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RP-HPLC法测定通光藤中11α-O-顺芷酰基-12β-O-乙酰基-通光藤苷元B的含量 被引量:7
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作者 王艳艳 王威 +2 位作者 李红岩 夏雪 董方言 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1409-1412,共4页
目的:建立 RP-HPLC 法测定通光藤药材中11α-O-顺芷酰基-12β-O-乙酰基-通光藤苷元 B 的含量。方法:采用酸水解法降解通光藤 C_(21)甾体苷,以反相高效液相色谱法测定11α-O-顺芷酰基-12β-O-乙酰基-通光藤苷元 B 含量,色谱柱为 Diamonsi... 目的:建立 RP-HPLC 法测定通光藤药材中11α-O-顺芷酰基-12β-O-乙酰基-通光藤苷元 B 的含量。方法:采用酸水解法降解通光藤 C_(21)甾体苷,以反相高效液相色谱法测定11α-O-顺芷酰基-12β-O-乙酰基-通光藤苷元 B 含量,色谱柱为 Diamonsil ODS(250 mm×4.6 mm,5 μm);柱温为16℃;流动相为乙腈-水(45:55);流速为0.8 mL·min^(-1);检测波长为220 nm。结果:11α-O-顺芷酰基-12β-O-乙酰基-通光藤苷元 B 进样量在1.016~5.080μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,r=0.9999(n=5);平均回收率(n=6)为98.8%,RSD=1.9%。结论:方法简便、快速、准确,为通光藤药材的质量评价和新药开发提供科学依据。 展开更多
关键词 通光藤 11α-O-顺芷酰基-12β-O-乙酰基-通光藤苷元B 反相高效液相色谱法
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12β-羟基藜芦酰棋盘花胺对小鼠小脑和大脑皮层组织DNA损伤的影响 被引量:1
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作者 郭敬功 李林 +6 位作者 刘迎滑 王江英 李沙沙 沈姗 魏晓利 丛悦 王天晓 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1668-1672,共5页
目的探讨12β-羟基藜芦酰棋盘花胺(12β-hydroxylveratroylzygadenine,Vog)引起小鼠小脑和大脑皮层组织DNA损伤的影响。方法取132只雄性昆明种小鼠,随机分为空白组,Vog高(2.50μmol/kg)、低剂量组(0.25μmol/kg),给药7 d。采用彗星实验... 目的探讨12β-羟基藜芦酰棋盘花胺(12β-hydroxylveratroylzygadenine,Vog)引起小鼠小脑和大脑皮层组织DNA损伤的影响。方法取132只雄性昆明种小鼠,随机分为空白组,Vog高(2.50μmol/kg)、低剂量组(0.25μmol/kg),给药7 d。采用彗星实验检测小脑和大脑皮层DNA损伤及修复情况;酶联免疫法检测8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)、醌氧化还原酶(NQO1)含有量;比色法测定小脑和大脑皮层活性氧自由基(ROS)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含有量和总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;RT-PCR检测小脑和大脑皮层8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(Ogg1)和血红素加氧酶-1(Ho-1)mRNA表达。结果 Vog明显提高小鼠小脑和大脑皮层MDA、ROS、NO以及尿液中8-OHd G含有量,降低GSH-Px和T-SOD活力,以及NQO1含有量,上调Ogg1表达。停药后第3天DNA修复接近正常水平,8-OHd G含有量接近正常水平。结论 Vog可能引起氧化应激,导致DNA损伤。Vog同时上调Ogg1表达,为抗氧化防御状态和DNA修复系统的代偿性调节。 展开更多
关键词 12β-羟基藜芦酰棋盘花胺 DNA损伤 氧化应激 DNA修复
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慢性肝脏疾病中趋化因子CXCL12α与CXCL12β的检测及其意义 被引量:2
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作者 袁星星 朱东 +6 位作者 姚瑶 王文静 卢实春 赵秀英 陈煜 肖汀 段钟平 《北京医学》 CAS 2014年第3期163-166,共4页
目的:探讨慢性肝脏疾病中趋化因子CXCL12α和CXCL12β水平的变化及其临床意义。方法应用实时定量逆转录PCR检测72例肝癌、72例癌旁、20例肝纤维化及8例正常新鲜肝组织标本CXCL12α、12βmRNA的表达;ELISA检测71例慢性肝炎、24例肝硬化... 目的:探讨慢性肝脏疾病中趋化因子CXCL12α和CXCL12β水平的变化及其临床意义。方法应用实时定量逆转录PCR检测72例肝癌、72例癌旁、20例肝纤维化及8例正常新鲜肝组织标本CXCL12α、12βmRNA的表达;ELISA检测71例慢性肝炎、24例肝硬化、26例肝癌患者及34例健康体检者血清CXCL12α、β的水平。结果肝癌、癌旁及肝纤维化组织中CXCL12αmRNA表达均高于CXCL12βmRNA,肝癌和癌旁组的差异有统计学意义(P=0.02,P 〈0.001);肝癌、癌旁、肝纤维化组CXCL12α、12βmRNA水平均高于正常组。慢性肝炎、肝硬化、肝癌及正常组血清 CXCL12α水平分别为(497.44±216.54)、(675.17±565.43)、(812.54±446.69)、(282.47±220.78)pg/ml;CX-CL12β水平为(1619.72±730.22)、(1177.12±541.78)、(2487.96±1192.79)、(281.69±217.08)pg/ml;肝炎、肝硬化、肝癌组血清CXCL12α、12β含量均高于正常对照组。肝硬化及肝癌组血清CXCL12α水平明显高于肝炎组(P 〈0.05);肝硬化组血清CXCL12β含量低于肝炎和肝癌组(P 〈0.05)。在肝炎患者中,随着肝纤维化程度加重(S1~S4期),血清CX-CL12β含量升高,组间尚无明显差异(P=0.28);血清CXCL12α水平无显著变化(P =0.686)。结论慢性肝脏疾病进展过程中CXCL12α、12β的表达差异显著,可成为慢性肝病辅助诊断和疾病监测的候选指标。 展开更多
