高效液相色谱法测定化妆品中11a-孕酮和11a-孕酮醋酸盐

目的建立凝胶渗透色谱净化液相色谱法检测11a-孕酮、11a-孕酮醋酸盐二种激素的分析方法,为市场监管和企业质量控制提供技术支撑。方法样品经乙酸乙酯提取,使用乙酸乙酯:正己烷=1:1作为淋洗液,经凝胶渗透色谱(gel permeation chromatography,GPC)净化,收集12~20 min淋洗液,淋洗液经旋转蒸发旋得到待测净化液。采用乙腈:水=45:55作为流动相、C18(250×4.6 mm)色谱柱进行分离、二级管阵列检测器对最大吸收波长为245 nm的11a-孕酮、11a-孕酮醋酸盐两种激素进行同时测定。结果该方法线性相关系数在0.995以上,三种代表性化妆品加标回收率分别为90.0%~102.6%、85.1~102.7%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为0.7%~2.5%、0.1%~8.7%,方法检出限分别为0.3 mg/kg、0.6 mg/kg,定量限分别为1.0 mg/kg、2.0 mg/kg。结论该方法操作简单、定性可靠、定量准确,可用于化妆品中禁用激素11a-孕酮、11a-孕酮醋酸盐含量测定。

宿主蛋白Rab11a对牛病毒性腹泻病毒复制的影响

为了探索宿主蛋白Rab11a在感染牛病毒性腹泻病毒(BVDV)后,对细胞增殖的影响。通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Rab11a基因稳定敲除的MDBK细胞株,设计靶向Rab11a基因的向导RNA表达载体,采用Western blot检测Rab11a基因敲除后的蛋白表达情况;使用实时荧光定量qPCR、免疫荧光染色试验、Reed-Muench法等技术检测BVDV感染Rab11a KO细胞后病毒RNA水平、双链RNA(dsRNA)积累水平、病毒滴度及致细胞病变(CPE)情况等。Western blot检测结果显示,成功构建出Rab11a基因敲除的细胞Rab11a KO;Rab11a基因敲除显著抑制BVDV 5'UTR mRNA和dsRNA水平的积累,感染36 h后,Scramble细胞明显有大量细胞病变,出现皱缩、碎裂、形成空泡后脱落等现象,Rab11a KO细胞的CPE现象明显低于Scramble细胞;在BVDV感染细胞12 h后,与Scramble细胞相比,Rab11a KO细胞的病毒滴度显著性降低,结果证明了敲除MDBK细胞的Rab11a基因对BVDV在胞内复制起到抑制作用。本研究结果为了解宿主蛋白Rab11a与BVDV的相互作用,以及Rab11a对病毒的复制增殖的作用提供了新的科学依据。

Fe-27Mn-11Al-0.9C低密度钢变形开裂机理研究

通过Gleeble-3500热模拟实验机对Fe-27Mn-11Al-0.9C低密度钢进行不同温度(700~1200℃)的等温拉伸实验,研究了不同温度下实验钢的变形行为并观察了断裂后的微观组织。结果表明:在700~1200℃温度下进行等温拉伸实验,基体组织为奥氏体和铁素体两相,流变应力随着温度的升高而逐渐降低,700℃等温拉伸塑性最差,800℃等温拉伸塑性居中,900~1200℃等温拉伸时塑性都较好。变形温度不同,组织会有差别,进而导致拉伸断裂机制不同。700℃等温拉伸时,在奥氏体晶界处有κ-碳化物生成,断裂形式为典型的沿晶断裂。800℃等温拉伸时,晶界仍然有脆性的κ-碳化物析出,但该温度下变形时奥氏体能够发生塑性变形,导致800℃拉伸断裂为沿晶延性断裂。当拉伸温度为900~1200℃时,碳化物未析出,塑性显著增强,在奥氏体和铁素体的相界处发生断裂,为韧性断裂。

