1型11β-羟基类固醇脱氢酶在实验性2型糖尿病大鼠模型骨骼肌中的表达及意义

目的:探讨糖皮质激素代谢酶1型11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD1)及其受体(GR)在2型糖尿病大鼠骨骼肌蛋白表达的改变及意义。方法:Wistar大鼠随机分为对照组及模型组。高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)(30mg·kg-1)2次腹腔注射建立糖尿病模型。造模8周后大鼠剪尾取血,氧化酶法检测空腹血糖水平;放射免疫法检测空腹胰岛素水平,并计算胰岛素相关指数。Western blotting检测11β-HSD1和GR的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组的胰岛素分泌指数(IS)、胰岛素敏感指数(ISI)及HOMAβ细胞分泌指数(HβCI)明显下降(P<0.05),而胰岛素抵抗指数(IRI)显著升高(P<0.05),表明模型组有明显的胰岛素抵抗,合并有胰岛素分泌不足。与对照组比较,模型组骨骼肌组织中11β-HSD1及GR的蛋白表达增加(P<0.05)。结论:高脂饮食联合小剂量STZ注射建立的实验性糖尿病模型具有高血糖、胰岛素分泌功能受损及胰岛素抵抗特征;糖尿病模型骨骼肌组织中11β-HSD1及GR的蛋白表达显著增加。

11β-羟基类固醇脱氢酶1在2型糖尿病中的研究进展

糖尿病(diabetes)系一组由于胰岛素分泌缺陷及(或)其生物学作用障碍引起的以高血糖为特征的代谢性疾病,成为继心血管、肿瘤之后的第三号健康杀手。其中2型糖尿病(T2DM)占90%以上,寻找治疗T2DM的新药物成为迫在眉睫的任务。研究表明,糖皮质激素(glucocorticoid,GC)是胰岛素的拮抗激素之一,11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-hydroxy steroid dehydrogenase type 1,11β-HSD1)是糖皮质激素的代谢酶,可通过调节局部组织中有活性的糖皮质激素水平影响机体内的糖脂代谢,因此11β-HSD1已成为治疗T2DM的靶点。本文就11β-HSD1在T2DM中的最新研究进展进行综述。

11β-羟基类固醇脱氢酶1与2型糖尿病

糖皮质激素在糖、蛋白质、脂肪、水盐代谢及应激反应中发挥着重要作用。糖皮质激素过多或者缺乏都会给机体带来异常。糖皮质激素可以诱导胰岛素抵抗，而胰岛素抵抗是2型糖尿病发病的中心环节。局部组织器官中糖皮质激素的水平与11β-羟基类固醇脱氢酶（11β-HSD）的活性及2种亚型的比例有关。其中1型11β-羟基类固醇脱氢酶（11β-HSD1）活性的变化与胰岛素抵抗（IR）、2型糖尿病等的发展有密切联系。本文就11β-HSD1与2型糖尿病的关系作一综述。

利拉鲁肽对胰岛素抵抗大鼠模型胰腺11β-羟甾脱氢酶1表达的影响

目的探讨利拉鲁肽对胰岛素抵抗(IR)模型大鼠的胰腺糖皮质激素活化酶11β-羟甾脱氢酶1(11β-HSD1)与其相关酶己糖6磷酸脱氢酶(H6 PD)和糖皮质激素受体(GR)表达的影响。方法 40只大鼠随机分成空白对照组、利拉鲁肽组、饮食限制组、生理盐水组和生胃酮组,其中后4组先予10%果糖溶液造IR模型,然后各组继续果糖喂养并分别予皮下注射利拉鲁肽、生理盐水、饮食限制和生胃酮(非选择性11β-HSD抑制剂)灌胃干预,连续4周。每3 d记录大鼠体重、饮水和摄食量,饮食限制组根据利拉鲁肽组给予相应的饮食量。实验结束后比较体重增长比、空腹胰岛素(FIns)、三酰甘油(TG)和果糖胺,并分别通过荧光定量PCR和Western blot法检测胰腺11β-HSD1、H6PD、和GR的mRNA和蛋白表达。结果 10%果糖溶液喂养10周后IR模型各组与空白对照组相比,大鼠血清TG、FPG和FIns均升高,胰岛素敏感指数(ISI)降低(PF P G<0.05,PT G、PF Ins、PISI等均<0.01),体重差异无统计学意义。对IR模型各组干预4周后,与生理盐水组相比,利拉鲁肽组FIns、TG和体重增长比均降低,11β-HSD1、H6PD和GR蛋白表达均减少(均P<0.01);饮食限制组和生胃酮组虽然TG、体重增长比降低(均P<0.01)和FIns降低(P饮食限制组<0.01,P生胃酮组>0.05),但是11β-HSD1、H6PD和GR蛋白表达均无明显改变。IR模型各组比较mRNA表达均无显著变化。结论利拉鲁肽可改善IR大鼠模型高FIns血症、高TG血症和体重增长,同时减少该模型胰腺11β-HSD1、H6PD和GR的蛋白表达。

