-1类似物exenatide... 在进行药理学实验教学改革的探索中,我们尝试将最新的科学研究转化为药理学实验教学,取得了较好的教学效果。我们将新发现的慢性疼痛靶点分子D-型氨基酸氧化酶(DAAO)抑制剂苯甲酸钠引入药物镇痛实验;将新型降糖药GLP-1类似物exenatide及新型抗高血糖靶点分子钠-葡萄糖2型转运体(SGLT2)的特异性抑制剂dapagliflozin引入降血糖药物实验,不但丰富了原实验内容,加强了学生对所学知识的融汇贯通,而且拉近了前沿科学研究与学生的距离,使他们直接了解和感受到一个新的药物靶点的发现对新药研发所产生的巨大影响,非常有助于对学生科学创新精神的培养。 展开更多
关键词 药理学实验教学改革 D-型氨基酸氧化酶 GLP-1受体 EXENATIDE SGLT2抑制剂
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粉蕉MbACO2基因克隆及其表达分析 被引量:2
15
作者 唐宇其 颜彦 +1 位作者 李美英 胡伟 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期155-162,共8页
【目的】克隆粉蕉1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)氧化酶(ACO)基因(MbACO2),并进行表达分析,为研究ACO基因家族在香蕉果实发育成熟过程及逆境胁迫过程中的功能作用提供参考依据,也为改良香蕉采后贮藏提供潜在的基因资源。【方法】利用RT-PCR... 【目的】克隆粉蕉1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)氧化酶(ACO)基因(MbACO2),并进行表达分析,为研究ACO基因家族在香蕉果实发育成熟过程及逆境胁迫过程中的功能作用提供参考依据,也为改良香蕉采后贮藏提供潜在的基因资源。【方法】利用RT-PCR从粉蕉果实克隆MbACO2基因,运用生物信息学软件分析其编码蛋白的理化性质、亲疏水性、保守结构域及二、三级结构。利用农杆菌介导的瞬时转化法进行亚细胞定位,并利用实时荧光定量PCR检测MbACO2基因在果实发育成熟过程及高盐、干旱和低温胁迫处理下的表达情况。【结果】克隆获得的MbACO2基因开放阅读框(ORF)长度为918 bp,编码305个氨基酸残基,其蛋白分子量为34.583 kD,理论等电点(pI)为5.43,属于亲水性蛋白,具有典型的植物ACO蛋白家族的结构特征,含有DIOX_N和2OG-FeⅡ_Oxy 2个保守结构域。MbACO2氨基酸序列与同属的香蕉(Musa acuminata AAA group)ACO氨基酸序列(XP_010908825.1)相似性最高,为98.04%,表明其具有高度的保守性。MbACO2蛋白在细胞核和细胞质中均有表达。随着粉蕉果实发育成熟,MbACO2基因表达量整体呈升高趋势,极显著高于开花后0 d(对照)(P<0.01,下同),尤其是在果实采后6 d,其相对表达量达最高值。高盐、干旱和低温胁迫处理下,MbACO2基因的相对表达量较对照(未胁迫处理)显著(P<0.05)或极显著提高。【结论】MbACO2基因属于ACO基因家族成员,含有该家族的典型结构域,在粉蕉果实发育成熟过程及逆境胁迫的应答中发挥正向调控作用,高盐、干旱和低温胁迫处理均能诱导其上调表达。 展开更多
关键词 粉蕉 1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶(ACO) 果实发育 逆境胁迫 表达分析
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基于聚锂均苯三甲酸/多壁碳纳米管复合膜的葡萄糖生物传感器的研究 被引量:1
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作者 王韬懿 徐芬 +5 位作者 孙立贤 张佳鸣 茹慧瑛 刘颖雅 郑倩 张箭 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1832-1838,共7页
利用电聚合方法在裸玻碳(GC)电极上修饰一种新型金属有机框架化合物锂均苯三甲酸(Li-BTC),并采用滴涂技术制备了Nafion/GOx/MWNTs/poly-Li-BTC/GC葡萄糖生物传感器。利用扫描电镜分析了复合膜(含MWNTs和poly-Li-BTC)的形貌,采用循环伏... 利用电聚合方法在裸玻碳(GC)电极上修饰一种新型金属有机框架化合物锂均苯三甲酸(Li-BTC),并采用滴涂技术制备了Nafion/GOx/MWNTs/poly-Li-BTC/GC葡萄糖生物传感器。利用扫描电镜分析了复合膜(含MWNTs和poly-Li-BTC)的形貌,采用循环伏安和交流阻抗方法对修饰电极的电化学性能进行了研究。结果表明,此复合膜可增大裸玻碳电极的有效表面积、改善电极的电催化活性。利用循环伏安法和计时安培法研究了葡萄糖在Nafion/GOx/MWNTs/poly-Li-BTC/GC电极上的电化学特性。结果表明:葡萄糖的浓度在0.02~1.56 mmol/L范围内,此修饰电极的电流响应与葡萄糖的浓度呈线性关系,其相关系数为0.9992,检出限为5.1μmol/L(信噪比为3∶1)。修饰电极的米氏常数为0.832 mmol/L,回收率为96.3#~100.3#。本研究制备的葡萄糖生物传感器具有较好的重复性、重现性、选择性与稳定性,用于葡萄糖注射液中葡萄糖含量的检测,结果满意。 展开更多
