^(137)Cs γ射线联合环磷酰胺与氯霉素介导的获得性再生障碍性贫血小鼠模型的建立

目的:对γ射线(^(137)Cs)联合环磷酰胺与氯霉素介导的获得性再生障碍性贫血小鼠模型进行改进研究,为再生障碍性贫血发病机制和治疗的研究提供稳定模型。方法:BALB/c小鼠经3-5 Gy^(137)Csγ射线(91 cGy/min)照射后,于d 4、5、6腹腔注射环磷酰胺25 mg/(kg·d)、氯霉素62. 5 mg/(kg·d),观察其外周血白细胞计数、网织红细胞计数、骨髓涂片及骨髓有核细胞计数、骨髓病理切片等指标。结果:经^(137)Csγ射线照射联合环磷酰胺、氯霉素腹腔注射的BALB/c小鼠的外周血三系细胞均迅速减少,其中白细胞、血小板、网织红细胞表现得尤为明显;于d14降至最低,在d 28三系细胞仍然严重减少,骨髓有核细胞数量明显下降,骨髓增生程度呈减低或重度减低;骨髓病理切片示造血细胞重度减少;脂肪细胞等非造血细胞增多。结论:通过^(137)Csγ射线照射并联合环磷酰胺、氯霉素腹腔注射的小鼠模型,其各项检测指标均达到获得性再生障碍性贫血的诊断标准,可作为获得性再生障碍性贫血发病机制及治疗研究的小鼠模型。

^(137)Csγ射线对陆地棉花粉及其M_1的辐射效应

本文以浙棉９号和浙１０２花粉为材料，研究了１３７Ｃｓγ射线对陆地棉花粉及其Ｍ１、Ｆ１Ｍ１的辐射诱变效应。研究结果表明：１辐照剂量与花粉活力呈高度负相关（ｒ＝－０９５４５～－０９７８５），浙棉９号和浙１０２花粉的半致死剂量分别为５１７和４６９Ｇｙ；２７．５１Ｇｙ以上剂量辐照花粉后，对其Ｍ１、Ｆ１Ｍ１的出苗、幼苗生长均有明显的抑制作用，辐射的致畸作用因品种不同而不同；３４．６９和７５１Ｇｙ辐照处理，对其Ｍ１、Ｆ１Ｍ１产量性状的抑制作用较大，其中受辐射影响较大的是衣分和单铃重；辐照花粉对纤维品质的抑制作用较小；４Ｍ１、Ｆ１Ｍ１种仁的蛋白质含量随辐照剂量的增高而提高，油分含量则相反。辐照花粉的适宜剂量应小于４６９Ｇｙ。

^(137)Csγ射线辐照对悬浮红细胞质量的影响研究

目的:探讨137Csγ射线辐照对悬浮红细胞中淋巴细胞的灭活作用,以及辐照后悬浮红细胞保存期间的质量变化,明确悬浮红细胞辐照处理技术的可行性。方法:悬浮红细胞制备后,分别用20 Gy、25 Gy、30Gy的137Csγ射线照射,照射后检测淋巴细胞反应抑制率,并分别于储存的第0 d、7 d、14 d、21 d、28 d、35 d检测悬浮红细胞的pH、电解质浓度、红细胞渗透脆性、游离血红蛋白及红细胞诸参数等,并与对照组进行比较。结果:淋巴细胞增殖反应抑制率随照射剂量的增加而增加。辐照后立即检测,悬浮红细胞的生化指标及红细胞的各项指标与对照组均无统计学意义(P>0.05),但随着保存时间的延长,照射组的Na+、K+、红细胞渗透脆性、游离血红蛋白、HCT、MCV、MCHC发生了明显的变化(P<0.05)。结论:25Gy可有效杀灭淋巴细胞,虽然辐照对悬浮红细胞的质量有一定的影响,但悬浮红细胞在保存期内仍符合其质量标准要求。

