1400W对成年大鼠脑缺血后海马神经元再生的影响

目的 研究脑缺血对海马齿状回神经元再生的刺激作用 ,以及iNOS抑制剂对缺血诱发的神经元再生的影响。方法 血管内栓线法阻塞大脑中动脉 1 5h然后再灌注制备再灌性局灶脑缺血模型。腹腔注射iNOS抑制剂 14 0 0W(5mg·kg-1)。BrdU参入法测定海马齿状回的细胞扩增。于再灌注后 2 4h测定海马iNOS活性及NO水平。结果 在脑缺血后d 8缺血侧海马齿状回的BrdU阳性细胞数比对照侧多大约 5倍 ,14 0 0W抑制iNOS活性和降低NO水平 ,同时抑制脑缺血诱发的海马齿状回神经细胞扩增。结论 iNOS是脑缺血诱发海马齿状回神经元再生的重要分子 ,激活iNOS可能是促进脑缺血损伤功能修复的治疗策略之一。

iNOS抑制剂1400W对人舌鳞癌CAL-27细胞株黏附力的研究

目的探讨缺氧条件培养下诱导型一氧化氮合酶(i NOS)抑制剂1400 W对人舌鳞癌CAL-27细胞株黏附能力的影响。方法 MTT法检测1400 W对人舌鳞状癌细胞CAL-27黏附能力的影响。结果细胞黏附率与对照组比较明显下降(P<0.05)。1400 W作用于人舌鳞癌CAL-27细胞后,可呈时间、剂量性依赖抑制人舌鳞癌黏附能力(P<0.05)。结论 1400 W可明显抑制人舌鳞癌的黏附能力。1400 W对人舌鳞状细胞癌生长、侵袭、转移具有预防和潜在的治疗价值。

1400W对内毒素损伤豚鼠血迷路屏障的保护作用及机制初探

目的观察一氧化氮合酶抑制剂1400W(N-(3-(氨甲基)-苄基)乙脒)对内毒素(endotoxin,ETX)所致的豚鼠血迷路屏障损伤的保护作用,并初步探讨其可能机制。方法将豚鼠分3组,每组分别于听泡内各注入无菌生理盐水、ETX和ETX加1400W,光镜观察耳蜗形态变化;以伊文思蓝(Evans Blue,EB)为示踪剂,测量EB通过耳蜗血迷路屏障的渗出量;用硝酸还原酶法检测各组耳蜗组织一氧化氮(NO)含量的变化。结果ETX组EB渗出量增加,同时有NO含量增加;ETX加1400W组和ETX组比较,EB渗出量减少(P<0.05),NO生成亦减少(P<0.05)。无菌生理盐水组无EB通过,亦无NO含量增加。结论ETX可能通过诱导NO生成而引起血迷路屏障通透性增加,此作用可以被1400W抑制,后者可能减轻中耳炎引起的内耳损害。

选择性一氧化氮合成酶抑制剂1400W对创伤后脑组织保护作用的研究

目的 探讨选择性一氧化氮合成酶抑制剂 140 0W对外伤性脑组织的保护作用。方法 建立大鼠自由落体脑外伤模型 ,测定脑外伤后生理盐水组和治疗组不同时期脑组织NO含量 ,同时观察脑组织病理及超微结构的改变 ,将两组结果进行比较。结果 140 0W能明显降低NO的含量 ,改善脑外伤后脑组织的病理变化和超微结构改变。结论 140

iNOS抑制剂1400W对宫颈癌HeLa细胞株生长的抑制作用

目的探讨诱导型一氧化氮合酶抑制剂1400W单独或者联合顺铂对宫颈癌HeLa细胞株生长及凋亡的影响。方法培养宫颈癌HeLa细胞株,应用MTT法检测1400W及顺铂对HeLa细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测1400W及顺铂对HeLa细胞凋亡的影响;RT-PCR检测1400W及顺铂对HeLa细胞E6,p53 mRNA表达的影响。结果1400W和顺铂均能抑制HeLa细胞生长,其抑制作用与剂量呈正相关。1400W单药并不增加HeLa细胞凋亡,而1400W联合顺铂后明显增加HeLa细胞凋亡(P<0.05),两者联合也使HeLa细胞E6,p53 mRNA表达明显下降(P<0.05)。结论1400W及顺铂均可抑制HeLa细胞增殖。1400W联合顺铂明显增加宫颈癌HeLa细胞凋亡率,并且较单独使用顺铂时作用更显著。顺铂联合iNOS抑制剂抗肿瘤可能是一种更有希望的新辅助疗法。