关键词 CXCL12α CXCL12β 慢性肝炎 肝硬化 肝癌
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CXCL12α和CXCL12β促进培养的LX-2肝星状细胞迁移
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作者 袁星星 肖汀 +2 位作者 代芳芳 于艳华 娄金丽 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期293-296,共4页
目的探讨C-X-C趋化因子配体12α(CXCL12α)和CXCL12β对肝星状细胞迁移的影响。方法体外培养LX-2肝星状细胞,分为正常对照组、10ng/mL血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)组、(50、100、200)ng/mL CXCL12α组、(50、100、200)ng/mL CXCL12β... 目的探讨C-X-C趋化因子配体12α(CXCL12α)和CXCL12β对肝星状细胞迁移的影响。方法体外培养LX-2肝星状细胞,分为正常对照组、10ng/mL血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)组、(50、100、200)ng/mL CXCL12α组、(50、100、200)ng/mL CXCL12β组。采用TranswellTM法检测CXCL12α和CXCL12β对LX-2细胞迁移能力的影响;外源性CXCL12刺激LX-2细胞,用Western blot法检测C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)蛋白的表达。结果 TranswellTM实验结果显示各组迁移的LX-2细胞个数分别为:正常对照组(66.33±11.43)、PDGF-BB组(127.47±31.68)、50ng/mL CXCL12α组(106.13±12.94)、100ng/mL CXCL12α组(125.87±17.00)、200ng/mL CXCL12α组(137.07±21.03)、50ng/mL CXCL12β组(103.80±11.26)、100ng/mL CXCL12β组(122.33±19.46)、200ng/mL CXCL12β组(124.40±15.16)。CXCL12α和CXCL12β均可促进LX-2细胞迁移;且随着CXCL12α和CXCL12β浓度增加,LX-2细胞迁移增强。LX-2细胞可表达CXCR4蛋白,外源性CXCL12刺激LX-2细胞后,CXCR4蛋白表达无变化。结论 CXCL12α和CXCL12β均可促进肝星状细胞迁移。 展开更多
关键词 肝纤维化 肝星状细胞 CXCL12α CXCL12β CXCR4
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12β-羟基藜芦酰棋盘花碱在小鼠体内的代谢 被引量:1
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作者 李沙沙 王江英 +4 位作者 沈姗 刘习平 武彦彤 郭敬功 丛悦 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1078-1081,共4页
目的研究12β-羟基藜芦酰棋盘花碱(VOG)在小鼠体内的代谢产物。方法采用LC-MS/MS法对小鼠粪便、尿液、血浆、大脑皮层和小脑中的VOG代谢产物进行分析,推测其在小鼠体内的代谢途径和代谢产物。结果 VOG在小鼠体内共检测到8个代谢产物(M1~... 目的研究12β-羟基藜芦酰棋盘花碱(VOG)在小鼠体内的代谢产物。方法采用LC-MS/MS法对小鼠粪便、尿液、血浆、大脑皮层和小脑中的VOG代谢产物进行分析,推测其在小鼠体内的代谢途径和代谢产物。结果 VOG在小鼠体内共检测到8个代谢产物(M1~M8),在粪便中全部检测到,尿液(M1和M8)和血浆(M1和M3)中均检测到2个,大脑皮层和小脑中均只检测到1个(M1)。结论 VOG在小鼠体内主要进行I相代谢反应,其代谢产物以酯键水解为主,并可通过血脑屏障进入脑组织,从而影响中枢神经系统。 展开更多
关键词 12β-羟基藜芦酰棋盘花碱 小鼠 代谢
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3β,12β,20,25-四羟基-达玛烷异构体大鼠肠道立体选择性的吸收
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作者 蒋唤 邵楠 +3 位作者 张亮 熊宁杰 蔡松霖 袁波 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期207-215,248,共10页
