冬凌草甲素对人软骨肉瘤SW-1353细胞迁移和侵袭能力的影响

为探究冬凌草甲素对人软骨肉瘤细胞迁移和侵袭能力的影响,体外培养人软骨肉瘤SW-1353细胞,将试验分别设为对照组(不做干预),1.25、2.50、5.00μmol/L冬凌草甲素组(1.25、2.50、5.00μmol/L冬凌草甲素)和阳性药物组(6μmol/L阿霉素),检测人软骨肉瘤SW-1353细胞的活力、迁移率、侵袭能力、上皮-间质转化(EMT)蛋白表达量。结果显示:与对照组比较,5.00μmol/L冬凌草甲素组和阳性药物组人软骨肉瘤SW-1353细胞活力降低(P<0.05);1.25、2.50、5.00μmol/L冬凌草甲素组和阳性药物组迁移率及侵袭能力降低,且浓度越高变化越显著(P<0.05)。冬凌草甲素能够通过升高E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达、降低波形蛋白(vimentin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达量进而抑制EMT进程,且浓度越高变化越显著(P<0.05)。冬凌草甲素可显著抑制人软骨肉瘤SW-1353细胞的迁移和侵袭,或是通过介导EMT实现的,这为人软骨肉瘤细胞的生物学研究提供了理论基础。

木犀草苷抑制SNHG14表达改善SW1353骨关节炎细胞模型的实验研究

目的:观察木犀草苷(Cy)对骨关节炎细胞模型的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法:使用0.1%二甲基亚砜(DMSO)及不同浓度的Cy(0、10、20、30、40、50μmol/mL)处理SW1353细胞,采用CCK-8检测其细胞毒性,确定刺激浓度。将SW1353细胞分为正常对照组、白细胞介素-1β(IL-1β)组、Cy低剂量组、Cy高剂量组。正常对照组SW1353细胞不进行任何处理;IL-1β组SW1353细胞采用10 ng/mL IL-1β处理24 h;Cy低剂量组SW1353细胞采用10 ng/mL IL-1β+10μmol/mL Cy处理24 h;Cy高剂量组SW1353细胞采用10 ng/mL IL-1β+20μmol/mL Cy处理24 h。采用RT-qPCR法检测基质金属蛋白酶-13(MMP-13)mRNA、白细胞介素-6(IL-6)mRNA、Ⅱ型胶原(COL2a1)mRNA、蛋白聚糖(ACAN)mRNA及长链非编码RNA(lncRNA)SNHG14 mRNA的表达水平;采用Western blotting检测MMP-13及细胞外基质COL2a1、ACAN蛋白表达。结果:CCK-8结果表明Cy(10、20μmol/mL)对SW1353细胞活性没有明显的抑制作用。IL-1β组MMP-13 mRNA、IL-6 mRNA相对表达量高于正常对照组,ACAN mRNA、COL2a1 mRNA相对表达量低于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);Cy低、高剂量组MMP-13 mRNA、IL-6 mRNA相对表达量低于IL-1β组,ACAN mRNA、COL2a1 mRNA相对表达量高于IL-1β组,差异均有统计学意义(P<0.05)。IL-1β组lncRNA SNHG14 mRNA相对表达量高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);Cy低、高剂量组lncRNA SNHG14 mRNA相对表达量低于IL-1β组,差异均有统计学意义(P<0.01)。IL-1β组MMP-13蛋白相对表达量高于正常对照组,ACAN、COL2a1蛋白相对表达量低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Cy低、高剂量组MMP-13蛋白相对表达量低于IL-1β组,ACAN、COL2a1蛋白相对表达量高于IL-1β组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:Cy能改善IL-1β诱导的SW1353骨关节炎细胞模型,可能机制为抑制SNHG14表达。

