鸡传染性支气管炎病毒感染HD11细胞的转录组分析

旨在探究感染早期宿主细胞的天然免疫应答和抗病毒反应,本研究将鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)Beaudette株感染鸡巨噬细胞HD11,2 h后提取细胞总RNA反转录成cDNA,采用Illumina进行转录组高通量测序。结果显示,感染组筛选出1363个上调基因,653个下调基因。通过对差异表达基因GO和KEGG分析发现,IBV感染HD11细胞早期,差异表达基因大多与免疫反应、抗病毒作用有关,富集到的信号通路主要集中在细胞因子和细胞因子受体之间的相互作用、病毒蛋白与细胞因子或细胞因子受体之间的相互作用、TNF信号通路、MAPK信号通路等。随机挑选10个与免疫反应、抗病毒相关基因进行RT-qPCR验证,结果与转录组测序分析一致。本研究为进一步探究IBV致病机制和感染早期宿主细胞免疫反应奠定了基础。

Akt特异性抑制剂MK2206诱导U937及RS4;11细胞凋亡及其机制

目的:本研究探讨Akt激酶抑制剂MK2206对U937及RS4;11细胞增殖、凋亡的影响,并分析其可能的作用机制。方法:以不同浓度MK2206处理U937及RS4;11细胞24、48 h,用CCK-8法绘制细胞增殖曲线;Annexin V/7-氨基放线菌素D(7-AAD)双标记法分析细胞凋亡情况;流式细胞术检测细胞周期的变化;实时定量PCR检测Bax、Bcl-2、XIAP、CDK1、caspase-3基因mRNA表达的变化。结果:MK2206对U937及RS4;11细胞增殖具有抑制作用,且抑制效应呈一定的时间和剂量依赖性,U937细胞24、48 h的半数抑制浓度(IC50)分别为(0.48±0.15)和(0.09±0.01)μmol/L,RS4;11细胞24、48 h的半数抑制浓度(IC50)分别为(0.91±0.02)和(0.68±0.11)μmol/L。0.5μmol/L MK2206作用于U937细胞及1.0μmol/L MK2206作用于RS4;11细胞24 h、48 h,Annexin V/7-AAD标记的阳性细胞升高,U937细胞组24 h细胞凋亡率为(4.18±0.70)%,48 h细胞凋亡率为(22.53±4.67)%,均高于对照组的(1.35±0.34)%(P<0.05),且48 h细胞凋亡率较24 h更为明显(P<0.05);RS4;11细胞组24 h和48 h细胞凋亡率分别为(5.74±0.58)%和(10.07±1.24)%,均高于对照组的(1.32±0.31)%(P<0.05),且48 h细胞凋亡率较24 h更为明显(P<0.05)。流式细胞术检测细胞周期结果显示,U937细胞组G2/M期细胞比例为(96.78±9.11)%,高于对照组的(9.64±0.91)%(P<0.05);RS4;11细胞组G2/M期细胞比例为(14.19±3.82)%,高于对照组的(5.75±1.28)%(P<0.05)。荧光定量PCR检测结果示,两种细胞中Bax、caspase-3 mRNA相对表达水平升高,而Bcl-2、XIAP表达水平降低,同时伴CDK1 mRNA水平的减少,与各自对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MK2206能有效抑制U937及RS4;11细胞增殖及促进细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G2/M期,其促凋亡机制与上调Bax与caspase-3基因表达、下调Bcl-2与XIAP基因表达有关,细胞周期G2/M期阻滞与CDK1基因表达水平下降有关。

