甘青青兰生品和炒制品总黄酮、总多酚含量及其2,2-二苯基-1-苦肼基自由基清除能力比较

目的比较甘青青兰生品和炒制品中总黄酮、总多酚含量的差异及其清除2,2-二苯基-1-苦肼基(DPPH)自由基能力,探讨生、炒甘青青兰中有效成分含量和抗氧化活性之间的关系。方法分别以75%乙醇为溶媒采用冷浸法对甘青青兰生品和炒制品进行提取,采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH法和Folin-Ciocalteu法分别测定其提取物中总黄酮和总多酚含量,采用DPPH自由基清除法评价其提取物的抗氧化能力。结果甘青青兰生品中总黄酮含量(6.442%)<炒制品(7.929%);甘青青兰生品中总多酚含量(4.132%)≈炒制品(4.136%);甘青青兰生品自由基半数清除率浓度(0.847)>炒制品(0.628),甘青青兰生品自由基清除效率(1181.335)<炒制品(1592.357)。结论甘青青兰抗氧化活性成分可能为酚酸类和黄酮类化合物,其总黄酮和总多酚含量与其抗氧化活性有一定相关性。

1,1-二苯基-2-苦基肼自由基的电子顺磁共振法研究

为了更好地采用1,1-二-苯基-2-苦基肼自由基（DPPH）评价物质的抗氧化能力,采用电子顺磁共振法对DPPH进行了研究.采用自动调模法寻找共振频率,从而实现严格偶合.设定调制频率为100kHz,调制幅度为1 GT,在0～9 500 GT范围内寻找样品的电子顺磁共振谱图,并确定中心磁场和扫描宽度.分别改变微波功率、时间常数、接收机增益及x轴的扫描次数,运行后得到不同条件下的电子顺磁共振谱图.得到的实验优化条件：DPPH浓度0.5 mmol/L,中心磁场3522.33 GT,扫描宽度100 GT,调制频率100 kHz,调制幅度1 GT,接收机增益5.02×104,时间常数10.24 ms,扫描次数3次.在优化后的实验条件下测得的DPPH的g因子,与其理论值2.003 6接近.

2,2-二苯基-1-苦肼基-高效液相色谱法快速筛选亚麻籽抗氧化活性成分

为了更加迅速地筛选到亚麻籽复杂提取物中的抗氧化活性物质及其活性强弱,以开环异落松树脂酚二葡萄糖苷(SDG)、开环异落叶松树脂酚(SECO)和肠二醇(ED)3种木酚素为研究对象,建立了抗氧化活性能力筛选的2,2-二苯基-1-苦肼基-高效液相色谱法(DPPH-HPLC法)。液相色谱条件为:流动相为乙腈和水,经反相色谱柱Waters XBridge C18分离,检测波长为280 nm。DPPH-HPLC法的步骤是:将单一或者混合抗氧化剂分别与DPPH混合,放置20 min,作为待测液,将同样量的相应抗氧化剂作为对照液,分别进行液相色谱分析获得其含量,计算出相应的抗氧化剂清除率(SRA),活性顺序为:SDG>SECO>ED。结合超高效液相色谱-飞行时间质谱联用法,鉴定出亚麻籽中5种抗氧化物,筛选其抗氧化能力分别为:SDG异构体(5)>SDG(4)>7α-[(β-D-glupyranosyl)oxy]-1-methoxyisolariciresinol(1)>(6R,7R,8S)-1-Methoxyisolariciresinol(2)>蜀葵苷元二葡萄糖苷(3)。结果表明,建立的DPPH-HPLC法能够有效完成复杂亚麻籽提取物的抗氧化活性物质筛选。

1,1-二苯基-2-2苦基肼基游离基法测定调脾护心方及其不同组分清除自由基的能力

目的研究调脾护心方的清除自由基活性及其成分。方法分别采用乙醇或水加热提取调脾护心方成分,并用石油醚、氯仿、醋酸乙酯和正丁醇依次进行萃取,利用1,1-二苯基-2-2苦基肼基游离法(DPPH法)进行清除自由基活性实验,同时与合成抗氧化剂维生素C进行对照。结果各组分均有一定的清除自由基作用,且调脾护心方水提物的醋酸乙酯萃取部分具有最高的清除自由基活性。结论调脾护心方中的多酚类成分是主要的抗氧化活性成分,值得进一步研究。