目的研究20(R)-25-OH-PPD和20(S)-25-OH-PPD在大鼠肠道的立体选择性吸收。方法雄性大鼠通过在体肠灌流手术分别给予20(R)-25-OH-PPD或20(S)-25-OH-PPD,收集一定时间内的肠道流出液及胆汁样品。肠道流出液及胆汁经沉淀蛋白处理,采用LC-MS... 目的研究20(R)-25-OH-PPD和20(S)-25-OH-PPD在大鼠肠道的立体选择性吸收。方法雄性大鼠通过在体肠灌流手术分别给予20(R)-25-OH-PPD或20(S)-25-OH-PPD,收集一定时间内的肠道流出液及胆汁样品。肠道流出液及胆汁经沉淀蛋白处理,采用LC-MS/MS方法测定其中母体化合物和代谢物含量。同时考察外排蛋白抑制剂对20(R)-25-OH-PPD和20(S)-25-OH-PPD肠道吸收率和胆汁外排率的影响。结果大鼠给予20(R)-25-OH-PPD、20(S)-25-OH-PPD差向异构体后,R和S构型间存在明显的立体选择性吸收,R构型吸收率明显低于S构型。外排蛋白抑制剂不影响这2种异构体的吸收情况,且R和S构型在1.67~41.8μmol·L^(-1)浓度内呈线性吸收方式。结论肠道的外排蛋白可能不参与20(R)-25-OH-PPD和20(S)-25-OH-PPD异构体在肠道的吸收过程,20(R)-25-OH-PPD和20(S)-25-OH-PPD异构体在肠道的立体选择性吸收可能是由于被动扩散速率不同造成的。 展开更多
关键词 12β 20 25-四羟基-达玛烷 立体选择性吸收 大鼠肠灌流模型 液相色谱-串联质谱法
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Preparation and Crystal Structure of 12β,15α-dihydroxyprogesterone
7
作者 孙华 沈妍君 +1 位作者 赵旭 王敏 《Chinese Journal of Structural Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2011年第12期1687-1690,共4页
Progesterone(1) was biotransformed into the title compound 12β,15α-dihydroxy-progesterone(2) with Colletotrichum lini AS3.4486.The biotransformation process was monitored with HPLC.The structure of 2 was determi... Progesterone(1) was biotransformed into the title compound 12β,15α-dihydroxy-progesterone(2) with Colletotrichum lini AS3.4486.The biotransformation process was monitored with HPLC.The structure of 2 was determined by 1H NMR,13C NMR,ESI-MS and single-crystal X-ray diffraction.The crystal of the compound belongs to orthorhombic,space group P212121 with a = 8.0671(9),b = 12.3970(15),c = 18.532(3) ,Z = 4,V = 1853.3(4)3,Dc = 1.242 mg/m3,μ = 0.084 mm-1,F(000) = 752,R = 0.0373 and wR = 0.0850.Single-crystal X-ray diffraction analysis reveals that a 1D supramolecular structure of 2 has been constructed by multiply intermolecular O(2)-H(2)…O(4) and O(3)-H(3)…O(2) H-bonding interactions. 展开更多
关键词 crystal structure PROGESTERONE 12β 15α-dihydroxyprogesterone BIOTRANSFORMATION
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CRYSTAL STRUCTURE OF (20R, 25S)-12β, 25-EPOXY-20, 26-CY-CLODAMMARANE-2α, 3β-DIOL MONOMETHANOL, C_(30)H_(50)O_3·CH_3OH
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作者 马建标 王宏根 《Chinese Journal of Structural Chemistry》 SCIE CAS CSCD 1993年第2期160-161,共2页
Gypenosides, a series of dammarane-type saponins from Gynostemma pentaphyllum Makino, were hydrolyzed under 5% H_2SO_4 catalysis to afford the title compound as a new secondary sapogenin in addition to panaxadiol and... Gypenosides, a series of dammarane-type saponins from Gynostemma pentaphyllum Makino, were hydrolyzed under 5% H_2SO_4 catalysis to afford the title compound as a new secondary sapogenin in addition to panaxadiol and 2a-hydroxypanaxadiol. The crystals of the title compound were obtained from methanol solution and a colourless crystal with dimensions of 0.2 × 0.2 × 0.2 mm was used. C_(30)H_(50) 展开更多
关键词 晶体结构 (20R 25S)-12β 25-环氧-20 26-环达玛烷-2α 3β-二醇 甲醇
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c-Myc、CDK12在胃癌组织中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 杨雪 程园园 田瑞华 《中国实用医药》 2024年第2期11-14,共4页