葡萄糖上调胰岛β细胞系NIT-1 11β-羟类固醇脱氢酶1型的表达

目的探讨葡萄糖对胰岛β细胞系NIT-1上11β-羟类固醇脱氢酶1型(11β-HSD1)的表达及其功能的影响。方法用细胞免疫化学染色、RT-PCR和Western blot法检测NIT-1细胞11β-HSD1mRNA及蛋白表达。分别用含10、15、20和25 mmol/L葡萄糖的Ham s F12培养液培养NIT-1细胞72 h,检测11β-HSD1mRNA和蛋白表达水平,用葡萄糖刺激释放(GSIS)实验评价胰岛β细胞功能。结果(1)胰岛NIT-1细胞胞质里有棕黄色阳性染色颗粒,并有11β-HSD1mRNA和蛋白表达,(2)15、20和25 mmol/L葡萄糖组11β-HSD1表达增加(P<0.05,P<0.01),葡萄糖刺激胰岛素分泌减少(P<0.05,P<0.01)。结论11β-HSD1在胰岛NIT-1细胞上有表达,糖皮质激素可能参与胰岛β细胞胰岛素分泌功能。

11β-类固醇脱氢酶Ⅰ型基因微卫星多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的:探讨南京地区汉族人群中11β-类固醇脱氢酶Ⅰ型基因多态性与2型糖尿病的相关性。方法:选择11β-类固醇脱氢酶Ⅰ型基因内含子4内高杂合度微卫星DNA多态标记,应用聚合酶链反应及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,探讨这一微卫星多态在中国南京汉族人群121例正常健康者和150例2型糖尿病患者之间等位基因频率分布差异。结果:该多态位点存在8种等位基因,CA重复序列分别重复13、14、15、16、17、18、19和20次,病例-对照群体分析结果表明,两组间等位基因频率总体分布差异无显著性(χ2=8.9944,Ρ=0.253)。但(CA)15等位基因糖尿病组频率高于正常组,有统计学意义(χ2=4.990,P=0.025),可以初步认为(CA)15等位基因可能是糖尿病发生的危险因素。结论:南京地区汉族人群中11β-类固醇脱氢酶Ⅰ型基因多态性可能与2型糖尿病有一定关系。

11β-羟类固醇脱氢酶1型基因沉默对胰岛β细胞系NIT-1葡萄糖刺激胰岛素分泌的影响

目的观察RNA干扰阻断胰岛β细胞系NIT-1中11β-羟类固醇脱氢酶1型(11β-HSD1)表达对细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)的影响。方法pSuper质粒为载体,构建针对11β-HSD1基因的质粒oligo886、oligo866和乱序对照质粒oligoScr886,转染NIT-1细胞,RT-PCR和蛋白印迹法检测11β-HSD1mRNA和蛋白表达。oligo886重组质粒转染25 mmol/L葡萄糖培养基中的NIT-1细胞,测GSIS。结果转染oligo886和oligo866质粒的NIT-1细胞11β-HSD1mRNA分别下降78.1%±2.9%和51.7%±2.7%,11β-HSD1蛋白的水平分别下降82.2%±2.1%和56.5%±2.0%。oligo866转染25 mmol/L葡萄糖培养基中的NIT-1细胞后,GSIS较对照组明显升高(P<0.01)。结论11β-HSD1基因沉默能改善NIT-1细胞的葡萄糖刺激胰岛素分泌能力,提示胰岛β细胞NIT-1通过11β-HSD1调节糖皮质代谢,参与葡萄糖刺激胰岛素分泌。

