LncRNA HCG18通过靶向miR-140-3p/PD-L1通路对鼻咽癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨长非编码(lncRNA)HCG18通过微小RNA-140-3p(miR-140-3p)/程序性死亡受体配体1(PD-L1)对鼻咽癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法 选择人鼻咽癌CNE2细胞、人正常鼻黏膜上皮细胞HNEpC细胞,将CNE2细胞分为HCG18组、pcDNA3.1组、sh-HCG18组、sh-NC组、miR-140-3p组、miR-NC组、miR-140-3p inhibitor组、Scramble组、HCG18+miR-NC组、HCG18+miR-140-3p组、miR-140-3p inhibitor+sh-NC组及miR-140-3p inhibitor+sh-PD-L1组。用CCK-8检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭及迁移能力,Western blot检测PD-L1蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测lncRNA HCG18、miR-140-3p及PD-L1 mRNA水平,生物信息学、双荧光素酶报告实验分析lncRNA HCG18、miR-140-3p及PD-L1的靶向关系。结果 CNE2细胞lncRNA HCG18、PD-L1蛋白及其mRNA表达水平高于HNEpC细胞,miR-140-3p表达水平低于HNEpC细胞(P <0.05)。上调lncRNA HCG18或下调miR-140-3p后CNE2细胞增殖、细胞迁移与侵袭能力增强,PD-L1蛋白、PD-L1 mRNA水平升高(P <0.05);下调lncRNA HCG18或上调miR-140-3p后CNE2细胞增殖、细胞迁移与侵袭能力降低,PD-L1蛋白、PD-L1 mRNA水平降低(P <0.05)。miR-140-3p与lncRNA HCG18、PD-L1均有靶向关系。上调miR-140-3p表达可逆转上调lncRNA HCG18对CNE2细胞增殖、迁移与侵袭的促进作用;沉默PD-L1可逆转下调miR-140-3p对CNE2细胞增殖、迁移与侵袭的促进作用。结论 过表达lncRNA HCG18可通过海绵化miR-140-3p,上调PD-L1表达,促进CNE2细胞增殖、迁移与侵袭。

miR-140-3p靶向CXCL8对食管鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的探究miR-140-3p靶向白介素8(CXCL8)对食管鳞癌(ESCC)细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法将ESCC细胞系EC109细胞分为:miR-NC组(转染miR-NC)、miR-140-3p组(转染miR-140-3p mimic)、miR-140-3p+CXCL8-NC组(细胞共转染miR-140-3p mimic和pcDNA-NC)、miR-140-3p+CXCL8组(细胞共转染miR-140-3p mimic和pcDNA-CXCL8),未做任何处理的EC109细胞记为NC组。双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p、CXCL8的关系;qRT-PCR检测人EC109细胞和正常人食管鳞状上皮细胞系Het-1A中miR-140-3p表达;Western blot检测Het-1A、EC109细胞CXCL8蛋白以及上皮间质转化(EMT)相关蛋白水平;CCK8法检测EC109细胞活力;流式细胞术检测EC109细胞凋亡率;Transwell检测EC109细胞侵袭以及迁移细胞数量。结果在EC109细胞中CXCL8呈高表达,miR-140-3p呈低表达;与NC组、miR-NC组相比,miR-140-3p组EC109细胞OD 450值、迁移、侵袭细胞数量、神经型钙粘附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、CXCL8蛋白水平显著下降(P<0.05),EC109细胞凋亡率、miR-140-3p水平、上皮钙粘附素(E-cadherin)蛋白水平显著升高(P<0.05),而上调CXCL8减弱了过表达miR-140-3p抑制EC109细胞增殖、迁移、侵袭、EMT及促进其凋亡的效果;miR-140-3p负向调控CXCL8表达。结论miR-140-3p通过下调CXCL8抑制ESCC细胞增殖、迁移和侵袭。

miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p表达在急性脑梗死患者诊疗中的价值研究

目的 探讨miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p表达在急性脑梗死(ACI)患者诊疗中的应用价值。方法 选取2020年1月至2022年12月南通市第三人民医院全科医学科收治的ACI患者100例作为研究对象,定义为ACI组,根据ACI患者3个月改良Rankin评分量表(mRS评分)将其分为预后良好组(mRS评分≤2分)68例与预后不良组(mRS>2分)32例,另选同期于南通市第三人民医院全科医学科体检的健康者100例作为对照组。记录各组miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p表达水平并进行比较,采用Pearson相关分析探讨两变量的相关性,通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p联合检测在ACI诊断中的效能,采用多因素Logistic回归分析探讨ACI预后的危险因素。结果 ACI组平均年龄、吸烟史比例、合并高血压比例、miR-140-3p与miR-128-3p及miR-27-3p表达水平均明显高于对照组(均P<0.05)。miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p联合检测用于诊断ACI的曲线下面积(AUC值)为0.965,敏感度为99.00%,特异度为98.00%,表明miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p联合检测用于诊断ACI的效能更高。预后不良组平均年龄、入院时NIHSS评分、梗死体积、吸烟史比例、合并高血压比例、miR-27-3p、miR-128-3p、miR-140-3p表达水平及3个月mRS评分均明显高于预后良好组(均P<0.05)。经Pearson相关分析表明ACI患者miR-27-3p、miR-128-3p、miR-140-3p表达水平均分别与入院时NIHSS评分、梗死体积、3个月mRS评分呈正相关(均P<0.05)。经多因素Logistic回归分析表明年龄(OR:1.546;95%CI:1.124~1.969)、入院时NIHSS评分(OR:1.721;95%CI:1.229~2.308)、梗死体积(OR:1.853;95%CI:1.436~2.786)、吸烟史(OR:1.517;95%CI:1.168~1.825)、miR-27-3p (OR:2.481;95%CI:1.452~3.201)、miR-128-3p (OR:1.692;95%CI:1.288-2.431)及miR-140-3p (OR:2.032;95%CI:1.141~1.976)均为ACI患者预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论 ACI患者miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p表达水平均明显升高,通过三指标联合检测可提高对ACI的诊断效能,而预后不良ACI患者miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p表达水平则升高更为明显,并分别与入院时NIHSS评分、梗死体积、3个月mRS评分呈正相关,且miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p均为ACI患者预后的独立危险因素,应予以重点关注。

急性缺血性脑卒中患者血清微小RNA-140-3p、Krüpple样因子5表达水平与颈动脉斑块稳定性及狭窄程度的相关性

目的探索急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清微小RNA-140-3p(miR-140-3p)、Krüpple样因子5(KLF5)表达水平与颈动脉斑块稳定性及狭窄程度的相关性。方法选择2022年10月—2024年1月本院收治的285例AIS患者作为研究对象,依据超声结果将患者分为斑块易损组(196例)、斑块稳定组(53例)以及无斑块组(36例);将患者依据斑块狭窄程度分为狭窄重度组(42例)、狭窄中度组(57例)、狭窄轻度组(150例)以及无狭窄组(36例)。收集患者的一般资料,采用实时荧光定量PCR对血清miR-140-3p、KLF5表达水平进行检测;多因素Logistic回归分析AIS患者颈动脉斑块不稳定性的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-140-3p、KLF5水平检测对AIS患者颈动脉斑块不稳定的诊断价值;分析不同狭窄程度血清miR-140-3p、KLF5水平;Pearson法和Spearman法相关性分析血清miR-140-3p、KLF5水平的相关性及二者与AIS患者颈动脉斑块稳定及狭窄程度的相关性。结果斑块易损组患者高血压人数、糖尿病人数、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、D-二聚体(D-D)、纤维蛋白原(FIB)、膀抑素C(Cys-C)及KLF5水平高于斑块稳定组及无斑块组(P<0.05),血小板(PLT)及miR-140-3p水平低于斑块稳定组及无斑块组(P<0.05),斑块稳定组LDL-C、FIB、D-D、Cys-C及KLF5水平高于无斑块组(P<0.05),PLT及miR-140-3p水平低于无斑块组(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示PLT、D-D、FIB、Cys-C、miR-140-3p、KLF5是AIS患者斑块不稳定性的影响因素(P<0.05);ROC分析显示,miR-140-3p、KLF5联合诊断AIS患者颈动脉斑块不稳定的ROC曲线下面积(AUC)显著大于miR-140-3p单独诊断的AUC(Z=4.617,P<0.001),KLF5单独诊断的AUC(Z=3.473,P=0.001);随着患者狭窄程度的增加,患者血清miR-140-3p水平降低(F=341.819,P<0.001),血清KLF5水平升高(F=152.186,P<0.001);Pearson法相关性分析显示,血清miR-140-3p水平与血清KLF5水平及斑块稳定性、狭窄程度呈负相关(r=-0.536,-0.529,-0.601,P<0.001),血清KLF5水平与斑块稳定性及狭窄程度呈正相关(r=0.511,0.634,P<0.001)。结论AIS患者血清miR-140-3p水平降低,血清KLF5水平升高,其水平变化与颈动脉斑块稳定性及狭窄程度密切相关。