目的 探讨胃癌组织中c-Myc、细胞周期蛋白依赖性激酶12(CDK12)表达及其与患者临床特征及预后的关系。方法 收集80例胃癌患者的胃癌组织和癌旁组织标本,采用免疫组化法检测标本中的c-Myc、CDK12表达水平。比较胃癌组织和癌旁组织中c-Myc... 目的 探讨胃癌组织中c-Myc、细胞周期蛋白依赖性激酶12(CDK12)表达及其与患者临床特征及预后的关系。方法 收集80例胃癌患者的胃癌组织和癌旁组织标本,采用免疫组化法检测标本中的c-Myc、CDK12表达水平。比较胃癌组织和癌旁组织中c-Myc、CDK12阳性表达情况;分析胃癌组织中c-Myc、CDK12阳性表达与患者临床病理特征的关系;分析c-Myc与CDK12阳性表达的相关性,胃癌组织中c-Myc、CDK12阳性表达与胃癌患者预后的关系。结果 胃癌组织中c-Myc、CDK12阳性表达率(77.5%、87.5%)均明显高于癌旁组织(13.8%、15.0%)(P<0.05)。不同年龄、性别、肿瘤最大直径患者胃癌组织中c-Myc、CDK12阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05);中低分化、Ⅲ~Ⅳ期、侵犯浆膜、有淋巴结转移患者胃癌组织中c-Myc和CDK12阳性表达率分别为88.0%、87.0%、88.9%、90.0%和94.0%、92.6%、97.2%、100.0%,均明显高于高分化、Ⅰ~Ⅱ期、未侵犯浆膜、无淋巴结转移患者胃癌组织的60.0%、57.7%、68.2%、70.0%和76.7%、76.9%、79.5%、80.0%(P<0.05)。相关分析发现,c-Myc、CDK12在胃癌组织中的表达呈正相关性(r=0.487,P=0.016<0.05)。胃癌组织中c-Myc、CDK12阳性患者的3年生存率分别为19.4%、21.4%,均明显低于c-Myc、CDK12阴性患者的55.6%、70.0%(P<0.05)。结论 c-Myc、CDK12在胃癌组织中异常高表达,两者呈正相关性,并与肿瘤的TNM分期、分化程度、肿瘤侵袭深度及淋巴结转移有关,对患者的预后有明显影响,通过检测两者水平可能评估胃癌患者的预后。 展开更多
关键词 胃癌 癌基因 C-MYC 细胞周期蛋白依赖性激酶12 预后
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GmYUC12a对大豆侧根发育和抗旱性的调控作用
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作者 齐玉军 邢兴华 +5 位作者 李思梦 徐泽俊 童飞 王好让 江海东 王幸 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1068-1078,共11页
侧根对作物抗旱具有重要作用,明确Gm YUC12a在大豆侧根生长发育和抗旱中的作用,为探究大豆侧根发育响应干旱的作用机制奠定基础。本文首先分析了徐豆18和徐9302在5%(m/V)聚乙二醇6000模拟干旱胁迫下根系形态特征、根系内源生长素(IAA)... 侧根对作物抗旱具有重要作用,明确Gm YUC12a在大豆侧根生长发育和抗旱中的作用,为探究大豆侧根发育响应干旱的作用机制奠定基础。本文首先分析了徐豆18和徐9302在5%(m/V)聚乙二醇6000模拟干旱胁迫下根系形态特征、根系内源生长素(IAA)含量、IAA合成和信号转导相关基因表达量以及叶片净光合速率(P_(n))和相对含水量(RWC)的变化。干旱胁迫下根系IAA含量、Gm YUC12a、Gm TIR1A和Gm AFB3A表达量变化趋势与侧根数、侧根长、总根长一致,徐9302各项指标均较对照增加,徐豆18则相反,因而徐豆18叶片P_(n)和RWC下降幅度较大。通过发根农杆菌侵染徐9302下胚轴,获得转基因毛状根嵌合植株。干旱胁迫下Gm YUC12a过表达毛状根嵌合体根系IAA含量、Gm TIR1A、Gm AFB3A表达水平、叶片P_(n)和RWC以及侧根数量和长度显著高于空载毛状根嵌合体。与之不同,干旱胁迫下Gm TIR1A、Gm AFB3A过表达毛状根嵌合体侧根数量和长度较空载毛状根复合体无变化,而GmTIR1A和Gm AFB3A同时过表达毛状根嵌合体侧根数量和长度显著增加。可见,干旱胁迫下Gm YUC12a诱导GmTIR1A和Gm AFB3A表达,进而Gm TIR1A和Gm AFB3A协同调控侧根生长发育,提高植株抗旱性。 展开更多
关键词 大豆 干旱 侧根 GmYUC12a GmTIR1A GmAFB3A
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干旱胁迫下GmYUC12a对大豆侧根蔗糖代谢的影响
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作者 齐玉军 邢兴华 +5 位作者 王好让 徐泽俊 童飞 李思梦 江海东 王幸 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2294-2304,共11页
黄素单加氧酶编码基因(YUCs)是依赖于色氨酸生长素合成途径中的关键因子。为了明确GmYUC12a在大豆侧根蔗糖代谢响应干旱胁迫中的作用,试验以大豆稳定品系徐9302为材料,通过发根农杆菌侵染子叶下胚轴,获得过量表达发状根复合体植株,测定5... 黄素单加氧酶编码基因(YUCs)是依赖于色氨酸生长素合成途径中的关键因子。为了明确GmYUC12a在大豆侧根蔗糖代谢响应干旱胁迫中的作用,试验以大豆稳定品系徐9302为材料,通过发根农杆菌侵染子叶下胚轴,获得过量表达发状根复合体植株,测定5%PEG 6000(M/V)模拟干旱胁迫下GmYUC12a过量表达发状根分生出的侧根形态特征、可溶性糖和蔗糖含量及蔗糖代谢相关基因表达量。结果发现,干旱胁迫下GmYUC12a过量表达显著增加侧根长度和干重,表明GmYUC12a可促进干旱胁迫下侧根的生长发育过程。GmYUC12a过量表达能够引起干旱胁迫下侧根GmSUC2、GmCWINV1和GmMST2表达上调,提高蔗糖卸载能力;促使GmSPS1、GmSPS2和GmSuSy1表达上调,增强蔗糖循环能力,促进侧根蔗糖和可溶性糖积累。综上,干旱胁迫通过上调GmYUC12a表达,调控侧根蔗糖卸载和循环过程,维持侧根生长。本研究结果揭示了干旱胁迫下GmYUC12a调控侧根发育的作用机制,为深入研究生长素合成在大豆干旱响应中的功能提供了参考。 展开更多