11β-羟类固醇脱氢酶1型在小鼠胰腺组织和胰岛β细胞系NIT-1中的表达

目的探讨11β-羟类固醇脱氢酶1型(11β-HSD1)在C57BL/6J小鼠胰腺组织和胰岛β细胞系NIT-1中的表达及其生物学意义。方法以11β-HSD1在肝脏组织中的表达为阳性参照,RT-PCR法和Western blot法检测小鼠胰腺组织中11β-HSD1 mRNA和蛋白表达。细胞免疫化学法检测NIT-1细胞中11β-HSD1的分布与表达,RT-PCR法和Wester nblot法检测NIT-1细胞中11β-HSD1 mRNA和蛋白表达。结果①在正常C57BL/6J小鼠胰腺组织中有11β-HSD1 mRNA和蛋白表达,其表达量均低于肝脏组织(均P<0.01)。②细胞免疫化学染色示NIT-1细胞胞质见棕黄色染色阳性颗粒,同时NIT-1细胞中有11β-HSD1 mRNA和蛋白表达。结论小鼠胰腺组织和胰岛β细胞系NIT-1中有11β-HSD1基因表达,为研究糖皮质激素代谢对胰岛细胞功能的影响以及其它潜在的生理功能,提供了一条研究途径。

11β-羟类固醇脱氢酶2活性抑制对大鼠血管内皮功能的影响

目的观察11β-羟类固醇脱氢酶2(11β-HSDase2)活性抑制对大鼠血管内皮功能的影响。方法将24只雄性SD大鼠分为普通饲料对照组和甘草次酸(GA)组,饲喂6周,后经颈动脉测血压、取血测量血中11β-HSDase2活性、内皮素(ET-1)及一氧化氮(NO)的含量;取胸主动脉作离体血管环张力实验,并测定主动脉中ET-1和NO的含量。结果GA组大鼠血压为(172.90±6.08)mmHg,明显高于对照组(143.40±9.52)mmHg(P<0.01);而血浆11β-HSDase2活性由0.48±0.09降低为0.29±0.12(P<0.05),对乙酰胆碱的舒张反应减退[最大舒张百分比由(101.71±4.73)%降至(81.94±3.51)%,P<0.01],对去甲肾上腺素的收缩反应增强[最大收缩反应由(1.02±0.07)g/mg增至(1.32±0.07)g/mg,P<0.01],主动脉和血浆中ET-1含量增加,而NO含量减少。结论11β-HSD2活性抑制可通过改变血管内皮功能使血压升高。

11β-羟类固醇脱氢酶2在恶性淋巴细胞中的表达及与其对糖皮质激素敏感性关系

本研究讨论11β-羟类固醇脱氢酶2(11β-HSD2)在3种来源淋巴的细胞系中的表达及其与恶性淋巴细胞对糖皮质激素敏感性的关系。利用实时定量PCR及Western blot方法检测急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞系、淋巴瘤Daudi和Raji细胞系、以及健康志愿者外周血T淋巴细胞中11β-HSD2的表达;用流式细胞术检测糖皮质激素(GC)对3种淋巴肿瘤细胞的诱导凋亡情况;应用台盼蓝拒染法观察不同浓度GC对Jurkat细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测GC联合11β-HSD2抑制剂18β甘草次酸(18β-GA)对Jurkat细胞凋亡影响。结果显示,11β-HSD2在Jurkat细胞中高度表达,而在Daudi、Raji细胞以及健康志愿者外周血T淋巴细胞中不表达。Jurkat对GC诱导的凋亡耐受,而Daudi和Raji对GC诱导的凋亡敏感。18β-GA能增加Jurkat细胞对GC诱导凋亡的敏感性。结论:11β-HSD2与Jurkat细胞对GC耐药有关,干预11β-HSD2可作为改善GC耐药的潜在靶点。

生脉散通过上调1型11β-羟基类固醇脱氢酶对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善作用

目的观察生脉散对HepG2细胞胰岛素抵抗及1型11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD1)的影响。方法建立胰岛素抵抗HepG2细胞模型,分别用MTT、葡萄糖氧化酶、RT-PCR、Western blotting检测生脉散对HepG2细胞增殖、葡萄糖消耗及11β-HSD1表达的影响。结果生脉散对HepG2细胞增殖及葡萄糖代谢无显著影响(P>0.05)。生脉散增加胰岛素抵抗HepG2细胞内葡萄糖含量、降低糖原含量,上调11β-HSD1表达(P<0.01或0.05)。结论生脉散可改善HepG2细胞胰岛素抵抗,其机制可能与上调11β-HSD1表达有关。