miR-140-3p在大鳞副泥鳅雌雄性腺中的差异表达和调控功能的研究

miR-140-3p是在不同物种性腺组织中广泛表达的一种miRNA。本研究利用qRT-PCR方法检测miR-140-3p在大鳞副泥鳅性腺中的雌雄表达差异并预测其生物学功能。结果显示:miR-140-3p在大鳞副泥鳅雌雄鱼的性腺组织中均有表达,且精巢中的表达量显著高于卵巢(P<0.01);KEGG pathway分析表明,靶基因CPEB4和GDF9参与卵母细胞成熟分化过程,富集在与性腺发育、繁殖功能相关的孕激素介导卵母细胞成熟通路、卵母细胞减数分裂通路、卵巢类固醇生成通路。荧光定量结果显示CPEB4和GDF9在卵巢中表达量显著高于精巢(P<0.01),且表达量与miR-140-3p的表达呈显著负相关,说明miR-140-3p和CPEB4、GDF9具有潜在的靶标关系。这为进一步探索miR-140-3p在鱼类性腺发育和繁殖过程中的作用奠定了基础。

高分辨率磁共振成像联合血清miR-140-3p、miR-223-3p在颈动脉粥样硬化斑块易损性评价中的价值研究

目的探究高分辨率磁共振成像(高分辨率MR)联合血清微小核糖核酸-140-3p(miR-140-3p)、微小核糖核酸-223-3p(miR-223-3p)在颈动脉粥样硬化斑块易损性评价中的价值。方法选取2022年1月—2023年12月连云港市第一人民医院神经内科收治的颈动脉粥样硬化患者86例为研究对象,根据病理学确诊斑块状况将患者分为斑块易损组42例和非斑块易损组44例。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清miR-140-3p、miR-223-3p表达;Kappa检验分析高分辨率MR检测与金标准诊断颈动脉粥样硬化斑块易损的一致性;多因素Logistic回归分析颈动脉粥样硬化患者斑块易损的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析高分辨率MR、miR-140-3p、miR-223-3p对颈动脉粥样硬化患者斑块易损性的诊断价值。结果斑块易损组血清miR-140-3p表达低于非斑块易损组,血清miR-223-3p表达高于非斑块易损组(t/P=6.033/<0.001,6.367/<0.001);2组动脉重构类型及斑块分布位置比较,差异无统计学意义(P>0.05);Kappa检验显示,高分辨率MR检测与金标准诊断颈动脉粥样硬化斑块易损的一致性尚可(Kappa=0.603,P<0.001);多因素Logistic回归分析显示,C反应蛋白(CRP)、miR-223-3p升高为颈动脉粥样硬化患者斑块易损的独立危险因素[OR(95%CI)=1.685(1.051~2.702)、3.054(2.008~4.645)],miR-140-3p升高为独立保护因素[OR(95%CI)=0.752(0.616~0.918)];高分辨率MR、miR-140-3p、miR-223-3p及三者联合诊断颈动脉粥样硬化患者斑块易损性的曲线下面积(AUC)分别为0.800、0.860、0.884、0.981,三者联合的AUC大于高分辨率MR、miR-140-3p、miR-223-3p单独诊断的AUC(Z/P=4.537/<0.001、2.980/0.003、2.869/0.004)。结论高分辨率MR联合血清miR-140-3p、miR-223-3p检测对颈动脉粥样硬化斑块易损性有较高的诊断价值。

miR-140-3p通过靶向MAPK1影响宫颈癌细胞增殖及顺铂敏感性的研究

目的研究miR-140-3p在宫颈癌细胞增殖和对顺铂敏感性中的作用及其机制。方法采用原位杂交技术检测宫颈癌及其癌旁组织中miR-140-3p的表达水平,并分析与临床病理参数的关系。通过CCK8实验、细胞克隆形成和细胞划痕实验,比较各组宫颈癌细胞增殖和迁移的差异。在不同浓度顺铂处理下,检测各组细胞的增殖、克隆形成及死亡率变化。利用miRNA数据库预测目标基因,并通过荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR和Western blot检测目标基因mRNA和蛋白水平,以及凋亡相关蛋白表达,以验证miR-140-3p的潜在靶点。结果宫颈癌组织中miR-140-3p表达显著低于癌旁组织(P<0.05)。上调miR-140-3p可显著抑制宫颈癌细胞的增殖、克隆形成及迁移。CCK8、细胞克隆形成和划痕实验结果表明,不同浓度顺铂处理后,miR-140-3p过表达组MAPK1的表达下降,宫颈癌细胞增殖及克隆形成下降,而细胞凋亡增加(P<0.05)。结论miR-140-3p可能通过调控MAPK1基因抑制宫颈癌细胞增殖,并增强对顺铂的敏感性。