关键词 大豆 干旱 侧根 GmYUC12a 蔗糖代谢
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木薯MeMLO12基因克隆及其CRISPR-Cas9表达载体的构建
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作者 蔡吉苗 李博勋 +3 位作者 黄贵修 李超萍 时涛 王国芬 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第8期1528-1537,共10页
MLO基因是植物中特有的一类抗病性负调控因子,该基因突变导致植物产生广谱抗病性。本研究从木薯全基因组中克隆获得木薯MLO12基因的DNA和cDNA序列,并将其命名为MeMLO12。该基因全长3743 nt、编码区(ORF)全长1728 nt,具有一个完整的开放... MLO基因是植物中特有的一类抗病性负调控因子,该基因突变导致植物产生广谱抗病性。本研究从木薯全基因组中克隆获得木薯MLO12基因的DNA和cDNA序列,并将其命名为MeMLO12。该基因全长3743 nt、编码区(ORF)全长1728 nt,具有一个完整的开放阅读框,含有15个外显子和14个内含子,编码586个氨基酸,蛋白的分子质量为67.2 kDa,等电点为8.85。该基因编码的蛋白定位在内质网膜上,无信号肽,在23~45、74~96、161~183、285~307、312~334、371~393、413~435 aa处形成7次跨膜结构域。qRT-PCR定量分析发现,受木薯黄单胞病菌侵染后,MeMLO12基因在木薯抗、感品种中的表达量存在明显的差异,参与木薯与黄单胞菌之间的互作,表现出负调控作用。选择该基因第11个外显子进行Snap Gene Viewer分析,获得了10 455条sgRNA的种子序列,从中选取3条靶序列约23 nt,碱基组成上3'末端含G结尾,将其构建到CRISPR-Cas9载体上,经验证,确认MeMLO12的3条靶序列已经成功构建到基因编辑载体上,将其命名为pSGR-Cas9-AT-MeMLO12载体。 展开更多
关键词 木薯 MeMLO12基因 克隆 表达分析 CRISPR-Cas9载体 构建
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基于RAA-CRISPR/Cas12a技术的桃成分单管一体化快速检测方法
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作者 王琳 邢冉冉 +5 位作者 于耀鲜 易秋菊 卢思远 邓婷婷 王旭 陈颖 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第21期280-287,共8页
通过设计特异性的桃重组酶介导的等温扩增(recombinase-aided amplification,RAA)和CRISPR RNA(crRNA)引物,建立RAA技术结合CRISPR/Cas12a系统的单管一体化桃成分快速检测方法,并分析该方法的特异性、灵敏度和检出限,同时对市售样品进... 通过设计特异性的桃重组酶介导的等温扩增(recombinase-aided amplification,RAA)和CRISPR RNA(crRNA)引物,建立RAA技术结合CRISPR/Cas12a系统的单管一体化桃成分快速检测方法,并分析该方法的特异性、灵敏度和检出限,同时对市售样品进行检测。结果显示,该方法不依赖大型仪器设备,在30 min内即可完成桃成分的快速检测;与其他常见水果物种之间无交叉污染,表现出良好的特异性;该方法的灵敏度为1.0×10-1 ng/μL;检出限为1%;通过对20份市售样品检测,结果显示本方法与实时聚合酶链式反应法检测结果一致。因此,本研究建立的RAA-CRISPR/Cas12a单管一体化桃成分快速检测方法具有特异性好、灵敏度高的优点,为桃成分快速检测提供了一种新的技术。 展开更多
关键词 重组酶介导的等温扩增 CRISPR/Cas12a 单管一体化 桃成分 快速检测
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叶酸通过JNK/p38 MAPK信号通路调节小鼠C2C12成肌细胞分化
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作者 孙缦利 邓海峰 +3 位作者 金少举 陈旭东 王兴红 范文娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期317-325,共9页
目的:观察叶酸(folic acid,FA)对小鼠C2C12成肌细胞增殖和分化的影响并探讨其作用机制。方法:(1)在小鼠C2C12成肌细胞增殖阶段,采用不同浓度(0、2.5、5、10和20μmol/L)的FA处理C2C12细胞,显微镜下观察各组细胞的状态,MTT法检测细胞活力... 目的:观察叶酸(folic acid,FA)对小鼠C2C12成肌细胞增殖和分化的影响并探讨其作用机制。方法:(1)在小鼠C2C12成肌细胞增殖阶段,采用不同浓度(0、2.5、5、10和20μmol/L)的FA处理C2C12细胞,显微镜下观察各组细胞的状态,MTT法检测细胞活力,EdU法检测细胞增殖情况。(2)在小鼠C2C12成肌细胞分化阶段,将细胞分为对照(control,Ctrl)组(0μmol/L FA)和FA组(10μmol/L FA),于分化的第2天和第4天,采用免疫荧光染色和Western blot检测成肌细胞分化相关蛋白成肌细胞决定蛋白1(myoblast determination protein 1,MyoD)、成肌蛋白(myogenin,MyoG)和肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHC)的表达水平,并统计各组细胞肌管形成情况。