A型塞尼卡病毒IRES假结与起始密码子之间序列长度对病毒复制的影响

A型塞尼卡病毒(Senecavirus A,SVA)5’非编码区包含一个内部核糖体进入位点(Internal ribosome entry site,IRES),其下游假结结构与起始密码子(AUG)之间具有高度保守的13-nt序列,称为“13-nt基序”。为研究其核苷酸数量增加是否影响SVA复制,本研究在该基序末端逐个插入核苷酸,从而构建了11个SVA cDNA克隆,将所有重组质粒分别转染至BSR-T7/5细胞,以拯救具有复制能力的重组病毒,进而分析重组病毒的遗传稳定性及生长动力学。结果表明,只有1~2 nt插入的cDNA克隆转染BSR-T7/5细胞后能够拯救出SVA。病毒在体外连续传代十次后测序表明,插入的核苷酸具有完全的基因稳定性。然而,与野生型病毒相比,插入1~2 nt的拯救病毒生长动力学均受到了抑制,表明IRES下游假结与起始密码子之间序列长度对于SVA复制至关重要。本研究为将来揭示SVA复制的分子调控机制奠定了理论基础。