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溃疡性结肠炎患者肠黏膜组织IL-23、IL-10、TLR2 表达与Baron分级和肠道菌群的关系
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作者 周传波 刘立坤 +2 位作者 史晓斌 焦冬菊 王华 《现代消化及介入诊疗》 2024年第5期610-613,共4页
目的分析溃疡性结肠炎(UC)患者肠黏膜组织白介素-23(IL-23)、白介素-10(IL-10)、Toll样受体2(TLR2)表达与Baron分级和肠道菌群的关系。方法选取2022年1月至2023年12月我院收治的74例UC(UC组)患者,另选取同期健康体检者60名作为对照组,... 目的分析溃疡性结肠炎(UC)患者肠黏膜组织白介素-23(IL-23)、白介素-10(IL-10)、Toll样受体2(TLR2)表达与Baron分级和肠道菌群的关系。方法选取2022年1月至2023年12月我院收治的74例UC(UC组)患者,另选取同期健康体检者60名作为对照组,比较两组肠黏膜组织IL-23、IL-10、TLR2表达和Baron内镜分级评分、肠道菌群,并分析肠黏膜组织IL-23、IL-10、TLR2表达与Baron内镜分级评分和肠道菌群的相关性。结果UC组黏膜组织IL-23、TLR2表达水平为(3.26±1.03)、(1.92±0.40),高于对照组的(1.55±0.20)、(1.01±0.13),IL-10表达水平为(0.77±0.20),低于对照组的(2.08±0.45)(P<0.05)。UC组Baron内镜分级评分为(3.65±0.20)分,高于对照组的0分(P<0.05)。UC组双歧杆菌、乳酸杆菌为(5.41±1.22)cfu/g、(5.62±1.40)cfu/g,低于对照组的(9.67±2.88)cfu/g、(8.93±2.55)cfu/g,大肠埃希菌、拟杆菌、肠球菌为(16.22±3.36)cfu/g、(4.01±0.82)cfu/g、(8.33±2.29)cfu/g,高于对照组的(8.21±2.14)cfu/g、(2.13±0.26)cfu/g、(4.45±1.03)cfu/g(P<0.05)。pearson相关分析显示,肠黏膜组织IL-23、TLR2表达与Baron内镜分级评分和大肠埃希菌、拟杆菌、肠球菌呈正相关,与双歧杆菌、乳酸杆菌呈负相关,IL-10表达与Baron内镜分级评分和大肠埃希菌、拟杆菌、肠球菌呈负相关,与双歧杆菌、乳酸杆菌呈正相关(P<0.05)。结论UC患者肠黏膜组织IL-23、TLR2呈高表达,IL-10呈低表达,并与肠道菌群紊乱和肠黏膜损伤程度有关。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 白介素-23 白介素-10 TOLL样受体2 Baron分级 肠道菌群
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计算机辅助设计抗MRSA耐药基因mecR1的10-23型脱氧核酶 被引量:2
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作者 周颖 薛小燕 +3 位作者 白卉 马雪 侯征 罗晓星 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期380-384,共5页
应用Primer Premier5.0和RNA structure4.6两种软件设计和筛选有效抗mecR1的10-23型脱氧核酶(DRz),采用电转化的方法将其导入细菌体内,实时PCR的方法定量检测其对mecR1转录的影响,并通过平板克隆形成实验观察脱氧核酶抑制细菌生长的情... 应用Primer Premier5.0和RNA structure4.6两种软件设计和筛选有效抗mecR1的10-23型脱氧核酶(DRz),采用电转化的方法将其导入细菌体内,实时PCR的方法定量检测其对mecR1转录的影响,并通过平板克隆形成实验观察脱氧核酶抑制细菌生长的情况。结果表明,计算机辅助设计合成的5条抗MRSA耐药调控基因mecR1的10-23型脱氧核酶,它们能不同程度的降低mecR1的转录水平,有效抑制临床耐药菌MRSA080309的生长,其中DRz6抑制效果最显著。说明联合应用这两种计算机软件设计抗mecR1的10-23型脱氧核酶,是一种经济实用而有效的方法,能够大大缩短有效反义药物的筛选时间。 展开更多
关键词 10-23型脱氧核酶 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 mecR1基因 计算机辅助设计
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结核分枝杆菌ICL mRNA特异性10-23脱氧核酶切割活性的鉴定及其切割特点 被引量:4
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作者 李俊明 朱道银 +2 位作者 伊正君 江山 骆旭东 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期151-157,共7页
