结核病与12-羟基二十碳四烯酸的相关性研究

目的探究结核病与12-羟基二十碳四烯酸(12-HETE)的相关性,揭示结核病可能的发病机理。方法选取健康体检者68例为对照组,72例来该院治疗的患者为结核组,采用12-羟基二十碳四烯酸酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒测定血清中12-HETE的含量。结果结核组12-HETE水平为(9.7±4.1)ng/m L,明显高于对照组的(5.4±2.3)ng/m L(P<0.01)。结论结核病与12-HETE具有相关性,12-HETE可能是结核病发病机理之一。

15-羟廿碳四烯酸对缺氧性大鼠颈内动脉环的收缩作用及机制

目的研究15-羟廿碳四烯酸(15-HETE)对正常及缺氧状态的离体大鼠颈内动脉环的作用,探讨15-HETE在缺血/缺氧性脑损伤的病理生理过程中的作用.方法 16只Wistar大鼠随机分为两组即对照组:其氧浓度(FiO2)为21%和缺氧组:置于FiO2为10%的缺氧箱中(n=8).9 d后将大鼠处死,游离颈内动脉(ICA)制备血管环,KH液中分别加入不同浓度15-HETE以及2 mmol·L-1 4-AP、10-2 mol·L-1 TEA、10-6 mol·L-1 GLYB后平衡15 min后,再加入15-HETE,观察不同浓度15-HETE、不同K+通道阻断剂对颈内动脉环收缩反应程度的变化.结果 15-HETE以浓度依赖方式(10-8 mol·L-1～10-6mol·L-1)使游离颈内动脉环张力增加,对缺氧组大鼠颈内动脉环张力作用更为明显,与正常对照组相比差异有显著性(15-HETE浓度为10-8 mol·L-1、10-7 mol·L-1时,P<0.05,10-6 mol·L-1时,P<0.01,n=8);2 mmol·L-1 4-AP使颈内动脉环血管张力增高(P<0.05，n=8),但预先应用 2 mmol·L-1 4-AP后浴液中加入10-6 mol·L-1 15-HETE,血管张力无进一步增加的趋势;10-2 mol·L-1 TEA、10-6 mol·L-1 GLYB,对血管环张力差异无显著性(P>0.05,n=8);但进一步应用15-HETE使血管环张力增加,变化幅度接近单纯应用15-HETE组.结论 15-HETE收缩ICA,缺氧情况下尤为明显;Kv通道在15-HETE所致的ICA收缩中起作用.

子痫前期患者血清12-羟基二十碳四烯酸浓度变化及其对血管内皮细胞凋亡的影响

目的观测子痫前期患者血清12-羟基二十碳四烯酸(12-HETE)浓度变化及对绒毛膜外滋养细胞诱导血管内皮细胞凋亡的影响,探讨12-HETE参与在子痫前期发生、发展的可能机制。方法收集2019年6月至2020年6月复旦大学附属中山医院吴淞医院子痫前期患者临床症状出现前26例和出现后23例,以及与之孕周、年龄及BMI相匹配的正常孕妇26例及正常未孕妇女14例血清样本,利用超高压液相色谱串联质谱仪(UPLC-MS)检测各组血清12-HETE浓度;建立人血管内皮细胞的单培养及其与胎盘滋养细胞HTR-8/Snveo的共培养模型,分为正常对照组、12-HETE处理组、共培养对照组、共培养12-HETE处理组。采用流式细胞术检测各组细胞血管内皮细胞的凋亡情况,计算凋亡率。结果12-HETE的保留时间为3.33 min,母离子碎片为319.33 m/z,离子碎片为179.22 m/z,在20-2000 pg/ml的线性范围内,相关系数r^(2)=0.99,能够满足样本检测需求。子痫前期患者临床症状出现前、后12-HETE浓度均高于正常孕妇组和正常未孕妇女组(均P<0.01)。血管内皮细胞单培养中,12-HETE处理组细胞凋亡率显著低于正常对照组(P<0.01);共培养对照组血管内皮细胞的凋亡率显著高于正常对照组(P<0.01);共培养12-HETE处理组血管内皮细胞的凋亡率显著低于共培养对照组(P<0.01)。结论子痫前期患者临床症状出现前后外周血中12-HETE浓度均显著升高,其可能通过抑制血管内皮细胞凋亡参与子痫前期的发生、发展。

