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人源m^(6)A甲基转移酶复合物METTL3-METTL14的表达、纯化和透射电镜观察
1
作者
韩妍妍
闫慧芳
+1 位作者
王清华
马剑鹏
《复旦学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第3期400-408,共9页
N^(6)-腺苷酸甲基化(m^(6)A)是一种重要的mRNA和长链非编码RNA的内部修饰方式,通过影响RNA代谢的各个方面,参与调控人体一系列生理过程。METTL3和METTL14组成的甲基转移酶复合物可以有效地催化甲基基团的转移,但其具体的催化机制尚不完...
N^(6)-腺苷酸甲基化(m^(6)A)是一种重要的mRNA和长链非编码RNA的内部修饰方式,通过影响RNA代谢的各个方面,参与调控人体一系列生理过程。METTL3和METTL14组成的甲基转移酶复合物可以有效地催化甲基基团的转移,但其具体的催化机制尚不完全清楚。本研究通过进行蛋白质结构无序度分析及三维模型预测发现,二者除MTD结构域外其他区域基本处于无序或低复杂度状态。为了进一步探索METTL3-METTL14复合物实现甲基基团转移的结构基础,本研究在哺乳动物细胞HEK293S GnTI-中成功表达了全长序列的人源METTL3-METTL14蛋白复合物,并通过镍柱亲和层析、离子交换及凝胶过滤层析获得了高纯度的METTL3-METTL14蛋白复合物,并推测全长METTL3和METTL14以1∶1的比例组成复合物。通过120kV透射电子显微镜观察发现,蛋白颗粒大小均一,颗粒直径在10~12nm。
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关键词
m^(6)A修饰
METTL3
METTL14
120kv透射电子显微镜
下载PDF
职称材料
题名
人源m^(6)A甲基转移酶复合物METTL3-METTL14的表达、纯化和透射电镜观察
1
作者
韩妍妍
闫慧芳
王清华
马剑鹏
机构
复旦大学生命科学学院
复旦大学复杂体系多尺度研究院
贝勒医学院生物化学和分子生物学系
复旦大学张江复旦国际创新中心
上海人工智能实验室
出处
《复旦学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第3期400-408,共9页
基金
上海市高峰人才计划项目(2018SHZDZX01)。
文摘
N^(6)-腺苷酸甲基化(m^(6)A)是一种重要的mRNA和长链非编码RNA的内部修饰方式,通过影响RNA代谢的各个方面,参与调控人体一系列生理过程。METTL3和METTL14组成的甲基转移酶复合物可以有效地催化甲基基团的转移,但其具体的催化机制尚不完全清楚。本研究通过进行蛋白质结构无序度分析及三维模型预测发现,二者除MTD结构域外其他区域基本处于无序或低复杂度状态。为了进一步探索METTL3-METTL14复合物实现甲基基团转移的结构基础,本研究在哺乳动物细胞HEK293S GnTI-中成功表达了全长序列的人源METTL3-METTL14蛋白复合物,并通过镍柱亲和层析、离子交换及凝胶过滤层析获得了高纯度的METTL3-METTL14蛋白复合物,并推测全长METTL3和METTL14以1∶1的比例组成复合物。通过120kV透射电子显微镜观察发现,蛋白颗粒大小均一,颗粒直径在10~12nm。
关键词
m^(6)A修饰
METTL3
METTL14
120kv透射电子显微镜
Keywords
m^(6)A modification
METTL3
METTL14
120
kv
transmission electron microscope
分类号
Q518.2 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人源m^(6)A甲基转移酶复合物METTL3-METTL14的表达、纯化和透射电镜观察
韩妍妍
闫慧芳
王清华
马剑鹏
《复旦学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023
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