为鉴定结核分枝杆菌异柠檬酸裂合梅(ICL)特异性的10-23DRz在无细胞体系切割ICL mRNA的活性,并探讨其在不同条件下以及联合应用时对靶mRNA的切割特点,采用计算机软件模拟ICL mRNA的二级结构,据此选择适合的待切割靶点并设计针对相... 为鉴定结核分枝杆菌异柠檬酸裂合梅(ICL)特异性的10-23DRz在无细胞体系切割ICL mRNA的活性,并探讨其在不同条件下以及联合应用时对靶mRNA的切割特点,采用计算机软件模拟ICL mRNA的二级结构,据此选择适合的待切割靶点并设计针对相应靶点的特异性10—23DRz(DZ1~DZ5).PCR法扩增获得纠基因并克隆入质粒pET32a+.采用T7 RNA聚合酶体外转录法获取ICL全长mRNA后分别用DZ1~DZ5在无细胞体系中对ICL mRNA进行切割,切割产物经变性聚丙烯酰胺凝胺电泳后用银染法鉴定各DRzs的活性.选择切割活性最强的DZ4考察不同10—23DRz剂量、不同反应时间、不同镁离子浓度条件下及不同错配或突变10—23DRz的切割特点.联合应用DZ1、DZ4及DZ5在无细胞体系中对ICL mRNA进行切割。检测10—23DRz联合应用对切割效率的影响.结果表明,DZ1、DZ3、DZ4及DZ5可在无细胞体系中有效地切割ICL mRNA,其切割效率在30.8%~64.5%之间.对DZ4切割活性的检测发现,其对靶mRNA的切割具有剂量和时间的依赖性;在2—20μmol/L范围内,DZ4的切割活性与Mg^2+浓度呈正相关;DZ4单侧底物结合臂上含一个不与靶mRNA配对的碱基时其切割效率大大降低,两侧底物结合臂上各含一个不配对的碱基或活性中心域第6位出现碱基突变(G—C)时,DZ4完全丧失切割活性.联合应用2种或2种以上10-23DRz可显著增强对底物RNA的切割效率.10-23DRz特异、有效地切割结核分枝杆菌ICL全长mRNA并显示一定的叠加效应,有望用于抗结核分枝杆菌潜伏感染的基因治疗. 展开更多
关键词 1023脱氧核酶 结核分枝杆菌 异柠檬酸裂合酶
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10-23型DNA酶作为鉴定mRNA靶点有效性的新工具 被引量:4
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作者 毛建平 王全会 +4 位作者 韩慧明 袁国刚 左刚 邵世和 毛秉智 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期622-627,共6页
10-23DNA酶是能主动切割mRNA的一类反义寡核苷酸.利用10-23DNA酶的直接切割作用验证mRNA结构靶点的有效性.对筛选的绿色荧光蛋白(GFP)基因mRNA的4个靶点平行设计了4条反义寡核苷酸和4条10-23DNA酶,对照组反义寡核苷酸将最佳靶点——靶点... 10-23DNA酶是能主动切割mRNA的一类反义寡核苷酸.利用10-23DNA酶的直接切割作用验证mRNA结构靶点的有效性.对筛选的绿色荧光蛋白(GFP)基因mRNA的4个靶点平行设计了4条反义寡核苷酸和4条10-23DNA酶,对照组反义寡核苷酸将最佳靶点——靶点2的反义寡核苷酸突变2个碱基,对照组10-23DNA酶将靶点2的10-23DNA酶结合臂中央突变2个碱基.体外4条10-23DNA酶切割mRNA的结果和相应的4条反义寡核苷酸依赖的RNaseH降解结果完全相似,细胞内4条10-23DNA酶对绿色荧光蛋白的表达抑制作用与相应的4条反义寡核苷酸相似,表明10-23DNA酶显示的最佳作用靶点同样是最佳作用效果的反义寡核苷酸结合靶.10-23DNA酶可以作为评价mRNA结构靶点有效性的新工具. 展开更多
关键词 10-23 DNA酶 MRNA 靶点 有效性 反义寡核苷酸 绿色荧光蛋白
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icl mRNA特异性10-23DRz在小鼠体内抗结核分枝杆菌感染的实验研究 被引量:1
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作者 李俊明 朱道银 +2 位作者 王娜 罗清 万腊根 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期541-545,共5页
目的探讨iclmRNA特异性10-23脱氧核酶(deoxyribozyme,DRz)对结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)在小鼠体内感染的影响,及其单独或与异烟肼(isoniazidum,INH)联合应用治疗小鼠结核病的效果。方法分别用DZ4、INH、INH+DZ4-S或I... 目的探讨iclmRNA特异性10-23脱氧核酶(deoxyribozyme,DRz)对结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)在小鼠体内感染的影响,及其单独或与异烟肼(isoniazidum,INH)联合应用治疗小鼠结核病的效果。方法分别用DZ4、INH、INH+DZ4-S或INH+DZ4对Mtb进行预处理,再用上述经过预处理的Mtb感染BALB/c小鼠,一定时间后进行小鼠肺组织Mtb培养及病理学改变观察。利用DZ4-FITC溶液对BALB/c小鼠进行滴鼻处理,检测滴鼻途径给药的效果。采用尾静脉注射法建立小鼠结核病模型,将模型小鼠随机分为5组(n=10),分别给予生理盐水、DZ4、INH、INH+DZ4、INH+DZ4-polyG治疗,于治疗完成2周后进行小鼠肺组织Mtb荷菌量检测和病理学改变观察。结果Mtb感染后2周,各组小鼠的肺组织荷菌量均无显著性差异(P>0.05)。感染进行至4~12周时,INH+DZ4预处理组Mtb感染小鼠的肺组织荷菌量较其它各组均显著偏低(P<0.05),肺组织的病理改变较其他各组也明显轻微。经滴鼻途径给予DZ4-FITC溶液4h后,小鼠肺组织冰冻切片在荧光显微镜下可见强烈的黄绿色荧光,并至少持续48h。对小鼠结核病模型的治疗结果显示,DZ4单独治疗组小鼠肺组织荷菌量及病理表现与未治疗组无显著差异;加用INH治疗的各组小鼠肺组织荷菌量与生理盐水组比较有显著下降(P<0.05),肺组织病理表现也明显轻微,但10-23DRz和INH联合治疗组与INH单独治疗组在肺组织荷菌量和病理表现上均无显著性差异。结论10-23DRz与INH联合预处理可有效降低Mtb感染小鼠的能力;本研究未发现10-23DRz对结核病具有治疗作用或辅助治疗作用。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 1023脱氧核酶 结核病模型 小鼠