含喹啉基片段的水杨醛席夫碱类化合物的合成及其淬灭1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基性能

通过2-甲基-5-氨基喹啉和取代水杨醛缩合反应,合成了10个含喹啉基片段的水杨醛席夫碱类化合物。通过1HNMR、13CNMR、IR、LC-MS和元素分析技术确证了产物的结构,并测定了目标化合物在不同浓度时淬灭1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基活性。结果表明,所有化合物在测试浓度0.02~0.10 g/L时都表现出一定的淬灭DPPH自由基活性,清除率主要集中在19%~35%之间,但是4-溴-2-甲氧基-6-{[(2-甲基-5-喹啉基)亚氨基]甲基}苯酚在浓度0.06 g/L时表现出特别优异的活性,清除率高达43.1%。目标化合物质量浓度的变化对活性的影响不明显或者没有明显的变化规律。

含吗啉基片段的水杨醛席夫碱类化合物的合成及其淬灭1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基性能

通过3-氟-4-吗啉基苯胺和取代水杨醛缩合反应,合成了14个含吗啉基片段水杨醛席夫碱类化合物(Ⅰa-Ⅰn)。通过核磁共振波谱仪(NMR)、傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)、液相色谱-质谱联用仪(LC-MS)和元素分析等技术手段研究了产物的结构和淬灭1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的活性。结果表明,在0. 02～0. 10 g/L,所有化合物均表现出一定的淬灭DPPH自由基活性。其中,化合物Ⅰd和Ⅰf表现出较为优异的性能,化合物Ⅰd的活性在30%～55%,化合物Ⅰf的活性则大于50%。随着化合物Ⅰd、Ⅰh、Ⅰj和Ⅰn质量浓度的增大,其淬灭DPPH自由基的活性均呈现增强趋势。

1,1-二苯基-2-三硝基苯基肼自由基的合成改进

以氯苯和N,N-二苯基肼盐酸盐为起始原料,经2步硝化、亲核取代和氧化合成目标化合物1,1-二苯基-2-三硝基苯基肼自由基,4步反应总收率59.7%,并对最后一步反应进行优化,目标化合物经熔点和MS确证。

葡萄糖-牡蛎酶解液美拉德反应体系的抗氧化活性

以牡蛎酶解液与葡萄糖建立美拉德反应体系,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、金属离子螯合能力和还原能力为指标,通过葡萄糖质量分数、反应温度、p H值以及反应时间4个因素的单因素试验和正交试验优化得到具有强抗氧化活性的美拉德反应产物适宜反应条件。结果表明,葡萄糖-牡蛎酶解液美拉德反应产物具有较强抗氧化活性的反应条件为葡萄糖质量分数4%、反应温度120℃、p H7.0、反应时间120min。在此组合条件下,牡蛎酶解液美拉德反应得到的反应液的DPPH自由基清除率为93.2%,金属离子螯合能力为22.5%,还原能力为1.436。

应用均匀设计-高通量筛选技术评价丹参有效单体成分抗氧化及海马神经细胞保护作用的最佳配伍

目的:通过均匀设计-高通量筛选(uniform design-high throughput screening,UD-HTS)技术,对丹参多种有效单体成分进行多因素多水平配伍组合样品抗氧化及海马神经细胞保护作用的筛选。方法:具有生物活性的丹参多种有效单体(脂溶性7种和水溶性7种)。按照均匀设计方案,得到各单体之间不同浓度配比的组合样品,通过抗2,2-二苯基-1-苦肼基自由基(2,2-Di(4-tert-octylphenyl)-1-picrylhydrazyl,DPPH)氧化法和细胞学实验检测各组合样品药物活性。结果:通过初筛和复筛,得到A13、PA两个抗氧化及海马神经细胞保护作用最佳配伍组合样品。结论:均匀设计-高通量筛选技术可快速筛选出药效较好的组合样品,适合多因素多水平配比的大规模药物筛选。

芹菜素-镁配合物的制备、表征及抗氧化活性的研究

通过加热回流法制备芹菜素与镁离子的配合物,确定其形成配合物的最佳条件为p H值9. 0,反应温度60℃,反应时间3 h,得率为82. 31%。采用紫外-可见光光度法、红外光谱法、元素分析法对形成的配合物进行表征;等摩尔变化法及相溶解度法测定其配合比及稳定常数,结果在研究的溶度范围内,芹菜素与镁离子形成稳定的配合物,配合比1∶1,溶解度增加,在液体中对自由基(DPPH·)的清除能力大大增强。