miR-139-5p靶向COL11A1抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的探讨miR-139-5p在胃癌进展中的功能和潜在分子调控机制。方法从TCGA数据库下载TCGA-STAD表达量数据进行差异分析,确定目标miRNA(miR-139-5p)。利用生信数据库预测miRNA的下游调控靶基因,与差异表达的mRNA取交集确定目标mRNA(COL11A1)。将胃癌细胞构建以下分组:NC mimics、miR-139-5p mimics、NC mimics+oe-NC、miR-139-5p mimics+oe-NC和miR-139-5p mimics+oe-COL11A1。实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组胃癌细胞中mRNA的表达情况;采用CCK-8法及平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力;Western blotting检测MMP-2、MMP-9的表达情况;双荧光素酶报告基因实验验证miR-139-5p与COL11A1之间的结合关系。结果数据库分析及qPCR检测结果均表明,miR-139-5p在胃癌组织及胃癌细胞株中显著低表达。CCK-8法、平板克隆形成实验及Transwells实验结果显示,过表达miR-139-5p能够抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实了miR-139-5p下游调控靶基因为COL11A1,且COL11A1在胃癌细胞中显著高表达。挽救实验显示,过表达miR-139-5p能够抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05),而过表达COL11A1能够逆转过表达miR-139-5p对胃癌细胞的抑制作用(P<0.05)。结论miR-139-5p能够通过靶向COL11A1从而调控胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

抗病抗倒高油甘蓝型油菜不育系汉11A的选育及应用

甘蓝型油菜不育系的不育性易于保持和恢复,是杂种优势利用的主要途径之一。汉11A是汉3A与油菜常规品种中双11号经连续7年定向成对回交选育而成的双低细胞质雄性不育系,具有丰产、稳产、抗倒、抗病、含油量高等特点。以该不育系配制的多个杂交组合已通过国家非主要农作物品种登记,并进行了转让转化,示范推广效果良好,2020-2023年累计在长江上、中、下游区品种适宜区域建立高产高效示范片111个,累计推广面积20余万hm^(2)。详述了汉11A的选育过程、配置的杂交油菜品种的推广应用情况,并对其繁殖和制种技术要点进行介绍,以期为其进一步利用、繁殖杂交种生产和推广应用提供参考。

YP11A封箱机“盒条件”关联方法的探索研究——一种YP11A封箱机“盒条件”关联方法

二维码作为一种便捷、低成本、安全、广泛的物联网接入方式,已经成为烟草行业应用前沿技术提升管理水平、加速产业融合、实现行业高质量发展的重要基础和手段。建设烟草行业二维码管控平台,开发“盒条件”关联管理系统,在企业部署和实施,是每个企业高质量发展的前提和支撑。YP11A在烟草工业企业中被大量使用已有20余年,如何在YP11A上部署“盒条件”关联管理系统,在完成关联的前提下保证箱装烟条品质,是目前工业企业的一大重点和难点。本文给出了一种YP11A封箱机“盒条件”关联的方法,第一工位盒条件关联机构能够准确的检测并剔除侧面二维码缺失或不清晰的烟条,检测烟条的到位情况并计量进入封箱机的烟条数量;第二工位盒条件关联机构检测装箱;第三工位盒条件关联机构进行烟箱条形码的检测,保证了装箱烟条的品质。

高粱11A与3种苏丹草杂交种F_1代的农艺特性及细胞遗传学研究

研究了雄性不育系高粱11A与苏丹草3个杂交组合F1代的生育、产量、光合性能等主要农艺特性及细胞遗传学特性。结果表明，3个杂交组合F1代的生长势和平均株高均明显超过其各自父本苏丹草，继承了苏丹草分蘖能力强和高粱11A抗倒伏的优良特性，生育期126～130d，穗型呈双亲中间型；F1代花粉可育率均高达93％以上，结实性好，自然结实率62．34％～68．75％，杂交组合间差异不明显；F1代PMCMⅠ的平均染色体构型均为2n=2x=20（10Ⅱ），配对行为较规则，但棒状二价体频率明显高于其3个父本苏丹草和母本高粱11A，原亲本间遗传组成存在一定差异。综合分析植株生长、产量性状、光合性能等指标，得出3个杂交组合F1代的育种潜力依次为：高梁11A×棕壳苏丹草F1≥高梁11A×黑壳苏丹草F1〉高粱11A×白壳苏丹草F1。

