钙黏蛋白家族成员3及11号染色体开放阅读框30基因多态性与支气管哮喘病儿易感性及糖皮质激素疗效的研究

目的探讨钙黏蛋白家族成员3(CDHR3)及11号染色体开放阅读框30(C11orf30,EMSY)基因多态性与支气管哮喘病儿易感性及糖皮质激素疗效。方法前瞻性选取2020年5月至2021年10月于泰州市第二人民医院就诊的支气管哮喘病儿132例作为易感组。均接受糖皮质激素吸入治疗,并根据疗效分为疗效良好组和疗效不良组。选取同期体检的48例儿童作为对照组,采用倾向性匹配方法对易感组和对照组性别、年龄等基线资料进行匹配;采用PCR检测CDHR3及EMSY基因的单核苷酸多态性,计算其基因型频率和等位基因频率,基因位点的多态性与儿童支气管哮喘易感风险间的关系采用多因素logistic回归分析。对比疗效良好组和疗效不良组不同基因型分布。结果易感组和对照组经倾向性评分匹配后有36组配对成功(每组36例),匹配后基线资料对比差异无统计学意义(P>0.05)。匹配后易感组和对照组CDHR3基因rs6967330位点、EMSY基因rs12278256位点基因型频率及A等位基因频率比较差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示:EMSY基因rs12278256位点AA基因型[OR=9.91,95%CI:(1.02,96.65)]、CDHR3基因rs6967330位点AA基因型[OR=10.09,95%CI:(1.08,94.02)]是支气管哮喘易感的危险因素(均P<0.05)。治疗12周后,24例(66.67%)为疗效良好组,其余12例(33.33%)归为疗效不佳组,两组CDHR3基因rs6967330位点基因型分布对比差异无统计学意义(P>0.05);两组EMSY基因rs12278256位点基因型分布对比差异有统计学意义(P<0.05),其中疗效良好组AA基因型分布频率[37.50%(9/24)]明显高于疗效不良组[0(0/12)](P<0.05)。结论CDHR3基因rs3847076位点以及EMSY基因rs12278256位点与儿童支气管哮喘易感有关,EMSY基因rs12278256位点与糖皮质激素治疗疗效相关。

趋化因子CCL11-糖胺聚糖-趋化因子受体CCR3的相互作用研究

目的 探究趋化因子CCL11与受体CCR3、糖胺聚糖(glycosaminoglycans,GAGs)相互作用过程及机制,为深入阐明CCL11-GAGs-CCR3相互作用关系提供理论参考。方法 利用基因工程技术,构建筛选了CCR3-EGFP单分子表达水平的CHO稳转细胞系,利用全内反射荧光成像(total internal reflection fluorescence,TIRF)与等温滴定量热(isothermal titration calorimetry,ITC)技术研究了不同体外溶液条件下GAGs与CCL11的相互作用,并利用趋化实验及活细胞单分子成像实验考察了GAGs-CCL11对CCR3-EGFP稳转细胞趋化行为的调控及CCR3-EGFP在细胞膜上聚集状态的影响。结果 随着硫酸软骨素链长度的增加,其与CCL11结合放热增多,表明其相互作用力增强,其促进CCL11聚集作用增强。单分子荧光成像技术结合趋化试验研究发现,不同种类及不同比例的GAGs均会影响CCL11与CCR3的相互作用,GAGs的加入,抑制了CCL11对CCR3-EGFP稳转细胞的趋化效应及促CCR3-EGFP聚集的能力,且随着硫酸软骨素分子质量的增加,抑制作用显著增强。结论 GAGs的存在可以显著调控CCL11的聚集状态,进而影响其与受体CCR3的相互作用,本研究为进一步阐明CCL11-GAGs-CCR3相互作用关系提供了一定的实验基础。