FasL反义RNA在人食管癌TE11细胞中的表达及意义

目的采用反义RNA技术,构建人FasL反义RNA重组逆转录病毒载体。以FasL表达阳性的人食管癌细胞株TE11为模型,研究反义RNA重组逆转录病毒表达载体对细胞FasL的阻断作用。方法将人FasL全基因序列的DNA片段反向插入逆转录病毒pLXSN质粒上的XhoⅠ和BamHⅠ位点间,建立重组质粒pL(FasL-AS)SN。将pL(FasL-AS)SN导入包装细胞PA317中,经G418筛选后收获培养上清,转染TE11细胞,建立TE11-hFasL-AS细胞系。用PCR技术检测pL(FasL-AS)SN中目的基因FasL的插入及其在TE11细胞中的整合;用RT-PCR法检测TE11细胞经重组病毒感染前后FasL mRAN表达量的变化;采用流式细胞仪检测TE11和TE11-hFasL-AS细胞FasL的表达及其对U937细胞凋亡的诱导。结果将pL(FasL-AS)SN转染TE11细胞后,FasL反义RNA已整合至TE11细胞(TE11-hFasL-AS)中;TE11-hFasL-AS细胞FasL mRAN及蛋白的表达水平均显著下降(P<0.01);与TE11-hFasL-AS细胞混合培养后,U937细胞凋亡率明显低于未转染组(P<0.01)。结论成功构建了人FasL反义RNA重组逆转录病毒表达载体,用该载体转染的TE11细胞中FasL的表达水平明显受抑,为Fas/FasL参与的体内许多病理进程的机制研究及临床应用提供实验基础。

地西他滨联合三氧化二砷对急性髓系白血病MV4-11细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨地西他滨(DAC)单用或联合三氧化二砷(As2O3)对人类急性髓系白血病(AML)MV4-11细胞的增殖和凋亡的影响,为寻找治疗MLL重排的AML的有效方法提供实验依据。方法:应用CCK8法检测DAC和As2O3单药对MV4-11细胞增殖的抑制情况,以低于50%抑制浓度(IC_(50))的DAC与低于20%抑制浓度(IC_(20))的AS_2O_3联合用药,检测联合用药对MV4-11细胞增殖时的抑制情况。用流式细胞术检测两药单用及联合应用时M V4-11细胞的凋亡情况。结果:DAC和AS_2O_3单独用药时,随着药物浓度的增加对MV4-11细胞的增殖抑制作用逐渐增强(P<0.01)。DAC和As_2O_3对MV4-11细胞的IC_(50)分别为2.409和2.364μmol/L。与DAC单独用药比较,低于(IC_(50))值各浓度(0.01、0.1、0.5、1μmol/L)DAC与As_2O_3(0.25μmol/L)分别联合用药,对MV4-11细胞增殖抑制率均明显升高(P<0.05)。DAC(5.0μmol/L)作用MV4-11细胞48 h的凋亡率为13.50%±1.87%,As_2O_3(2μmol/L)作用MV4-11细胞48 h的凋亡率为12.60%±2.33%,两药联合采用的凋亡率增高为51.13%±4.97%。结论:DAC和As_2O_3能显著抑制MV4-11细胞增殖并诱导其凋亡,两药联合应用对MV4-11细胞增殖抑制及诱导凋亡有协同作用。

干扰TLR4对LPS感染鸡HD11细胞免疫炎症的影响

Toll样受体(toll-like receptor,TLR)成员TLR4可识别革兰氏阴性细菌的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),参与宿主免疫炎症反应。研究旨在通过干扰基因TLR4,以阐释TLR4对炎性细胞因子基因表达水平和鸡巨噬细胞HD11凋亡的影响,为完善TLR4在鸡免疫反应中的分子调控机制提供一定依据。不同剂量LPS感染鸡HD11细胞,检测感染后不同时间点TLR4及免疫炎性相关基因表达量。设计3条TLR4基因干扰片段,分别转染鸡HD11细胞,qRT-PCR和流式分别检测LPS感染前后TLR4和免疫炎性相关基因表达量以及细胞凋亡。结果显示,1μg/mL LPS感染8 h时诱导基因TLR4、IL-1β、IL-8和IL-6的表达效果最佳。成功干扰TLR4基因后,LPS感染鸡HD11细胞时促炎因子基因IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α表达量显著性降低(P<0.05),且有效抑制细胞凋亡;但抗炎因子基因TGF-β和IFN-α的表达水平不受影响(P>0.05)。结果说明,调节TLR4基因的表达可直接影响细胞对LPS的炎症反应,为控制过度炎症反应提供新思路和干预靶点,对缓解应激性病理损伤和提高家禽健康具有实践意义。

