4%中性甲醛固定液制备及质量评价

目的研制4%中性甲醛固定液并建立质量标准。方法制备4%中性甲醛固定液,检查性状、pH并进行鉴别,采用间接碘量法测定甲醛的含量。结果 4%中性甲醛固定液为无色澄清液体,有刺激性气味,pH为7.2～7.4,其检测浓度线性范围为29.60～51.80mg.mL-1,r=0.9999(n=7);平均回收率为99.91%,RSD=0.90%(n=9)。结论此试验含量测定线性关系良好,检测范围宽,系统适用性好,回收率、稳定性和精密度均符合要求。本质量控制方法简便,准确,可作为该制剂质量快速检验的方法 。

不同组织固定液对毛囊内蛋白固定效果的对比研究

目的探讨4%多聚甲醛、10%中性缓冲甲醛液、丙酮和95%乙醇4种组织固定液对大鼠毛囊冷冻切片免疫组织荧光染色的影响,找出最佳的冰冻切片固定液。方法选取2只SD大鼠,乙醚麻醉后处死,剪下大鼠唇部皮肤,分离触须毛囊后随即进行冷冻连续切片。将切片分别置于4%多聚甲醛、10%中性缓冲甲醛液、丙酮、95%乙醇固定液中固定,所有切片经过相同的固定时间后进行免疫荧光染色,检测毛囊内细胞角蛋白(CK15)和β-连环蛋白(β-catenin)的表达情况。结果免疫荧光染色结果显示,4%多聚甲醛、10%中性缓冲甲醛、丙酮、95%乙醇对蛋白抗原的保存效果各不相同,其中4%多聚甲醛固定效果较好,组织内可见较强的荧光表达,而经10%中性缓冲甲醛、丙酮、95%乙醇固定的组织则呈现更低的表达状态。结论不同的组织固定液对蛋白的保存效果存在差异,4%多聚甲醛对毛囊内蛋白具有更好的保存效果。

三种固定液使用情况的比较

目的将环保型标本保存液、无醛GS固定液和10%的甲醛液,保存新鲜病理组织、比较三种液体对病理标本防腐固定作用有何不同,探索无醛GS固定液取代10%甲醛液的可能性。方法分别用环保型标本保存液、无醛GS固定液和10%甲醛液固定同类活检标本48h,进行常规石蜡切片染色,观察三种不同固定方法对组织常规石蜡切片效果影响。另外将新鲜组织标本放入以上三种固定液中固定1年,观察病理标本在三种固定液中的差别。结果 10%甲醛液与无醛GS固定液对新鲜标本固定效果相同,常规石蜡切片组织细胞结构同样清晰;用10%甲醛液和无醛GS固定液固定2个月后的标本放入保环保型标本保存液保存效果良好,未经处理的新鲜组织单用放入环保型标本保存液做固定效果差,标本组织腐烂发霉、液体浑浊及标本上浮水平面等现象。结论无醛GS固定液对病理标本的固定、组织制片的效果与10%甲醛液有同样效果,无醛GS固定液完全可替代致癌剂甲醛液在标本固定、组织切片制作中的运用;环保型标本保存液用于经过无醛GS固定液固定2个月以上的病理标本保存效果好。

3种固定液对骨髓细胞涂片免疫组化染色中的应用

比较3种固定液对骨髓细胞学涂片免疫组化染色的影响。方法:将我院收治的 120 例有血液系统疾病的患者作为研究对象,将抽取的骨髓进行涂片,分别用80%酒精(甲组)、冷丙酮(乙组)、10%中性甲醛(丙组)固定涂片,再通过全自动免疫组化染色机进行染色,比较各组经过免疫组化机抗原修复后掉片率及染色后抗体阳性表达率。结果:3组固定后经抗原修复后免疫组化染色掉片率比较,差异有统计学意义(P<0.05),两两比较掉片率:甲组掉片率(0.0%)与乙组掉片率(2.5%)比较,差异无统计学意义(X2=3.038,P=0.081);甲组掉片率(0.0%)与丙组掉片率(52.5%)比较,差异有统计学意义(X2 =85.424,P=0.001);乙组掉片率(2.5%)与丙组掉片率(52.5%)比较,差异有统计学意义(X2=75.235,P=0.001)。3种方法在抗体阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:应用80%酒精固定与冷丙酮固定掉片率无或者是及低,但用冷丙酮固定成本比80%酒精高,而且丙酮有毒、对技术员身体有害,所以不适合使用。