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针对Egr-1mRNA的10-23脱氧核酶抑制大鼠动脉损伤后内膜增生的研究 被引量:2
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作者 滕雅轩 赵卫华 +1 位作者 刘闺男 周敬 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1823-1827,1830,共6页
目的探讨针对Egr-1mRNA的10-23脱氧核酶对大鼠动脉损伤后内膜增生的影响和可能的机制。方法制备大鼠颈动脉球囊损伤模型,96只大鼠随机分为4组,A组为假手术组;B组为1mmol/LMgCl2对照组;C组为FuGENE6对照组;D组为FuGENE6介导的ED5转染组;... 目的探讨针对Egr-1mRNA的10-23脱氧核酶对大鼠动脉损伤后内膜增生的影响和可能的机制。方法制备大鼠颈动脉球囊损伤模型,96只大鼠随机分为4组,A组为假手术组;B组为1mmol/LMgCl2对照组;C组为FuGENE6对照组;D组为FuGENE6介导的ED5转染组;每组再按术后3,7,14和21d,分为4个亚组,每组6只。术后3、7、14、21d各处死每组动物6只,分别应用RT-PCR和Western-blot技术检测血管组织Egr-1mRNA水平及蛋白合成情况;HE染色观察损伤血管内膜的增生情况;免疫组织化学染色观察PCNA的表达。结果与B组和C组比较,D组各时间点血管内膜、中膜的厚度和管腔的狭窄率均显著减小(P<0.01);正常血管组织有微量Egr-1表达,术后Egr-1mRNA和蛋白水平逐渐增高,而D组血管组织E-gr-1mRNA和蛋白水平较B组和C组均降低(P<0.01);免疫组织化学染色显示,术后3dPCNA表达开始增加,7d达高峰,14d开始下降,D组血管壁PCNA阳性细胞百分比明显低于B组和C组(P<0.01)。B组和C组之间相比较,以上各指标差异均无显著性(P>0.05)。结论ED5可能通过抑制Egr-1和PCNA的表达,而减轻血管损伤后内膜增生。 展开更多
关键词 EGR-1 10-23脱氧核酶 血管损伤 内腱增生
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益气解毒化瘀方对溃疡性结肠炎大鼠血清IL-23和IL-10的影响 被引量:8
7
作者 程雪 査安生 《安徽中医药大学学报》 CAS 2014年第4期65-68,共4页
目的观察益气解毒化瘀方对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠血清白细胞介素-23(interleukin-23,IL-23)和白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平的影响,探讨益气解毒化瘀方治疗UC的机制。方法将50只雄性SD大鼠随机分为正常组... 目的观察益气解毒化瘀方对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠血清白细胞介素-23(interleukin-23,IL-23)和白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平的影响,探讨益气解毒化瘀方治疗UC的机制。方法将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺吡啶(salicylazosulfapyridine,SASP)组、益气解毒化瘀方低剂量组和益气解毒化瘀方高剂量组,每组10只大鼠。采用三硝基苯磺酸联合无水乙醇灌肠法复制UC模型。药物干预4周后,肉眼下观察各组大鼠结肠大体病理损伤指数(chief morphology damage index,CMDI),光镜下观察各组大鼠结肠组织损伤指数(tissue damage index,TDI),采用酶联免疫吸附试验检测大鼠血清IL-23和IL-10水平。结果各治疗组大鼠结肠CMDI和TDI评分及血清IL-23水平较模型组显著降低(P<0.01),血清IL-10水平较模型组显著升高(P<0.01);益气解毒化瘀方高剂量组在改善上述指标方面显著优于益气化瘀解毒方低剂量组和SASP组(P<0.05,或P<0.01)。结论益气解毒化瘀方通过调节促炎性细胞因子和抑炎性细胞因子平衡,达到治疗UC目的。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 白细胞介素-23 白细胞介素-10 组织形态学 益气解毒化瘀方 INTERLEUKIN-23 INTERLEUKIN-10