成人疾病的胎儿起源与糖皮质激素胎盘屏障11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅱ型

胎儿期的生长发育情况能印迹成年个体的机体功能,低出生体重能增加成年后发生高血压、糖尿病、高血脂等代谢性疾病的风险。低出生体重儿往往伴有血糖皮质激素水平升高。糖皮质激素作为影响生长和发育的重要激素,对胎儿各个器官都具有编码作用。糖皮质激素水平过高可以导致胎儿宫内生长受限、新生儿低体重等。糖皮质激素在"胎儿起源的成年疾病"中扮演重要角色。糖皮质激素胎盘屏障11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅱ型(11β-HSD2)在保护胎儿方面起着重要作用。

11β-氢化醛固酮脱氢酶2型与高血压

本文就近年来有关11β-氢化醛固酮脱氢酶2型的生物学功能及与高血压病之间的关系作一综述。

11β-羟类固醇脱氢酶Ⅰ型在代谢综合征中的作用及药物干预研究进展

综述11β-羟类固醇脱氢酶Ⅰ型(11β-HSD1)在代谢综合征中的作用及药物干预研究概况。11β-HSD1在脂肪细胞中通过c-Jun氨基末端激酶(JNK)活化介导胰岛素抵抗;己糖-6-磷酸脱氢酶可活化11β-HSD1,引起胰岛素抵抗;11β-HSD1对海马(杏仁核)-HPA轴有双向调节作用。研究发现,某些中药单体及复方可通过11β-HSD1治疗代谢综合征。

噻嗪类11β-羟类固醇脱氢酶抑制药三维定量构效关系研究

目的:通过构建噻嗪类11β-羟类固醇脱氢酶(11β-HSD)抑制药的三维定量构效关系(3D-QSAR)模型,用于其结构改造及发现具有更高生物活性的11β-HSD抑制药。方法:基于骨架叠合的模式,采用比较分子力场分析(CoMFA)的方法,构建噻嗪类衍生物定量构效关系模型,并用分子对接的方法对已构建的3D-QSAR模型进行验证。结果:得到了高精度的11β-HSD抑制药的3D-QSAR模型(CoMFA:q^2=0.346,r^2=0.850;其中q^2为交叉验证系数,r^2为非交叉验证系数)。结论:本文构建的3D-QSAR模型可为11β-HSD抑制药骨架各个位点的化学修饰,实施定向合理设计,为开发新型抗2型糖尿病药物提供理论基础。

原发性高血压患者肾脏中11β-羟类固醇脱氢酶活性的变化

目的 探讨肾脏中 11β -羟类固醇脱氢酶 (11β -hydroxysteroiddehydrogenase ,11β -HSD)活性和原发性高血压 (essentialhypertension ,EH)的关系。方法 选择EH患者 5 4例 (经检测 2 1例为低肾素水平 ,33例肾素水平正常或升高 )和正常对照 30例 ,用高效液相色谱法 (HPLC)测定尿液中的氢化可的松和可的松浓度 (两者比值即肾脏 11β -HSD活性 ) ,将 2组 11β-HSD活性进行比较。 结果 对照组尿液中氢化可的松和可的松的比值是 0 .4 4±0 .15 ,高血压组的比值是 0 .4 9± 0 .2 8(低肾素型亚组 0 .6 4± 0 .31,非低肾素型亚组 0 .4 0± 0 .2 3)。对照组和高血压组比值差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,非低肾素型亚组和对照组相比差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但低肾素型亚组与对照组相比 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 高血压患者与对照组肾脏 11β -HSD的活性无显著性差异 ,但是低肾素型高血压患者肾脏中 11β-HSD活性显著减低。