花生四烯酸12-脂氧化酶-12-氢基二十碳四烯酸-GPR31轴在肝脏再灌注肝缺血损伤中的作用

目的探究花生四烯酸12-脂氧化酶(ALOX12)–12-氢基二十碳四烯酸(HETE)–GPR31轴在肝脏再灌注肝缺血损伤中的作用机制。方法采用8周龄雄性B6.Cg-Tg(MX1-cre)Cgn/J小鼠为研究对象,采用随机数字表法分为三组:空白对照组(n=12)、实验对照组(n=12)和实验组(n=12)。实验组小鼠进行基于胚胎干细胞的基因打靶技术制备基因敲除手术;进行肝血流阻断。肝血流阻断45 min后发送移走血管夹,以恢复血液供应。实验对照组进行肝血流阻断。空白对照组同样进行开腹但并不进行肝血流阻断。采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测ALOX12–12-HETE–GPR31轴中基因表达水平。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法分别检测肝脏血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)三项炎性因子水平和12-HETE含量。采用原位细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况。采用日立7180全自动生化分析仪检测小鼠肝脏血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、AST/ALT。结果肝脏再灌注肝缺血损伤小鼠的ALOX12–12-HETE-GPR31轴中基因转录水平均高于空白对照组(P<0.05),且随着再灌注时间的延长而逐渐增大(P<0.05)。空白对照组和实验组小鼠,在肝血流阻断并再灌注后,随着再灌注时间延长ALOX12–12-HETE–GPR31轴中基因转录水平间差异无统计学意义(P>0.05)。实验对照组小鼠肝脏中IL-1β[(20.53±1.32)ng/L比(10.61±0.83)ng/L]、IL-6[(322.1±11.41)ng/L比(107.34±9.02)ng/L]、TNF-α水平[(31.78±2.42)ng/L比(11.41±0.98)ng/L]、12-HETE含量、肝脏组织细胞凋亡率、ALT[(47.94±1.48)U/L比(24.85±1.50)U/L]、AST[(54.45±3.17)U/L比(30.69±2.08)U/L]和AST/ALT[(1.23±0.04)比(0.69±0.03)]均高于空白对照组(P<0.05)。实验组小鼠各项指标低于实验对照组(P<0.05),且与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论ALOX12表达量的上调会促进12-HETE的积累,特异性敲除ALOX12基因,阻断12-HETE的积累能够有效抑制肝脏再灌注肝缺血损伤。

15-羟基二十碳四烯酸收缩慢性缺氧动脉环信号转导通路的部位:内皮细胞还是平滑肌

目的:观察15-羟基二十碳四烯酸(15-HETE)致慢性缺氧性大鼠肺动脉收缩的信号转导途径,阐明15-羟基二十碳四烯酸引起慢性缺氧性肺动脉收缩作用的可能机制。方法:实验于2006-03/2006-09在哈尔滨医科大学药学院进行。①实验材料:健康成年雄性Wistar大鼠,体质量220～240g,清洁级,由哈尔滨医科大学附属第二医院实验动物中心提供。②实验方法:取18只成年雄性Wistar大鼠连续缺氧9d(O2体积分数为0.12)制作大鼠缺氧模型,通过氧气监测控制器控制箱内氧气体积分数为0.12,9d后即成为缺氧大鼠模型。16只正常大鼠吸入正常空气(O2体积分数为0.21)作为对照。将大鼠麻醉后分离直径1.5mm肺内动脉,剪成2mm长动脉环置于组织浴槽中,记录血管张力变化。③实验评估:观察15-羟基二十碳四烯酸对缺氧模型组、正常组大鼠血管收缩作用,在此基础上,除去血管内皮细胞和使用丝裂素活化蛋白激酶的激酶抑制剂PD98059,明确血管内皮细胞和丝裂素活化蛋白激酶的激酶系统在15-羟基二十碳四烯酸收缩肺动脉中的作用。结果:34只大鼠均进入结果分析。①15-羟基二十碳四烯酸对正常组、缺氧模型组大鼠血管环均有收缩作用,呈浓度-效应正相关,但缺氧组收缩明显,与正常组比较,差异显著(P<0.01)。②丝裂素活化蛋白激酶的激酶抑制剂PD98059可明显阻断15-羟基二十碳四烯酸对缺氧大鼠肺动脉的收缩作用(P<0.05)。③去掉内皮的缺氧大鼠肺动脉,PD98059仍明显阻断15-羟基二十碳四烯酸的收缩作用(P<0.05)。结论:15-羟基二十碳四烯酸通过激活肺动脉平滑肌丝裂素活化蛋白激酶的激酶信号转导途径收缩慢性缺氧性大鼠肺动脉,作用部位主要位于血管平滑肌。