DOT1L抑制剂EPZ-5676联合化疗药物对RS 4;11细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨DOT1L抑制剂EPZ-5676与抗急性淋巴细胞性白血病药物在抗增殖及促凋亡方面的联合作用。方法:将EPZ-5676与5种抗急性淋巴细胞性白血病药物分别以单药、2药联合形式作用于MLL基因重排阳性的急性淋巴细胞性白血病RS 4;11细胞系。用CCK-8法测定不同浓度单药及联合用药对细胞抑制率的影响。应用compusyn软件评价联合用药对肿瘤细胞的抑制率(Fa)与联合作用指数(combination index,CI)的关系,判定药物间的相互作用。用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测EPZ-5676、长春新碱及糖皮质激素和/或EPZ-5676的细胞凋亡率,两者比较判断该浓度EPZ-5676是否具有与长春新碱及糖皮质激素联合促凋亡作用。结果:EPZ-5676与甲基强的松龙或长春新碱或VP16联用具有协同抗增殖效应;EPZ-5676与环磷酰胺或表柔比星2药合用产生拮抗效应。与对照组相比,3种浓度的EPZ-5676单药(5、10和25μmol/L)对细胞凋亡均无显著性影响。5μmol/L的EPZ-5676与长春新碱或糖皮质激素的联合用药均具有协同促凋亡作用(56.87%vs 12.93%)(P=0.001),(8.86%vs 5.28%)(P=0.044)。结论:EPZ-5676与甲基强的松龙或长春新碱或VP16具有协同抗RS 4;11细胞增殖的效应,EPZ-5676单药对于RS 4;11细胞凋亡的影响不明显,而低浓度EPZ-5676与长春新碱或糖皮质激素具有协同促凋亡作用。

装载鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白重组HD11细胞源外体的构建

为了给禽类巨噬细胞源外体在免疫应答的功能研究和家禽外体载体疫苗的研发奠定基础,本研究以鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchins virus,IBV)S1蛋白作为模式抗原,通过慢病毒表达系统技术实现在HD11细胞中稳定表达S1蛋白,再利用超速离心从细胞培养物上清中分离纯化得到外体。蛋白免疫印分析、电镜与粒径分析检测等结果表明,在该重组HD11细胞分泌的外体中可检测到稳定的S1蛋白表达,显示成功构建了装载IBV S1蛋白的重组外体。

黄芪多糖对鸡巨噬细胞HD11的免疫调节作用研究

调节巨噬细胞的活化是增强畜禽免疫力的有效方法。黄芪多糖(APS)作为免疫增强剂,在临床被广泛应用,但有关其对家禽巨噬细胞的调节作用机制鲜有报道。本研究用APS诱导鸡巨噬细胞HD1112 h,评价其对HD11细胞的免疫调节作用。通过CCK-8法检测细胞增殖活力;用台盼蓝检测细胞的活率;采用Griess试剂法检测细胞中NO含量;采用RT-PCR法检测细胞中细胞因子、TLRs和NF-κB p65的mRNA表达水平。结果表明,25~400μg/mL APS对鸡巨噬细胞HD11无毒性作用,能显著促进细胞增殖(P<0.05),且APS组(除400μg/mL)与LPS组无显著性差异(P>0.05)。CCK-8检测显示,50~200μg/mL APS能显著提高细胞中NO含量(P<0.05)及炎性因子IL-8和IL-10转录水平(P<0.05),且呈一定的剂量依赖性,200μg/mL APS还能显著提高炎性因子IL-1β和IL-6转录水平(P<0.05),但均对TNF-α无显著性影响(P>0.05)。此外,50~200μg/mL APS对TLR2基因表达有显著的抑制作用(P<0.05),100~200μg/mL APS对TLR4基因表达有显著的抑制作用(P<0.05),表明TLR2对APS更敏感,但200μg/mL APS能提高NF-κB p65的转录水平(P<0.05)。这些结果表明黄芪多糖作为一种免疫调节剂对鸡巨噬细胞有免疫增强作用,并表现出不同的剂量依赖效应。