(3)在小鼠C2C12成肌细胞分化第4天时,加入FA处理0、1、3和6 h,采用Western blot检测各时点c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、磷酸化JNK(phosphorylated JNK,p-JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和磷酸化p38 MAPK(phosphorylated p38 MAPK,p-p38 MAPK)蛋白水平。(4)将分化4 d的小鼠C2C12成肌细胞分为Ctrl组、FA组、SP600125(JNK特异性抑制剂)组、SB2035805(p38 MAPK特异性抑制剂)组、FA+SP600125组和FA+SB203580组。C2C12成肌细胞先接受10μmol/L的SP600125或SB203580处理1 h,再经10μmol/L的FA处理24 h,FA组经10μmol/L FA处理24 h,Ctrl组不作处理。采用Western blot检测p-JNK、JNK、p-p38 MAPK、p38 MAPK和MyHC蛋白水平。结果:(1)与0μmol/L FA组相比,其余各浓度组的细胞数量明显增多,细胞活力显著提高(P<0.05),EdU阳性细胞率均显著增加(P<0.05)。(2)与Ctrl组相比,FA组MyoD、MyoG和MyHC的表达水平均显著提高(P<0.05),肌管融合指数显著增加(P<0.05或P<0.01)。(3)与0 h组相比,FA处理1、3和6 h后p-JNK/JNK和p-p38 MAPK/p38 MAPK的比值均显著升高(P<0.05或P<0.01),且随着处理时间的延长,p-JNK/JNK和p-p38 MAPK/p38 MAPK的比值呈现逐渐升高的趋势。(4)与Ctrl组相比,FA组p-JNK、p-p38 MAPK和MyHC蛋白水平显著升高(P<0.01);与FA组相比,FA+SP600125组p-JNK和MyHC蛋白水平显著降低(P<0.05),FA+SB203580组p-p38 MAPK和MyHC蛋白水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:FA可以通过激活JNK/p38 MAPK信号通路促进小鼠C2C12成肌细胞分化。 展开更多
关键词 叶酸 C2C12成肌细胞 骨骼肌 细胞分化 JNK/p38 MAPK信号通路
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2014-2018年江苏省人源喹诺酮耐药1,4,[5],12:i:-沙门氏菌的基因组学初步分析
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作者 郑东宇 马恺 +3 位作者 周翌婧 吴高林 霍翔 乔昕 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期739-744,共6页
目的分析江苏省喹诺酮耐药1,4,[5],12:i:-沙门氏菌分子流行病学特征。方法用cgMLST分析江苏省及欧美来源菌株的分子流行病学特征,并初步分析喹诺酮耐药1,4,[5],12:i:-沙门氏菌可能的传播特征。结果13株喹诺酮耐药1,4,[5],12:i:-沙门氏... 目的分析江苏省喹诺酮耐药1,4,[5],12:i:-沙门氏菌分子流行病学特征。方法用cgMLST分析江苏省及欧美来源菌株的分子流行病学特征,并初步分析喹诺酮耐药1,4,[5],12:i:-沙门氏菌可能的传播特征。结果13株喹诺酮耐药1,4,[5],12:i:-沙门氏菌共注释11大类抗性基因(Antibiotic resistance genes,ARGs)。其中氨基糖苷类ARGs检出率最高(100%);12株喹诺酮耐药菌株(92.3%)均携带IncHI2/IncHI2A质粒类型;不同国家/地区来源菌株质粒介导喹诺酮耐药(PMQR)基因携带分析显示美国及欧洲来源菌株携带6类PMQR基因,qnrB19检出率最高。江苏省来源菌株携带3类PMQR基因类型,aac(6′)-Ib-cr检出率最高(11.84%);不同国家/地区来源菌株cgMLST位点差异分析显示形成3个主要流行谱系。结论江苏省人源喹诺酮耐药1,4,[5],12:i:-沙门氏菌分离株与欧美菌株可能具有共同进化来源,PMQR基因携带水平存在国家/地区差异。 展开更多
关键词 1 4 [5] 12:i:-沙门氏菌 喹诺酮耐药 分子流行病学
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雌雄同株工业大麻新品种云麻12号的选育
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作者 郭蓉 张庆滢 +7 位作者 吕品 郭鸿彦 张园 陈璇 许艳萍 郭孟璧 字雪靖 杨明 《中国麻业科学》 2024年第2期65-68,共4页
云麻12号是云南省农业科学院经济作物研究所于2023年选育的雌雄同株晚熟型工业大麻新品种。该品种THC平均含量为0.07%,CBD平均含量为2.58%。2020—2021年参加全省区域试验,花叶平均产量2785.8 kg/hm^(2),较对照品种云麻8号增产24.68%;... 云麻12号是云南省农业科学院经济作物研究所于2023年选育的雌雄同株晚熟型工业大麻新品种。该品种THC平均含量为0.07%,CBD平均含量为2.58%。2020—2021年参加全省区域试验,花叶平均产量2785.8 kg/hm^(2),较对照品种云麻8号增产24.68%;麻籽平均产量1959.15 kg/hm^(2),较对照增产14.00%;麻糠平均产量1921.05 kg/hm^(2),较对照增产12.33%。该品种具有较强的抗病性、抗旱性和抗倒伏性,是适合低纬地区种植的一个雌雄同株工业大麻多用型新品种。 展开更多
关键词 工业大麻 雌雄同株 品种 云麻12
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Ag掺杂Mo-12Si-8.5B合金在25~600℃的摩擦学行为