15-羟廿碳四烯酸对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织SOD、MDA的影响

目的研究15-羟廿碳四烯酸(15-HETE)对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法36只SPF级大鼠随机分为假手术组、模型组以及15-HETE组三组,每组各12只。假手术组大鼠右侧脑室注入15μl的PBS;模型组和15-HETE组大鼠在缺血前30 min右侧脑室分别注入15μl的PBS和15μl的15-HETE,模型制备成功24 h后处死全部大鼠。检测各组大鼠脑梗死百分比,脑组织中SOD活性和MDA含量。结果与模型组相比较,15-HETE组大鼠脑梗死百分比明显减少(P<0.05),SOD活性显著提高(P<0.05),MDA含量显著下降(P<0.05)。结论15-HETE对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用。

探析针刺调节15-羟基二十碳四烯酸防治动脉粥样硬化的作用机制

动脉粥样硬化(AS)是多因素参与的复杂的病理过程,中医药治疗AS已显示出了其独特的优势及广阔的应用前景。针灸作为祖国医学的瑰宝,能够着眼于宏观,综合治疗,通过调整阴阳、扶正祛邪、疏通经络,有效地防治AS,并且具有取穴简单,疗效肯定,安全经济,无不良反应等优点。15-羟基二十碳四烯酸(15-HETE)作为花生四烯酸的代谢产物,参与调节动脉血管收缩与重构。文章综合整理15-HETE代谢机制相关文献,与针灸防治AS的作用机制加以对比分析,探究15-HETE对AS发生发展的影响以及针刺调节15-HETE防治AS的作用机制。

10-羟基-12-十八碳烯酸的静息细胞合成

10-羟基-12-十八碳烯酸(10-HOE)是一种典型的微生物源羟基不饱和脂肪酸,具有抑菌、抗炎、抗过敏等功效,在食品、药品、化工等行业具有很好的应用前景,因此,10-HOE的生物合成十分重要。本文以亚油酸为底物,以含10-亚油酸水合酶的重组大肠杆菌为催化剂,采用静息细胞法生物合成10-HOE,通过优化黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)浓度、溶剂种类及含量、甘油含量、氯化钠浓度、转化温度、溶液pH值、菌浓度、底物浓度和培养时间等9个单因素转化实验,来提高10-HOE的转化率。细胞转化生物合成的优化条件为:FAD浓度0.25 mmol/L,添加2%的正己烷,氯化钠浓度15 mmol/L,亚油酸底物质量浓度20 g/L,菌质量浓度200 g/L、溶液pH7.0,在37℃、200 r/min的摇床中培养24 h,获得的10-HOE转化率为(73.1±0.9)%,转化质量浓度为(16.3±0.2)g/L。该转化是目前为止10-HOE生物合成报道的最高转化浓度。本研究为大规模制备10-HOE提供了工艺路线,为工业化生产10-HOE提供参考。

12-羟基-9-十八碳烯酸甲酯实验研究

12-羟基-9-十八碳烯酸甲酯是新型增塑剂,热稳定性好,透明度高,毒性小,广泛应用在塑料行业中。文章通过小试实验、中试试制确定了其最佳工艺参数和条件,从而为规模化生产提供依据。