新城疫病毒Mukteswar株感染鸡巨噬细胞入胞及胞内转运途径研究

新城疫病毒(NDV)可以通过多种内吞途径入侵不同宿主细胞并在内体中逃逸从而避免被宿主天然免疫系统“追踪”。为探究NDV中等毒力疫苗株Mukteswar感染鸡巨噬细胞(HD11)的入胞和胞内转运途径,本研究利用Dynasore、CPZ、MβCD、Baf A1预处理细胞,然后感染NDV Mukteswar株,通过Westem blot和IFA检测NDV NP蛋白的表达变化。结果显示Dynasore、MβCD和Baf A1处理后NP的表达水平降低,表明NDV入侵HD11细胞是利用小窝蛋白介导的内吞途径,且依赖动力蛋白、胆固醇和pH。通过过表达和干扰试验检测调节不同内体囊泡类型运输的Rab蛋白(Rab5、Rab7、Rab11)对NDV感染HD11细胞的影响,结果发现Rab7的表达对NDV感染无影响,而过表达Rab5和Rab11促进NDV感染,表明是由Rab5、Rab11而不是Rab7调节NDV的转运。本研究丰富了NDV入侵宿主免疫细胞的途径及胞内转运的研究,并为全面阐明NDV感染机制提供了理论基础。

扩张型心肌病病人血清白细胞介素-11水平与心肌纤维化指标的关系

目的:探究扩张型心肌病病人血清白细胞介素-11(IL-11)水平与心肌纤维化指标的关系。方法:回顾性选取我院心胸血管外科2019年1月—2020年12月收治的扩张型心肌病等待移植病人63例作为观察组,匹配年龄、性别、体重因素选取同期我院健康体检者63名作为对照组。检测两组外周血IL-11、氨基末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)、心肌纤维化指标[血清Ⅰ型前胶原(PC-Ⅰ)、透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)]。经胸多普勒超声心动图检查,检测两组研究对象左室相关指标[左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)]。采用Pearson相关性分析法分析IL-11与左室及心肌纤维化相关指标的相关性。结果:观察组外周血IL-11、PC-Ⅰ、HA、LN以及NT-proBNP水平高于对照组,LVEF低于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,IL-11与NT-proBNP、LVEDD、PC-Ⅰ、HA、LN呈正相关(P<0.05),与LVEF呈负相关(P<0.05)。结论:外周血清IL-11水平与扩张型心肌病病人心肌纤维化及心力衰竭指标有相关性,可辅助临床扩张型心肌病的诊疗。

