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霍氏肠杆菌β-胡萝卜素9,10'双加氧酶的制备及其应用
1
作者
魏涛
王敏
+4 位作者
张志平
段乃心
杨旭
黄申
毛多斌
《中国酿造》
CAS
北大核心
2022年第1期128-132,共5页
以霍氏肠杆菌(Enterobacter hormaechei)基因组DNA为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)法扩增β-胡萝卜素9,10’双加氧酶基因,构建重组质粒,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达,并采用高效液相色谱(HPLC)法检测9,10’双加氧酶活...
以霍氏肠杆菌(Enterobacter hormaechei)基因组DNA为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)法扩增β-胡萝卜素9,10’双加氧酶基因,构建重组质粒,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达,并采用高效液相色谱(HPLC)法检测9,10’双加氧酶活性。结果表明,通过镍柱亲和层析和分子筛Sephacryl TM S-200,得到纯化重组β-胡萝卜素9,10’双加氧酶,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,该酶分子质量约57 k Da,最适反应温度为40℃,最适反应p H值为8.5;当底物β-胡萝卜素质量浓度为500 mg/L,β-胡萝卜素9,10’双加氧酶酶活为0.4 U/m L时,β-紫罗兰酮产量为142.3 mg/L,产率达到79.4%。
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关键词
霍氏肠杆菌
克隆表达
Β-紫罗兰酮
β-胡萝卜素9
10’双加氧酶
酶学性质
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职称材料
题名
霍氏肠杆菌β-胡萝卜素9,10'双加氧酶的制备及其应用
1
作者
魏涛
王敏
张志平
段乃心
杨旭
黄申
毛多斌
机构
郑州轻工业大学食品与生物工程学院
出处
《中国酿造》
CAS
北大核心
2022年第1期128-132,共5页
基金
河南省高校科技创新人才项目(18HASTIT040)
广西中烟对外合作项目(2020450000340027)。
文摘
以霍氏肠杆菌(Enterobacter hormaechei)基因组DNA为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)法扩增β-胡萝卜素9,10’双加氧酶基因,构建重组质粒,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达,并采用高效液相色谱(HPLC)法检测9,10’双加氧酶活性。结果表明,通过镍柱亲和层析和分子筛Sephacryl TM S-200,得到纯化重组β-胡萝卜素9,10’双加氧酶,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,该酶分子质量约57 k Da,最适反应温度为40℃,最适反应p H值为8.5;当底物β-胡萝卜素质量浓度为500 mg/L,β-胡萝卜素9,10’双加氧酶酶活为0.4 U/m L时,β-紫罗兰酮产量为142.3 mg/L,产率达到79.4%。
关键词
霍氏肠杆菌
克隆表达
Β-紫罗兰酮
β-胡萝卜素9
10’双加氧酶
酶学性质
Keywords
Enterobacter hormaechei
cloning and expression
β-ionone
β-carotene 9
10’
dioxygenase
enzymatic property
分类号
S852.2 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
霍氏肠杆菌β-胡萝卜素9,10'双加氧酶的制备及其应用
魏涛
王敏
张志平
段乃心
杨旭
黄申
毛多斌
《中国酿造》
CAS
北大核心
2022
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