关键词 葡萄糖 多壁碳纳米管 葡萄糖氧化酶 锂均苯三甲酸 修饰电极
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茶多酚对高尿酸血症小鼠尿酸产生与排泄的影响及机制研究 被引量:24
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作者 陈刚 谭明亮 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期218-222,共5页
目的观察茶多酚(green tea polyphenols,GTP)对氧嗪酸钾(PO)诱导的高尿酸血症(HUA)小鼠血尿酸水平的影响,并从调节尿酸产生和排泄途径探讨其药理机制。方法每天分别灌胃给予PO(250 mg·kg^(-1))和GTP(150、300、600mg·kg^(-1))... 目的观察茶多酚(green tea polyphenols,GTP)对氧嗪酸钾(PO)诱导的高尿酸血症(HUA)小鼠血尿酸水平的影响,并从调节尿酸产生和排泄途径探讨其药理机制。方法每天分别灌胃给予PO(250 mg·kg^(-1))和GTP(150、300、600mg·kg^(-1)),连续7 d。磷钨酸法检测小鼠血尿酸水平,比色法和Western blot法分别检测肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)活性与表达,免疫组织化学染色法检测肾脏中尿酸盐转运子1(URAT1)、有机阴离子转运子(OAT)1和3的表达。结果GTP明显降低了氧嗪酸钾诱导的HUA小鼠血尿酸水平(P<0.05或P<0.01);同时,GTP明显降低了HUA小鼠肝脏XOD的活性和表达(P<0.05或P<0.01);此外,GTP还明显降低了HUA小鼠肾脏URAT1的表达,增强了OAT1和OAT3的表达(P<0.05或P<0.01)。结论 GTP对PO诱导的HUA小鼠血尿酸水平有明显降低作用,其机制与减少尿酸产生和增加尿酸排泄密切相关。 展开更多
关键词 茶多酚 尿酸 高尿酸血症 黄嘌呤氧化酶 尿酸盐转运子1 有机阴离子转运子1 有机阴离子转运子3
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Quinclorac Resistance in Echinochloa crus-galli from China 被引量:5
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作者 PENG Qiong HAN Heping +3 位作者 YANG Xia BAI Lianyang YU Qin Stephen BPOWLES 《Rice science》 SCIE CSCD 2019年第5期300-308,共9页
Echinochloa crus-galli is a major weed in rice fields in China,and quinclorac has been long used for its control.Over-reliance of quinclorac has resulted in quinclorac resistance in E.crus-galli.Two resistant(R)E.crus... Echinochloa crus-galli is a major weed in rice fields in China,and quinclorac has been long used for its control.Over-reliance of quinclorac has resulted in quinclorac resistance in E.crus-galli.Two resistant(R)E.crus-galli populations from Hunan,China were confirmed to be at least 78-fold more resistant to quinclorac than the susceptible(S)population.No difference in foliar uptake of 14C-labelled quinclorac was detected between the R and S plants.However,a higher level of 14C translocation and a lower level of quinclorac metabolism were found in the R plants.Basal and induced expression levels ofβ-cyanoalanine synthase(β-CAS)gene andβ-CAS activity were not significantly different between the R and S plants.However,the induction expression of 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase(ACO1)gene by quinclorac treatment was evident in the S plants but not in the R plants.Quinclorac resistance in the two resistant E.crus-galli populations was not likely to be related to foliar uptake,translocation or metabolism of quinclorac,nor to cyanide detoxification viaβ-CAS.Thus,target-site based quinclorac signal reception and transduction and regulation of the ethylene synthesis pathway should be the focus for further research. 展开更多
