美金刚对β淀粉样蛋白25～35神经毒性的拮抗作用

目的 研究兴奋性氨基酸受体拮抗剂美金则（MEM）对β淀粉样蛋白25-35（Aβ25-35）神经毒性的影响及其可能机制。方法 用系列浓度的Aβ25-35和（或）MEM作用PC12细胞，MTT检测其对细胞活力的影响；倒置显微镜下观察细胞形态的变化；Western blotting 检测半胱氨酸蛋白水解酶3（caspase 3）和磷酸化的蛋白激酶C（P-PKC）的表达；检测MEM对Aβ25-35诱导的一氧化氮（NO）产生和超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响。结果 Aβ25-35诱导的caspase 3的活化，也可以部分抑制Aβ25-35诱导的P-PKC表达降低。Aβ25-35使NO含量升高，SOD活性下降，预先加入MEM可使NO含量和SOD的活性得到部分恢复。结论MEM可以拮抗Aβ25-35的神经毒性作用，这可能是其治疗中重度阿尔茨海默病的机制之一。

电针对SAMP8小鼠行为学及大脑皮层β位淀粉样前体蛋白裂解酶表达的影响

目的探讨电针治疗阿尔茨海默病的可能作用机制。方法将快速老化小鼠P8亚系(SAMP8)36只随机分为模型组、电针组和药物组,抗快速老化小鼠R1亚系(SAMR1)12只为正常组。电针组给予电针百会穴、印堂穴20 min后,点刺水沟穴;药物组给予盐酸多奈哌齐按0.92 mg·kg-1剂量灌胃;正常组和模型组给予电针组相同程度和时间的束缚。治疗15 d后,用Morris水迷宫测定小鼠学习记忆能力,免疫组化技术检测小鼠大脑皮层β淀粉样蛋白(Aβ)及β位淀粉样前体蛋白裂解酶(BACE-1)含量,实时荧光定量PCR法测定BACE-1 mRNA的表达。结果与模型组比较,药物组与电针组逃避潜伏期均显著下降,而目标象限游泳时间均显著增加(P<0.05),电针组BACE-1、BACE-1 mRNA表达显著减少(P<0.05);电针组游泳总路程、游泳速度明显下降,与药物组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论电针可能通过抑制SAMP8小鼠大脑皮层BACE-1表达,降低Aβ水平,达到改善其学习记忆障碍的作用。

中药成分影响阿尔茨海默病β-淀粉样蛋白靶点的研究进展

β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)的异常沉积与阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的发生、发展密切相关。以Aβ为靶点,寻找治疗AD的潜在药物是目前研究的热点。中药具有毒副作用小、多靶点、多途径、多环节的作用特点。总结近10年来国内外文献,就中药成分通过减少Aβ产生、促进Aβ清除、拮抗Aβ毒性等几个方面阐述其对AD中Aβ靶点的影响。以期为中药成分防治AD的进一步研究提供参考。

人端粒酶反转录酶对人胚胎皮质神经元损伤的保护

背景:端粒酶可维持端粒长度,避免细胞复制性衰老和凋亡,其催化亚基端粒酶反转录酶还具有抗凋亡和调节细胞生存的作用。目的:观察人端粒酶反转录酶对β淀粉样蛋白1-40引起的人胚胎皮质神经元损伤的影响。方法:分离和培养12-16周龄人胚胎皮质神经元,将人端粒酶反转录酶基因重组腺病毒转染至神经元。免疫细胞化学法检测人端粒酶反转录酶基的表达,端粒重复序列扩增酶联免疫吸附法检测端粒酶活性。转染后第3天,给予10μmol/Lβ淀粉样蛋白1-40作用24h后,应用MTT检测细胞活力。荧光探针2’7’-二乙酰二氯荧光素标记检测细胞内活性氧水平,比色法测定细胞匀浆中谷胱甘肽含量。结果与结论:转染后第3天,人端粒酶反转录酶的表达最高,并重建了其端粒酶活性;10μmol/Lβ淀粉样蛋白1-40显著降低神经元的细胞活力和谷胱甘肽的含量(P<0.05和P<0.01),升高活性氧水平(P<0.05)。转染了人端粒酶反转录酶基因的神经元能显著对抗β淀粉样蛋白1-40的毒性作用,增加细胞的活力和谷胱甘肽含量(P<0.05和P<0.01),降低活性氧水平(P<0.05)。结果表明,人端粒酶反转录酶对β淀粉样蛋白1-40引起的人胚胎皮质神经元的损伤有明显保护作用。