MiR-140-3p调节PI3K/Akt通路减轻缺氧复氧心肌细胞损伤的实验研究

目的:探讨miR-140-3p靶向调节PI3K/Akt通路对缺氧复氧心肌细胞再灌注损伤的影响。方法:对大鼠来源的H9C2心肌细胞进行缺氧/复氧以诱导细胞损伤,使用miR-140-3p mimics及其对照(NC)转染H9C2心肌细胞,再使用10μmol/L LY294002处理过表达miR-140-3p的H9C2细胞。将心肌细胞分为6组,分别为对照组(CON组)、H/R组(Model组)、Model+NC组、Model+miR-140-3p mimics组、Model+miR-140-3p mimics+LY294002组、Model+LY294002组。采用荧光定量PCR(RT-PCR)法检测各组miR-140-3p相对表达量,CCK-8法检测各组心肌细胞活力,流式细胞仪检测各组心肌细胞凋亡率,Western blot检测各组磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、Bax、Bcl-2、Cleaved-caspases-3表达量。结果:与CON组比较,Model组miR-140-3p表达量、细胞活力以及Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白表达明显降低(P<0.05),Bax、Cleaved-caspases-3蛋白表达和凋亡率明显提高(P<0.05),与Model组比较,miR-140-3p过表达可上调miR-140-3p表达量、细胞活力以及Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白,下调Bax、Cleaved-caspases-3蛋白表达和凋亡率,LY294002可抑制miR-140-3p表达,下调细胞活力以及Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白,上调Bax、Cleaved-caspases-3蛋白表达和凋亡率。结论:MiR-140-3p可通过调节PI3K/Akt通路减轻缺氧复氧心肌细胞自噬和凋亡,进而减轻心肌损伤。

LncRNA PSMA3-AS1调节miR-140-3p/DDX5轴对肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

目的探讨长链非编码RNA人蛋白酶体α亚基3型的反义RNA1(PSMA3-AS1)调节miR-140-3p/DEAD box p68 RNA解旋酶(DDX5)轴对肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法qRT-PCR、Western blot、免疫组化法分别检测40例肺癌组织和细胞系中PSMA3-AS1、miR-140-3p、DDX5表达。将A549细胞分为:control组、si-NC组、si-PSMA3-AS1组、si-PSMA3-AS1+inhibitor-NC组、si-PSMA3-AS1+miR-140-3p inhibitor组,qRT-PCR检测转染效率;MTT法、流式细胞仪、Transwell小室分别检测细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭;Western blot方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、波形蛋白(vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及DDX5蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p与PSMA3-AS1和DDX5的关系;构建肺癌裸鼠模型,分为si-NC、si-PSMA3-AS1组,测量肿瘤质量与体积,qRT-PCR检测移植瘤组织中miR-140-3p表达,免疫组化法检测移植瘤组织Ki-67、DDX5蛋白表达。结果在肺癌组织/细胞系中,PSMA3-AS1 mRNA、DDX5蛋白表达升高,miR-140-3p mRNA表达水平降低(P<0.05);敲低PSMA3-AS1表达可显著抑制A549细胞增殖、迁移与侵袭,降低PCNA、MMP-2、vimentin、DDX蛋白表达,促进miR-140-3p、Bax、E-cadherin表达及细胞凋亡(P<0.05);下调miR-140-3p,可减弱敲低PSMA3-AS1对A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用及对细胞凋亡的促进作用(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实miR-140-3p与PSMA3-AS1、miR-140-3p与DDX5存在靶向调控关系(P<0.05);体内实验显示,抑制PSMA3-AS1表达可显著降低移植瘤质量和体积,降低Ki-67、DDX5表达水平,升高miR-140-3p表达(P<0.05)。结论敲低PSMA3-AS可能通过调节miR-140-3p/DDX5轴,抑制肺癌细胞的增殖和EMT,促进细胞凋亡。