三种小鼠眼球组织石蜡切片固定液固定效果的比较

背景:固定液是影响病理制片质量的重要因素,为了优化眼球组织病理学观察的条件,需要相对简便、实用和可靠的固定液。目的:比较3种固定液对小鼠眼球组织石蜡切片的影响,优化小鼠眼球组织石蜡切片的固定方法。方法:取30只BALB/c小鼠(济南朋悦实验动物繁育有限公司提供)眼球,随机分为3组,每组10只,分别固定于3种固定液中,即甲醛-戊二醛混合固定液、Davidson固定液和体积分数10%甲醛固定液,24 h后制作标本并进行苏木精-伊红染色,分析比较固定效果。动物实验获得山东省立第三医院伦理委员会批准,批准号:sdsldsyy-m-201801006。结果与结论:①各组大部分眼球大体标本均略有收缩变形;②苏木精-伊红染色显示,甲醛-戊二醛组眼球壁出现皱缩,晶状体结构较完整、清晰,中央区无破碎,细胞排列整齐有序;角膜成纤维细胞间出现较大空隙;视网膜组织明显脱落分离,各层细胞不清晰,细胞间可见明显空白裂隙;③苏木精-伊红染色显示,Davidson组视网膜轻微变薄,分层排列较平整,未见明显缺失,无明显脱落,各层细胞排列紧密整齐,细胞核各层核膜清晰,细胞无收缩、膨胀;角膜各层结构完整,无明显结构改变,未见脱片现象,各层结构清晰、无裂隙;晶状体结构中央区可见不同程度破碎、脱片、染色不连续;④苏木精-伊红染色显示,甲醛组角膜组织轻微收缩,角膜上皮各层结构较整齐、层次较分明,晶状体和视网膜结构基本完整,但晶状体组织皱缩破裂、空隙形成,细胞排列乱序,可见视网膜组织脱落,各层排列较平整,细胞结构基本清晰,细胞间可见明显空白裂隙;⑤结果表明对于苏木精-伊红染色,Davidson固定液对角膜和视网膜的固定效果较为理想,而甲醛-戊二酸混合固定液是固定小鼠眼球晶状体组织的较好方法。

Bouin氏液二次固定时间对家兔肝脏纤维化Masson三色染色的影响

目的:探讨Bouin氏液二次固定时间对Masson三色染色效果的影响,进一步寻找Bouin氏液二次固定的最佳条件。方法:取5例肝纤维化模型家兔肝脏组织(10%中性福尔马林固定)的蜡块,切片、脱蜡后,用Bouin氏液二次固定,固定时间分别为0 min、15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、过夜。进行Masson三色染色并用光镜和统计软件分析比较染色结果。结果:未经二次固定的切片与所有经过二次固定的切片染色评分比较,差异均有统计学意义(P<0.05);二次固定过夜的染色效果最好,其与二次固定4 h染色评分比较,差异无统计意义(P>0.05)。结论:Bouin氏液二次固定的肝纤维化切片的Masson三色染色效果优于仅经福尔马林固定的切片;二次固定4 h或过夜切片的染色效果最佳。

混合固定液在病理制片中的固定效果观察

目的观察混合固定液在病理制片中的固定效果。方法将日常取材后的新鲜标本组织块分2批放入脱水机的固定液缸中，分别用4％甲醛固定液和混合固定液固定，然后常规制片。结果混合固定液固定的切片组织结构清晰，着色均匀，染色鲜亮。结论两种固定液均可以用于常规标本的固定，但混合固定液固定效果好于4％甲醛固定液。

如何选择合适的病理标本固定液容器

活体组织病理诊断是外科疾病诊断的金标准-（[1]）,如果组织自溶、结构破坏、细胞变形就可能导致无法诊断-（[2]）。病理标本固定液一般为甲醛溶液,市售的甲醛溶液为含40%甲醛的溶液,其最佳固定效果为含4%甲醛的溶液,又叫做福尔马林溶液,因此在固定病理标本前应将其稀释10倍,即1份的市售甲醛溶液加9份的水。如果是一些怀疑恶性肿瘤或者恶性肿瘤需做免疫组织化学的,则应选择中性甲醛溶液固定,

Bouin液和4％中性甲醛固定液对睾丸活检组织固定和HE染色差异的比较

在男性学发展过程中，睾丸活检曾经是惟一对无精子症或少精子症有诊断价值的检查。随着精液内一些附性腺的功能性指标检测技术的建立，生殖激素测定及与精子发生有关基因诊断技术的开展，睾丸活检已成为一种既可协助临床诊断又可指导临床治疗的方法。通常情况下睾丸活检组织与普通组织标本放在一起用4％中性甲醛液固定，但甲醛在睾丸组织的固定中渗透速度相对较慢，