不同温度下^(137)Csγ射线处理水稻种子的诱变效率

水稻种子在极低温(-196℃)条件下进行(137)~Csγ射线辐照,然后进行热冲击(65℃)后处理。结果表明,极低温加热冲击处理的辐射防护效应大于极低温处理。在10—50krad剂量范围内,水稻主要性状的突变率,极低温加热冲击组及热冲击组大于常温组,而常温组又大于极低温组;在70—90krad范围内,极低温加热冲击组大于极低温组,其余两组全部死亡。各处理组在最适宜诱变剂量下的突变频率:极低温加热冲击组最高,常温组最低,其余两组居中。

^(137)Csγ射线对白膜不同成分的影响

目的137Csγ射线对白膜不同成分的影响。方法MTT法测辐照前后淋巴细胞的增殖情况;用荧光素FITC标记DH5α细菌,FCM分析粒细胞荧光强度的变化;用细胞色素C还原法检测中性粒细胞O2-的生成以及用ELISA法测单核细胞辐照前后细胞因子的分泌情况。结果25 Gy能完全灭活T细胞;辐照后粒细胞离体12h后有明显凋亡出现,但辐照前后粒细胞吞噬DH5α的能力无明显改变;而粒细胞释放的O2-在辐照后有明显升高;单核细胞经辐照后仍能分泌细胞因子,且IFN-γ的分泌量较未照组有所下降,而TNF-α的分泌量随着时间的推移呈逐渐升高趋势。结论γ射线对白膜中各成分都有不同程度的影响。分离后的粒细胞应尽早输注,由细胞因子参与的临床输血问题以及由此带来的风险,应当引起关注。

利用激光拉曼光谱研究^(137)Csγ射线照射人食管癌细胞的最佳剂量

目的:利用激光拉曼光谱研究137Csγ射线照射人食管癌细胞的最佳剂量。方法:人食管癌细胞(EC9706)经不同剂量137Csγ射线辐照,继续培养24h后采集其激光拉曼光谱,并对拉曼光谱进行比对分析。结果:(1)蛋白质酰胺Ⅲ带1240cm-1谱带在各剂量组出现不同程度蓝移,表明改变了β回折构象;色氨酸残基的吲哚环振动谱带550、762cm-1谱带在各剂量组中出现较明显的频移,说明其内部构象的改变;空白对照组EC9706细胞中酪氨酸是"埋藏式"的,而在4、5、6Gy组却变成了"暴露式;"(2)核酸中磷酸骨架基团的785、1096cm-1在射线剂量组出现了明显频移和散射强度变化,这可能与137Csγ射线对EC9706细胞DNA损伤,导致其增殖机制变化有关;(3)脂类中的CH2、CH3弯曲振动谱带1448cm-1仅在4、6Gy组出现频移,其它剂量组基本上没有改变。结论:4、6Gy组频移明显,说明4、6Gy组为最佳照射剂量。

EC9706细胞经不同剂量^(137)Csγ射线照射后拉曼光谱的研究

本文研究了EC9706细胞经不同剂量137Csγ射线辐照、继续培养24h后的拉曼光谱,结果表明:(1)蛋白质酰胺Ⅲ带1240cm-1谱带在各剂量组出现不同程度蓝移,表明改变了β回折构象;色氨酸残基的吲哚环振动谱带550、762cm-1谱带在各剂量组中出现较明显的频移,说明其内部构象的改变;空白对照组EC9706细胞中酪氨酸是"埋藏式"的,而在4、5、6Gy组却变成了"暴露式"的。(2)核酸中磷酸骨架基团的785、1096cm-1在射线剂量组出现了明显频移和散射强度变化,这可能与137Csγ射线对EC9706细胞DNA损伤,导致其增殖机制变化有关。(3)脂类中的CH2、CH3弯曲振动谱带1448cm-1仅在4、6Gy组出现频移,其它剂量组基本上没有改变。