高粱11A与3种苏丹草杂交新品系的AFLP分析

利用AFLP分子标记技术，对4个高丹草新品系11A-黑壳苏丹草、11A-白壳苏丹草、11A-棕壳苏丹草、11A-黑壳苏丹草晚熟型与对照品种蒙农青饲1号、蒙农青饲2号、蒙农3号及乐食高丹草的遗传差异性进行比较分析。结果表明：用筛选出的24对适宜引物共扩增出3986个AFLP位点，其中多态性位点3546个，多态性位点比率高达88．96％；各供试材料的遗传距离（GD）变动在0．6905～0．8089之间，以GD值0．74为基准，8个材料聚为3类，第一类为蒙农青饲1号、蒙农青饲2号、蒙农3号、11A-黑壳苏丹草、11A-白壳苏丹草、11A-黑壳苏丹草晚熟型；第二类为乐食；第三类为11A-棕壳苏丹草。

当归多糖、黄芪多糖及其配伍对化疗性骨髓抑制小鼠骨髓干细胞的转录因子GATA1、BCL11A、KLF1、NFE2影响

目的:通过实验研究当归多糖、黄芪多糖及其配伍对化疗性骨髓抑制小鼠骨髓干细胞转录因子GATA1、BCL11A、KLF1、NFE2的影响。方法:C57BL/6小鼠20只,雌雄各半,28~32 g。给模型组小鼠每日腹腔注射1次环磷酰胺380 mg·kg-1,正常小鼠腹腔注射等量生理盐水,连续3 d。造模后,以脱颈椎法处死各组小鼠,取出股骨,剔除肌肉和结缔组织,剪开股骨两端,用6号针头以生理盐水反复冲洗骨髓腔,并将冲出的骨髓打碎,再用4号针头过滤制成单个细胞悬液,在离心机上2000 r/min,离心10 min,去上清液,加入4 mL冷70%乙醇固定,上振荡器摇匀制成骨髓干细胞样本。细胞实验分为7组,包括正常组、模型组、"EPO"组、"EPO+(G-CSF)"组、当归多糖组、黄芪多糖组、两药配伍组。直接给药当归多糖0.2 mg/mL,黄芪多糖0.2 mg/mL,EPO50 U/mL,(G-CSF) 50 U/mL于骨髓干细胞体外培养体系中,培养3 d,室内18~20℃,20%相对湿度,5%CO2,37℃孵育箱。采用MTT法检测骨髓干细胞生长和增殖的情况;采用ELISA检测骨髓干细胞中GATA1的蛋白含量;采用RT-qPCR法检测骨髓干细胞中BCL11A、KLF1、NFE2的mRNA表达。结果:(1)造模后模型组GATA1蛋白含量明显下降,与正常组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。各给药组与模型组GATA1均有明显差异,药物组之间差异均有统计学意义,当归多糖与黄芪多糖有交互作用,合用比单一用药好。(2)造模后模型组小鼠骨髓干细胞BCL11A、KLF1、NFE2mRNA明显下降,与正常组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。①各给药组与模型组BCL11A均有明显差异,当归多糖与黄芪多糖均有提升BCL11A作用,两药交互作用明显,合用比单一用药好;②各给药组与模型组KLF1均有明显差异,当归多糖与黄芪多糖均有提升KLF1作用,两药交互作用明显,合用不如单用黄芪多糖;③各给药组与模型组NFE2均有明显差异,当归多糖与黄芪多糖均有提升NFE2作用,两药交互作用明显,合用比单一用药好。结论:当归多糖、黄芪多糖及两药配伍能够显著提升GATA1蛋白含量,上调骨髓抑制小鼠骨髓干细胞的BCL11A mRNA、KLF1 mRNA、NF-E2 mRNA的表达水平,对珠蛋白基因的调控网络起到促进作用,从而为促进骨髓干细胞红系分化发育创造条件。两药配伍的作用优于单一用药。