HPLC-DPPH快速发现重楼果壳总黄酮中抗氧化成分及其活性初步验证

目的:以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)为底物,利用HPLC快速发现重楼果壳总黄酮中的抗氧化物成分,为重楼果壳资源的利用提供研究基础。方法:对重楼果壳用70%乙醇水提取进行总黄酮提取富集后,利用DPPH与重楼果壳总黄酮进行反应,采用HPLC分析反应前后色谱峰的变化,通过制备色谱、高分辨质谱、核磁共振等鉴定潜在的抗氧化成分,并进行其抗氧化活性验证。结果:与DPPH反应后,发现一个色谱峰消失,利用制备色谱对该消失的色谱峰进行制备纯化,利用质谱和核磁共振数据,鉴定为槲皮素-3-O-龙胆二糖苷,该化合物首次从重楼属植物中分离得到,在重楼果壳总黄酮中的含量为3.28%。对其抗氧化活性进行验证,发现其对DPPH自由基半数清除率(IC50)为0.0340 mg·ml^(-1),与维生素C(IC50=0.0240 mg·ml^(-1))的抗氧化活性相当。结论:该法快速从重楼果壳中发现抗氧化活性成分槲皮素-3-O-龙胆二糖苷,为重楼果壳总黄酮的进一步开发提供研究基础。

自由基含量对H_2O_2复合固体推进剂贮存稳定性的影响

以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)为指示剂,采用紫外-可见分光光度法实现了过氧化氢复合固体推进剂(HPSP)体系内自由基含量的定量测试。结果表明,HPSP体系内自由基含量与推进剂贮存过程中的质量损失存在正相关关系,可以作为评判稳定剂效果及推进剂贮存性能的标准;CD-n型稳定剂可较好地抑制HPSP体系内的自由基含量,引入该型稳定剂后,HPSP体系内自由基浓度低于原材料H_2O_2中的自由基浓度;HPSP体系内自由基含量(C_(radical))与推进剂质量损失速率(r_(M_R))呈指数关系,常温条件下采用CD-n型稳定剂时,二者的经验公式为r_(M_R)=0.003 65+1.70 66×10^(-8)exp(5.531 78C_(radical))。

分光光度法测定太白山20种中草药的抗氧化活性

采用分光光度法测定秦岭太白山 2 0种中草药的乙醇提取液对DPPH·(1 ,1 二苯基 2 苦肼基自由基 )的清除作用。检查了 2 0种中草药的抗氧化活性 ,其中枇杷菜、金钱草、桃儿七、朱砂七、虎杖和独叶草 6种中草药在浓度为 0 .4mg(干重 ) /mL时对DPPH的清除作用都超过 80 % ,且具有较强的抗氧作用。枇杷菜浓度为 0 .4mg(干重 ) /mL时 ,对DPPH·的清除作用仍高达 84.1 % ,且抗氧化作用最强。

用清除DPPH自由基法评价药黑豆色素的抗氧化能力

通过对DPPH·体系的吸收光谱和稳定性研究,确定DPPH·乙醇溶液的检测波长为517nm;体系中加入不同抗氧化剂反应30min趋于稳定;用上述方法评价纯化前后的药黑豆色素(MBSP1和MBSP2)对DPPH·清除率和浓度之间的关系,以VC作对照,HSC50值作为评价指标,并对MBSP2进行抗氧化动力学分析和FT-IR分析。结果表明,药黑豆色素对DPPH·具有明显的清除作用,VC、MBSP1和MBSP2三者的HSC50值分别为0·63、1·09、0·88mg/mL,同时药黑豆色素的抗氧化能力与其花色苷含量呈正相关。FT-IR结果表明,药黑豆色素是一种以矢车菊素为主要结构的花色苷类化合物。

荜茇挥发油清除自由基作用及其与分子结构的关系

目的观察海南产荜茇挥发油清除自由基活性,探讨其与分子结构的关系。方法DPPH法检测清除自由基活性;GC-MS法分析其化学成分,并用谱库检索确定各化合物结构。结果①荜茇挥发油具有清除DPPH自由基的能力,且浓度越高,活性越强;②海南产荜茇挥发油含41个化合物,碳碳双键C=C的相对含量占绝对优势。结论碳碳双键C=C可能为荜茇挥发油清除自由基活性的必需官能团。