外周血sCD14、miR-140-3p及TBIL对冠心病患者冠脉斑块稳定性的评估价值

目的探究外周血可溶性白细胞分化抗原14(sCD14)、微小RNA-140-3p(miR-140-3p)及总胆红素(TBIL)对冠心病患者冠脉斑块稳定性的评估价值。方法选取郸城县人民医院2021年8月至2023年8月收治的80例冠心病患者为研究对象,行血管内超声检查,对患者的斑块性质进行分类,并根据检查结果对患者进行分组:稳定组55例与不稳定组25例。收集并对比两组患者一般资料信息及血清指标水平,将有统计学意义的变量进行分析,探究影响冠心病患者冠脉斑块稳定性的因素。结果稳定组和不稳定组患者的年龄、性别、体质量指数(BMI)、糖尿病、高血压、尿素氮、尿肌酐以及血中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平比较差异无统计学意义(P>0.05);稳定组sCD14水平显著低于不稳定组,差异具有统计学意义(P<0.05),miR-140-3p、TBIL水平显著高于不稳定组,差异均有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析显示,高水平sCD14、低水平miR-140-3p及低水平TBIL均为冠心病患者冠脉斑块不稳定性斑块形成的危险因素,差异均有统计学意义(P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线分析表明,高水平sCD14、低水平miR-140-3p及低水平TBIL均对不稳定型斑块均具有一定诊断价值,其曲线下面积(AUC)分别为0.706、0.939、0.807,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论冠心病患者外周血sCD14、miR-140-3p及TBIL表达水平与冠脉不稳定型斑块的形成具有密切关系,对于斑块稳定性具有一定的评估价值。

LncRNA XIST通过调控miR-140-3p/PD-L1轴促进弥漫大B细胞淋巴瘤细胞的增殖与迁移

目的探讨LncRNA X失活特异性转录本(XIST)通过miR-140-3p/程序性死亡配体-1(PD-L1)轴对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、迁移的影响。方法以2015年至2017年期间我科室收治的40例DLBCL患者的淋巴结活检组织标本,以及人DLBCL细胞系OCI-LY19、SU-DHL-4、U2932为研究对象,qRT-PCR检测XIST表达,分析XIST表达与DLBCL患者临床病理特征的关系;利用LipofectamineTM2000转染试剂对U2932细胞进行转染,分组为:空白组、miR-NC组、miR-140-3p mim⁃ics组、OE-NC组、OE-XIST组、OE-PD-L1组、OE-XIST+miR-NC组、OE-XIST+miR-140-3p mimics组、OE-XIST+si-NC组、OEXIST+si-PD-L1组,qRT-PCR检测各组细胞中miR-140-3p及XIST表达水平;MTT法检测各组细胞增殖情况;Transwell实验检测各组细胞迁移情况;双荧光素酶报告基因检测实验分别验证XIST与miR-140-3p、miR-140-3p与PD-L1的靶向关系;West⁃ern blot检测各组细胞中PD-L1蛋白表达。结果XIST在DLBCL组织和细胞OCI-LY19、SU-DHL-4、U2932中高表达,且U2932细胞中XIST的表达水平最高,因此后续实验以U2932细胞为研究对象;XIST的表达与DLBCL患者的Hans分型有关,而与DLBCL患者的性别、年龄、Ann Arbor分期、国际预后指数(IPI)评分无关;XIST靶向负调控miR-140-3p的表达,miR-140-3p靶向负调控PD-L1的表达,XIST正向调控PD-L1的表达;与空白组、OE-NC组比较,OE-PD-L1组细胞中PD-L1蛋白、OD490nm值(24、48、72 h)、迁移细胞数目显著升高(P<0.05);与OE-XIST组和OE-XIST+miR-NC组比较,OE-XIST+miR-140-3p mimics组中miR-140-3p表达水平显著升高,PD-L1蛋白表达水平、细胞增殖能力及迁移细胞数目显著降低(P<0.05);与OE-XIST组和OE-XIST+si-NC组比较,OE-XIST+si-PD-L1组中miR-140-3p表达水平无显著变化,而PD-L1蛋白表达水平、细胞增殖能力及迁移细胞数目显著降低(P<0.05)。结论LncRNA XIST通过靶向调控miR-140-3p/PD-L1轴促进DLBCL细胞增殖与迁移。