固定时间对口腔黏膜鳞状细胞癌组织染色的影响

目的探讨固定时间对口腔黏膜鳞状细胞癌组织HE染色和免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色的影响。方法选取10例患者口腔黏膜鳞状细胞癌组织,每例各取4块,分别固定8h、24h、48h和1周,进行HE染色和高分子量细胞角蛋白(cytokeratin high molecular weight,CKH,克隆号34βE12)和广谱细胞角蛋白(cytokeratin pan,ckpan,克隆号AE1/AE3)IHC染色,观察细胞形态的优良、染色情况及IHC染色的阳性强度和阳性率。结果 HE染色和IHC染色结果均显示口腔黏膜鳞状细胞癌组织形态和染色、阳性强度和阳性率最佳为固定24h,8h为最差。固定1周者染色效果较48h差。结论本研究表明对口腔黏膜鳞状细胞癌组织,24h为最佳固定时间;组织固定不充分对HE染色和IHC染色的影响要大于固定时间过长的影响;固定时间越长,对HE染色和IHC染色效果影响越大。

Bouin氏液与10%福尔马林固定组织对Masson氏三色染法染色结果的影响

目的:了解Bouin氏液与10%福尔马林固定组织对Masson氏三色染法染色结果的影响。方法:取肝纤维化模型大鼠肺、肾、肝脏,分别用Bouin氏液与10%福尔马林固定,切片后,用Masson氏三色染法进行胶原纤维染色,比较染色结果。结果:Bouin氏液固定组织胶原纤维染成绿色,胞核、胞质染成紫红色,红细胞染成桔黄色;10%福尔马林固定组织胶原纤维、胞核染成绿色,胞质染成紫红色,红细胞染成桔黄色。结论:Bouin氏液较10%福尔马林固定组织Masson胶原纤维染色特异性更强,背景色干净,组织结构更清晰。

不同固定方法制作细胞蜡块的效果比较

目的比较在脱落细胞学检查过程中采用不同固定方法制作细胞蜡块所获效果的差异,寻求最佳固定方法。方法收集2020年1至4月浙江省台州医院病理科送检的胸腹水标本60例。采用10%中性缓冲甲醛和95%乙醇联合固定、薄层液基细胞学检查指定保存液固定以及细胞蜡块制作试剂盒固定3种不同的固定方法对同一体腔积液进行处理,离心富集细胞后,制成细胞蜡块,行HE染色和免疫组化染色,观察切片HE染色结果和免疫抗体标志物表达情况。结果10%中性缓冲甲醛和95%乙醇联合固定的细胞富集蜡块HE染色鲜艳,细胞形态基本完好,核质分明,免疫标记定位良好;薄层液基细胞学检查指定保存液固定的细胞蜡块HE染色偏红,细胞核偏小有固缩现象,免疫标记欠佳;细胞蜡块制作试剂盒固定的细胞蜡块细胞量偏少,HE染色细胞轮廓较模糊,细胞核重叠现象严重,免疫标记欠佳。结论在病理细胞学检查过程中,采用10%中性缓冲甲醛和95%乙醇联合固定效果最佳,且操作简便,费用低廉,更适合于各级医疗单位。

固定剂对肾组织染色的影响

众所周知,组织的正确固定具有重要意义。选择理想的固定剂不仅能保持细胞与生活时的形态相似,成份相仿,而且对染色也有良好的、微妙的助染作用。本文用三种固定剂对人、大鼠肾组织固定后,在 HE,PAS,Masson 及 PASM-Masson 等染色方面进行观察比较,借以探讨不同固定剂对肾组织染色的影响。

植物标本保色术

本文介绍了植物原色标本制作及保存的方法，这是作者在前人的基础上加以改革创新，而研究出一整套的方法．在几年的教学实践中取得了良好的效果。

浆膜腔积液病理制片的几种方法对比

目的:比较几种浆膜腔积液的制片方法对后期诊断的影响。方法:收集20份浆膜腔积液标本,分别用液基沉降法,添加95%乙醇制作蜡块后切片,添加10%中性福尔马林液制作蜡块后切片处理,对三种方法制片后细胞数量,细胞形态及后期诊断方法应用比较。结果:综合满足即可保证细胞数量,又可为后期诊断方法如免疫组化提供可行性的是添加95%乙醇制作蜡块的方法,此方法的不足之处在于经离心细胞沉渣再次用95%乙醇固定制作蜡块后细胞形态不能完全还原,影响HE切片诊断。