东乡野生稻细胞质源雄性不育系“东B11A”的选育

以东乡野生稻为母本与栽培稻品种“红优”、“HA7931 7-7”杂交 ,在其杂交后代中分离出雄性不育株 ,再与栽培稻品种“B1 1”杂交 ,并连续选不育株与“B1 1”回交 ,育成东乡野生稻质源新不育系“东B1 1A”。该不育系属早籼类型 ,在宜春 4～ 6月播种 ,播种至始穗历期 63～ 78d,主茎叶片数 1 2～ 1 3叶 ;株型较散 ,茎秆粗壮 ,穗大粒多 ,田间抗性较强 ;不育株率、不育度均达 1 0 0 % ;不育花粉中以典败为主 ;柱头发达 ,外露率达 81 .1 % ,异交结实率一般 5 0 %以上 ;配合力强 ,所配组合“东B1 1A/D1 8”、“东B1 1A/R40 2”和“东B1 1A/C1 42 9”

CYP11A1基因多态性与老年性骨质疏松性骨折相关性研究

目的探讨CYP11A1基因rs900798位点多态性与老年性骨质疏松性骨折骨转换标志物的关系。方法研究对象为121例老年性骨质疏松性骨折患者(骨折组),114例老年性骨质疏松症患者(对照组)。骨折组中胸椎骨折、腰椎骨折、胸腰椎骨折、股骨颈骨折、粗隆间骨折、肱骨近端骨折和桡骨远端例数分别为32例、40例、3例、19例、20例、4例和3例。采用SNa Pshot法进行SNP分型,化学发光法测定血清Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PINP)、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-CTX)浓度。计算两组等位基因频率、基因型频率并分析骨折组CYP11A1基因多态性与PINP、β-CTX的关系。结果两组rs900798位点等位基因基因频率和基因型频率分布符合哈迪温伯格平衡。骨折组和对照组G、T等位基因频率分别为40.1%、59.9%和38.2%、61.8%,差异无统计学意义(P>0.05);两组GG、GT、TT基因型频率分别为14.9%、50.4%、34.7%和13.2%、50.0%、36.8%,差异无统计学意义(P>0.05)。骨折组和对照组血清PINP、β-CTX差异无统计学意义(P>0.05)。骨折组中GG、GT、TT基因型的PINP、β-CTX差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CYP11A1基因rs900798位点多态性与老年性骨质疏松性骨折患者血清PINP、β-CTX无相关性。

高粱11A与3种苏丹草杂种F_2代的生育细胞遗传学及同工酶分析

研究了高粱雄性不育系11A与苏丹草3个杂交组合F2代的生长、育性、细胞遗传学特性及同工酶酶谱表型。结果表明：3种杂交组合F2代的生长势和平均株高均明显超过其各自父本苏丹草，生育期约140d，平均单株分蘖数5．3个，每组合分离出4类穗型，中间类型可作为后代优良单株选择的重要形态学依据；F2代花粉可育率在75．26％～86．05％之间，花粉不存在严重不育问题；F2代PMCMI的平均染色体构型均为2n=2x=20=1011，与亲本相比，F2棒状二价体频率较高，约为50％，原亲本间的遗传组成存在着差异；F2代抽穗期4类穗型POD同工酶的酶带数、位点（Rf）及强弱均存在一定差异，体现了基因在蛋白质表达水平上的差异，可作后代优良单株选择的遗传标记。