玉米自交系石140-3的选育及其育成品种

玉米自交系石140-3是以白早四×Mo17为基础材料,通过和白早四回交一次,经南北异地连续自交选育而成。该自交系具有品质优良、抗旱、抗病、配合力高等优点,用石140-3为亲本和瑞德群组配,已育成了石玉6号、石玉7号、石玉8号等优良品种,在生产上已大面积推广应用。

miR-140-3p调节非小细胞肺癌细胞功能的研究

目的:探讨调控miR-140-3p表达对非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)细胞株A549和NCI-H1299细胞行为的影响。方法:体外培养A549和NCI-H1299细胞,转染miR-140-3p mimic(过表达)或miR-140-3p inhibitor(抑制表达),通过EdU检测细胞增殖率,通过Transwell及划痕实验检测细胞迁移能力,通过生物信息学工具预测miR-140-3p的潜在靶基因,通过生物信息学软件构建基因调控网络。结果:过表达miR-140-3p后,A549和NCI-H1299细胞的增殖率升高,迁移能力下降;相反,抑制miR-140-3p的表达后,细胞的增殖率较低,但迁移能力提高。生物信息学分析结合实时定量反转录聚合酶链式反应验证提示,miR-140-3p可能靶向CBL基因,影响细胞生物学过程。结论:miR-140-3p对NSCLC细胞具有促进细胞增殖和抑制细胞迁移的作用。

血清miR-140-3p、sLOX-1对急性STEMI患者PCI术后支架内再狭窄的预测能效

目的探讨血清微小RNA(miR)-140-3p、可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)对急性ST段抬高型心肌梗死(ASTEMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后支架内再狭窄的预测价值。方法选取2019年1月至2021年1月于郑州市第七人民医院心内科收治的247例接受PCI的STEMI患者,根据PCI术后1年是否发生支架内再狭窄分为再狭窄组(n=38)和无再狭窄组(n=209)。收集患者基础资料,RT-PCR测定患者血清miR-140-3p水平,酶联免疫吸附法测定血清sLOX-1水平。分析ASTEMI患者PCI术后支架内再狭窄影响因素,ROC曲线判断血清miR-140-3p、sLOX-1水平对ASTEMI患者PCI术后支架内再狭窄的预测价值。结果与无再狭窄组比较,再狭窄组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、左心室射血分数(LVEF)、急诊PCI比例、支架内径及血清miR-140-3p水平降低,空腹血糖(FBG)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、支架长度、Gensini积分及血清sLOX-1水平升高(P<0.05)。多因素Logistics回归分析显示,hs-CRP(OR=2.797,95%CI:1.506~5.194)、急诊PCI(OR=0.186,95%CI:0.106~0.319)、支架内径(OR=0.382,95%CI:0.106~0.319)、miR-140-3p(OR=0.785,95%CI:0.525~0.883)为ASTEMI患者PCI术后支架内再狭窄独立保护因素,Gensini积分(OR=1.228,95%CI:1.086~1.389)、sLOX-1(OR=1.035,95%CI:1.018~1.052)为其独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,miR-140-3p联合sLOX-1(AUC=0.892,95%CI:0.847~0.928)预测STEMI患者PCI后支架内再狭窄的AUC明显大于miR-140-3p(AUC=0.791,95%CI:0.735~0.840)、sLOX-1(AUC=0.784,95%CI:0.728~0.834)单独预测,其敏感度、特异度、准确度为81.58%、85.65%、85.02%。结论PCI术后支架内再狭窄ASTEMI患者血清miR-140-3p水平明显降低,sLOX-1水平明显提升,miR-140-3p为PCI术后支架内再狭窄的独立保护因素,sLOX-1为其独立危险因素,二者均对支架内再狭窄具有一定预测价值,联合预测价值更高。

2型糖尿病患者血清miR-140-3p和EGR1水平与肠道菌群的关系研究

目的 探究2型糖尿病(T2DM)患者血清微小RNA-140-3p(miR-140-3p)和早期生长反应因子1(EGR1)水平与肠道菌群的关系。方法 回顾性选取2021年3月至2022年12月在青岛大学附属青岛市中心医院就诊治疗的125例T2DM患者作为T2DM组,另选取同期体检健康者100名作为对照组。采用实时荧光定量PCR测定血清miR-140-3p、EGR1 mRNA水平,比较对照组与T2DM组的一般资料以及血清miR-140-3p、EGR1 mRNA水平;采用Pearson分析T2DM患者血清miR-140-3p、EGR1 mRNA水平与肠道菌水平的相关性。结果 与对照组比较,T2DM组的体重指数、腰围、空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、甘油三酯、总胆固醇均显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。T2DM组血清miR-140-3p较对照组均显著下调,血清EGR1 mRNA水平显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,T2DM组乳酸杆菌、拟杆菌水平均显著减少,T2DM组双歧杆菌、肠杆菌、肠球菌、酵母菌水平均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,T2DM患者血清miR-140-3p水平与乳酸杆菌、拟杆菌水平均呈正相关(P<0.05),与双歧杆菌、肠杆菌、肠球菌、酵母菌水平均呈负相关(P<0.05);T2DM患者血清EGR1 mRNA水平与乳酸杆菌、拟杆菌水平均呈负相关(P<0.05),与双歧杆菌、肠杆菌、肠球菌、酵母菌水平均呈正相关(P<0.05)。结论 T2DM患者血清miR-140-3p表达水平显著下调,EGR1表达水平显著上调,且与患者肠道菌水平具有一定相关性。