15-羟廿碳四烯酸对缺氧性肺血管收缩电压门控性K^+通道的作用机制

缺氧性肺血管收缩(HPV)是机体的一种保护功能,但其机制至今尚不完全清楚。15-羟廿碳四烯酸(15-Hydroxyei-cosatetrienoic acid,15-HETE)是15-脂质氧化酶(15-LO)代谢花生四烯酸(AA)的产物,其对肺动脉平滑肌细胞(PSMVC)电压门控性K+通道(Kv)有抑制作用,使细胞去极化,细胞内钙离子浓度增加,进而导致细胞收缩,产生HPV,故15-HETE可能是形成HPV的始发介质。

填充柱超临界流体色谱手性拆分5-羟基-8-十一碳烯酸-δ-内酯(茉莉内酯)

研究了填充柱超临界CO2流体色谱手性拆分外消旋5-羟基-8-十一碳烯酸-δ-内酯(茉莉内酯)的方法。在筛选固定相种类及改性剂种类基础上,通过单因素及正交实验较为系统地考察了柱温、柱压、改性剂含量、流速等因素的影响,优化出较佳的分析型拆分条件:固定相Chiralcel OD-H,柱温31℃,柱压12 MPa,改性剂为乙腈-甲醇(体积比7∶3),在流动相中体积分数2.0%,流动相流速1.0 mL/min,分离度2.00。利用较佳条件,在流速8mL/min下进行制备规模放大,320 min内进样10 mg得6.6 mg两对映体产品,回收率66%,光学纯度(e.e%)均为100%,表明超临界流体色谱分离效率高,可作为茉莉内酯mg级对映体纯品快速制备的手段。

花生四烯酸与银屑病——致病作用与药理调节

花生四烯酸(AA)及其衍生物是一簇有效的炎症介质和调节剂。起初,对AA的研究集中在环氧合酶(CO)的代谢产物前列腺素(PGs)和血栓素(TXs)上。近10年发现AA还可经脂氧合酶(LO)代谢。1975年Turner等首次报道LO的代谢产物12-羟基廿碳四烯酸(12-HETE)

12-羟基二十碳四烯酸与2型糖尿病合并冠心病的相关分析

目的探讨12-羟基二十碳四烯酸(12-HETE)在T2DM合并冠心病(CHD)中的作用。方法测定109例T2DM非CHD患者(T2DM)组,152例T2DM合并CHD患者(CHD)组和103名健康对照者(NC)组的12-HETE水平。结果 T2DM组和CHD组的12-HETE水平高于NC组(P<0.01),且CHD组高于T2DM组(P<0.01)。T2DM组和CHD组的12-HETE均与Gensini积分相关(r=0.430,P=0.001;r=0.371,P=0.001)。结论 12-HETE可能与糖尿病合并CHD的发生有关。

12-羟基二十碳四烯酸在炎症及氧化应激中的研究进展

12-羟基二十碳四烯酸(12-HETE)是花生四烯酸(AA)的代谢产物.12-HETE主要由活化的磷脂酶A2(PLA2)释放AA后经12-脂氧合酶(LOX)催化AA代谢生成.12-HETE在癌症、糖尿病和高血压等多种疾病中扮演着重要角色,参与炎症、氧化应激等病理过程的发生发展,目前研究表明它参与炎症反应过程中的变质、渗出.本文通过对12-HETE在炎症及氧化应激中的作用及其调节策略进行综述,以提高对12-HETE的认识.

12-脂氧化酶与糖尿病视网膜病变的相关性

糖尿病视网膜病变是糖尿病微血管病变的严重眼部并发症,当前研究认为视网膜的炎症损伤在糖尿病视网膜病变早期发挥重要作用。12-脂氧化酶是一种多元不饱和脂肪酸的氧化酶,其最终过氧化产物为12-羟基二十碳四烯酸。研究证明,12-羟基二十碳四烯酸可以上调血管紧张素II的水平,参与白细胞淤滞、毛细血管周细胞凋亡,导致慢性氧化应激,影响视网膜新生血管的形成。上述改变均是糖尿病时视网膜发生病理改变的重要环节。本文主要综合近年来国内外研究成果,详述12-脂氧化酶对糖尿病视网膜病变早期微血管病变发生的影响。