选择性iNOS抑制剂1400W对大鼠肠黏膜上皮细胞凋亡保护作用的研究

目的探讨选择性诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂1400W对大鼠肠黏膜上皮细胞凋亡的保护作用及其作用机制。方法实验于2016年10月—2017年2月在湖北省第三人民医院药理实验所实施。选取50只SD大鼠,随机将SD大鼠均分5组:创伤模型组(T组)、低剂量组(L组)、中剂量组(M组)、高剂量组(H组)和假手术组(C组)各10只,其中T组、L组、M组和H组采用盲肠结扎穿孔(CLP)法模拟肠黏膜上皮细胞凋亡模型,C组只开腹腔不进行盲肠穿孔。术后1h,接受CLP法的L、M和H组分别给予不同剂量的iNOS抑制剂1400W(100、200、400μg/L)进行腹腔注射治疗,T组和C组予以等量生理盐水,观察免疫组化切片下肠黏膜上皮细胞凋亡情况;采用TUNEL法检测肠黏膜上皮细胞凋亡指数(AI),采用QRT-PCR检测各组肠黏膜组织凋亡相关蛋白Caspase-3 mRNA表达。结果T、L、M和H组肠黏膜上皮细胞均观察到不同程度的细胞凋亡,T组最严重,M组、H组明显减少,C组仅少量凋亡的上皮细胞集中在肠绒毛顶端及中下部等处;接受CLP的各组AI明显高于C组,T组AI明显高于L、M和H组,差异具有统计学意义(P<0.05),接受1400W治疗的L、M和H组AI依次降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。T、L、M和H组肠黏膜Caspase-3 mRNA表达量均高于C组,其中T组最高,L、M和H组依次降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论选择性iNOS抑制剂1400W可显著地抑制SD大鼠肠黏膜细胞凋亡,保护肠黏膜屏障。

iNOS抑制剂1400W通过p53途径增强顺铂对宫颈癌SiHa细胞的化疗效果

该文探讨了iNOS抑制剂1400W联合顺铂对宫颈癌SiHa细胞株生长抑制作用及其机制。应用MTT法检测1400W及顺铂对宫颈癌Si Ha细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测1400W及顺铂对宫颈癌Si Ha细胞凋亡的影响;quantitative RT-PCR和Western blot检测1400W及顺铂对宫颈癌Si Ha细胞p53、鼠双微基因2(murine double minut 2,MDM2)、DNA依赖蛋白激酶(DNA-dependent protein kinase,DNA-PK)蛋白及m RNA表达的影响。结果显示,通过i NOS抑制剂1400W联合顺铂作用于宫颈癌Si Ha细胞株发现,1400W联合顺铂能明显抑制Si Ha细胞生长,其抑制作用与剂量呈正相关。1400W可以增强顺铂诱导的细胞凋亡作用。进一步研究证实,1400W可以抑制顺铂诱导的p53积聚,增加鼠双微基因2及DNA依赖蛋白激酶的表达。该实验结果为治疗宫颈癌患者提供了新的治疗策略,即通过联合使用i NOS抑制剂,可以增强顺铂对宫颈癌细胞的杀伤作用,提高顺铂对宫颈癌患者的治疗作用。

1400W对脂多糖诱导少突胶质细胞前体死亡通路的阻断研究

目的建立细菌脂多糖(LPS)诱导的2日龄感染型脑室周围白质软化(PVL)新生大鼠动物模型,探讨iNOS抑制剂1400W对LPS诱导脑白质少突胶质细胞(OL)前体死亡的体内阻断效果。方法 2日龄新生大鼠随机分为假手术组、PVL组、1400W-即刻组、1400W-8h组、1400W-16h组以及1400W-24h组,分别在LPS注射后即刻、8 h、16 h以及24 h经皮下注射1400W 20 mg/kg。于造模后第5天处死取脑,分别进行光镜下脑白质病理评估、硝酸还原法检测一氧化氮(NO)含量、Western blot法检测诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达量、免疫组织化学染色检测过氧亚硝酸盐(ONOO-)含量以及OL前体数量。结果 LPS诱导可引起新生大鼠脑白质明显损伤,脑内iNOS表达明显上调,NO和ONOO-含量显著增加,脑白质内少突胶质细胞前体标记物(O4)标记的OL前体显著减少。与PVL组比较,1400W-即刻组、1400W-8h组以及1400W-16h组新生大鼠的脑白质病理均获明显改善,iNOS蛋白合成量、NO及ONOO-生成量均显著降低,OL前体数量明显增加(P<0.05)。1400W-24h组的各项检测结果与PVL组相似,均无明显改善。结论体内研究确认1400W通过抑制iNOS的表达上调、减少脑内NO及ONOO-的生成量,从而阻断OL前体的死亡通路,发挥对脑白质的保护效果。在LPS诱导后16 h内应用1400W,均有良好的脑保护作用。

1400W对内毒素血症猪呼出气一氧化氮及血浆硝酸盐水平的影响

目的 探讨选择性诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂1400W对内毒素血症猪一氧化氮产量的影响。方法猪14只,随机分为两组:内毒素组和1400W组。内毒素组持续静脉输注内毒素0.08mg·h-1,12 h后内毒素组继续输注内毒素,1400W组输注内毒素的同时输注1400W,1400W剂量为0.5 mg·kg-1·h-1,分别于输注内毒素前、输注后12 h及24 h测定呼出气一氧化氮含量、动脉和门静脉血浆硝酸盐浓度。结果 内毒素使呼出气一氧化氮含量、动脉和门脉血硝酸盐浓度明显升高,1400 W使呼出气一氧化氮含量降至基础水平(P<0.05),但对已升高的血浆硝酸盐浓度无逆转作用(P>0.05)。结论1400W通过抑制iNOS的活性,减少了内毒素血症时一氧化氮的合成和释放。