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血清白细胞介素-10、白细胞介素-17、白细胞介素-23检测对慢性阻塞性肺疾病合并侵袭性肺曲霉菌感染的诊断及预后评估价值 被引量:4
8
作者 胡传玺 刘灵燕 李漫 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第10期1415-1418,共4页
目的:探讨血清白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并侵袭性肺曲霉菌(IPA)感染的诊断及预后评估价值。方法:选取90例COPD急性加重住院患者,筛查患者IPA感染情况,41例合并IPA... 目的:探讨血清白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并侵袭性肺曲霉菌(IPA)感染的诊断及预后评估价值。方法:选取90例COPD急性加重住院患者,筛查患者IPA感染情况,41例合并IPA感染的患者作为感染组,余49例作为无感染组,比较两组血清IL-10、IL-17、IL-23水平,分析其对IPA感染的诊断价值;并统计感染组死亡情况,分析血清IL-10、IL-17、IL-23水平与预后的关系。结果:感染组IL-10水平低于无感染组(P<0.05),IL-17、IL-23水平高于无感染组(均P<0.05);血清IL-10、IL-17、IL-23及IL-10和IL-17联合、IL-10和IL-23联合、三项指标联合诊断COPD合并IPA感染ROC曲线下面积(AUC)分别为0.692、0.685、0.762、0.836、0.884、0.893,敏感度、特异度分别为66.45%、45.24%,70.50%、52.60%,78.05%、71.43%,60.98%、93.88%,87.80%、77.55%,90.24%、83.50%。41例COPD合并IPA感染患者中,6例死亡,死亡者血清IL-10明显低于存活者,血清IL-17、IL-23水平显著高于存活者(均P<0.05),但Cox回归分析显示仅IL-17为影响患者预后的独立因素(P<0.05)。结论:对于COPD急性加重住院患者,合并IPA感染血清IL-10较低,IL-17、IL-23较高,其联合检测对于IPA感染的诊断及患者预后评估临床价值较高。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 白细胞介素-10 白细胞介素-17 白细胞介素-23 诊断 预后
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内皮素-1 10-23脱氧核酶对离体灌流大鼠心脏急性缺血性心律失常的影响 被引量:3
9
作者 潘秀颉 林丽 +3 位作者 任安经 潘燕霞 王伟忠 袁文俊 《心脏杂志》 CAS 2004年第6期526-529,共4页
目的 :应用内皮素 (endothelin ,ET) 110 2 3脱氧核酶抑制内源性ET 1表达 ,探讨内源性ET 1在急性缺血性心律失常发生中的作用。方法 :设计并合成ET 110 2 3脱氧核酶 ,作体外切割筛选 ;SD大鼠静脉注射ET 110 2 3脱氧核酶 ,观察心肌... 目的 :应用内皮素 (endothelin ,ET) 110 2 3脱氧核酶抑制内源性ET 1表达 ,探讨内源性ET 1在急性缺血性心律失常发生中的作用。方法 :设计并合成ET 110 2 3脱氧核酶 ,作体外切割筛选 ;SD大鼠静脉注射ET 110 2 3脱氧核酶 ,观察心肌对 5’标记荧光素FAM的ET 110 2 3脱氧核酶的摄取和对其后离体灌流大鼠心脏左冠状动脉前降支结扎致急性缺血性心律失常的影响。结果 :设计合成的ET 110 2 3脱氧核酶在体外高效切割ET 1RNA底物 ;荧光标记ET 110 2 3脱氧核酶静脉注射 4h后 ,大鼠心肌组织内荧光广泛分布 ;静脉注射ET 110 2 3脱氧核酶4h后 ,左冠状动脉前降支结扎引起的急性缺血性心律失常显著减轻 ,并呈剂量依赖性 ,而对照序列无此效应。结论 :本实验设计的ET 110 2 3脱氧核酶能有效切割ET 1RNA ,减轻急性缺血性心律失常的发生 ,证明内源性ET 1在急性缺血性心律失常的发生中起重要作用。 展开更多
关键词 10-23脱氧核酶 心律失常 内皮素
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痰菌阴性肺结核患者血清白细胞介素-6、白细胞介素-10、白细胞介素-23、骨桥蛋白水平的动态变化及临床意义 被引量:13
10
作者 郝兴亮 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期359-362,共4页
目的探讨痰菌阴性(菌阴)肺结核患者治疗前后血清白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-23、骨桥蛋白(OPN)动态变化及其临床意义。方法选择初治的菌阴肺结核患者43例,正常对照组40例,应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定正常对照组和菌阴肺... 目的探讨痰菌阴性(菌阴)肺结核患者治疗前后血清白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-23、骨桥蛋白(OPN)动态变化及其临床意义。