12(S)-HETE与皮肤损伤和脑创伤的相关研究进展

12(S)-羟基二十碳四烯酸[12(S)-HETE]是一种具有生物活性的脂质代谢产物,主要是由花生四烯酸经血小板型12-脂氧合酶催化生成。通常情况下,生物体液和组织中可以发现低浓度的12(S)-HETE存在,当人体受到各种生理和病理刺激时,12(S)-HETE浓度可发生相应改变。越来越多的研究表明,12(S)-HETE在多种临床疾病中发挥着重要作用,如糖尿病、高血压、氧化应激、炎症、肿瘤及心血管疾病等。然而,12(S)-HETE与创伤的关系尚不明确,目前,仅有一些12(S)-HETE与皮肤损伤及颅脑创伤的相关研究,该文旨在综述12(S)-HETE与皮肤损伤及颅脑创伤的关系,为后续研究做好理论准备。

15-脂氧合酶/15-羟廿碳四烯酸在缺氧性肺动脉高压中的作用和机制

肺动脉高压是一种病因复杂的罕见病,以肺动脉阻力增高,引起右心室后负荷增大,最终导致右心室功能衰竭而使患者死亡为特征。肺血管花生四烯酸信号通路异常在肺动脉高压中发挥重要作用。肺动脉高压患者肺动脉内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞中15-脂氧合酶(15-lipoxygenase,15-LO)及其代谢产物15-羟廿碳四烯酸(15-hydroxyeicosatetraenoic acid,15-HETE)水平均升高。在缺氧条件下,15-LO/15-HETE引起肺动脉收缩,促进肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞增殖,抑制肺动脉平滑肌细胞凋亡,促进肺血管外膜纤维化,进而导致肺动脉高压的发生。本文主要对15-LO/15-HETE与缺氧性肺动脉高压相关性的研究进行综述,以阐明15-LO/15-HETE在缺氧性肺动脉高压中发挥的核心作用。

15-羟廿碳四烯酸对脑动脉平滑肌细胞ERK信号传导通路影响

目的探讨缺氧时15-羟廿碳四烯酸(15-HETE)对细胞外信号调节激酶(ERK)1/2及ERK5通路的影响以及ERK1/2及ERK5通路在缺血缺氧性脑动脉收缩中的作用。方法将大鼠脑动脉平滑肌细胞随机分为正常对照组、缺氧组、缺氧+去甲二氢愈创木酸(NDGA)组、缺氧+NDGA+15-HETE组、缺氧+NDGA+15-HETE+ERK抑制剂组、缺氧+ERK抑制剂组。将细胞分别应用Western blot技术和Real-time PCR技术检测大鼠脑动脉平滑肌细胞中p-ERK、ERK、电压门控性钾离子通道(Kv)2.1蛋白及mRNA的表达。结果随着15-HETE作用时间延长,正常对照组中15-HETE活化ERK1/2以及ERK5作用降低;随着15-HETE浓度的升高,正常对照组中ERK1/2和ERK5的活性增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着15-HETE增多,p-ERK1/2表达增多,Kv2.1通道表达受抑制;加入ERK1/2抑制剂后,缺氧+NDGA+15-HETE+ERK1/2抑制剂组与缺氧+NDGA+15-HETE组相比较、缺氧+ERK1/2抑制剂组与缺氧组相比较,ERK1/2活性减弱的同时,Kv2.1通道表达增强,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着15-HETE的产生增多,ERK5表达减少,Kv2.1通道表达降低。缺氧+NDGA+15-HETE+ERK5抑制剂组和缺氧+ERK5抑制剂组,分别与缺氧+NDGA+15-HETE组和缺氧组相比较,ERK5活性明显受抑制,Kv2.1通道表达增多,差异均有统计学意义(P<0.05)。加入ERK抑制剂后,ERK mRNA表达明显被抑制,缺氧+NDGA+15-HETE+ERK抑制剂组与缺氧+NDGA+15-HETE组相比较、缺氧+ERK抑制剂组与缺氧组比较,Kv2.1 mRNA均上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在缺氧条件下,脑动脉平滑肌细胞中15-HETE可能是通过上调ERK1/2信号传导通路的表达而抑制Kv2.1通道的表达,最终导致脑动脉收缩。