11β-羟类固醇脱氢酶在人肠癌中的表达

目的:观察11β-羟类固醇脱氢酶(11β-HSD)在肠癌中的表达。方法:12例确诊肠腺癌患者,术后立即取肿瘤组织和癌旁正常组织标本,采用半定量RT-PCR、Western-blotting等技术,以自身配对,研究11β-类固醇脱氢酶在肠癌中表达。结果:11β-羟类固醇脱氢酶(11β-HSD)两种同工酶在肠腺癌中表达不相同,在肿瘤组织中11β-HSD2表达明显减少,11β-HSD1在肿瘤与正常组织中表达无明显差异。结论:11β-HSD2可能与肠癌变有关。

11β-羟基类固醇脱氢酶2型活性对库欣综合征患者血钾水平的影响

目的通过分析不同类型库欣综合征患者尿液中游离皮质醇（UFF）与游离皮质酮（UFE）的比值，反映体内11β羟基类固醇脱氢酶（11β-HSD2）的功能水平，进一步揭示促肾上腺皮质激素（ACTH）非依赖性库欣综合征患者低血钾的发病机制。方法运用液相色谱联合串联质谱分析（LC．MS／MS）方法，对北京协和医院2013年10至12月收治的异位ACTH综合征患者（n=6）、血钾正常肾上腺库欣腺瘤患者（n=6）、低血钾肾上腺库欣腺瘤患者（n=5），以及对照的健康人（n=6）的24h尿液中游离皮质醇（UFF）和皮质酮（UFE）的含量进行测算；对4组研究对象的UFF＋UFE总量以及UFF／UFE比值进行组间比较分析。结果通过LC—MS／MS对4组研究对象UFF以及UFE定量分析得出：异位ACTH综合征患者组UFF＋UFE为（2787±820）μg／L，UFF／UFE为2．98±0．35；血钾正常肾上腺库欣腺瘤患者组UFF＋UFE为（689±163）μ/L，UFF／UFE为1．03．±0．42；低血钾肾上腺库欣腺瘤患者UFF＋UFE为（697±120）μg／L，UFF／UFE为2．24±0．37；健康对照组UFF＋UFE为（70±27）μg／L，UFF／UFE为0．42±0．20；血钾正常肾上腺库欣腺瘤患者和低血钾肾上腺库欣腺瘤患者的UFF＋UFE差异无统计学意义，但低血钾肾上腺库欣腺瘤患者UFF／UFE比值显著高于血钾正常肾上腺库欣腺瘤患者（P〈0．001），提示低血钾。肾上腺库欣腺瘤患者存在11β．14SD2酶功能缺陷。结论部分ACTH非依赖性库欣综合征患者由于自身体内11β—HSD2酶功能缺陷，无法有效地将有活性的皮质醇转化为无活性的皮质酮出现典型低血钾等盐皮质激素过多表现。

11β-羟类固醇脱氢酶与2型糖尿病

11β-羟类固醇脱氢酶(11β-HSDs)催化氢化可的松(皮质酮)和可的松(脱氢皮质酮)的相互转化,对调节局部糖皮质激素的活性起着重要作用,而糖皮质激素可诱导胰岛素抵抗。肝、脂肪等组织内11β-HsD活性的改变与肥胖、2型糖尿病等疾病密切相关。

11β-羟基类固醇脱氢酶1基因多态性与2型糖尿病相关性研究

目的探讨11β-羟基类固醇脱氢酶1(type111beta-hydroxysteroid dehydrogenase,11β-HSD1)基因rs12086634-G/T和rs846910-G/A多态性与云南汉族人群2型糖尿病(T2MD)的关系。方法提取78例健康对照者和210例T2DM患者基因组DNA,通过基因测序检测11β-HSD15′端-2940多态位点rs846910-G/A、第三内含子+94处rs12086634-G/T基因型及等位基因分布频率。结果云南汉族人群11β-HSD1rs846910-G/A基因型GG、AG和AA在T2DM组和对照组中的频率分别为79.8%/63.2%,17.5%/32.9%,2.6%/3.9%,G/A等位基因频率为88.6%/79.6%,11.4%/20.4%,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。rs12086634-G/T基因型GG、GT和TT在两组间分布频率为5.3%/3.9%,27.4%/23.4%,67.3%/72.7%,G/T等位基因频率为19.0%/15.6%,81.0%/84.4%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论11β-HSD1rs846910-G/A可能与云南汉族人群T2DM相关,但rs12086634-G/T与T2DM不一定相关。