方法选择初治的菌阴肺结核患者43例,正常对照组40例,应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定正常对照组和菌阴肺结核组治疗前、治疗2个月后、治疗4个月后、治疗6个月后血清IL-6、IL-10、IL-23、OPN的水平。结果菌阴肺结核组治疗前血清IL-6、IL-10、IL-23、OPN水平均明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。经过治疗2个月后患者血清IL-6、IL-10、IL-23、OPN水平开始降低,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗4个月后血清IL-10和OPN接近正常水平,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);IL-6、IL-23水平进行性降低,治疗6个月后接近正常水平,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论菌阴肺结核治疗过程中动态观察IL-6、IL-10、IL-23、OPN水平,可作为评估病情转归及抗结核药物治疗有效性的敏感指标。 展开更多
关键词 痰菌阴性肺结核 白细胞介素-6 白细胞介素-10 白细胞介素-23 骨桥蛋白 炎性反应
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10-23脱氧核酶对CTX-M-38型超广谱β-内酰胺酶的抑制作用 被引量:1
11
作者 张志坚 郭小兵 +1 位作者 李海霞 张钦宪 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2010年第5期740-742,共3页
目的:探讨10-23脱氧核酶(10-23DRz)抑制CTX-M-38型ESBLs的可行性。方法:依据CTX-M-38型ESBLs序列及其mRNA构象特征,设计针对其mRNA结构的10-23DRz脱氧核酸序列及反义核酸序列;采用氯化钙法对10-23DRz及反义核酸进行转化;依据转化菌在平... 目的:探讨10-23脱氧核酶(10-23DRz)抑制CTX-M-38型ESBLs的可行性。方法:依据CTX-M-38型ESBLs序列及其mRNA构象特征,设计针对其mRNA结构的10-23DRz脱氧核酸序列及反义核酸序列;采用氯化钙法对10-23DRz及反义核酸进行转化;依据转化菌在平板上菌落形成状况及菌液吸光度选择10-23DRz应用量;采用K-B法体外药敏试验检测耐药活性。结果:45nmol10-23DRz用量时转化菌菌落形成量及菌液吸光度较为理想。除哌拉西林、头孢噻肟及亚胺培南外,其他抗菌药物10-23DRz组与反义核酸组抑菌环直径间差异有统计学意义(P均<0.001)。结论:10-23DRz可抑制CTX-M-38型ESBLs的表达。 展开更多
关键词 10-23脱氧核酶 CTX-M-38型 超广谱Β-内酰胺酶
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10-23脱氧核酶及其应用进展 被引量:2
12
作者 李娜 朱道银 《医学综述》 2006年第2期65-67,共3页
1023脱氧核酶是近年来利用体外分子进化技术筛选得到的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性及特异的序列识别能力,能催化RNA特定部位的切割反应,从mRNA水平上抑制基因表达,从而调控相应蛋白的表达,可能成为治疗肿瘤、病... 1023脱氧核酶是近年来利用体外分子进化技术筛选得到的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性及特异的序列识别能力,能催化RNA特定部位的切割反应,从mRNA水平上抑制基因表达,从而调控相应蛋白的表达,可能成为治疗肿瘤、病毒感染等疾病的新型工具。 展开更多
关键词 10-23脱氧核酶 设计原则 基因治疗
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10-23脱氧核酶对新生大鼠心肌细胞ET-1 mRNA表达的影响
13
作者 潘秀颉 林丽 +1 位作者 潘燕霞 袁文俊 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1106-1109,共4页
目的 :将体外筛选具有切割内皮素 - 1(endothelin- 1,ET- 1) m RNA的 10 - 2 3脱氧核酶转染原代培养新生大鼠心肌细胞 ,观察其对心肌细胞 ET- 1m RNA的影响。 方法 :体外转录 ET- 1全长 RNA底物 ,设计并合成 5条 ET- 110 - 2 3脱氧核酶(... 目的 :将体外筛选具有切割内皮素 - 1(endothelin- 1,ET- 1) m RNA的 10 - 2 3脱氧核酶转染原代培养新生大鼠心肌细胞 ,观察其对心肌细胞 ET- 1m RNA的影响。 方法 :体外转录 ET- 1全长 RNA底物 ,设计并合成 5条 ET- 110 - 2 3脱氧核酶(DZ1~ DZ5 ) ,其 5′及 3′端各有 2个核苷酸硫代修饰 ,体外切割 ET- 1RNA底物 ,筛选有效脱氧核酶 ;5′标记荧光素 FAM的10 - 2 3脱氧核酶瞬间转染新生大鼠心肌细胞以观察对 10 - 2 3脱氧核酶的摄取 ;采用半定量 RT- PCR检测 ET- 1基因的表达。结果 :DZ2、DZ3、DZ4及 DZ5在体外均可切割 RNA底物 ,其中 DZ4两侧结合区结合自由能之差最大 ,其切割效率最高 ,达83.5 % ,而 DZ3两侧结合区结合自由能之差最小 ,其切割效率亦最低 (4 7.3% ) ;瞬间转染新生大鼠心肌细胞 2 4 h,心肌细胞内可见 10 - 2 3脱氧核酶的分布 ,半定量 RT- PCR结果显示转染 2 4 h后的 DZ4 (0 .2 μmol/ L)可减少血清诱导肥大心肌细胞 ET- 1m RNA及细胞总蛋白 ,降低细胞活力与蛋白质合成速率 (P<0 .0 5 )。 结论 :本研究设计的 10 - 2 3脱氧核酶能切割体外转录的ET- 1全长 RNA底物 ,转染心肌细胞后 ,可抑制 ET- 1m RNA的表达 ,减缓血清诱导心肌细胞肥大 ,10 - 2 展开更多