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作者 胡华荣 尹果 +3 位作者 杨洪宇 郭源君 颜建辉 陈芳 《摩擦学学报(中英文)》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第7期884-892,共9页
本文中采用放电等离子烧结法制备了Mo-12Si-8.5B和Mo-12Si-8.5B-10%Ag这2种合金,通过高温真空摩擦磨损试验仪测试了2种合金与Al_(2)O_(3)摩擦副在25~600℃间的干摩擦学性能.结果表明:与Mo-12Si-8.5B合金相比,在25~600℃区间Mo-12Si-8.5B... 本文中采用放电等离子烧结法制备了Mo-12Si-8.5B和Mo-12Si-8.5B-10%Ag这2种合金,通过高温真空摩擦磨损试验仪测试了2种合金与Al_(2)O_(3)摩擦副在25~600℃间的干摩擦学性能.结果表明:与Mo-12Si-8.5B合金相比,在25~600℃区间Mo-12Si-8.5B-10%Ag合金表现出更低的摩擦系数和磨损率.在600℃时,Mo-12Si-8.5B-10%Ag合金的摩擦系数和磨损率均可达到最小值,其值分别为0.41和1.14×10^(-5)mm^(3)/(N·m),此时Mo-12Si-8.5B-10%Ag合金的干摩擦性能表现最佳,这与Mo-12Si-8.5B-10%Ag合金磨损表面的MoO_(3)、SiO_(2)和Ag_(2)MoO_(4)等润滑相的存在及Ag在25~600℃范围内起到的润滑效果有关.此外,在25~200℃区间,Mo-12Si-8.5B-10%Ag合金的磨损机制主要为黏着磨损和剥层磨损,在400~600℃范围内,则以黏着磨损和氧化磨损为主. 展开更多
关键词 Mo-12Si-8.5B-10%Ag合金 Al_(2)O_(3) 中低温 干摩擦 磨损机理
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宫颈癌组织中KLF12、STAT3的表达及其与临床病理特征和预后的相关性
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作者 何永亮 章培 +4 位作者 吴宁 蒋炳林 成永莲 欧阳海英 涂媛 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第7期1305-1310,共6页
目的:分析宫颈癌中Krüpple样转录因子12(KLF12),信号转导和转录激活因子3(STAT3)的表达,并探讨其与临床病理特征和预后的相关性。方法:收集2017年07月至2020年07月收治于本院的82例宫颈癌患者活检及手术宫颈癌标本。采用免疫组化... 目的:分析宫颈癌中Krüpple样转录因子12(KLF12),信号转导和转录激活因子3(STAT3)的表达,并探讨其与临床病理特征和预后的相关性。方法:收集2017年07月至2020年07月收治于本院的82例宫颈癌患者活检及手术宫颈癌标本。采用免疫组化法检测患者宫颈癌组织及宫颈癌KLF12、STAT3表达情况。通过χ^(2)检验分析KLF12、STAT3表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系。采用多因素Cox回归分析宫颈癌患者预后的相关因素。绘制Kaplan-Meier曲线分析KLF12、STAT3表达与宫颈癌患者3年生存率的关系。结果:宫颈癌组织KLF12阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05),STAT3阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05)。不同年龄、产次、月经状态、肿瘤直径、组织学分类、浸润深度患者宫颈癌组织中KLF12、STAT3表达差异无统计学意义(P>0.05)。FIGO分期Ⅱ期、低分化、有淋巴结转移的宫颈癌患者组织中KLF12、STAT3阳性表达率较高(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,FIGO分期Ⅱ期、KLF12、STAT3阳性表达均是宫颈癌患者3年内死亡的独立危险因素(P<0.05)。Kaplan-Meier曲线结果显示,KLF12阳性表达患者3年生存率66.66%(28/42)低于KLF12阴性表达患者90.00%(36/40)(P<0.05),STAT3阳性表达患者3年生存率70.49%(43/61)低于STAT3阴性表达患者100%(21/21)(P<0.05)。结论:宫颈癌组织中KLF12、STAT3阳性表达升高,两者异常表达与FIGO分期、分化程度、淋巴结转移及预后有关,可作为用于评估预后的生物标志物。 展开更多
关键词 宫颈癌 KLF12基因 信号转导和转录激活因子3 临床病理特征 预后
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妊娠期糖尿病患者血清Xenin-25、CTRP12水平及对妊娠结局的影响
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作者 张杰 王静 +3 位作者 刘启航 祝静 吴斌 陈小芬 《疑难病杂志》 CAS 2024年第8期940-944,共5页
目的分析妊娠期糖尿病(GDM)患者血清神经降压素相关肽(Xenin-25)、C1q肿瘤坏死因子相关蛋白12(CTRP12)与妊娠结局的关系。方法选取2021年2月—2022年2月川北医学院附属医院生殖医学科诊治的GDM患者92例为GDM组,再根据是否发生不良妊娠结... 目的分析妊娠期糖尿病(GDM)患者血清神经降压素相关肽(Xenin-25)、C1q肿瘤坏死因子相关蛋白12(CTRP12)与妊娠结局的关系。方法选取2021年2月—2022年2月川北医学院附属医院生殖医学科诊治的GDM患者92例为GDM组,再根据是否发生不良妊娠结局,分为预后不良亚组(n=34)和预后良好亚组(n=58)。以同期健康妊娠妇女50例为正常妊娠组。采用酶联免疫吸附法检测血清Xenin-25、CTRP12水平;Pearson相关性分析血清Xenin-25、CTRP12与糖代谢指标的相关性;多因素Logistic回归分析影响GDM患者不良妊娠结局的因素;受试者工作特征曲线评价血清Xenin-25、CTRP12对妊娠结局的预测价值。