lncRNA GAS6-AS1靶向调控IL-11对子宫内膜基质细胞向成纤维细胞分化的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)生长停滞特异基因转录的反义RNA(GAS6-AS1)靶向调控白细胞介素11(IL-11)对子宫内膜基质细胞(ESCs)向成纤维细胞分化的影响。方法体外传代培养ESCs,取传3~6代、对数生长期、生长状态良好的ESCs,随机分为TGF-β_(1)未干预组和TGF-β_(1)干预组。TGF-β_(1)未干预组不予TGF-β_(1)干预,TGF-β_(1)干预组用无血清培养基饥饿培养后予TGF-β_(1)干预,收集细胞,采用RT-qPCR法检测lncRNA GAS6-AS1、IL-11及纤维化标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白α1(COL1A1)mRNA表达。另取传3~6代、对数生长期、生长状态良好的ESCs,分别转染三条si-GAS6-AS1序列以及si-Control序列,采用RT-qPCR法验证转染效率。将转染si-GAS6-AS1的ESCs用无血清培养基饥饿培养后予TGF-β_(1)干预,收集细胞,采用Western blotting法检测IL-11、α-SMA、COL1A1蛋白表达,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率。结果与TGF-β_(1)未干预组比较,TGF-β_(1)干预组lncRNA GAS6-AS1、IL-11、α-SMA、COL1A1 mRNA相对表达量均显著升高(P均<0.01)。转染si-GAS6-AS1-1、si-GAS6-AS1-2、si-GAS6-AS1-3及si-Control序列的ESCs GAS6-AS1 mRNA相对表达量分别为0.22±0.04、0.27±0.06、0.81±0.07、1.00±0.00。与转染si-Control序列的ESCs比较,转染si-GAS6-AS1-1、si-GAS6-AS1-2序列的ESCs GAS6-AS1 mRNA相对表达量显著降低(P均<0.01),而转染si-GAS6-AS1-3序列的ESCs GAS6-AS1 mRNA相对表达量降低不明显(P>0.05)。因此,选择si-GAS6-AS1-1、si-GAS6-AS1-2序列进行后续实验。与si-Control+TGF-β_(1)组比较,si-GAS6-AS1-1+TGF-β_(1)组和si-GAS6-AS1-2+TGF-β_(1)组IL-11、α-SMA、COL1A1蛋白相对表达量及细胞增殖活性均显著降低,细胞凋亡率均显著升高(P均<0.01)。结论lncRNA GAS6-AS1通过靶向调控IL-11表达抑制ESCs向成纤维细胞分化。

nCD11b、mCD14和mCD86表达对新生儿败血症病情严重程度的预测价值

目的 探讨中性粒细胞CD11b (nCD11b)、单核细胞CD14 (mCD14)和单核细胞CD86 (mCD86)表达对新生儿败血症病情严重程度的预测价值。方法 选取2018年2月至2022年2月南阳市中心医院收治的73例新生儿败血症作为疾病组,根据患儿是否发生休克分为休克组26例和非休克组47例,另选取同期体检的足月健康新生儿73例为健康组。采用流式细胞法检测所有新生儿的外周血n CD11b、m CD14和m CD86表达水平,比较各组新生儿外周血n CD11b、mCD14和m CD86表达水平,并采用受试者工作特征曲线(ROC)分析其对新生儿败血症病情程度的预测价值。结果 疾病组新生儿的外周血n CD11b、mCD86表达水平分别为(220.00±12.58) MFI、(62.89±7.69) MFI,明显高于健康组的(186.69±10.98) MFI、(41.27±5.09) MFI,而外周血m CD14表达水平为(38.85±6.27) MFI,明显低于健康组的(54.03±6.15) MFI,差异均有统计学意义(P<0.05);休克组新生儿的外周血nCD11b、m CD86表达水平分别为(227.69±11.62) MFI、(67.96±6.18) MFI,明显高于非休克组的(215.74±12.95) MFI、(60.08±8.29) MFI,而外周血m CD14表达水平为(34.99±5.83) MFI,明显低于非休克组的(40.98±6.54) MFI,差异均有统计学意义(P<0.05);经ROC分析结果显示,外周血nCD11b、m CD14、mCD86单独及其联合检测对新生儿败血症病情程度的曲线下面积(AUC)分为0.850、0.804、0.815和0.930,联合检测AUC均高于其单独检测(P<0.05)。结论 外周血n CD11b、m CD14、m CD86检测可用于新生儿败血症病情严重程度评估,且联合检测可提高新生儿败血症病情严重程度预测价值。

TP患者应用IL-11联合重组人血小板生成素治疗的临床疗效及安全性

目的:探讨血小板减少症(TP)患者应用白细胞介素(IL)-11联合重组人血小板生成素注射液治疗的临床疗效及安全性。方法:选取2022年8月至2023年8月在漯河医学高等专科学校第二附属医院接受治疗的150例TP患者,随机均分为常规组与联合组,每组各纳入75例。常规组给予应用IL-11治疗,联合组在常规组的基础上联合应用重组人血小板生成素输注治疗。观察两组患者治疗期间血小板计数的变化,比较血小板计数达标时间;治疗14 d,观察血清学检测指标的变化;出院前统计两组患者不良反应发生情况并比较。结果:治疗3 d、7 d、14 d时,联合组患者血小板计数均高于常规组;联合组患者血小板计数恢复至≥50×10^(9)·L^(-1)时间、≥70×10^(9)·L^(-1)时间、≥100×10^(9)·L^(-1)时间均短于常规组;治疗14 d时,联合组血清促血小板生成素(TPO)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均低于常规组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。两组患者不良反应总发生率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:IL-11联合重组人血小板生素注射液治疗TP可获得理想的临床疗效,能有效缩短血小板达标时间,且联合方案安全性可靠。