白藜芦醇通过失活FoxO1及激活Sirt1在IL-1β处理的SW1353细胞中发挥抗骨关节炎效应

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)抑制白介素1β(interleukin 1β,IL-1β)处理的SW1353细胞的炎症反应与叉头框转录因子O1(forkhead transcription factors O1,FoxO1)/细胞沉默信息调节子1(silent information regulator 1,Sirt1)信号之间的关系。方法采用SW1353软骨肉瘤细胞系,进行如下4个方面的处理及检测:给予10ng/ml IL-1β的同时,加入RES(12.5、50μmol/L)处理24 h,Western blot法检测Sirt1蛋白的表达;给予10ng/mL IL-1β的同时,加入RES(50μmol/L)处理30 min,免疫细胞化学技术检测FoxO1的定位,Western blot法检测FoxO1及p-FoxO1水平;FoxO1 siRNA进行转染,荧光显微镜下观察转染效率,Western blot法检测FoxO1的抑制效果及对Sirt1的影响;FoxO1siRNA转染后,Western blot法检测RES处理对Sirt1蛋白表达的影响,ELISA法检测细胞培养基上清IL-6的水平。结果单纯IL-1β处理对Sirt1的蛋白表达无明显影响,而给予RES(12.5、50μmol/L)处理后显著增加Sirt1水平。加入IL-1β/RES后,FoxO1主要定位于细胞质中;IL-1β处理显著上调p-FoxO1水平,而加入RES则进一步增加p-FoxO1水平;FoxO1水平保持不变。FoxO1基因沉默可有效抑制细胞FoxO1水平,同时Sirt1水平也被显著抑制。FoxO1基因沉默后抑制RES诱导的Sirt1水平,抑制IL-1β增加的IL-6水平,而RES处理则引起IL-6水平的进一步降低。结论在IL-1β处理的SW1353细胞中,RES可以通过失活FoxO1,增加Sirt1的水平发挥抗炎效应。

海藻酸钠三维培养SW1353人软骨瘤细胞株:表型标志物Ⅱ型胶原的生物动力学特征及超微定位

背景:软骨细胞在体外单层培养的去分化改变及其来源困难是目前软骨细胞研究领域中的两大难题,目前关于SW1353人软骨瘤细胞表型和生物学特点及三维培养的相关报道较少。目的:观察SW1353人软骨瘤细胞在海藻酸钠三维培养体系中表型标志物Ⅱ型胶原的生物动力学及超微定位特点。设计、时间及地点:材料-细胞学体外观察,于2004-08/2006-01在中南大学湘雅医学院完成。材料:SW1353人软骨瘤细胞株由ATCC公司提供。方法:细胞复苏后接种,加入含胎牛血清、维生素C的DMEM培养基进行单层贴壁培养。离心后将细胞团块悬浮于低黏性海藻酸钠溶液中,细胞终浓度为2×109L-1,滴入凝胶溶液,聚化获得细胞凝珠,每个凝珠约含20000个细胞。藻酸盐凝胶三维体系培养8周后,柠檬酸钠分解凝胶,收获培养的软骨细胞及上清,并与单层培养的细胞进行比较。主要观察指标:细胞形态及表型变化,细胞生长曲线,细胞上清和海藻酸钠基质中Ⅱ型胶原的表达,细胞超微结构及Ⅱ型胶原的定位,同位素脉冲追踪活细胞Ⅱ型胶原的合成分泌。结果:①单层培养时,细胞由1周时的多角形变为8周后的条梭状或不规则形,三维培养条件下细胞形态始终以多角形为主。甲苯胺蓝及II型胶原免疫组化染色结果显示,单层培养1周时均呈强阳性表达,8周后转为弱阳性,而三维培养8周后仍均呈强阳性表达。②三维培养条件下细胞生长曲线无明显增殖高峰,单层培养的细胞第8～10天达增殖高峰。③ELISA检测结果显示,单层培养8周后细胞上清中II型胶原的表达明显高于第1周(P<0.05),同时也明显高于三维培养条件下细胞上清及海藻酸钠基质中II型胶原的表达(P<0.05)。④透射电镜下细胞超微结构基本正常,免疫电镜下可见细胞内II型胶原主要定位于粗面内质网膜内,少数分布在线粒体。⑤14C标记的脯氨酸干预后180min,是细胞内合成及向细胞外分泌II型胶原的高峰期。结论:SW1353人软骨瘤细胞在体外长期单层培养会发生细胞表型改变,其在藻酸盐凝胶三维培养体系中生长状态良好,细胞内软骨细胞标志物II型胶原表达丰富,提示SW1353可以作为软骨细胞功能研究的良好模型。

