大豆籽粒贮藏蛋白11S和7S组分提取分离方法的优化

为确定提取分离大豆贮藏蛋白11S和7S两种主要成分的最适方法，采用凯氏定氮和SDS-PAGE分析，从浸提液种类、提取液pH、浸提次数和温度、料液比、Tris-HCl浓度和还原剂种类等影响提取分离效果的因素着手，对Nagano法进一步优化。结果表明，浸提液采用pH8．5、含0．01mol／L亚硫酸氢钠的0．03～0．06mol／L Tris-HCl缓冲液系统，提取温度45℃，料液比1：15，重复浸提两次；分离过程中，在pH6．4沉淀离心分离出11S组分、调pH5．5沉淀离心分离出中间产物后。再调pH至4．8沉淀离心分离出7S组分。优化后的方法与Nagano法相比，可显著提高11S和7S组分的得率、蛋白含量和纯度。