重组人白细胞介素-11药物利用评价标准建立与使用合理性分析

目的建立重组人白细胞介素-11(rhIL-11)药物利用评价标准(DUE),找出临床不合理使用相关问题,为临床合理使用rhIL-11提供参考,为临床药师处方点评提供依据。方法以rhIL-11药品说明书为基础,参考相关指南、专家共识及循证医学证据,通过各专业专家咨询法制订rhIL-11的DUE,通过美康合理用药监测系统(PASS)抽取湖南省常德市第二人民医院2021年1月至2022年6月使用rhIL-11的出院患者100例进行合理性评价,具体包括适应证、禁忌证、用法用量、给药停药时机、疗程、药物疗效监护、不良反应监测、处置及药物转换、临床结局等。结果使用rhIL-11的100例中,用药完全合理的患者3例(3%),用药不合理的患者97例(97%)。不合理应用常见于适应证不适宜(9例,9%)、用法用量不适宜(33例,33%)、溶媒不合理(93例,93%)、用药疗程不合理(63例,63%)、给药时机不合理2例(2%)。结论建立的rhIL-11 DUE具有较强的科学性、实用性和可行性,该院rhIL-11在临床应用中尚存在一些问题,临床药师需加大管理力度,促进rhIL-11的临床合理应用。

广藿香醇通过PKM2和NF-κB诱导MV4-11细胞凋亡相关机制

目的:探讨广藿香醇(PA)诱导MV4-11细胞凋亡,并探讨其可能存在的相关活性。方法:采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测PA对人结、直肠癌细胞HCT116,人肝癌细胞Hep G-2,人肺癌细胞A549,人急性淋巴髓单核细胞白血病细胞MV4-11,人皮肤黑色素瘤细胞A375,小鼠乳腺癌细胞4T1,人单核细胞型淋巴瘤细胞THP-1,人正常胚肾293A细胞的增殖抑制作用;采用Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡的形态学变化;通过Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)双染法并应用流式细胞术检测细胞凋亡;免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化M2型丙酮酸激酶(p-PKM2),核转录因子-κB(NF-κB),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)凋亡蛋白的表达。结果:PA能抑制人HCT116,Hep G-2,A549,MV4-11,A375,4T1,THP-1,293A细胞的增殖,半抑制浓度(IC50)分别为0.26,0.32,0.28,0.09,0.37,0.23,0.24,0.33 mmol·L-1;作用于MV4-11细胞24 h后可使细胞核皱缩,染色质凝聚,形成明显的凋亡小体。0.1,0.2,0.5 mmol·L-1PA能诱导MV4-11细胞凋亡,凋亡率分别为7.9%,13.6%,22.0%,与溶剂组比较,结果具有统计学差异(P<0.05);Western blot检测显示,PA使细胞NF-κB,p-PKM2,Caspase-3蛋白表达发生明显改变(P<0.05)。结论:PA能抑制人白血病细胞MV4-11细胞的增殖,并诱导其发生凋亡,作用机制可能与NF-κB,p-PKM2,Caspase-3蛋白量的改变有关。

