高效液相色谱法测定犬全血中两种基喜树碱活性成份

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定犬全血中羟喜树碱两种活性成份羧酸型羟喜树碱(CHCPT)和内酯型羟喜树碱(LHCPT)含量的方法。方法采用HPLC荧光法,检测器激发波长为363nm,发射波长为550nm,DiscoveryC18色谱柱,流动相为甲醇乙腈三乙胺-0.05mol·L-1磷酸氢二钾缓冲液(345160,pH6.8),流速1.0ml·min-1,N2000色谱工作站采集数据,外标法计算药物浓度。结果全血样品中CHCPT、LHCPT峰分离良好,内源性杂质不干扰样品峰,最低检测浓度为2.5μg·L-1。CHCPT、LHCPT浓度范围在2.5～1500μg·L-1间呈线性相关,回归方程分别为y=11196x-921.56和y=11840x-5188.4,相关系数分别为r=0.9998和0.9991,绝对回收率分别为85.5%～98.6%和78.4%～89.1%,相对回收率分别为100.7%～103.9%和96.8%～102.0%,日内和日间变异均小于15.0%,提取后样品-75℃冻存7d稳定。结论本实验方法具有专属性,且灵敏、可靠,适用于HCPT类制剂给药后血药浓度的检测,有助于深入研究HCPT两种活性成份CHCPT和LHCPT在体内的药代动力学特征。

HPLC-荧光法测定人血浆中羟基喜树碱的两种构型及其相互间的转化

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定人血浆中羟基喜树碱两种活性成分盐型羟基喜树碱(C-HCPT)和酯型羟基喜树碱(L-HCPT)含量的方法,并且对两者之间的相互转化进行了初步研究.方法采用HPLC-荧光法,Lichrospher C18色谱柱,流动相为乙腈-0.075 mol·L-1醋酸铵缓冲液(32∶68,pH 6.4),流量1.0 ml·min-1,检测器激发波长为363 nm,发射波长为530 nm,内标法计算药物浓度.结果人血浆样品中C-HCPT、L-HCPT峰分离良好,内源性杂质不干扰样品峰,最低检测浓度均为5 ng·ml-1.C-HCPT、L-HCPT浓度范围在15～2000 ng·ml-1间呈线性相关,回归方程分别为Y1=9.393×10-4X1-9.1×10-6和Y2=1.0207×10-3X2-3.4×10-6,相关系数分别为r1=0.9997和r2=0.9998,相对回收率分别为96.79%～119.64%和100.23%～112.93%,日内和日间变异均小于10%.两者之间的转化具有一定规律性;C-HCPT标准血样-20 ℃冻存20 d稳定,L-HCPT标准血样的稳定性有待进一步研究.结论本方法专属性强,灵敏、可靠,适用于HCPT类制剂给药后血药浓度的监测和体内的药代动力学特征研究;有关两者相互转化的机制及L-HCPT稳定性问题尚待进一步深入研究.

环糊精的包合作用对羟基喜树碱活性内酯结构的保护

目的:研究磺丁醚-β-环糊精与羟基喜树碱活性结构包合作用,寻找既能改善羟基喜树碱溶解度又能保持其活性结构的新方法。方法:采用计算机模拟计算法、紫外分光光度法预测磺丁醚-β-环糊精分别对羟基喜树碱开环结构和活性内酯结构包合作用的可能性,并比较强弱;酸碱法制备包合物;UV法测定包合物的溶解度和稳定性;HPLC法测定包合物中以活性内酯结构形式存在的羟基喜树碱含量。结果:磺丁醚-β-环糊精与羟基喜树碱形成包合物后,药物的溶解度由0.22μg.mL-1增至1.01 mg.mL-1;药物主要以活性内酯结构形式存在,其含量由63.2%增至96.8%;包合物室温放置12个月内稳定。结论:磺丁醚-β-环糊精可提高羟基喜树碱的溶解度并保持其内酯结构,该技术可用于改进羟基喜树碱药物剂型。