1,10邻二氮杂菲双过氧钒酸钾对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的干预作用

目的探讨1,10邻二氮杂菲双过氧钒酸钾[BPV(phen)]在脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤中的作用。方法取18只雄性C57BL/6小鼠随机分为三组:空白对照组、LPS组、BPV(phen)+LPS组。除空白对照组外,其他两组小鼠气管滴注含LPS(3mg·kg-1)的生理盐水溶液100μL,BPV (phen)+LPS组在给予LPS前30min时,腹腔给予0.4μmol·L-1 BPV(phen) 500μL,空白对照组和LPS组则腹腔给予等量生理盐水。给予LPS 24h后,处死小鼠,留取肺组织备用。肺组织切片HE染色评估肺损伤程度;Western blot法检测肺组织中Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3和SP-C的表达;TUNEL染色检测肺上皮细胞凋亡,ELISA法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性。结果与对照组相比,LPS处理24h后,肺上皮细胞凋亡增多,肺组织Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达增加,肺组织Bcl-2和SP-C表达减少,肺组织MPO活性增加(P均<0.05);BPV(phen)能降低LPS引起的急性肺损伤和肺上皮细胞凋亡,降低肺组织Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达,增加肺组织Bcl-2和SP-C蛋白表达,降低肺组织MPO活性(P均<0.05)。结论 BPV(phen)对LPS诱导的急性肺损伤有保护作用,可能是通过抑制肺上皮细胞凋亡实现的。

1,10-邻二氮杂菲双过氧钒酸钾对HT22细胞增殖和周期的影响

目的探讨1,10-邻二氮杂菲双过氧钒酸钾〔BPV(phen)〕是否通过调节DNA甲基转移酶(DNMT)的表达,调控细胞周期相关基因表达,进而影响细胞周期。方法 BPV(phen)0.3和3.0μmol·L-1处理HT22细胞24 h,MTS法检测细胞存活;流式细胞术方法检测细胞周期;ELISA法检测DNMT活性;实时荧光定量PCR检测p21,DNMT1,DNMT3A和DNMT3B mRNA表达水平;Western印迹法分别检测相应蛋白表达水平。结果与DMSO对照组相比,BPV(phen)0.3μmol·L-1对细胞存活率无显著影响,BPV(phen)3.0μmol·L-1组细胞存活率显著降低(P<0.05)。细胞周期结果显示,与DMSO对照组相比,BPV(phen)0.3μmol·L-1组各细胞周期百分比无显著差异,BPV(phen)3.0μmol·L-1组S期细胞显著增加,为(76.1±1.6)%(P<0.05),G2期细胞显著降低(P<0.05),为(2.1±1.5)%。与DMSO对照组相比,BPV(phen)3.0μmol·L-1组细胞DNMT活性显著增加(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,与DMSO对照组相比,BPV(phen)0.3μmol·L-1组p21,DNMT1,DNMT3A和DNMT3B mRNA表达水平无显著差异,BPV(phen)3.0μmol·L-1组各基因表达水平均显著增加(P<0.05,P<0.01)。Western印迹结果显示,与DMSO对照组相比,BPV(phen)0.3μmol·L-1组各蛋白表达水平均无显著性差异,只有BPV(phen)3.0μmol·L-1组DNMT3B和P21蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论 BPV能够通过改变DNMT的表达,调节下游与细胞周期相关基因的表达,进而影响HT22细胞的生长和增殖。