基于UHPLC-LTQ/Orbitrap MS法的苦荬菜内酯Z和11,13α-二氢苦荬菜内酯Z的大鼠肝微粒体体外代谢产物鉴定

苦荬菜内酯Z和11,13α-二氢苦荬菜内酯Z是苦碟子(Ixeris sonchifolia(Bunge)Hance)中2种重要的倍半萜内酯类成分。为研究它们在大鼠肝微粒体中的代谢产物,采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1mm×50mm×1.7μm)分离,以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,采用高效液相色谱-线性离子阱静电轨道场质谱(UHPLC-LTQ/Orbitrap MS)技术,在ESI负离子模式下分析样品。筛选出18个化合物(包括苦荬菜内酯Z和11,13α-二氢苦荬菜内酯Z,及其16个代谢产物),并对其中15个代谢产物进行结构鉴定。结果表明,苦荬菜内酯Z和11,13α-二氢苦荬菜内酯Z经大鼠肝微粒体主要发生了羟基化、加氢和脱氢的Ⅰ相代谢反应。该结果初步阐明了苦荬菜内酯Z和11,13α-二氢苦荬菜内酯Z在大鼠肝微粒体中的代谢规律,可为新药、毒理学研究提供支持。

苦荬菜内酯Z和11,13α-二氢苦荬菜内酯Z对大鼠肝微粒体CYP450酶活性的抑制作用

目的探讨苦荬菜内酯Z和11,13α-二氢苦荬菜内酯Z对大鼠肝微粒体细胞色素P450(CYP450)酶活性的抑制作用。方法将大鼠肝微粒体、苦荬菜内酯Z和11,13α-二氢苦荬菜内酯Z与探针底物(非那西丁、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、睾酮和氯唑沙宗)共同孵育,超高效液相色谱质谱联用技术检测各探针底物的代谢物含量,分析苦荬菜内酯Z和11,13α-二氢苦荬菜内酯Z对大鼠肝微粒体CYP450酶的抑制作用。结果苦荬菜内酯Z对CYP2C9和CYP2C19分别有中等抑制作用和弱抑制作用,半数抑制浓度为9.46μmol/L和21.76μmol/L;11,13α-二氢苦荬菜内酯Z对CYP2C9和CYP2C19分别有弱抑制作用和中等抑制作用,半数抑制浓度为92.31μmol/L和4.65μmol/L。结论苦荬菜内酯Z和11,13α-二氢苦荬菜内酯Z对大鼠CYP2C9和CYP2C19均有不同程度的抑制作用,可能与经过CYP2C9和CYP2C19代谢的药物发生相互作用。

苦碟子中2个倍半萜内酯的牛血清白蛋白结合率的测定

目的:研究苦碟子中倍半萜内酯类化合物苦荬菜内酯Z和11,13α-二氢苦荬菜内酯Z的牛血清白蛋白的结合率。方法:采用HPLC法测定苦荬菜内酯Z和11,13α-二氢苦荬菜内酯Z的总浓度及游离药物浓度,色谱分离采用Zorbax SB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以水(A)-甲醇(B)为流动相,线性梯度洗脱(0~5 min,30%B→37%B;5~15 min,37%B→52%B;15~22 min,52%B→60%B),流速1.0mL·min^(-1),柱温30℃,检测波长272 nm,进样量10μL;在37℃条件下,应用平衡透析法测定苦荬菜内酯Z和11,13α-二氢苦荬菜内酯Z的牛血清白蛋白结合率。结果:低、中、高3个浓度下,苦荬菜内酯Z和11,13α-二氢苦荬菜内酯Z的牛血清白蛋白结合率分别为51.21%、54.72%、52.14%和50.63%、52.82%、50.28%。结论:苦荬菜内酯Z和11,13α-二氢苦荬菜内酯Z具有中等强度的蛋白结合率,且无明显的浓度依赖性。