LED照射对培养SW1353细胞MPP-3与MMP-13的影响

在骨关节疾病中,基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)对关节软骨缺损的机理扮演着重要的角色。为了进一步明确低强度激光在关节软骨缺损中的治疗作用,应用细胞因子IL-1β与TNF-α刺激培养SW 1353细胞复制炎症细胞模型,观察发光二极管(LED)照射对培养细胞的生存率和死亡率的影响、细胞活性的影响、以及对MMP-3和MMP-13的调节作用。实验结果显示,10μg/L IL-1β与20μg/L TNF-α对培养细胞生存率无明显影响,而细胞活性明显下降(P<0.01),培养液中MMP-3和MMP-13含量明显上升(P<0.01,P<0.05);LED照射后可见与相应的模型组比较细胞死亡率下降(P<0.01)、培养液中MMP-3和MMP-13含量显著性降低在(P<0.01,P<0.05)。研究表明,LED照射对炎症因子刺激的SW 1 353细胞的MMP过多表达具有抑制性作用,可能对于关节软骨缺损性疾病的LED照射治疗起一定的指导意义。

梅花入骨丹多糖对SW1353软骨肉瘤细胞活性的影响

目的研究梅花入骨丹多糖对SW1353细胞活性的影响。方法体外培养SW1353细胞,用MTT法检测其在梅花入骨丹多糖剂量为50、100、200、400、800μg/mL中的细胞活性。结果 SW1353细胞在50～200μg/mL多糖剂量范围内细胞活性增加,400～800μg/mL时受抑制。结论低剂量的梅花入骨丹多糖溶液对SW1353细胞活性有促进作用,高剂量有抑制作用。

应用原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系建立体外骨关节炎模型的效果评价

目的通过比较白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)处理对原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力、炎症因子与炎症通路表达水平变化的影响,为骨关节炎体外研究用细胞提供多重选择。方法免疫细胞化学法与甲苯胺蓝染色分别检测细胞中Ⅱ型胶原与蛋白多糖,鉴定所培养的原代细胞是否为软骨细胞。CCK-8法检测IL-1β(10ng/ml)处理24h、48h、72h对原代软骨细胞增殖活力的影响,IL-1β(1、10、20、40ng/ml)处理24h对SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力的影响。IL-1β(10ng/ml)分别处理原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系细胞24h后,ELISA法检测细胞培养上清中白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)与基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达水平。Real-time PCR法检测核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)mRNA表达水平。结果所培养的原代细胞为原代软骨细胞。IL-1β(10ng/ml)处理可显著抑制原代软骨细胞增殖活力,但IL-1β(1、10、20、40 ng/ml)处理对SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力无明显影响。IL-1β(10ng/ml)处理可使IL-6、MMP-13表达水平及NF-κB mRNA的表达量均显著增加。结论IL-1β作用下原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系均可表现出骨关节炎样炎症反应,二者均可用于骨关节炎的体外实验研究。

1353SH常见故障及处理方法

1前言 随着电信网络规模的进一步扩大和广泛的应用.网络管理的范围和功能也在扩大,而且良好的网络管理对电信网的正常可靠运行也显得越来越重要.

鹿衔草挥发油诱导人软骨肉瘤细胞SW1353凋亡的机制

目的:探讨鹿衔草挥发油诱导人软骨肉瘤细胞SW1353凋亡的作用机制。方法:MTT法检测鹿衔草挥发油对人软骨肉瘤细胞SW1353增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡;RT-PCR检测Bcl-2,Bax基因的表达;Western Blot检测Bcl-2蛋白的表达。结果:鹿衔草挥发油在50μg/mL-150μg/mL浓度范围内能明显抑制SW1353细胞的增殖,并呈剂量和时间依赖性,IC50为106μg/mL;流式细胞仪检测的结果显示鹿衔草挥发油能诱导SW1353细胞凋亡;RT-PCR结果表明Bcl-2基因表达降低,Bax基因表达增强;Western Blot结果表明Bcl-2蛋白表达降低。结论:鹿衔草挥发油通过诱导细胞凋亡抑制SW1353细胞增殖,可能与其下调Bcl-2表达,上调Bax表达有关。