关键词 10-23脱氧核酶 内皮素 心肌细胞 肥大
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微量热法研究10-23脱氧核酶切割反应的热动力学
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作者 周国燕 李炫辰 +2 位作者 王爱民 蓝浩 邢华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第19期157-160,共4页
选用乙型肝炎病毒(HBV)前区C/C区2031位点的序列作为底物RNA片段,并合成相应的10-23脱氧核酶,然后用微量热法研究10-23脱氧核酶的热动力学。在近生理条件下,通过微量热法测定10-23脱氧核酶切割反应的热动力学参数。根据热流曲线得出底物... 选用乙型肝炎病毒(HBV)前区C/C区2031位点的序列作为底物RNA片段,并合成相应的10-23脱氧核酶,然后用微量热法研究10-23脱氧核酶的热动力学。在近生理条件下,通过微量热法测定10-23脱氧核酶切割反应的热动力学参数。根据热流曲线得出底物RNA不同浓度的反应初速率v0,再作出v-[S]曲线,通过Lineweaver-Burk作图得出10-23脱氧核酶切割反应的最大速率vmax为2.5×10-9mol/(L.s)、米氏常数Km为0.045nmol/L、催化常数Kcat为0.107min-1。 展开更多
关键词 10-23脱氧核酶 切割反应 微量热法 热动力学
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10-23脱氧核酶的生物催化功能研究进展
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作者 曾云 刘刚 凌保东 《川北医学院学报》 CAS 2007年第6期597-600,共4页
10-23脱氧核酶是利用体外筛选技术得到的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性及特异的序列识别能力,能催化RNA特定部位的切割反应,从mRNA水平上抑制基因表达,具有潜在的治疗应用价值。
关键词 10-23脱氧核酶 催化活性 基因治疗
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枸杞多糖对免疫抑制小鼠血清中IL-6、IL-10和IL-12/IL23 p40分泌水平的影响 被引量:12
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作者 白学鹏 孙鹏 +5 位作者 沈春秀 杨荣敏 王昀昕 王佩 李家兴 苏春霞 《动物医学进展》 北大核心 2019年第7期49-51,共3页
通过研究枸杞多糖(LBP)对免疫抑制小鼠血清中细胞因子IL-6、IL-12/IL-23p40和IL-10分泌的影响,探讨LBP的免疫调节机制,为LBP的开发利用提供理论依据。60只ICR雌性小鼠,随机分为5组,对各组小鼠进行连续4d每日腹腔注射环磷酰胺(40mg/kg),... 通过研究枸杞多糖(LBP)对免疫抑制小鼠血清中细胞因子IL-6、IL-12/IL-23p40和IL-10分泌的影响,探讨LBP的免疫调节机制,为LBP的开发利用提供理论依据。60只ICR雌性小鼠,随机分为5组,对各组小鼠进行连续4d每日腹腔注射环磷酰胺(40mg/kg),间隔3d后,再连续4d每日腹腔注射环磷酰胺(40mg/kg);同时,用高(40mg/1kg)、中(20mg/1kg)、低剂量(10mg/1kg)的LBP给小鼠连续灌胃2周,阳性对照和阴性对照分别用LPS(1mg/kg)和PBS,连续2周。小鼠眼眶取血,分离血清,ELISA检测血清中IL-6、IL-12/IL-23p40和IL-10的分泌水平。结果显示,与阳性对照和阴性对照组相比,LBP能提高免疫抑制小鼠血清中IL-6、IL-12/IL-23p40和IL-10的分泌水平,提示LBP能增强小鼠细胞免疫与体液免疫应答,为枸杞多糖作为免疫增强剂的开发应用奠定了一定的理论基础。 展开更多
关键词 枸杞多糖 细胞因子 白细胞介素-6 白细胞介素-12/白细胞介素23p40 白细胞介素-10
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In vitro cleavage of hepatitis B virus C mRNA by 10-23 DNA enzyme 被引量:5
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作者 Wei Hou, Jian-Er Wo, Min-Wei Li and Ke-Zhou Liu Institute of Infectious Diseases, First Affiliated Hospital, Zhejiang University School of Medicine, Hangzhou 310003, China 《Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International》 SCIE CAS 2005年第4期573-576,共4页