circ-BAX.3和circ-BAX.11抑制急性髓细胞性白血病细胞作用的机制研究

目的:探讨circRNA-BAX.3(hsa_circ_0051799)、circRNA-BAX.11(hsa_circ_0051800)和miR-128、miR-214以及BAX在人急性髓系白血病(AML)细胞中的相互作用关系及其在AML细胞增殖和凋亡中的作用。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外周血样本和AML细胞系中circRNA-BAX.3、circRNA-BAX.11、miR-128、miR-214和BAX-mRNA的表达水平。免疫印迹法(WB)检测BAX蛋白表达水平。采用CCK-8和流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡能力。通过双荧光素酶报告分析BAX 3’UTR和miR-128、miR-214之间的靶向关系。结果:circRNA-BAX.3和circRNA-BAX.11在AML组织和细胞中表达下调,且两者均可明显促进AML细胞的增殖及抑制细胞凋亡(P<0.05)。本研究发现了circRNA-BAX.3、circRNA-BAX.11、miR-128和miR-214以及BAX的共调节网络。生物信息学分析结果显示,BAX是miR-128和miR-124的靶基因。miR-128和miR-214能够明显下调BAX表达,促进细胞增殖并抑制细胞凋亡(P<0.05),而circ-BAX.3和circ-BAX.11通过结合miR-128和miR-214促进BAX表达并加速AML细胞凋亡。结论:circRNA-BAX.3和circRNA-BAX.11通过抑制miR-128和miR-214并促进BAX的表达来抑制AML的进展。

GDF11调控NLRP3-焦亡途径抑制宫颈癌增殖和转移的作用机制研究

目的探讨生长分化因子11(GDF11)对宫颈癌细胞增殖、转移的影响及其作用机制分析。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人正常宫颈上皮细胞End1/E6E7和宫颈癌细胞系HeLa、C33A、SiHa、Caski中GDF11、NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)表达情况,构建GDF11过表达慢病毒载体、NLRP3过表达慢病毒载体,转染/共转染HeLa细胞系,分别记为oe-GDF11组和oe-GDF11/oe-NLRP3组,同时设置Control组和vector组。采用qRT-PCR、酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测HeLa细胞中白介素(IL)-1β、IL-18 mRNA水平和含量,采用CCK8法、克隆形成试验、划痕试验、Transwell试验分别检测HeLa细胞活性、增殖、迁移、侵袭情况,WB法检测基质金属蛋白酶(MMPs)和上皮间质转化(EMT)相关蛋白表达水平。结果HeLa、C33A、SiHa、Caski细胞中GDF11 mRNA水平均低于End1/E6E7细胞(P<0.05),而NLRP3 mRNA水平均高于End1/E6E7细胞(P<0.05)。oe-GDF11组NLRP3 mRNA水平(0.41±0.05)低于Control组(1.03±0.05)(P<0.05)。e-GDF11组细胞IL-1β、IL-18 mRNA水平和含量、细胞活力、克隆形成率、划痕闭合率、单个视野细胞侵袭数,以及MMP2、MMP9、N-cadherin、Vimentin蛋白表达均低于Control组(P<0.05),E-cadherin蛋白表达高于Control组(P<0.05)。oe-GDF11/oe-NLRP3组细胞IL-1β、IL-18 mRNA水平和含量、细胞活力、克隆形成率、划痕闭合率、单个视野细胞侵袭数,以及MMP2、MMP9、N-cadherin、Vimentin蛋白表达均高于oe-GDF11组(P<0.05),E-cadherin蛋白表达低于oe-GDF11组(P<0.05)。结论GDF11过表达可抑制宫颈癌细胞增殖和转移,可能与抑制NLRP3-焦亡途径有关。