miR-140-3p通过靶向PD-L1抑制非小细胞肺癌A549细胞的活力、迁移和侵袭

目的:探究微小RNA-140-3p(mi R-140-3p)对程序性细胞死亡配体1(PD-L1)的靶向关系以及对非小细胞肺癌A549细胞的活力、迁移和侵袭的影响。方法:使用RT-qPCR检测HLF-1、A549和H1299不同细胞株中mi R-140-3p的表达水平,选择差异最显著的A549细胞用作后续研究对象; Target Scan软件预测和双萤光素酶报告基因实验验证mi R-140-3p和PD-L1之间的靶向关系; RT-qPCR和Western blot检测转染mi R-140-3p模拟物和抑制剂对PD-L1表达水平的影响; MTT法检测mi R-140-3p和PD-L1对A549细胞活力的影响; Transwell实验检测mi R-140-3p和PD-L1对A549细胞迁移和侵袭的影响。结果:mi R-140-3p在人肺癌A549和H1299细胞的表达中显著下调(P <0. 05); mi R-140-3p高表达能够使PD-L1表达下调,对A549细胞的活力、迁移和侵袭具有抑制作用;转染pc DNA3. 0-PD-L1能够阻断mi R-140-3p对A549细胞活力、迁移和侵袭的抑制作用。结论:mi R-140-3p可通过靶向负调控PD-L1抑制A549细胞的活力、迁移和侵袭。

沉默circ_0000218靶向miR-140-3p影响皮肤鳞状细胞癌细胞恶性生物学行为

目的探讨circ_0000218对皮肤鳞状细胞癌(cSCC)细胞恶性生物学行为的影响及可能机制。方法收集21例cSCC组织和21例正常皮肤组织,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测组织中circ_0000218和微小RNA-140-3p(miR-140-3p)表达。体外培养cSCC SCL-1细胞,分别转染si-circ_0000218、miR-140-3p mimics、共转染si-circ_0000218与anti-miR-140-3p后,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法和克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,划痕实验检测细胞迁移,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞中活化的胱天蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证circ_0000218和miR-140-3p调控关系。结果cSCC组织中circ_0000218表达量高于正常皮肤组织(P<0.05),而miR-140-3p表达量低于正常皮肤组织(P<0.05);转染si-circ_0000218或miR-140-3p mimics后,cSCC SCL-1细胞光密度(OD)值、集落形成数及划痕愈合率降低(P<0.05),而凋亡率和细胞中Cleaved caspase-3蛋白表达量升高(P<0.05)。circ_0000218靶向负调控miR-140-3p。与转染si-circ_0000218的SCL-1细胞比较,共转染si-circ_0000218与anti-miR-140-3p的SCL-1细胞OD值、集落形成数及划痕愈合率升高(P<0.05),而凋亡率和细胞中Cleaved caspase-3蛋白表达量降低(P<0.05)。结论circ_0000218在cSCC组织中呈高表达,其可能通过靶向抑制miR-140-3p促进cSCC细胞增殖和迁移,而阻碍细胞凋亡,有可能成为cSCC治疗的分子靶点。

膝骨关节炎患者关节液中miR-140-3p表达可反映骨关节炎进程

背景:骨关节炎是一种与年龄相关,以关节软骨退变为特点的关节疾病。目的:检测膝关节液中mi R-140-3p的表达,明确其表达量是否与骨关节炎严重程度相关。方法:共收集到健康志愿者、痛风性关节炎患者、类风湿性关节炎患者各10例,膝骨关节炎患者45例,其中骨关节炎早期、中期、晚期各15例。应用实时荧光定量PCR检测各组膝关节液中mi R-140-3p的表达。结果与结论:1骨关节炎组mi R-140-3p的表达明显下调,非骨关节炎组与骨关节炎组间表达量差异有显著性意义(P<0.05),健康对照组、痛风性关节炎与类风湿性关节炎组间差异无显著性意义(P>0.05);2健康对照组mi R-140-3p的表达量是骨关节炎组的11.4倍,随骨关节炎严重程度的增加mi R-140-3p表达量呈相对减少的趋势;3进一步行Spearman等级相关分析显示:骨关节炎的严重程度与mi R-140-3p的表达量均呈负相关;4结果表明,关节液中mi R-140-3p的表达量可以在一定程度上反映骨关节炎病程的进展。