白藜芦醇通过TLR4/MyD88依赖性信号通路对SW1353细胞发挥抗骨关节炎作用的实验研究

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)通过抑制TLR4/MyD88依赖性信号通路发挥抗白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的SW1353细胞骨关节炎(osteoarthritis,OA)作用。方法 3-(4,5-二甲基吡啶-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑盐法[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,inner salt,MTS]测定RES(0~100μmol/L)及IL-1β(10 ng/ml)对SW1353细胞增殖活力的影响。采用RES(12.5、50μmol/L)处理经IL-1β(10 ng/ml)诱导的细胞,ELISA法检测培养基上清中白细胞介素6(IL-6)水平,Western blot法检测软骨细胞Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、髓样分化蛋白88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)蛋白表达。结果 IL-1β(10 ng/ml)对细胞增殖活力无明显影响,RES(3.125~25μmol/L)可显著增强细胞活力(P<0.05),RES(100μmol/L)可显著抑制细胞活力(P<0.05)。IL-1β可显著增加培养基上清IL-6水平(P<0.05),且具有时间依赖性;同时IL-1β也可显著增加软骨细胞TLR4及MyD88的蛋白表达(P<0.05)。RES处理可显著降低培养基上清IL-6水平(P<0.05)及软骨细胞的TLR4及MyD88的蛋白表达(P<0.05)。结论 RES可能通过抑制TLR4/MyD88依赖性信号通路发挥抗IL-1β诱导的SW1353细胞的OA效应,在OA的防治方面有潜在的应用前景。

JJF1353-2012《血液透析装置校准规范》解读

一、规范制定的必要性和意义血液透析装置是清除血液中代谢产物、异常血浆成分以及蓄积体内的药物或毒物等,纠正体内电解质与维持酸碱平衡的一组体外循环装置。由于血液透析装置直接与病人动(静)脉相连接,其电导率、压力等各项性能指标的准确性直接影响病人的生命安全和治疗效果,因此,如何对血液透析装置进行计量校准,以确保其为临床提供科学、准确、可靠的数据,并符合相关要求非常重要。国家医药行业标准YY0054-2010《血液透析设备》

样板支部育建背景下,高职院校党建与教学育人工作同频共振新模式探索--以西安铁路职业技术学院机电工程学院教学第二党支部为例

高职院校教工党支部是党在高校组织系统中的基本组成单元,在立德树人和教书育人中发挥着重要作用。本文结合教育部“样板党支部”的创建要求,围绕立德树人根本任务,以高职院校教学育人工作中的人才培养、课程思政教育、创新创业教育三大核心内容为重点,以专业建设为抓手,探索党建与教学育人工作同频共振新模式,为轨道交通类高职院校的党建提供新思路。

梅花入骨丹总黄酮对人软骨肉瘤细胞活性的影响

梅花入骨丹总黄酮是从龙须藤的藤中提取的总黄酮类成分，我们采用MTT法检测不同浓度梅花入骨丹总黄酮干预48h后的SW1353细胞活性，旨在研究梅花入骨丹总黄酮对SW1353细胞活性的影响．为进一步开发利用梅花入骨丹提供依据。