不同剂量^(137)Cs γ射线辐照全血后T淋巴细胞亚群的变化

目的应用不同剂量的^(137)Csγ-射线(0～35Gry)照射ACD-B配方保存的新鲜全血,观察照射前后T淋巴细胞亚群[CD3+(总T)、CD4+(辅助性T)、CD8+(抑制性T)]的变化。方法将10份每份容量为200ml的ACD-B配方保存的新鲜全血(保质期21d)分为4组,分为用15Gry、25Gry、35Gry不同剂量г-射线照射的实验组及未照射的对照组,于采血后立即进行照射,用流式细胞仪检测照射前后及不同照射剂量之间T淋巴细胞亚群的变化。结果不同剂量的^(137)Csγ-射线照射新鲜全血,照射前后T淋巴细胞亚群百分数(CD3+、CD4+、CD8+)的变化无显著性差异。结论15～35Gry的^(137)Csγ-射线照对新鲜全血中T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+百分比数量无改变,CD4+/CD8+比值无改变。

^(137)Csγ射线对绿豆种子诱变效应及适宜诱变剂量探讨

为了探索^(137)Csγ射线辐照绿豆的适宜诱变剂量,用^(137)Csγ射线对6个绿豆品种(晋绿豆2号(绿种皮)、晋绿豆3号(绿种皮)、苏绿5号(绿种皮)、黄绿豆(黄种皮)、冀黑绿0506(黑种皮)和冀绿13号(绿种皮))的干种子进行200、300、400、500、700、900 Gy辐照处理,分析不同剂量的^(137)Csγ射线对绿豆幼苗的辐射效应。结果发现,不同辐照剂量^(137)Csγ射线处理对绿豆干种子发芽影响不明显;但高剂量能明显抑制幼苗的苗高和根长,估算的绿皮绿豆平均半致矮剂量(HD50)为784 Gy,估算的适宜诱变剂量为600~1000 Gy,黄种皮绿豆、冀黑绿0506半致矮剂量分别为1572、899 Gy。研究结果表明,在绿豆辐射诱变育种中,为了提高突变频率,同等剂量范围内最好选择绿种皮绿豆作为诱变亲本。

^137Csγ射线和低温等离子体对耐辐射奇异球菌和大肠杆菌杀灭效果观察

目的观察^137Csγ射线和低温等离子体对耐辐射奇异球菌和大肠杆菌杀灭效果。方法采用细菌定量检测和生化分析方法,对^137Csγ射线和低温等离子体杀灭耐辐射奇异球菌和大肠杆菌的效果和作用机理进行观察。结果^137Csγ射线辐照对耐辐射奇异球菌杀灭效果较差,但对大肠杆菌杀灭效果较好;对耐辐射奇异球菌DNA损伤较轻,而对大肠杆菌DNA损伤较重。低温等离子体对两种细菌均具有较好的杀灭效果,对耐辐射奇异球菌DNA损伤程度也较大肠杆菌轻,低温等离子体对两种菌致死的因素主要来自膜损伤。结论低温等离子体对耐辐射奇异球菌杀灭效果优于^137Csγ射线,二者杀菌机理存在差异。

^(137)Csγ射线辐照全血对红细胞损伤初探

目的 探讨用灭活淋巴细胞剂量的13 7Csγ -射线照射后 ,ACD -B方及CPD方保存的新鲜全血红细胞损伤情况。方法 将ACD -B方及CPD方新鲜全血分为用γ -射线照射的实验组及未照射的对照组 ,测定两组标本在 0、7、14、2 1、2 8d红细胞渗透脆性、血浆游离Hb ,ATP含量 ,用血球计数仪进行RBC计数、Hct、MCV检测 ,用K+ 、Na+ 、Cl-分析仪检测血浆的K+ 、Na+ 离子浓度的变化。结果 辐照后ACD -B方、CPD方新鲜全血与血液辐照前各项指标比较差异无显著性 ;保存 7天时试验组K+ 浓度比对照组升高快 ,Na+ 离子浓度下降 ,其它指标差异均无显著性 ;保存期末K+ 离子浓度显著升高 ,Na+ 离子浓度随保存期延长显著下降 ,其它各项指标差异无显著性。结论 ACD -B方全血、CPD方新鲜全血经 2 5Gry13 7Cs辐照后 ,红细胞的数量、细胞代谢功能均不受到影响 。

