松墨天牛14-3-3ζ基因的鉴定及生物信息学分析

为探究松墨天牛(Monochamus alternatus)14-3-3ζ基因特性,通过构建cDNA文库,从松墨天牛cDNA文库中克隆到14-3-3ζ基因,命名为Ma14-3-3ζ,GenBank登录号为KT970073.1。克隆得到的Ma14-3-3ζcDNA全长为902 bp,其中开放阅读框为747 bp,编码248个氨基酸。推测的Ma14-3-3ζ蛋白等电点为4.73,分子量为28.16 ku。Ma14-3-3ζ的氨基酸序列与大黄粉虫(Tenebrio molitor)同源性最高、为98%,与褐飞虱(Nilaparvata lugens)等12种昆虫同源性在95%~90%之间。系统发育树表明松墨天牛与大黄粉虫在同一分枝上。

拟穴青蟹14-3-3ζ基因cDNA的克隆和表达分析

利用SMART RACE技术克隆得到拟穴青蟹ERK信号通路的酪氨酸3-加单氧酶/色氨酸5-加单氧酶激活蛋白ζ(14-3-3ζ蛋白)基因。其cDNA全长1 092 bp,编码248个氨基酸。实时定量PCR结果显示14-3-3ζ基因在各组织器官均有表达,但在卵巢中的表达量显著高于其他组织(P<0.05),在卵黄发生中期14-3-3ζ的表达量显著高于增殖期(P<0.05),推测其在青蟹卵巢中发挥重要作用。