选择性一氧化氮合成酶抑制剂对脑组织保护作用研究

目的 探讨创伤性脑损伤后脑组织中一氧化氮 (NO)含量变化与脑组织病理及超微结构变化之间的关系 ,及选择性一氧化氮合成酶抑制剂 (iNOS) 14 0 0W (N [3 (aminomethyl)benzyl]acetamidine)对脑组织的保护作用。方法 114只大鼠随机分成正常组、假手术组、生理盐水治疗组和14 0 0W治疗组 ,建立大鼠自由落体脑外伤模型 ,伤后 18h开始分别给予生理盐水和 14 0 0W腹腔内注射 ,每 8h一次。测定各组不同时期脑组织NO含量 ,同时观察脑组织病理及超微结构的改变 ,将结果进行比较。结果 生理盐水治疗组NO含量于伤后 6h开始升高 ,4 8h达到高峰 ,以后逐渐下降。14 0 0W治疗组NO含量降低 ,与生理盐水治疗组结果比较有统计学意义 ,72h后逐步恢复正常。生理盐水治疗组组织病理学检查和超微结构检查结果与NO改变同步 ,14 0 0W治疗组较生理盐水治疗组明显改善。结论 NO对脑外伤后继发性损伤起着重要作用 ,14 0

低浓度氢气吸入对心跳骤停大鼠心肺复苏成功率的影响及复苏后脑组织的保护作用

目的探讨低浓度(2%)氢气吸入对大鼠心肺复苏成功率的影响及复苏后是否对脑组织有保护作用。方法通过对成年雄性SD大鼠气管夹闭及复苏给药构建心跳骤停-复苏模型。根据复苏时给予治疗方案不同分为4组:假手术组、常规复苏组、氢气干预组和1400W干预组(1400W为i NOS特异性抑制剂)。分别观察4组复苏状况:窒息至停搏时间tCA、自主循环恢复(ROSC)时间tROSC、复苏成功率、24 h存活率和神经功能评分。在ROSC后0.5、24 h分别用ELISA法测定血浆S100β蛋白浓度。取自主循环恢复后24 h大鼠脑海马组织进行HE及免疫组化染色,观察神经元结构改变情况及凋亡水平。结果 (1)氢气干预组与常规复苏组和1400W干预组相比,复苏情况未见明显差异(P>0.05)。(2)无论是ROSC后0.5 h还是24 h,氢气干预组神经损伤标志物S100β的表达水平都显著低于常规复苏组(P<0.05),与1400W干预组比较未见明显差异(P>0.05)。(3)复苏后1 d,可见常规复苏组的CA1区神经元排列紊乱,神经元核固缩深染;氢气组和1400W组的神经元排列较常规组规则。(4)相对于常规组,氢气组和1400W组表达凋亡相关蛋白Caspase-3表达低,氢气组和1400W组之间未见明显差异(P>0.05)。结论低浓度氢气吸入对心跳骤停大鼠心肺复苏率等复苏指标影响不明显,但可对复苏后脑组织的损伤起到保护性作用,这种保护性作用可能与i NOS之间存在密切相关。

一氧化氮对兔纤维环细胞生物学行为的影响

目的:研究一氧化氮(NO)对兔纤维环细胞生物学行为的影响及其相关机制。方法:构建兔纤维环细胞凝胶培养模型并将其为7组,分别向培养基内加入不同浓度的NO供体硝普钠(SNP)及iNOS抑制剂烟酰胺和1400W进行干预:第1组为正常对照组,不加入药物;第2组加入10μmol/LSNP;第3组加入100μmol/LSNP;第4组加入200μmol/LSNP;第5组加入100μmol/LSNP和1μmol/L1400W;第6组加入100μmol/LSNP和0.05mg/mL烟酰胺;第7组加入100μmol/LSNP和0.5mg/mL烟酰胺。干预3d后分别采用MTT法、AnnexinV-PI染色和RT-PCR检测各组纤维环细胞增殖活力、细胞凋亡状况及细胞聚集蛋白多糖(aggrecan)、Ⅰ和Ⅱ型胶原基因表达。结果:①MTT检测显示:第3、4组吸光度值(A)较正常对照组明显下降(均P<0.05),而第5、6、7组均高于第3组(均P<0.05)。②流式细胞仪分析显示:第2、3、4组凋亡细胞比例远高于正常对照组,其中第4组高达32.98%;第5、6、7组凋亡细胞比例较第3组均有所下降,但仍高于正常对照组。③RT-PCR显示:第2、3、4组aggrecan、Ⅰ和Ⅱ型胶原基因表达较正常对照组均明显降低(均P<0.05),而第5、6、7组较第3组均明显增加(均P<0.05)。结论::NO对兔纤维环细胞生物学行为有较强的干扰作用,可能在纤维环损伤机制中扮演着重要角色。iNOS抑制剂可以有效抑制NO对兔纤维环细胞生物学行为的干扰,具备用于椎间盘退变防治的良好潜力。