关键词 ECHINOCHLOA crus-galli QUINCLORAC RESISTANCE QUINCLORAC metabolism β-cyanoalanine SYNTHASE 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid SYNTHASE 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase rice
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BCAT4、CYP79F1和ESM1过表达提高西兰花细胞萝卜硫素含量 被引量:6
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作者 张佑齐 曹海艳 +4 位作者 刘旦梅 张锦华 范三红 金竹萍 裴雁曦 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2020年第1期79-87,共9页
萝卜硫素(sulforaphane,SFN)是目前防癌抗癌效果最好的植物天然产物之一。十字花科芸薹属植物西兰花是生产SFN的重要材料。然而普通西兰花中SFN产量仍无法满足巨大的市场需求。之前单一基因改造提高植物SFN含量的策略效果并不理想。该... 萝卜硫素(sulforaphane,SFN)是目前防癌抗癌效果最好的植物天然产物之一。十字花科芸薹属植物西兰花是生产SFN的重要材料。然而普通西兰花中SFN产量仍无法满足巨大的市场需求。之前单一基因改造提高植物SFN含量的策略效果并不理想。该研究从西兰花中克隆了SFN合成相关的支链氨基酸转移酶4编码基因BCAT4、细胞色素P450氧化酶编码基因CYP79F1和环硫修饰酶编码基因ESM1。分别以单基因导入和三基因串联导入的方式,通过农杆菌法转化西兰花愈伤组织,对所获得的转化细胞系中SFN的含量进行比较,以期获得SFN含量更高的细胞系,为通过细胞系大量培养获取SFN奠定基础。实验结果表明,目的基因BCAT4、CYP79F1、ESM1和B-C-E(BCAT4NSCYP79F1N-SESM1)都成功整合于宿主细胞基因组。BCAT4和B-C-E基因过表达细胞系中SFN含量为139.7和171.4μg/g,分别是野生型细胞系SFN含量的1.79倍和2.19倍,差异极显著(**P<0.01);B-C-E基因过表达细胞系SFN含量是BCAT4基因过表达细胞系的1.23倍,差异显著(*P<0.05)。而CYP79F1和ESM1过表达细胞系未检测到高于对照的SFN含量。综上所述,单基因BCAT4的过表达对SFN含量的影响大于CYP79F1与ESM1。多基因串联共表达对SFN含量的影响效果好于单个基因的过表达。 展开更多
关键词 西兰花 萝卜硫素 支链氨基酸转移酶4 细胞色素P450氧化酶 环硫修饰酶1
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杂交酸模叶片线粒体交替氧化酶呼吸途径在光破坏防御中的作用 被引量:7
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作者 孟祥龙 张立涛 +2 位作者 张子山 高辉远 孟庆伟 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1803-1808,共6页
以杂交酸模(RumexK-1)为试材,研究了不同光强下线粒体交替氧化酶呼吸途径(AOX途径)对酸模叶片光破坏的防御作用.结果表明:在200μmol·m-2·s-1弱光下,用水杨基羟肟酸抑制AOX途径后,RumexK-1叶片的PSⅡ实际光化学效率、光合线... 以杂交酸模(RumexK-1)为试材,研究了不同光强下线粒体交替氧化酶呼吸途径(AOX途径)对酸模叶片光破坏的防御作用.结果表明:在200μmol·m-2·s-1弱光下,用水杨基羟肟酸抑制AOX途径后,RumexK-1叶片的PSⅡ实际光化学效率、光合线性电子传递速率以及光合放氧速率均显著下降,非还原性QB反应中心显著升高,加重了叶片的光抑制,而活性氧清除机制上调,避免了活性氧的过量积累,部分缓解了RumexK-1叶片的光抑制;在800μmol·m-2·s-1强光下,AOX途径受抑,导致RumexK-1叶片发生严重的光抑制,而此时活性氧清除机制的上调不足以缓解活性氧过量的积累.无论在强光还是弱光下,AOX途径在RumexK-1叶片的光破坏防御过程中都起着重要作用,而且在强光下,AOX途径对叶片的光破坏防御作用是叶绿体内其他光破坏防御途径所不能代替的. 展开更多
关键词 杂交酸模 水杨基羟肟酸 线粒体交替氧化酶途径 光抑制 光破坏防御
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