信号转导和转录激活因子3和长链非编码RNA肿瘤易感候选基因11在子痫前期胎盘中的表达及与胎盘螺旋动脉重铸的关系

目的 探究子痫前期(PE)病人胎盘组织中信号转导及转录活化因子3(STAT3)、长链非编码RNA肿瘤易感候选基因11(lncRNA CASC11)表达水平与胎盘螺旋动脉重铸的关系。方法 选取2019年1月至2022年4月于沧州市人民医院行剖宫产分娩的68例PE病人为PE组,并选取同期该院行剖宫产分娩的68例健康孕妇为健康组。比较PE组、健康组一般资料及胎盘组织中STAT3 mRNA、lncRNA CASC11表达水平;分析PE病人胎盘组织中STAT3 mRNA表达水平与lncRNA CASC11的相关性;比较健康组与PE组胎盘螺旋动脉管壁厚度、管腔面积;分析PE病人胎盘组织中STAT3 mRNA、lncRNA CASC11表达水平与胎盘螺旋动脉管壁厚度、管腔面积的相关性。结果 PE组病人舒张压、收缩压高于健康组(P<0.05),胎盘组织中STAT3mRNA、lncRNA CASC11表达水平分别为0.40±0.14、0.46±0.15,低于健康组的1.04±0.35、1.01±0.34(P<0.05),胎盘螺旋动脉管壁厚度高于健康组(P<0.05),管腔面积小于健康组(P<0.05);PE病人胎盘组织中STAT3 mRNA表达水平与lncRNA CASC11,及STAT3 mRNA、lncRNA CASC11表达水平与胎盘螺旋动脉管腔面积均呈正相关(P<0.05),STAT3 mRNA、lncRNA CASC11表达水平与胎盘螺旋动脉管壁厚度呈负相关(P<0.05)。结论 PE病人胎盘组织中STAT3 mRNA、lncRNA CASC11表达水平均较低,二者均与胎盘螺旋动脉重铸关系密切,可能为临床诊治PE提供新方向。

黄色荧光粉La_(3)Si_(6)N_(11)∶Ce^(3+)的结构、性能研究及第一性原理计算

运用高温固相法合成掺铈的氮化物荧光粉La_(3)Si_(6)N_(11)∶Ce^(3+)。采用X射线衍射仪、能谱仪、荧光光谱仪对合成样品的结构、发光性能等进行研究,利用Rietveld方法对其结构精修,并计算了La_(3)Si_(6)N_(11)∶Ce^(3+)的色坐标、色纯度和色温。结果表明:该荧光粉的色坐标为(0.4165,0.558),落在黄绿光区域,计算得到La_(2.82)Si_(6)N_(11)∶Ce_(0.18)^(3+)的色纯度约为92.86%,具有较高的纯度,相关色温为4137K,属于中间色温。通过计算可得掺杂后La_(3)Si_(6)N_(11)∶Ce^(3+)的带隙值为2.92eV,相对掺杂前略微减少,且La_(3)Si_(6)N_(11)∶Ce^(3+)体系属于直接带隙结构,从而有利于提高其发光性能。

产酸克雷伯氏菌SG-11生物合成吲哚-3-乙酸的检测

产酸克雷伯氏菌SG-11是从水稻根面分离的植物根际促生细菌,能有效的促进水稻植物的生长和发育,为探索其促生机理,通过色谱 -质谱联用、薄层色谱与高效液相色谱的定性和定量分析,证明了在产酸克雷伯氏菌SG-11的代谢产物中存在着较高浓度的植物生长素吲哚 -3-乙酸。

长期培养的人脐带间充质干细胞PCNA、IL-6、IL-11和galectin-3的表达

目的:探讨长期培养的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)增殖细胞核抗原(PCNA)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-11(IL-11)和半乳糖凝集素-3(galectin-3)mRNA及蛋白表达的变化情况,为hUC-MSCs的实验研究和临床应用提供实验资料和理论依据。方法:取剖宫产新生儿脐带,分离、传代培养hUC-MSCs;收集第3、8、18、28和33代细胞及培养上清,用qRT-PCR、ELISA及Western bloting检测PCNA、IL-6、IL-11和galectin-3 mRNA和蛋白水平。结果:(1)hUC-MSCs PCNA、IL-6、IL-11 mRNA及IL-6、IL-11蛋白的表达随培养传代次数增加而减少,第33代较第3代分别降低了33%、56%、37%和50.3%、58.9%,差异显著(均P<0.01)。(2)各代间galectin-3 mRNA表达无显著差异(P>0.05),且各代间蛋白表达亦无明显差异。结论:(1)体外长期传代培养过程中hUC-MSCs增殖能力和支持造血能力可能逐渐减弱甚至丧失。(2)体外长期传代培养可能对hUC-MSCs的免疫调节功能无显著影响,这有待进一步的实验验证。