铝佐剂Aβ_(42)及其亚单位疫苗可有效诱导大鼠产生特异性抗体

[目的]探讨铝佐剂AB42及其C端亚单位肽Aβ36-42疫苗接种大鼠能否产生特异性抗Aβ42抗体。[方法]24只SD大鼠随机分为Aβ42肽疫苗、Aβ36-42肽疫苗和对照组,每组8只。将Aβ42肽疫苗及Aβ36-42与七聚赖氨酸耦联制成的亚单位疫苗分别接种于SD大鼠,对照组用等体积PBS加铝佐剂。用间接ELISA法检测大鼠血清和脑匀浆上清液中特异性抗体的滴度;用Morris水迷宫测试大鼠的行为学变化;用HE染色观察大鼠的脑、肝、脾和肾组织学变化;用接种后血清与老年性痴呆患者的脑片作免疫组织化学染色。[结果]第3次接种后ABβ42和Aβ36-42组鼠的血清均开始有抗Aβ42抗体产生,抗体滴度随接种次数的增多而增高,第6次接种后两组鼠血清的抗ABβ42抗体滴度均达到1:1 600以上,同时脑匀浆上清液也检测到低滴度的抗Aβ42抗体,血和脑匀浆的抗体滴度与对照组相比,差异有显著性(P<0.01);对照组、Aβ42组和Aβ36-42组鼠逃避潜伏期分别为54.81±17.06、43.18±18.70和52.27±15.13,差异均无显著性(P>0.05);对照组、Aβ42组和Aβ36-42组鼠平台象限游泳距离占总游泳距离百分比分别为59.78±5.68、65.14±4.98和61.34±4.19,各组间差异也无显著性(P>0.05);3组鼠的脑、肝、脾和肾均未出现病理性变化;Aβ42组鼠的血清能结合AD患者脑组织中的老年斑,?

γ-分泌酶在铝致大鼠脑内Aβ蓄积中作用

目的探讨γ-分泌酶在铝引起脑内β-淀粉样蛋白(Aβ)蓄积中的作用。方法 32只SD大鼠随机分为对照组,麦芽酚铝低、中、高剂量组(0.4、0.8、1.2 mg/kg);腹腔注射麦芽酚铝8周后,酶联免疫吸附试验和western-blot检测大鼠皮质和海马Aβ的量和γ-分泌酶组成亚单位早老素1(presenilin 1)和nicastrin蛋白。结果在皮质内,高剂量染铝组Aβ总量为(120.58±23.65)pg/mL,在海马内中、高剂量染铝组Aβ总量为(115.57±7.00)、(127.09±11.04)pg/mL,均高于对照组(P<0.05);在皮质和海马内,与对照组比较,各染毒组Aβ40无明显变化;在皮质内,高剂量染铝组Aβ42为(51.02±20.90)pg/mL,在海马内,低、中、高剂量染铝组Aβ42分别为(24.84±5.05)、(42.52±12.13)、(54.42±7.98)pg/mL,均高于对照组(P<0.05);与对照组比较,中、高剂量染铝组大鼠脑皮质和海马内presenilin 1、nicastrin均升高(P<0.05)。结论γ-分泌酶水平的升高是铝引起大鼠脑内Aβ蓄积的重要原因之一。

二苯乙烯苷与三七总皂苷配伍对阿尔茨海默病模型PC12细胞损伤的影响

目的探讨二苯乙烯苷（TSG）与三七总皂苷（PNS）配伍对阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）模型pCl2细胞的细胞存活率的影响。方法将接种于培养板上的神经细胞培养1d后去掉原培养液，每板除空白组外，模型组和药物配伍组每孔均加入5μl的淀粉样13蛋白（Ap）25-35诱导PCI2细胞损伤，接触24h，建立AD细胞损伤模型。分别采用均匀设计法、析因设计法分组，1d后，采用四甲基偶氮唑盐比色法检测各组细胞存活率。结果均匀设计结果显示，细胞存活率和TSG、PNS之间呈显著线性关系。从方程看，TSG、PNS的剂量增大，则细胞存活率提高，在本实验条件下，理论上当TSG、PNS分别以200mmol／L、50mg／L合用时，细胞存活率最高。2×2析因设计试验发现，与模型组比较，TSG＋PNS组细胞存活率[（74．46±2．06）％LL（65．42±1．42）％]提高（P〈0．05），但TSG与PNS未见交互作用（P=0．053）。结论TSG与PNS配伍对AD细胞损伤有相加的保护作用。

Sirt1与阿尔茨海默病的关系研究

Sirt1是源于哺乳动物体内的Sirtuins家族成员之一,它参与抗氧化应激、抗感染、抗凋亡等生理病理过程,神经系统发生退行性病变时,Sirt1表达量上调,起到一定的神经保护作用。目前Sirt1与阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的关系日益受到关注,本文对两者之间的关系研究情况进行总结,以期为AD的治疗提供依据。