斑马鱼CYP11a1基因在不同性腺发育时期的表达

采用实时荧光定量PCR技术,分析了斑马鱼Danio rerio的CYP11a1基因在成鱼4个组织和性腺发育3个时期的表达情况。结果表明:CYP11a1基因在卵巢、精巢、肌肉和脑组织中均有表达且存在差异,在脑中表达量最低(P<0.05),在卵巢、精巢、肌肉中的表达量分别为脑中表达量的204.7倍、38.9倍、17.0倍;CYP11a1基因在3个卵巢发育时期的表达量表现为先降低后升高的趋势,其在卵巢成熟期的表达量最低(P>0.05),在卵巢成熟前期、卵巢成熟后期的表达量分别为卵巢成熟期表达量的1.7倍、1.5倍;CYP11a1基因在3个精巢发育时期的表达量表现为先升高后降低的趋势,在精巢成熟期表达量最高(P<0.05),分别为精巢成熟前期、精巢成熟后期表达量的6.5倍、13.4倍。研究表明,尽管CYP11a1基因在卵巢和精巢发育过程中的表达规律不同,但CYP11a1基因在一定程度上与斑马鱼的性腺发育相关,其可能在促进斑马鱼精子成熟中发挥一定作用。

基于IEEE 802.11ac的多用户MIMO传输方案的优化设计及其性能分析

在IEEE 802.11ac Draft 2.0标准草案的基础上,针对其新引入的多用户MIMO传输机制进行了深入研究,提出了几点改进的优化设计方案,并完成了相应的性能分析。最后对IEEE 802.11ac的多用户MIMO传输方案进行了系统的性能分析,仿真结果表明,改进的传输方案在误比特率(BER)和吞吐量方面获得了明显的性能增益,且与针对性能的理论分析与仿真结果相吻合。

β-珠蛋白生成障碍性贫血患者血红蛋白F表达与BCL11A基因rs11886868位点单核苷酸多态性的关系

本研究通过分析β-珠蛋白生成障碍性贫血患者的血红蛋白F(HbF)表达及BCL11A基因rs11886868位点的单核苷酸多态性,探讨二者之间的关系。选取89例已知基因突变类型的轻型β-珠蛋白生成障碍性贫血患者,通过毛细管电泳分析患者的红细胞HbF含量;提取患者基因组DNA,通过聚合酶链反应扩增含rs11886868位点的BCL11A基因片段,用DNA测序法确定rs11886868位点的单核苷酸多态性。结果显示,在89例深圳地区β-珠蛋白生成障碍性贫血患者的BCL11A基因rs11886868位点中发现C和T两种单核苷酸多态性;携带C/C单倍型患者的红细胞HbF含量为(4.47±3.42)%,高于携带C/T单倍型患者的(2.79±2.21)%。结论:β-珠蛋白生成障碍性贫血患者BCL11A基因rs11886868位点存在C和T两种单核苷酸多态性,其中C多态性可能与红细胞内HbF高表达存在相关性。

实时定量PCR检测B细胞恶性肿瘤中BCL11A基因的表达水平

目的:建立B细胞淋巴瘤/白血病BCL11A基因的定量检测方法,并分析其在B细胞恶性肿瘤中的表达水平。方法:利用实时定量RT-PCR分析B细胞淋巴瘤(18例)、B细胞性慢性淋巴细胞白血病(B-CLL,8例)、T细胞性急性淋巴细胞白血病(T-ALL,8例)和正常对照(15例)外周血单个核细胞(PBMC)中BCL11A基因的表达水平,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因作为内对照。结果:B-CLL组和B细胞淋巴瘤组患者PBMC中BCL11A表达水平均明显高于正常对照(P=0.000)和T-ALL组(P=0.000);T-ALL组和正常对照组BCL11A表达水平无显著差别(P=0.084);B-CLL组和B细胞淋巴瘤组BCL11A表达水平无显著差别(P=0.776)。在B细胞淋巴瘤不同的病例中,BCL11A表达水平有较大差异,其中最小值为0.04,最大值为9.70,中位值为1.00。结论:成功建立BCL11A基因的定量检测方法。