简单节杆菌催化17α-羟基-16β-甲基孕甾-4,9(11)二烯-3,20-二酮脱氢动力学研究

作为倍他米松合成的重要环节,本文研究了简单节杆菌催化17α 羟基 16β 甲基孕甾 4,9(11)二烯 3,20 二酮的C1,2微生物脱氢生成17α 羟基 16β 甲基孕甾 1,4,9(11)三烯 3,20 二酮的反应.考察了不同菌体量和底物质量浓度对反应初速度的影响,结果表明,提高菌体质量浓度有利于提高反应速率,反应初速度与底物质量浓度的关系符合米氏方程.考虑底物及产物的固液平衡以及产物抑制,建立了相应的动力学模型,并对不同初始底物质量浓度下的格氏物间歇脱氢反应过程曲线进行了拟合,模型计算值与实验值吻合较好.

高效液相色谱和质谱法对产酸克雷伯氏菌SG-11生物合成吲哚-3-乙酸代谢途径的研究

产酸克雷伯氏菌 (Klebsiellaoxytoca)SG 1 1是从水稻根面分离的植物根际促生细菌 ,具有生物固氮能力。利用HPLC和GC MS对该菌的代谢产物进行了定性定量分析 ,结果表明该菌能产生较高浓度的吲哚 3 乙酸(IAA) ;对其代谢途径的研究结果证明 ,该菌以吲哚 3 丙酮酸代谢途径合成IAA。

3-氧-乙酰-11-脱氧甘草次酸铝对阿斯匹林诱发大鼠胃溃疡的影响

目的探讨了-氧-乙酸-11-脱氧甘草次酸铝（alumium3－0－acetyl－11－deoxoglycyrrhetinate，ADA）对胃溃疡的防治作用。方法健康Wistar大鼠29只，随机分为4组，分别分为阴性对照组，及生胃酮（carbenoxolone，CN）阳性对照组，ADA50、100mg·kg-1各一组。观察时胃溃疡模型的作用。结果ADA50及100mg·kg-1组对胃溃疡的抑制率与阴性对照组相比，差异显著（P＜0.01），呈剂量依赖性；并且在相同剂量下（100mg·kg－1）对溃疡抑剂率比CN组高（P＜0.05）。ADASO及100mg·kg-1对胃液总酸度、胃蛋白酶活性与阴性对照五相比，差异均显著（P＜0．01），阴性对照组未引起胃液量和胃液总酸度的明显变化。结论治疗量的ADA能显著抑制阿斯匹林型胃溃疡的形成，能显著提高对溃疡的抑制率。

IL-11对ITP患者Th1、Th2细胞及T-bet、GATA-3 mRNA的影响

目的:研究白细胞介素-11(IL-11)对免疫性血小板减少症(ITP)患者Th1、Th2细胞亚群及其调控因子T-bet mRNA和GATA-3 mRNA表达的影响。方法:从10例ITP患者静脉中抽取外周血提取单个核细胞,加入不同浓度IL-11(0、25、50、100、200 ng/mL)培养4 d后,应用流式细胞术和实时荧光定量反转录-多聚酶链反应法检测Th1、Th2细胞亚群比例及T-bet mRNA、GATA-3 mRNA表达水平。结果:当IL-11浓度为100 ng/mL时,与浓度为0的对照组差异最明显,表现为Th1比例及Th1/Th2比值下降,Th2比例升高,差异有统计学意义(P<0.01),同时T-bet mRNA表达下降,GATA-3 mRNA表达增加,T-bet/GATA-3比值显著下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:一定浓度的IL-11在体外培养中能促使ITP患者Th1细胞向Th2细胞转化,同时GATA-3 mRNA表达增加、T-bet mRNA表达下降。

NS-3 802.11物理层源代码实现原理分析

NS-3是国外近几年发展起来的重要网络仿真软件,它提供了比NS-2更低层次的无线功能抽象,更贴近真实的无线物理层的工作原理。分析了802.11无线物理层的源代码,对其主要实现机制进行了详细剖析,包括节点状态与接收分组的条件、信道繁忙起止时间的计算、信道支持多个路径损耗衰落模型、误码率与分组接收成功率的计算、多个干扰分组的跟踪管理和以分块为单位的累积干扰计算;并对协议修改给出了建议。该工作为理解NS-3无线仿真原理做出了有益贡献。

3-氧-乙酰-11-脱氧甘草次酸铝抗大鼠实验性胃溃疡作用机制

目的 探讨 3-氧 -乙酰 - 11-脱氧甘草次酸铝 (aluminum 3-oxo -acetyl- 11-deoxogly cyrrhetinate,ADA)对实验性大鼠胃溃疡的保护作用机制。 方法 采用Shay结扎法、醋酸法复制大鼠胃溃疡模型 ,分别测定给药后胃粘液PGE2 含量及胃粘膜血流量 (GMBF) ,并对结果进行统计分析。结果 ADA5 0mg·kg-1,10 0mg·kg-1与对照组相比 ,能显著增加胃内游离粘液和胃壁粘液量及胃壁内PGE2 含量(P <0 .0 1)。连续以ADA灌胃能显著增加胃粘膜血流量 (P <0 .0 1)。结论 ADA的抗溃疡作用与增加胃粘液量 ,促进PGE2

1-氨基-11-叠氮基-3,6,9-三氧杂十一烷的合成

1-氨基-11-叠氮基-3,6,9-三氧杂十一烷是一种双功能聚乙二醇链状化合物,其具有两个特征官能团氨基与叠氮基,所以可以用于药物传递系统或小分子探针的研究。报道了合成1-氨基-11-叠氮基-3,6,9-三氧杂十一烷的方法,以三缩四乙二醇为原料,经磺酰化反应,亲核取代反应和Staudinger反应的三步反应制得目标化合物,其结构经~1H NMR和^(13)C NMR表征。

IL11类似物c(CGRRAGGSC)与人前列腺癌PC-3细胞体外结合特性的研究

目的:探讨白细胞介素11(IL11)类似物环九肽c(CGRRAGGSC)与人前列腺癌PC-3细胞的体外结合特性。方法:采用荧光染料LSS670标记c(CGRRAGGSC)合成LSS670-c(CGRRAGGSC),流式细胞仪测定其与PC-3细胞体外结合的荧光强度,计算其竞争抑制试验中的半数抑制量(IC50)和平衡抑制常数(K i),荧光显微镜观察LSS670-c(CGRRAGGSC)在PC-3细胞的定位;用99mTc标记c(CGRRAGGSC)合成99mTc-DTPA-c(CGRRAGGSC)与PC-3细胞进行放射受体结合分析,Scatchard作图法计算标记物与PC-3细胞结合的平衡解离常数(Kd)和每个细胞上的最大结合位点数(Bm ax)。结果:LSS670-c(CGRRAGGSC)与人前列腺癌PC-3细胞的结合具有可饱和性,浓度与时间呈依赖性。未标记c(CGRRAGGSC)与LSS670-c(CGRRAGGSC)对PC-3受体具有竞争性抑制作用[IC50=(6.31±0.12)nmol/L,Ki=(2.11±0.14)nmol/L]。LSS670-c(CGRRAGGSC)荧光主要集中在PC-3细胞膜上,Kd值为(0.11±0.02)nmol/L,Bm ax为(230±34)fmol/mg pro。结论:c(CGRRAGGSC)符合特异性配体的标准。