重组人白细胞介素-11对恶性实体瘤患者化疗所致血小板减少症一级预防的有效性和安全性

目的探讨重组人白细胞介素-11(rhIL-11)对恶性实体瘤患者化疗所致血小板减少症(CIT)一级预防的有效性和安全性。方法采用随机数字表法将88例恶性实体瘤化疗患者分为观察组和对照组,每组44例,观察组患者应用rhIL-11一级预防CIT,对照组患者应用安慰剂。比较两组患者CIT发生率、血小板(PLT)变化情况、化疗相关不良事件发生情况、PLT输注情况、rhIL-11相关不良反应发生情况。结果一级预防后,两组患者CIT总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者Ⅲ~Ⅳ级CIT发生率为2.27%,低于对照组患者的18.18%,差异有统计学意义(P<0.05)。化疗第14、20天,观察组患者PLT水平均高于对照组(P<0.05)。至化疗第20天,观察组患者化疗相关不良事件总发生率为11.36%,低于对照组患者的29.55%,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者PLT输注率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。应用rhIL-11后,观察组5例患者出现了轻微的不良反应,对症治疗后症状消失,未停用rhIL-11。结论应用rhIL-11对恶性实体瘤CIT高出血风险和有危险因素的中出血风险人群进行一级预防,可减轻CIT严重程度,减少化疗相关不良事件,rhIL-11相关不良反应轻且易纠正,建议应用于临床。

青蒿酯联合阿糖胞苷±柔红霉素对MLL基因重排白血病细胞株MV4-11凋亡的影响及其机制研究

目的:探讨青蒿酯(ARTS)联合柔红霉素(DNR)±阿糖胞苷(Ara-C)对MLL基因重排(MLL-r)急性髓系白血病(AML)细胞株MV4-11细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法:采用CCK-8法检测ARTS、DNR、Ara-C单药及联用对MV4-11细胞增殖率及计算单药的IC50;流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况及凋亡受体DR4、DR5的表达;Western blot检测各组细胞中Caspase-3、Caspase-9的表达。结果:ARTS、Ara-C、DNR均呈浓度依赖性抑制MV4-1l细胞增殖(r=0.99,r=0.90,r=0.97),48 h的IC50分别为0.31μg/ml、1.43μmol/L、22.47 nmol/L。ARTS 0.3μg/ml、Ara-C 1.0μmol/L、DNR 15 nmol/L作用于MV4-11细胞48 h的增殖率比较:3药联合组<2药联合组<单药组(均P<0.05);2药联合组细胞增殖率比较:ARTS+Ara-C组<ARTS+DNR组<Ara-C+DNR组,3药及2药相互作用的协同指数(CI)均<l。2药及3药联合处理细胞后,ARTS+DNR+Ara-C组细胞凋亡率高于Ara-C+DNR组、ARTS+DNR组(P<0.05),ARTS+DNR+Ara-C组细胞凋亡率与ARTS+Ara-C组相当(P>0.05),各组细胞中DR4和DR5的表达无差异(P>0.05)。与DNR+Ara-C组相比,ARTS+DNR+Ara-C组、ARTS+Ara-C组24 h Caspase-3表达下降,差异均有统计学意义(P<0.05),其中3药联合组细胞中Caspase-3表达下调最显著,但各组细胞中Caspase-9表达无明显改变。结论:体外研究显示ARTS+DNR+Ara-C、ARTS+Ara-C方案协同抑制MV4-11细胞增殖和诱导MV4-11细胞凋亡作用均强于传统方案Ara-C+DNR,其作用机制可能是通过下调Caspase-3表达发挥作用,对Caspase-9、DR4、DR5的表达无影响。