地塞米松对骨关节炎细胞模型基质金属蛋白酶的抑制作用

目的:探讨不同浓度地塞米松对白介素-1β(IL-1β)诱导的SW1353细胞骨关节炎细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)表达水平的抑制作用。方法:取人软骨肉瘤细胞(SW1353细胞)分别置于含浓度为10^(1)~10^(8)nmol/L地塞米松培养液中,培养12 h后采用MTS法筛选适宜的地塞米松浓度范围进行后续实验。将SW1353细胞使用10 ng/mL IL-1β进行致炎造模后,给予10^(1)~10^(7)nmol/L地塞米松干预,使用实时定量-聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测MMP-1、MMP-3、MMP-13的mRNA表达水平。选取10^(4)nmol/L地塞米松干预后提取MMP-1、MMP-3、MMP-13蛋白,使用Western Blot法检测其蛋白表达水平。结果:MTS增殖实验结果显示,10^(1)~10^(7)nmol/L地塞米松对SW1353细胞活性无明显影响,10^(8)nmol/L地塞米松对SW1353有明显抑制作用(P<0.05),加入10 ng/mL IL-1β后对细胞增殖无明显影响。RT-PCR结果提示,IL-1β组和空白对照组比较,MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA的表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。和IL-1β组相比,10^(2)~10^(7)nmol/L浓度地塞米松干预后,MMP-1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05);10^(4)~10^(7)nmol/L地塞米松干预后,MMP-3 mRNA表达水平明显降低(P<0.05);10^(1)~10^(7)nmol/L地塞米松干预后,MMP-13 mRNA水平明显减少(P<0.05)。Western blot结果显示,相对于空白对照组,IL-1β组MMP-1、MMP-3、MMP-13蛋白表达水平明显增加;继续加入10^(4)nmol/L地塞米松干预后MMP-1、MMP-3、MMP-13蛋白表达水平明显降低。结论:地塞米松能够在mRNA及蛋白质水平抑制IL-1β诱导的骨关节炎细胞模型MMP-1、MMP-3、MMP-13的表达。

腺病毒介导人ATF6基因修饰对体外细胞增殖凋亡的实验研究

目的:构建携带人活化转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)的重组腺病毒Ad-ATF6和Ad-ATF6 si RNA,并探讨内质网应激(ER Stress,ERS)时其对人软骨肉瘤细胞SW1353增殖凋亡的影响。方法:将ATF6基因序列与靶向ATF6的si RNA序列分别克隆到p Ad Track-cmv和p SES-HUS穿梭质粒上,然后分别与腺病毒骨架质粒p Ad Easy-1在大肠杆菌BJ5183感受态中同源重组,得到腺病毒重组质粒p Ad-ATF6和p Ad-ATF6 si RNA,通过脂质体介导在HEK293细胞中进行包装和扩增。通过RT-PCR和Western blot检测病毒效果。流式细胞仪法(flow cytometry,FCM)、MTT法及Western blot检测ERS状态下ATF6对SW1353细胞增殖凋亡的影响。结果:成功获得了重组腺病毒Ad-ATF6和Ad-ATF6 si RNA。RT-PCR和Western blot结果表明,重组腺病毒能有效的感染细胞。FCM检测结果表明,ERS条件下,ATF6感染组S期细胞比例明显升高,凋亡率明显降低(P=0.000);Ad-ATF6 si RNA感染组S期细胞比例明显降低,凋亡率明显上升(P=0.000)。MTT与Western blot实验结果与FCM结果一致。结论:ERS状态下,ATF6能促进SW1353细胞的增殖,抑制其凋亡。

唑来膦酸对软骨肉瘤细胞生长的影响

目的研究探讨第三代双磷酸盐类药物唑来膦酸(ZOL)在体外对人软骨肉瘤细胞株SW1353增殖及凋亡的影响,进一步研究ZOL与甲氨喋呤(MTX)对细胞的生长抑制是否具有协同作用。方法应用细胞计数、形态学观察、流式细胞术等方法,检测和观察分别及联合应用不同浓度ZOL和MTX对SW1353的增殖抑制和诱导凋亡的作用。结果ZOL对SW1353细胞的抑制效应与药物剂量及作用时间均呈正相关;与MTX联合用药,作用明显强于单独用药组,抑制率59.22%(P<0.05),凋亡率28.47%(P<0.05)。结论ZOL对软骨肉瘤SW1353细胞株有生长抑制作用,呈时间、剂量依赖性效应,与MTX联合用药抑制作用更强,有协同作用。

基于32位微处理器的液晶显示系统设计与实现

提出了一种基于摩托罗拉32位微处理器MC683332的液晶显示系统设计方法。首先介绍了图形液晶显示控制器SED1353及其接口原理,设计了MC68332、SED1353和LM64P83L之间的接口电路,对系统的I/O地址空间、硬件环境进行了有效配置。最后以该系统控制大规模点阵液晶显示屏LM64P83L为例,阐述了系统的初始化及汉字显示的程序设计思想,给出了程序清单。该方案对解决32位嵌入式微处理器应用中显示带宽不足的问题提供了一种有效方法,具有良好的应用前景。