中子、^(137)Csγ射线及混合辐射对淋巴细胞微核的影响

目的:比较中子、^(137)Csγ射线及中子/γ射线混合照射对人淋巴细胞微核、核质桥和核芽的影响。方法:将两名志愿者的外周血淋巴细胞随机分为对照组、中子、^(137)Csγ射线和中子/γ射线混合照射组,用胞质分裂阻滞法分析不同处理组人淋巴细胞微核率、核质桥率以及核芽率的差异;结果:外周血淋巴细胞经中子、^(137)Csγ射线和混合照射后的CB微核率高于对照组,经中子和混合照射后的CB微核率高于^(137)Csγ射线照射组,中子/γ射线混合照射后的人淋巴细胞微核率高于中子照射组,差异具有统计学意义(P<0.01);中子/γ射线混合照射诱导的核质桥率和核芽率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:以微核率为生物终点,中子/γ射线混合照射对人淋巴细胞引起的损伤严重,说明混合照射可能存在一定的协同作用。

^(137)Cs γ辐照和NaN_3处理对毛竹种子发芽率和保护酶活性的影响

用不同剂量的137Csγ射线和不同浓度的NaN3对毛竹种子进行诱变处理,研究2种诱变方式对毛竹种子发芽率以及萌发种子内保护酶活性的影响,以期为开展毛竹诱变育种工作奠定理论基础。结果表明:10Gy剂量的γ射线辐照促进种子萌发,随着剂量的增加,对种子的发芽率抑制作用达极显著性水平,而NaN3处理对种子的发芽率的抑制则达显著水平,说明137Csγ射线对毛竹种子产生的诱变效应较NaN3明显;不同剂量γ射线和不同浓度NaN3对萌发种子中保护酶活性的影响均达到极显著水平,并且在低剂量和高剂量时均出现明显的变化临界点,分析得出保护酶活性可以反映毛竹种子对γ射线和NaN3的敏感性。初步选择出137Csγ射线和NaN3对毛子种子的半致死剂量和浓度分别为95.5Gy和0.16mmol/L,可以将其作为毛竹种子适宜的诱变剂量。

^(137)Cs γ射线对体外培养成骨细胞形态与几种细胞因子基因表达的影响

目的 观察1 37Csγ射线照射对体外培养成骨细胞的形态、核浆比与几种细胞因子基因表达的影响。方法 取第 1代新生SD大鼠头盖骨成骨细胞传代后 2 4h一次接受1 37Csγ射线照射 ,吸收剂量分别为 10 ,2 5 ,5 0cGy和 1,3,6 ,9,12Gy。观察各组成骨细胞形态与超微结构改变 ;Giemsa染色后进行显微形态计量 ,计算核浆比 ;细胞培养至 14d抽提细胞内总RNA ,RT PCR方法半定量检测各组细胞IGF 1,OPG ,ODF基因mRNA表达量。结果 3Gy以上γ射线照射的细胞 ,胞体变大、变薄 ,细胞数减少 ,细胞内细胞器减少 ,溶酶体增多 ,核浆比降低 ,其改变随吸收剂量增加而突出。基因IGF 1、OPG、ODF与OPG ODFmRNA表达量在 1Gy以上组随吸收剂量增加逐渐降低 ,与吸收剂量呈明显相关 (P <0 0 5或 0 0 1)。结论 1 37Csγ射线照射引起成骨细胞形态明显改变 ,增殖能力降低 ,核浆比降低 ,基因IGF 1、OPG、ODF与OPG ODFmRNA表达量降低。