BACKGROUND: 10-23 DNA enzyme is one kind of de-oxyribozymes for RNA cleavage. The inhibition effects of 10-23 DNA enzyme on the expression of the HBV C gene in HepG2. 2. 15 cells were demonstrated previously. The aim ... BACKGROUND: 10-23 DNA enzyme is one kind of de-oxyribozymes for RNA cleavage. The inhibition effects of 10-23 DNA enzyme on the expression of the HBV C gene in HepG2. 2. 15 cells were demonstrated previously. The aim of this study was to further explore the cleavage activities of 10-23 DNA enzyme targeting at HBV C gene mRNA in vitro. METHODS: 10-23 DNA enzyme named Drz-HBV-C-9 specific to HBV C gene ORF A1816UG was designed and synthesized. HBV C gene mRNA was obtained by the in vitro transcription method. Cleavage activities of Drz-HBV-C-9 were observed in vitro. Values of kinetic parameters including Km,Kcat and Kcat/Km were calculated accordingly. RESULTS: Under the certain cleavage conditions, Drz-HBV-C-9 could efficiently cleave target mRNA at specific sites in vitro. Cleavage products of 109nt plus 191nt were obtained. The kinetic parameters, Km,Kcat and Kcat/ Km for Drz-HBV-C-9, were 1.4 ×10-9 mol, 1.6 min-1 and 1.1 × 109 mol-1 · min-1, respectively. CONCLUSIONS: 10-23 DNA enzyme targeting at HBV C gene mRNA possesses specific cleavage activities in vitro. This would be a potent antiviral strategy with respect to HBV gene therapy. 展开更多
关键词 10-23 DNA enzyme hepatitis B C gene CLEAVAGE in vitro
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Loss of heterozygosity on chromosome 10q22-10q23 and 22q 11.2-22q 12.1 and p53gene in primary hepatocellular carcinoma 被引量:3
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作者 Guang-NengZhu LiZuo +4 位作者 QingZhou Su-MeiZhang Hua-QingZhu Shu-YuGui YuanWang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2004年第13期1975-1978,共4页
AIM: To analyze loss of heterozygosity (LOH) and homozygous deletion on p53 gene (exon2-3, 4 and 11), chromosome 10q22-10q23 and 22q11.2 -22q12.1 in human hepatocellular carcinoma (HCC).METHODS: PCR and PCR-based micr... AIM: To analyze loss of heterozygosity (LOH) and homozygous deletion on p53 gene (exon2-3, 4 and 11), chromosome 10q22-10q23 and 22q11.2 -22q12.1 in human hepatocellular carcinoma (HCC).METHODS: PCR and PCR-based microsatellite polymorphism