3,7,11-三甲基苯并菲二聚体转移积分的研究

在有机分子晶体中,分子间的转移积分和分子重组能是决定载流子迁移率的两个主要因素。采用二聚体能级分裂方法和科普斯曼定理,研究转移积分对载流子迁移率的影响,计算了3,7,11-三甲基苯并菲二聚体在不同状态下的转移积分,主要包括:共面3,7,11-三甲基苯并菲二聚体的转移积分随距离变化的函数关系;共面3,7,11-三甲基苯并菲二聚体中的一个分子绕垂直于分子平面旋转一个角度时得到转移积分随转角的函数关系。

3,5,9,11-四乙酰基-14-氧杂-1,3,5,7,9,11-六氮杂五环[5.5.3.0^(2,6).0^(4,10).0^(8,12)]十五烷的硝解反应研究

对3,5,9,11-四乙酰基-14-氧杂-1,3,5,7,9,11-六氮杂五环[5.5.3.02,6.04,10.08,12]十2五烷(Ⅰ)的硝解反应进行了详细研究。以硝酸-乙酸酐为硝化剂可选择性硝化Ⅰ得到:4-硝基氧甲基-2,6,8,12-四乙酰基-10-硝基-2,4,6,8,10,12-六氮杂异伍兹烷(Ⅱ)。以硝硫混酸为硝化剂直接在80℃下与Ⅰ反应得到CL-20,而先低温反应再提高反应温度的两段法则得到4-硝基氧甲基-2,6,8,10,12-五硝基-2,4,6,8,10,12-六氮杂异伍兹烷(Ⅲ)。硝硫混酸硝化Ⅱ可得到Ⅲ。Ⅱ和Ⅲ是新型的六氮杂异伍兹烷衍生物,用元素分析、FTIR、MS和NMR等手段对其进行了结构表征。

11α,17-二羟基-及11β,17-二羟基-雄甾-1,4-二烯-3-酮-17-腈羟基保护的研究

11α ,17 二羟基 及 11β ,17 二羟基 雄甾 1,4 二烯 3 酮 17 腈以乙烯基正丁醚进行保护 ,得到双羟基和 11 及17 单羟基保护产物 ,对因保护基引入手性碳而产生的双羟基保护产物的立体异构体进行了分离纯化和波谱鉴定 ;

3-氧-乙酰-11-脱氧甘草次酸铝毒理学研究

目的测定３－氧－乙酰－１１－脱氧甘草次酸铝（Ａｌｕｍｉｎｕｍ３－ｏ－ａｃｅｔｙｌ－１１－ｄｅｏｘｏｇｌｙｃｙｒｈ－ａｔｅ，ＡＤＡ）的半数致死量（ＬＤ５０）及对大鼠血清钠、钾浓度的影响。方法昆明小鼠６０只，体重２０±１ｇ，随机分６组，每组１０只，各组按不同剂量的ＡＤＡ０．２ｍｌ·１０ｇ－１灌胃，给药后按急性毒性实验法连续观察７ｄ。Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只，体重２００±１０ｇ，随机分４组，每组１０只。各组分别给０．５％羧甲基纤维素钠（ＣＭＣ）、生胃酮（Ｃａｒｂｅｎｏｘｏｌｏｎｅ，ＣＮ）和两个剂量的ＡＤＡ，早晚灌胃一次，连续１２ｄ后，处死大鼠取血，测血清钠、钾浓度。结果灌胃ＡＤＡ的ＬＤ５０为４４４４±８３１．５ｍｇ·ｋｇ－１。长期用药，ＡＤＡ未引起大鼠血清钠、钾浓度的明显变化，相反ＣＮ却显著降低血清钾浓度。结论ＡＤＡ引起急性致死性中毒的危险性甚小，长期用药未引起大鼠血清钠。