方格星虫多糖对HUVEC细胞137Cs γ射线损伤的保护作用

目的研究方格星虫多糖(Sipunculus nudus polysaccharide, SNP)对HUVEC细胞电离辐射损伤的保护作用。方法采用CCK-8法测定137Cs γ射线照射的SNP预处理HUVEC细胞的存活率,筛选获得137Cs γ射线的最佳辐照剂量为8 Gy,SNP的最佳处理浓度为100 g/ml。采用克隆形成法检测SNP预处理后HUVEC细胞的辐照敏感性。采用Hoechst33342和PI双染色法及流式细胞术测定HUVEC细胞凋亡情况。结果 HUVEC细胞存活率随辐射剂量增大而显著下降(P<0.01);而经一定浓度的SNP预处理后,HUVEC细胞存活率显著上升,且与浓度呈正相关(P<0.01),当SNP终浓度为100 μg/ml时,存活率最高,由照射后的63.43%上升至84.96%(P<0.01);SNP预处理组的细胞克隆形成率显著高于未处理组(P<0.01)。与辐照模型组相比,SNP预处理的细胞凋亡率和细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平均显著下降,其中凋亡率由15.6%降至6.8%,ROS水平由47.10×104降至41.77×104,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);Hoechst33342着色的蓝色荧光和PI着色的红色荧光也显著降低(P<0.01)。结论 SNP预处理能提高照射后细胞存活率和克隆形成率,有效降低辐射诱导的细胞凋亡和细胞内ROS水平,表明SNP对电离辐射所致的HUVEC细胞损伤具有较好的保护作用。

E838保护放化疗小鼠造血功能的疗效观察

目的:研究E838对137Csγ射线和环磷酰胺所致小鼠白细胞减少症及造血功能的保护作用。方法:采用137Csγ射线和环磷酰胺造模,分别测定两个模型骨髓造血干细胞脾脏节结(CFU-S)、外周血白细胞数、骨髓DNA、骨髓有核细胞数、脾脏指数的变化。结果:E838能减轻环磷酰胺和137Csγ射线对小鼠造血系统的损伤作用。E838各组的外周血白细胞、骨髓有核细胞数与对照组相比有明显的增高,中、高剂量组与对照组比较,经统计学处理有显著性差异。CFU-S与对照组比较有显著性差异。脾脏指数及胸腺指数均高于对照组,高剂量组脾脏指数与对照组比较有显著性差异。结论E838具有改善机体免疫功能和刺激骨髓造血功能的作用。

N-乙酰基-S-烯丙基-L-半胱氨酸的合成及其抗辐射活性

以L-半胱氨酸为原料,经取代和酰化两步反应合成目标产物N-乙酰基-S-烯丙基-L-半胱氨酸(N-acetyl-S-allyl-L-cysteine,NAc-SAC)。以^(137)Csγ射线照射至不同剂量的ICR小鼠作为研究对象,通过30 d存活率实验、血相和免疫系统实验、各项脏器指数以及外周血淋巴细胞彗星实验,研究目标化合物分别在200、400、600 mg/kg给药剂量下的抗辐射活性。ICR小鼠经伽马射线照射至致死剂量7.5 Gy后,其存活率由单纯照射对照组的41.6%,分别提高到NAc-SAC给药组的58.3%、50.0%和66.7%,平均存活天数明显延长。^(137)Csγ射线照射至亚致死剂量6.0 Gy后,NAc-SAC在不同程度上增加了受照小鼠的脾指数、脾结节数(CFU-S)、骨髓DNA含量和白细胞数。彗星实验中7.0 Gy伽马射线照射联合NAc-SAC给药组小鼠外周血淋巴细胞的尾长、尾矩、Olive尾矩和尾部DNA百分含量明显低于7.0 Gy伽马射线单纯照射组(p<0.01),提示NAc-SAC可明显降低辐射导致的DNA损伤。本研究表明,目标化合物NAc-SAC具有一定的抗辐射损伤作用。