Artemin在软骨肉瘤中的表达及其对内皮细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨Artemin在软骨肉瘤中的表达水平及其对内皮细胞增殖与迁移的作用及其机制。方法:收集2015年5月至2019年4月南京中医药大学连云港附属医院手术切除的40例软骨肉瘤患者的肿瘤组织标本,分为低(Ⅰ级)、高级别(Ⅱ、Ⅲ级)软骨肉瘤各20例;对照组为20例因车祸等意外伤截肢患者的正常软骨组织标本。用免疫组化法检测肿瘤组织中Artemin、血管内皮生细胞长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、Ki-67表达水平和CD31^+血管密度。用10 ng/ml的Artemin处理SW1353细胞后,用ELISA实验检测细胞培养上清中VEGF、基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)、基质金属蛋白酶2(matric metalloproteinase 2,MMP2)和MMP9的含量变化,用Transwell迁移实验和MTT细胞增殖实验分别检测Artemin处理的软骨肉瘤细胞对ECV304细胞增殖和迁移的影响。结果:低级别组软骨肉瘤组织中Artemin和Ki-67表达水平均显著高于对照组(均P<0.01),高级别组软骨肉瘤组织中Artemin表达水平和Ki-67表达率显著高于低级别组(均P<0.01)。Artemin表达与软骨肉瘤组织中VEGF水平和血管密度呈正相关(均P<0.01);Artemin促进软骨肉瘤细胞分泌VEGF,而对SDF-1、MMP2和MMP9分泌无显著的影响;Artemin通过促进软骨肉瘤细胞分泌VEGF,诱导ECV304细胞增殖和迁移(均P<0.01)。结论:Artemin在软骨肉瘤组织中高表达且与VEGF水平和血管密度呈正相关,Artemin能够增强软骨肉瘤细胞诱导血管生成功能。

低剂量辐射诱导小鼠生精细胞凋亡及p53基因表达的适应性反应

目的研究低剂量X射线照射诱导小鼠睾丸生精细胞凋亡及p53基因表达的适应性反应。方法通过不连续泛影葡胺密度梯度离心法分离睾丸组织不同种类生精细胞,采用碘化丙啶荧光探针标记细胞,流式细胞术检测各类生精细胞凋亡,免疫组化法观察生精细胞p53蛋白表达。结果当1.0、2.0或3.0Gy(攻击剂量,D2)照射前6h给予75mGy(诱导剂量,D1)预照射时明显减轻D2对精原细胞和精母细胞的凋亡损伤作用,而对精子细胞和精子影响不明显。当D2照射前6h给予D1预照射时明显减少精原细胞和精母细胞p53基因表达阳性率,而对精子细胞和精子影响不明显。结论低剂量X射线照射可选择性诱导小鼠睾丸精原细胞和精母细胞凋亡的适应性反应,并与D1和D2间隔时间及D2剂量有关。同时,可诱导精原细胞和精母细胞p53基因表达的适应性反应,推测其在低剂量辐射诱导生精细胞凋亡适应性反应分子机制中起重要的调控作用。

腺病毒介导p53基因对胰腺癌细胞抑制作用的体外实验研究

目的探讨腺病毒介导p53基因（adenovims—mediated p53 gene，Ad-p53）对人胰腺癌细胞株PANC-1的生长抑制作用。方法以Western Blot方法检测加入Ad—p53后PANC-1细胞在48h、72hp53表达情况以及未处理组细胞48h、72hp53的表达。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色实验检测不同MOI值的Ad—p53感染后，PANC-1细胞的生长情况并绘制生长曲线，用PI、annexin V—FITC双重染色并用流式细胞技术检测受感染细胞的凋亡比例。结果Westem Blot结果显示，处理组细胞内48h、72hp53蛋白表达明显高于相同时间点对照组细胞；MTT结果显示不同MOI值细胞生长抑制情况不同，MOI值越高，对细胞生长的抑制程度也越高；流式检测细胞在MOI值为150时，0h、48h、72h凋亡比例分别为（7．5±0．8）％、（22．5±2．3）％和（34．4±2．7）％，对照组细胞为（5．8±0．4）％、（8．3±1．7）％和（9．7±2．1）％。结论Ad-p53能有效感染胰腺癌细胞，导致胰腺癌细胞凋亡。