analysis techniques were used.RESULTS: LOH was observed at D10S579 (10q22-10q23) in 4 of 20 tumors (20%), at D22S421 (22q11.2-22q12.1) in 3 of 20(15%), at TP53.A (p53gene exon 2-3) in 4 of 20 (20%), at TP53.B (p53gene exon 4) in 6 of 20(30%), and at TP53.G (p53gene exon 11)in 0 of 20(0%). Homozygous deletion was detected at 10q22-10q23(8/20; 40%), 22q11.2-22q12.1(8/20; 40%), p53 gene exon 2-3(0/20;0%), p53gene exon 4(6/20; 30%), and p53gene exon 11(2/20; 10%).CONCLUSION: There might be unidentified tumor suppressor genes on chromosome 10q22-10q23 and 22q11.2-22q12.1 that contribute to the pathogenesis and development of HCC. 展开更多
关键词 杂合性 丢失基因 染色体 10q22-10q23 22q11.2-22q12.1 P53 肝细胞癌 肿瘤 LOH
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IL-6、IL-10、IL-23、IFN-γ在菌阴结核病中的辅助诊断价值 被引量:2
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作者 吴启航 李海波 +4 位作者 赵隆麒 张露 郑晖 余晓丽 魏明 《武汉轻工大学学报》 2018年第1期32-35,55,共5页
探究血清中的γ-干扰素(IFN-γ)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、白介素-23(IL-23)这些细胞因子在菌阴结核患者、非结核患者及健康人中的表达水平,为菌阴结核病的诊断提供根据。采用酶联免疫吸附技术检测菌阳结核和菌阴结核患者、... 探究血清中的γ-干扰素(IFN-γ)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、白介素-23(IL-23)这些细胞因子在菌阴结核患者、非结核患者及健康人中的表达水平,为菌阴结核病的诊断提供根据。采用酶联免疫吸附技术检测菌阳结核和菌阴结核患者、非结核患者和健康人血清中的IFN-γ,IL-6,IL-10,IL-23表达水平,比较不同组的差异。(1)与健康组比较,肺结核组患者血清中的IL-6平均水平较高,但是差异没有统计学意义(P>0.05)。(2)结核组患者的IL-10比健康和非结核组都要高,但没有统计学意义(P>0.05)。(3)与健康组比较,结核患者的血清IL-23要高,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)与健康组比较,菌阴结核患者的血清IFN-γ要高,差异有统计学意义(P<0.05)。IFN-γ对菌阴结核的诊断中具有很好的应用前景,血清IL-6、IL-23等细胞因子存在辅助诊断菌阴结核患者的价值。 展开更多
关键词 菌阴结核 干扰素-Γ 白细胞介素-6 白细胞介素-10 白细胞介素-23
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“冰火两重灸”对HIV/AIDS患者IL-23及IL-10影响的研究
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作者 唐亚娟 李田妹 +1 位作者 罗癸敏 普菊华 《中医临床研究》 2021年第18期76-77,85,共3页
目的:连续监测"冰火两重灸"疗法对不同淋巴细胞计数值的AIDS免疫重建不良患者的白介素-23(Interleukin-23,IL-23)及白介素-10(Interleukin-10,IL-10)的影响。方法:选取云南中医药大学第三附属医院的AIDS免疫重建不良患者30例... 目的:连续监测"冰火两重灸"疗法对不同淋巴细胞计数值的AIDS免疫重建不良患者的白介素-23(Interleukin-23,IL-23)及白介素-10(Interleukin-10,IL-10)的影响。方法:选取云南中医药大学第三附属医院的AIDS免疫重建不良患者30例,按淋巴细胞计数值进行分组,分为两组,运用冰火两重灸联合高效抗逆转录病毒治疗(Highly Active Antiretroviral Therapy,HAART)治疗,观察0、3、6、9、12个月的IL-23及IL-10的数值变化。结果:两组在不同测定时间的IL-10及IL-23(对数值)均数的差异均有统计学意义(P<0.05),且都有随时间推移而下降的趋势(P<0.05)。结论:在不同免疫重建不良的AIDS患者中,因淋巴细胞数值的不同,在同一联合治疗方案下,均呈现有效治疗趋势,中医治疗联合国家推荐的一线方案治疗值得长期观察。 展开更多
关键词 淋巴细胞计数 白介素-23 白介素-10 高效抗逆转录病毒治疗
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