大疱性类天疱疮患者嗜酸粒细胞相关指标与疾病严重程度相关性分析

目的分析大疱性类天疱疮(BP)患者外周血及皮损组织中嗜酸粒细胞比例,皮损组织中嗜酸粒细胞趋化因子CCL11表达水平与疾病严重程度之间的相关性。方法本研究纳入65例自2019年1月—2021年1月期间于天津市中医药研究院附属医院皮肤科住院的BP患者,以及24例同一时间段在本院皮肤外科治疗的有医学美容需求的健康人群作为对照组。通过斯皮尔曼相关系数(Spearman correlation coefficient)分析BP患者外周血和皮损组织嗜酸粒细胞、皮损组织嗜酸粒细胞趋化因子CCL11与BP疾病面积指数(BPDAI)评分之间的相关性。结果BP患者外周血和皮损组织嗜酸粒细胞、皮损组织嗜酸粒细胞趋化因子CCL11与BPDAI评分呈正相关(P<0.05);外周血和皮损组织嗜酸粒细胞、皮损组织嗜酸粒细胞趋化因子CCL11均与患者的红斑评分、水疱评分之间有相关性(P<0.05),与患者的损害评分、黏膜评分无相关性;BP患者外周血嗜酸粒细胞与患者的瘙痒评分有相关性(P<0.05)。结论BP患者外周血和皮损组织嗜酸粒细胞、皮损组织嗜酸粒细胞趋化因子CCL11与BPDAI评分之间存在相关性,可在一定程度上反应BP病情严重程度,且可推断其在BP的红斑、水疱形成机制中发挥了一定的作用,此外,外周血嗜酸粒细胞的升高可能与皮肤瘙痒形成机制有关。

白细胞介素-11及其受体在新生缺氧缺血性脑病大鼠模型中的表达

目的探讨白细胞介素-11(IL-11)和IL-11受体蛋白(IL-11Rα)在缺氧缺血性脑病(HIE)新生大鼠模型中的表达。方法7日龄Sprague-Dawley新生大鼠分为假手术组(Sham组9只)和模型组(HIE组21只),HIE组行右颈动脉结扎、8%O2+92%N2的低氧环境缺氧2 h建立HIE模型,Sham组不结扎和不缺氧;造模48 h后观取两组各6只大鼠观察翻正反射、负趋地性试验和Longa评分等短期行为学表现,之后麻醉处死大鼠取脑组织HE染色、观察大鼠大脑皮层及海马组织学改变;于造模后6 h取Sham组3只大鼠,HIE组于造模后6、12、24、48、72 h时各取3只大鼠取脑组织,采用免疫印迹(Western blot)法IL-11、IL-11Rα和糖蛋白130(GP130)的表达。结果与Sham组比较,HIE组大鼠翻正反射、负趋地性试验时间显著延长(P<0.01),Longa评分升高;与Sham组比较,HIE组大鼠脑干组织结构不清晰、脑细胞丢失、海马和皮层细胞坏死严重;HIE模型大鼠脑组织IL-11的表达呈现先降低后升高,与Sham组比较,在72 h时差异有统计学意义(P<0.05);IL-11Rα和GP130的表达趋势为先增后减,与Sham组比较,IL-11Rα和GP130在24 h时明显升高(P<0.01或P<0.01)。结论HIE模型新生大鼠神经功能缺损,脑组织损伤明显,内源性IL-11及其受体可能参与新生大鼠缺氧缺血性脑损伤疾病的发生及发展过程。

炎症预后指数联合IL-11对晚期非小细胞肺癌免疫相关不良反应的预测价值

目的 探讨炎症预后指数(IPI)联合外周血白细胞介素-11(IL-11)对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)免疫相关不良反应(untoward reaction)的预测价值。方法 回顾性选择85例NSCLC患者临床资料。按是否发生ir AE分为发生ir AE组(n=26)和非ir AE组(n=59),收集患者临床资料,采用多因素Logistic回归分析IPI联合IL-11与NSCLC患者发生ir AE的关系,并进一步绘制ROC曲线分析IPI、IL-11单独及联合检测对NSCLC患者发生ir AE的预测价值。结果 两组CRP、IL-6、IL-11、LDH、NLR、PLR、IPI水平明显相关(P<0.05)。进一步分析显示,IL-11、LDH、IPI是影响NSCLC患者发生ir AE的独立危险因素。ROC曲线结果显示,IL-11、IPI单独检测预测NSCLC患者发生ir AE的曲线下面积分别为0.731、0.786(P<0.05)。两者联合检测的曲线下面积最大,为0.890(P<0.05)。结论 IPI联合IL-11水平用于预测NSCLC患者发生ir AE具有重要价值。