BCL11A基因对γ-珠蛋白基因转录的影响

本研究旨在探讨B细胞淋巴瘤/白血病11A(B-cell lymphoma/leukemia 11A,BCL11A)基因对γ-珠蛋白基因转录的影响。通过小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术沉默人红白血病细胞(K562细胞)的BCL11A基因的表达,用实时荧光定量RT-PCR法定量细胞内γ-珠蛋白基因mRNA水平,分析BCL11A基因对γ-珠蛋白基因转录的调控作用。结果表明,所构建的4个siRNA表达载体对BCL11A基因表达的沉默率分别为49.7%、55.4%、78.2%和84.1%。将沉默率为84.1%的siRNA表达载体转导K562细胞,K562细胞的γ-珠蛋白基因的转录水平较转导对照载体质粒升高了2.4倍。结论:BCL11A基因表达被沉默后γ-珠蛋白基因mRNA水平升高显示BCL11A基因对γ-珠蛋白基因表达可能存在负调控。

热浸镀Zn11Al3Mg0.2Si合金镀层微观组织实验研究

主要研究了热浸镀Zn11Al3Mg0.2Si合金镀层的微观结构及组织特征,利用扫描电镜SEM及其能谱附件EDX观察分析了锌铝镁镀层表面以及截面的微观结构、合金层的形貌、镀层中各相的成分组成,利用辉光放电发射光谱仪GD-OES分析了镀层中各元素沿深度方向的分布,利用电子探针EPMA分析了镀层中各元素的分布,利用X-射线衍射仪分析了镀层的相组成。结果表明:镀层中各元素沿镀层的深度方向呈现不均匀分布,Mg元素在镀层表面严重富集,镀层组织呈现多相混合结构,以MgZn2和Zn共晶为主,同时存在块状锌以及一层较薄的合金层。

UR S11A对船体梁波浪载荷长期极值的影响研究

2016年7月1日起生效的新版UR S11A以提升集装箱船结构安全为目标,替代了之前的版本UR S11。论文对UR S11A和UR S11中关于船体梁波浪载荷长期极值的计算公式和技术背景进行了比较。以已经交付运营或正在建造中的14型不同尺度集装船为分析数据库,对这两个规范在确定波浪载荷长期极值中的应用进行对比研究。然后以一型超大型集装船为算例,用基于线性波浪载荷的谱分析法、基于非线性波浪载荷的等效设计波法和非线性等效设计海况法等三种长期极值预报方法,对船舯区域垂向波浪弯矩进行计算,并分析它们与规范值之间的差异。总结UR S11A对船体梁的波浪载荷长期极值的影响,也为集装箱船波浪载荷设计极值的确定提供参考和建议。

miR-29a-3p和miR-144a-3p下调人非小细胞肺癌细胞COL11A1表达并抑制其增殖、迁移和侵袭

目的探讨XI型胶原α1(collagen type XI alpha 1,COL11A1)、miR-29a-3p和miR-144a-3p在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的作用和它们之间的内在联系。方法用RT-qPCR法检测NSCLC组织和细胞中COL11A1 mRNA和与COL11A1具有可能靶向关系的miRNAs的表达水平。COL11A1 siRNA、miR-29a-3p mimic或miR-144a-3p mimic转入H520细胞后,CCK-8法检测细胞活性,EdU法检测细胞增殖,Transwells法检测细胞迁移和侵袭,Western blot法检测COL11A1、Ki67和MMP-2的蛋白表达水平。荧光素酶报告基因分析检测COL11A1是否是miR-29a-3p和miR-144a-3p在NSCLC细胞中的靶点。结果在NSCLC肿瘤组织和细胞中,CoL11A1的表达水平均明显上调(P<0.01),miR-29a-3p和miR-144a-3p的表达水平均明显下调(P<0.01)。敲低COL11A1或过表达miR-29a-3p和miR-144a-3p均能抑制H520细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05或P <0.01),且过表达miR-29a-3p和miR-144a-3p均能抑制COL11A1表达。荧光素酶报告基因实验证实miR-29a-3p和miR-144a-3p均可直接靶向COL11A1。结论过表达miR-29a-3p和miR-144a-3p可通过直接下调COL11A1表达来抑制NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭。