14-3-3β蛋白对胶质瘤细胞生物学行为的影响

目的探讨14-3-3β蛋白对胶质瘤细胞系生物学行为的影响。方法应用分子生物学技术构建14-3-3β蛋白的真核表达质粒pc DNA 3.1(-)-14-3-3β及干扰质粒pc DNATM6.2-GW/Em GFPmiR-14-3-3β,应用MTT、集落形成、Transwell侵袭试验研究14-3-3β蛋白对人胶质瘤细胞株U251增殖及侵袭等生物学行为的影响。结果过表达14-3-3β能够明显促进U251细胞(人胶质瘤系)的侵袭和增殖过程;而应用干扰质粒抑制14-3-3β表达后,U251细胞的侵袭和增殖能力则受到显著抑制。结论 14-3-3β对于U251细胞(人胶质瘤系)蛋白的侵袭和增殖能力起到明确的促进作用,其在人类胶质瘤的发生和发展过程中可能也起到促癌作用。

14-3-3β蛋白与常见疾病关系的研究进展

14-3-3β蛋白(YWHAB)是14-3-3蛋白家族中含量最高的成员,参与生物体内多种信号转导、蛋白跨膜转运等过程。YWHAB可调节细胞增殖与生长,与肿瘤的发生、发展密不可分。YWHAB可与多种蛋白相互作用,与神经系统疾病的病理形成过程以及引起非酒精性脂肪肝等肝脏疾病的糖脂代谢异常有关。

14-3-3β蛋白特性及与卡波肉瘤的关系

酪氨酸3-加单氧酶/色氨酸5-加单氧酶激活蛋白(14-3-3蛋白)是高度保守的可溶性酸性蛋白家族,它们在细胞有丝分裂、生长、分化、增殖和凋亡等过程中起重要的调控作用。其中14-3-3β蛋白在卡波肉瘤组织中高表达,与其发生、发展相关。本文就14-3-3β蛋白的特性以及与卡波肉瘤的关系予以综述。

ADAM22蛋白与14-3-3β蛋白之间的相互作用

ADAM家族是一类具有去整合域和金属蛋白酶域的跨膜蛋白,广泛参与各种重要的生理过程,如精卵结合、神经系统发育、成肌细胞融合以及炎症反应等.该家族蛋白具备潜在的粘连和蛋白酶活性.adam22在脑部高度表达,基因剔除小鼠则出现严重的共济失调,并在断奶前死亡,但其作用机制不详.用酵母双杂合系统筛选到与ADAM22相互作用的蛋白质143-3-3β,离体结合实验、免疫共沉淀进一步证实了ADAM22与14-3-3β蛋白相互作用的专一性.ADAM22胞内部分系列缺失实验表明,C端第864～892氨基酸残基是14-3-3β的结合基序.14-3-3β在脑部大量表达,具有介导细胞的扩散、迁移及调节细胞周期等重要功能.因此,本实验证实这两种蛋白质之间存在相互作用,为阐明ADAM22在神经系统发育中的功能奠定了基础.

酪氨酸3-加单氧酶/色氨酸5-加单氧酶激活蛋白的新研究进展

酪氨酸3-加单氧酶/色氨酸5-加单氧酶激活蛋白(14-3-3蛋白)家族是高度保守的可溶性酸性蛋白质。14-3-3蛋白调节着许多重要细胞生命活动,如新陈代谢、细胞周期、细胞生长发育、细胞的存活和凋亡以及基因转录,该蛋白家族异常与疾病的发生密切相关。其中14-3-3β蛋白是重要的亚型之一,引起了相关学者的关注。14-3-3β蛋白已成为一些疾病的临床诊断指标,其作为疾病治疗的靶点也在研究之中。本文主要简述了14-3-3β蛋白在糖脂代谢中发挥的作用及该蛋白与临床疾病的关系。

Ywhab通过靶向Hsp90aa1抑制小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞生长

目的:研究Ywhab在小鼠B细胞淋巴瘤发生发展中的作用,并探讨其可能的分子机制。方法:使用生物信息学分析Ywhab与弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的相关性。在小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞中感染逆转录病毒构建Ywhab基因过表达细胞系,并采用RT-qPCR和Western blot验证Ywhab的mRNA及蛋白(14-3-3β)水平;通过细胞计数法、CCK-8法和小鼠皮下成瘤实验检测Ywhab过表达对38B9细胞在体内外生长的影响;RT-qPCR和Western blot检测细胞凋亡相关蛋白的表达;应用蛋白质免疫共沉淀联合蛋白质谱(CoIP-MS)筛选与14-3-3β特异性结合的蛋白并采用Western blot及分子对接分析进行验证。结果:Ywhab基因在DLBCL中低表达,其低表达预示DLBCL患者的临床预后较差。与正常小鼠骨髓B细胞相比,Ywhab在38B9细胞中低表达。Ywhab过表达能在体内外诱导38B9细胞凋亡,促进凋亡蛋白Puma、Noxa和Bax的mRNA及蛋白表达,抑制抗凋亡蛋白Bcl2的mRNA及蛋白表达(P<0.05)。14-3-3β蛋白能特异性结合Hsp90aa1蛋白并抑制其表达,从而促进38B9细胞凋亡。结论:Ywhab能够显著诱导小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞凋亡,其机制可能是通过靶向抑制Hsp90aa1蛋白表达来实现的。

14-3-3β在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的研究14-3-3β在人体食管鳞癌的表达，探讨其表达与临床病理及预后的相关性。方法免疫组织化学法检测组织芯片中78例食管鳞癌和其配对的癌旁正常组织的表达。结果14-3-3β在食管鳞癌组织细胞核中中度阳性及强阳性占62．8％（49／78）；在癌旁正常组织中中度阳性及强阳性占17．9％（14／78），两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）；14-3-3β蛋白在食管鳞癌组织细胞质中中度阳性及强阳性占69．2％（54／78）；在癌旁正常组织中中度阳性及强阳性占29．5％（23／78），两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。14-3-3β表达与食管鳞癌的分化程度有关，随着分化程度的降低，14-3-3β在细胞质和细胞核中均高表达（P〈0．01），与性别、年龄、TNM分期、肿瘤的大小和生存率无相关性（P〉0．05）。结论14-3-3β在食管鳞癌中表达上调，该蛋白高表达于细胞核和细胞质，并与肿瘤分化程度呈正相关。

单中心小样本量胃癌患者淋巴转移与异常表达基因的相关性研究

目的研究基因层面信息与胃癌淋巴结转移的相关性及14-3-3β蛋白是否参与胃癌淋巴转移。方法收集2022年1~6月间30例在哈尔滨医科大学附属肿瘤医院胃肠外科行胃癌根治术患者的胃癌组织及癌旁组织,依据术后病理结果分为淋巴结转移阳性组(Pos组)和淋巴结转移阴性组(Neg组)2组,每组各15例。利用转录组测序技术获得胃癌患者样本的转录本序列信息,使用生物信息学分析方法比较胃癌患者在有无淋巴转移时的差异表达基因,并进一步分析其生物学意义。结果(1)Pos组和Neg组间共1878个基因表达水平有显著差异,其中差异高表达基因683个,差异低表达基因1195个,差异显著性最明显的两个基因是USP24P1(P=7.6760e-03)和DEFA5(P=1.8585e-02);(2)基因本体(Gene Ontology,GO)富集分析显示,差异基因主要富集在突触传递的调节、突触间信号传递、肌肉系统、含胶原蛋白的细胞外基质、突触膜、突触后膜、阳离子通道、丝氨酸型肽活性、丝氨酸水解酶活性等功能条目上;(3)Pos组活化的CD_(4)^(+)T细胞显著高于Neg组(P=0.0329),而未成熟的树突状细胞显著低于Neg组(P=0.0235);(4)YWHAB基因表达的14-3-3β蛋白在两组间数据统计分析显示,两组间未发现显著差异(P=0.68)。结论基因USP24P1、DEFA5及活化的CD_(4)^(+)T细胞与胃癌的淋巴结转移存在相关性。