用清除有机自由基DPPH法评价市售腐乳提取物的抗氧化能力

用清除1,1-二苯基-2-苦基苯肼(DPPH)自由基能力表示腐乳提取物的抗氧化能力,并以抗氧化剂(α-生育酚)为当量浓度表示抗氧化的能力大小。中国市售14种腐乳的水提取物的抗氧化活性为2.03～11.93μgα-生育酚/mg,50%乙醇提取物的抗氧化活性为0.75～4.94μgα-生育酚/mg。14种腐乳提取物的总抗氧化活性为2.91～16.87μgα-生育酚/mg)。贵州的“老干爹”和福建的“米酱豆腐乳”均显出最大的活性。

类胡萝卜素清除自由基的动力学及体外模拟消化对清除率的影响

测定不同质量浓度类胡萝卜素在不同温度条件下清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基的能力;考察经人工胃液、肠液及胃液-肠液3种方法模拟消化后类胡萝卜素清除DPPH自由基能力的变化情况。结果表明:反应温度(T)对类胡萝卜素清除DPPH自由基的速率(k)影响显著(P<0.05),T升高,k增大,即k45℃>k37℃>k30℃,而对清除率(α)无显著影响;类胡萝卜素初始质量浓度(ρ)对α影响显著,ρ升高,α增大,而对k无显著影响;类胡萝卜素对DPPH自由基的清除作用符合一级反应动力学模型;T对半数效应浓度(EC50)、k和半衰期(t1/2)影响显著,T升高,EC50减小(EC50(45℃)<EC50(37℃)<EC50(30℃))、k增大(k45℃>k37℃>k30℃)、t1/2减小(t1/2(45℃)<t1/2(37℃)<t1/2(30℃));表观活化能(Ea)和方程常数(K0)不受ρ的影响,Ea=17.039 k J/mol、K0=7.38×106;体外模拟消化后的类胡萝卜素对DPPH自由基的清除率减小,且底物浓度越大,清除率下降百分比越大,降幅越小;与油脂混合后的类胡萝卜素经体外模拟消化后对DPPH自由基的清除率低于不加油脂组,即脂溶性的类胡萝卜素与油脂混合后更易被人体消化吸收,但因不同植物油的脂肪酸组成不同,对其消化吸收的影响存在差异。

多管藻中新溴代酚的鉴定及其自由基清除活性

应用正相硅胶、凝胶Sephadex LH-20柱色谱和反相HPLC方法,从多管藻(Polysiphonia urceolata)中分离得到一个新化合物A,通过IR、MS、1D和2DNMR波谱技术鉴定为3-溴-4-[3-溴-4,5-二羟基苄基]-5-(乙氧甲基)-1,2-苯二酚。对化合物A进行的生物活性测试显示:其有明显的清除DPPH自由基活性,显示出较好的抗氧化能力。

丹酚酸B清除DPPH有机自由基活性及影响因素研究

目的探讨丹酚酸B清除DPPH自由基的活性及其影响因素。方法运用自由基反应模型观察丹酚酸B对DPPH自由基的淬灭效应。结合高效液相色谱技术分别研究温度和pH值对丹酚酸B清除DPPH能力的影响。结果在设定的反应体系下,丹酚酸B能有效清除DPPH自由基。相同浓度下其清除能力高于二丁基羟基甲苯(BHT)和抗坏血酸(AsA)。热处理后,丹酚酸B含量和清除DPPH自由基能力有不同程度下降。pH=3时丹酚酸B含量相对稳定,其清除能力较其它环境显著增加。结论丹酚酸B具有清除DPPH自由基的能力。温度对其含量和抗氧化能力有较大影响。酸性条件有利于丹酚酸B的稳定性和清除能力的增强。

白英果提取物清除DPPH自由基活性研究

确定了以分光光度法测定天然抗氧化剂清除2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazy(l2,2-二苯基-1-苦肼基,DPPH)自由基能力的条件。通过测定芦丁、檞皮素、抗坏血酸、没食子酸的自由基清除率曲线,提出以IC50值作为评价试样清除DPPH自由基能力的指标,并将此应用于白英果提取物清除DPPH自由基能力的测定,测得白英果乙醇提取液、乙酸乙酯提取液以固形物计算的IC50值分别为0.230和1.010。