结果GDM组血清Xenin-25、CTRP12低于正常妊娠组,而空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA_(1c))、空腹胰岛素(FINS)及稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平均高于正常妊娠组(t/P=16.046/<0.001,22.114/<0.001,11.510/<0.001,13.666/<0.001,12.101/<0.001,14.413/<0.001);GDM组血清Xenin-25、CTRP12表达与FPG、FINS、HbA_(1c)及HOMA-IR呈显著负相关(Xenin-25:r/P=-0.665/<0.001,-0.598/<0.001,-0.567/<0.001,-0.702/<0.001;CTRP12:r/P=-0.579/<0.001,-0.622/<0.001,-0.667/<0.001,-0.725/<0.001);预后不良亚组血清Xenin-25、CTRP12低于预后良好亚组,HOMA-IR高于预后良好亚组(t/P=6.783/<0.001,17.997/<0.001,15.146/<0.001);血清CTRP12升高、Xenin-25升高是影响GDM患者不良妊娠结局的独立保护因素[OR(95%CI)=0.646(0.499~0.837),0.619(0.465~0.824)],HOMA-IR升高是危险因素[OR(95%CI)=1.353(1.110~1.649)]。血清Xenin-25、CTRP12及二者联合预测GDM患者不良妊娠结局的AUC分别为0.828、0.815、0.870,二者联合优于各自单独预测效能(Z=4.113、4.327,P=0.003、0.001)。结论GDM孕妇血清Xenin-25、CTRP12水平降低,均参与GDM的疾病过程,二者联合对GDM患者不良妊娠结局具有较高的评估价值。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 Xenin-25 C1q肿瘤坏死因子相关蛋白12 妊娠结局
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去氢骆驼蓬碱诱发PC12细胞凋亡时对线粒体融合分裂的影响
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作者 巩月红 赵美玲 +3 位作者 马瑞佳 林玉霞 赵军 王建华 《医药导报》 北大核心 2024年第2期174-183,共10页
目的探讨去氢骆驼蓬碱(HM)对PC12细胞线粒体功能损伤和线粒体融合分裂相关蛋白表达水平的影响。方法PC12细胞分为细胞对照组、HM组、线粒体分裂抑制剂Mdivi-1组、HM+Mdivi-1组、线粒体裂变激动剂WY14643组、HM+WY14643组,药物浓度均为1... 目的探讨去氢骆驼蓬碱(HM)对PC12细胞线粒体功能损伤和线粒体融合分裂相关蛋白表达水平的影响。方法PC12细胞分为细胞对照组、HM组、线粒体分裂抑制剂Mdivi-1组、HM+Mdivi-1组、线粒体裂变激动剂WY14643组、HM+WY14643组,药物浓度均为1、10、25、50、100μmol·L^(-1),处理24 h,噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,显微镜观察细胞形态;MitoTracker Red探针染色观察线粒体形态和纵横轴长度比值,JC-1染色检测线粒体膜电位,试剂盒检测ROS、ATP水平和乳酸脱氢酶(LDH)活性,免疫荧光染色法和Western blotting检测胱天蛋白酶3(caspase-3)、促凋亡蛋白(Bax)、细胞色素C(cyt-c)和线粒体融合蛋白(Mfn2)、线粒体分裂蛋白(Drp-1)的表达水平;电穿孔法转染Drp1的干扰序列,筛选转染效果好的siRNA序列,协同药物干预,通过荧光法、MTT法、免疫印迹法检测相关指标。结果MTT结果显示,与细胞对照组比较,HM组、Mdivi-1组、HM+Mdivi-1组、WY14643组和HM+WY14643组存活率显著下降(P<0.01),EC 50分别为(11.48±2.32)、(12.35±1.67)、(14.88±2.07)、(39.14±3.25)、(20.09±1.97)μmol·L^(-1),依此后续实验选择20μmol·L^(-1)浓度的HM、Mdivi-1和HM+Mdivi-1作为构建PC12细胞模型的工作浓度;显微镜和MitoTracker Red探针染色观察发现,药物组细胞密度呈不同程度减少,树枝状突起减少变圆;线粒体形态趋向圆形,纵横轴长度比值分别为细胞对照组(3.33±0.72)、HM组(2.19±0.58)、Mdivi-1组(2.45±0.44)、HM+Mdivi-1组(1.43±0.62)。JC-1染色检测结果显示,与细胞对照组相比,HM组线粒体模电位显著下降(P<0.01);ROS显著升高(P<0.01)、ATP水平下降(P<0.01),LDH酶活性上升(P<0.01);免疫荧光染色法和Western blotting结果显示,与细胞对照组比较,HM组促凋亡蛋白Bax、细胞色素C、胱天蛋白酶3表达水平均显著上升(均P<0.01);与细胞对照组比较,HM组细胞线粒体分裂相关蛋白Drp1表达水平显著上升(P<0.01),而线粒体融合相关蛋白Mfn2的表达水平显著下降(P<0.01);特异性干扰Drp1并协同HM干预后,各干扰组较各单独药物干预组PC12细胞存活率下降,Drp1和Mfn2表达下调,均差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论HM可通过ROS累积降低PC12细胞膜电位及ATP,进而激活caspase-3凋亡途径促使细胞凋亡,线粒体融合分裂可能参与HM造成PC12细胞的损伤,启动细胞线粒体途径凋亡。 展开更多
关键词 去氢骆驼蓬碱 PC12细胞 线粒体融合分裂 线粒体功能损伤 神经毒性损伤
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