微小RNA-140-3p靶向细胞分裂周期相关蛋白8抑制肺腺癌细胞侵袭转移的生物信息学分析及验证

目的在生物信息学基础上探讨微小RNA(miR)-140-3p靶向细胞分裂周期相关蛋白8(CDCA8)抑制肺腺癌细胞的侵袭和转移。方法通过GEO数据库中的GEO2R分析肺腺癌芯片数据中差异表达的miRNA。Target Scan Human7.2和miRWalk数据库查找miR-140-3p的靶基因。Cytoscape3.7.2软件筛选出Hub基因。GEPIA数据库查询靶基因在肺腺癌组织和正常肺组织中的表达水平,在肺腺癌不同分期中的表达水平以及靶基因的表达水平与肺腺癌患者总体生存率的关系。Star Base数据库查找miR-140-3p在肺腺癌中的生存分析及与CDCA8的表达水平在肺腺癌中的相关性。Real-time PCR检测miR-140-3p在正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺腺癌细胞A549的表达水平以及感染效率。Real-time PCR和Western blotting实验检测过表达miR-140-3p后CDCA8 m RNA和蛋白的表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p是否与CDCA8直接结合。Transwell侵袭实验检测过表达miR-140-3p和CDCA8对肺腺癌细胞侵袭力的影响。结果通过GEO等数据库的分析结果显示,miR-140-3p在正常肺组织中的表达水平明显高于在肺腺癌中的表达水平,其预测靶基因CDCA8在肺腺癌中的表达水平明显高于在正常肺组织中的表达水平,且CDCA8与miR-140-3p的表达水平在肺腺癌中成负相关。实验结果显示,miR-140-3p在A549细胞中的表达明显低于在BEAS-2B细胞中的表达(P<0.05);用过表达慢病毒感染细胞后miR-140-3p的表达水平明显升高(P<0.05);过表达miR-140-3p后CDCA8的m RNA和蛋白表达水平明显下调(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-140-3p能与CDCA8直接结合(P<0.05);与对照组相比,过表达miR-140-3p可抑制肺腺癌细胞A549的侵袭转移,而CDCA8可逆转miR-140-3p对肺腺癌细胞A549侵袭力的抑制作用(P<0.05)。结论MiR-140-3p靶向CDCA8抑制肺腺癌细胞的侵袭转移。

miR-140-3p靶向AGT5调控鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移及自噬研究

目的探讨miR-140-3p对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移和自噬的影响及其与自噬相关基因5(AGT5)的靶向关系。方法选择人鼻咽癌细胞CNE2细胞、人鼻黏膜上皮细胞HNEpC,根据转染不同质粒分为miR-140-3p组(转染miR-140-3p mimic质粒)、si-miR-140-3p组(转染miR-140-3p inhibitor质粒)、miR-空白对照(NC)组(转染miR-140-3p mimic空载体)、NC组(转染miR-140-3p inhibitor空载体)、si-miR-140-3p+OE组(转染miR-140-3p inhibitor质粒、过表达AGT5空载体)及si-miR-140-3p+AGT5组(转染miR-140-3p inhibitor质粒、过表达-AGT5质粒)。CCK-8实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力,荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞AGT5 mRNA及miR-106b-5p表达水平,Western blot检测细胞微管关联蛋白轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、微管关联蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、AGT5、自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)及p62蛋白表达水平,TargetScan在线网站预测miR-140-3p与AGT5结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p与AGT5的靶向关系。结果CNE2细胞miR-140-3p、AGT5蛋白及AGT5 mRNA表达水平明显低于HNEpC细胞(0.21±0.03 vs 0.87±0.11、0.21±0.06 vs 0.87±0.12、0.32±0.05 vs0.74±0.08)(P<0.01)。上调miR-140-3p的CNE2细胞增殖、侵袭及迁移能力降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、AGT5蛋白表达水平升高,p62蛋白表达水平降低(P<0.01);下调miR-140-3p的CNE2细胞增殖、侵袭及迁移能力升高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、AGT5蛋白表达水平降低,p62蛋白表达水平升高(P<0.01)。上调AGT5可逆转敲低miR-140-3p对CNE2细胞增殖、侵袭、迁移的促进作用及自噬的抑制作用。miR-140-3p与AGT5具有靶向调控关系。结论miR-140-3p对CNE2细胞增殖、侵袭、迁移具有抑制作用,对自噬具有促进作用,机制可能与正性调控AGT5有关。