成人支气管哮喘发作期患者中医证型特点及与miR-155-5p、Treg/Th17细胞平衡的关系

目的:探讨成人支气管哮喘发作期患者中医证型特点及与miR-155-5p、Treg/Th17细胞平衡的关系。方法:选择2022年3月~2024年2月在我院及我院上级医联体医院就诊的成人支气管哮喘发作期患者116例作为研究对象。收集患者一般资料、miR-155-5p mRNA、Treg/Th17及相关细胞因子[白细胞介素(IL)-17、IL-23]指标,同时对患者进行中医辨证分型,比较不同中医证型患者一般资料、miR-155-5p、Treg/Th17、IL-17、IL-23水平。结果:116例成人支气管哮喘发作期患者中医辨证为热哮、风哮、冷哮、虚哮,占比分别为34.48%(40/116),31.90%(37/116),22.41%(26/116),11.21%(13/116)。其中虚哮者年龄均高于风哮、热哮、冷哮者(P<0.05),其余证型年龄无差异(P>0.05)。不同中医证型患者病程、肺功能指标无差异(P>0.05)。不同中医证型患者miR-155-5p mRNA、Treg/Th17、IL-17、IL-23水平比较有差异(P<0.05),且风哮>冷哮>热哮>虚哮(P<0.05)。结论:成人支气管哮喘发作期以热哮、风哮为主,风哮患者miR-155-5p水平升高,Treg/Th17失衡,两者可能作为成人支气管哮喘发作期证型客观化的指标之一。

α-亚麻酸通过调节Th17减轻鲍曼不动杆菌感染小鼠的肺部炎症

目的探究α-亚麻酸(ALA)在鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,AB)小鼠肺炎中的作用机制。方法12只BALB/c小鼠随机分成野生组和肺炎组,分别利用靶向代谢组学技术和转录组学技术分析野生组和肺炎组小鼠的血清和肺组织中差异代谢物和差异基因。另取18只BALB/c小鼠随机分为空白组(vehicle组)、A.baumannii感染组(A.baumannii组)和实验组(A.baumannii+ALA组)。空白组和A.baumannii感染组给予普通饮食28 d,实验组给予定制饲料(含5%ALA)喂养28 d,第28天时A.baumannii感染组和实验组给予鲍曼不动杆菌悬液滴鼻,空白组给予PBS缓冲液滴鼻。24h后取小鼠肺组织,采用苏木精-伊红(HE)染色法观察肺组织病理学变化、酶联免疫吸附(ELISA)法测定肺组织炎症因子;流式细胞术和免疫荧光技术检测肺组织辅助性T细胞17(Th17)比例。体外评估ALA对于Th17细胞的影响时,设立ALA组(添加100μmol/L ALA)和对照组(添加相同体积PBS)并用流式细胞术分析Th17细胞比例。结果代谢组学显示,肺炎组小鼠血清的ALA水平显著低于野生组[(3.19+0.76)μg/mL比(10.32+1.75)μg/mL,P<0.0001]。转录组学显示,肺炎组小鼠的肺组织IL-17信号通路中有32个差异基因,其中包括28个上调基因和4个下调基因。在添加ALA的小鼠实验组中,实验组肺组织病理感染严重程度相比于A.baumannii感染组明显减轻,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-1β、IL-17A水平和Th17细胞比例相比于A.baumannii感染组有明显降低(均P<0.05),IL-6和IL-10水平相对于A.baumannii感染组明显升高(均P<0.05)。在体外分化实验中,ALA组Th17细胞比例明显低于对照组(P<0.05)。结论AB肺炎小鼠血清ALA水平低下,补充ALA后通过抑制Th17分化,对鲍曼不动杆菌所致肺炎具有保护作用,提示膳食补充ALA对鲍曼不动杆菌感染的控制具有一定益处。

黄芪-莪术对C5a介导JAK2/STAT3通路调控Lewis肺癌小鼠Th17/Treg细胞平衡影响的实验研究

目的探讨黄芪-莪术影响C5a介导JAK2/STAT3通路调控肿瘤微环境中Th17/Treg细胞平衡,从而阐明其在此途径抑制肿瘤进展的相关机制。方法40只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为空白对照组、模型对照组、中药干预组、阳性对照药(PMX53)组,每组各10只。腋下接种Lewis细胞建立肺癌小鼠模型,于接种后第3天开始,中药干预组按8.2 g/kg剂量给予中药浓煎液灌胃,模型对照组和PMX53组予等容积灭菌双蒸水灌胃,连续14 d;PMX53组分别于第3、6、9、12、15天按1mg/kg剂量给予腹腔注射PMX53,模型对照组和中药干预组同时腹腔注射等容PBS溶液。每2 d测算各组小鼠肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线;于第15天处死,剖取瘤块,ELISA法检测血清C5a、IL6、IL-10、IL-17、TGF-β等因子水平,流式细胞术检测并计算外周血和肿瘤组织中Th17/Treg细胞比例,Western Blot和Real-time PCR法检测肿瘤组织中JAK2/STAT3信号通路相关蛋白及mRNA表达。结果与模型对照组比较,中药干预组和PMX53组肿瘤生长较缓慢,补体C5a、JAK2和STAT3蛋白及mRNA水平、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值、Treg占比均降低,SOCS3蛋白及mRNA水平、Th17/Treg比例增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论黄芪-莪术可降低补体C5a进而抑制JAK2/STAT3通路活化,并调节肿瘤微环境中Th17/Treg平衡达到抑制肿瘤生长的作用。

IL-23/Th17炎症轴与银屑病关系的研究进展

银屑病是一种常见的慢性、复发性、炎症性皮肤病,导致该病的原因和多种因素有关,主要包括遗传因素、免疫紊乱、环境影响等,其中最重要的就是免疫紊乱。越来越多的实验研究证明IL-23/Th17炎症轴及其相关的免疫分子在银屑病的发病机制中发挥着重要的作用,基于此轴方面的治疗也有一定的成果。本文从IL-23/Th17炎症轴在银屑病中的研究进展进行综述。

Th1/Th2细胞因子、白细胞介素-17和血清肿瘤标志物在乳腺癌诊断、预后与复发中的应用价值研究

目的:探究Th1/Th2细胞因子、白细胞介素-17(IL-17)和血清肿瘤标志物在乳腺癌诊断、预后与复发中的应用价值。方法:选取2021年12月至2022年12月于北京大学肿瘤医院内蒙古医院收治的200例乳腺癌患者为研究对象,并将其按免疫组织化学指标检测后分为阴性组(60例)、弱阳性组(80例)及阳性组(60例);另选60名体检健康人员为健康对照组。观察Th1/Th2、IL-17、糖类抗原(CA125)、细胞角质蛋白19片抗原21-1(CYFRA21-1)、糖类抗原(CA153)、癌胚抗原(CEA)水平变化,探究6项指标联合检测预测乳腺癌预后及复发的临床价值。结果:对比分析临床病理特征与复发、组织学分级、肿瘤直径、淋巴结转移有关,差异有统计学意义(x^(2)=7.552、12.037、12.063、8.543,P<0.05)。多因素分析显示,肿瘤复发、组织分级、肿瘤直径、淋巴结转移为乳腺癌患者预后的重要因素(OR=3.096、3.050、3.425、3.031,P<0.05)。与Th1/Th2、IL-17、CA125、CYFRA21-1、CA153、CEA单项预测相比,6项指标联合预测对乳腺癌患者预后及复发临床价值较高,灵敏度96%,准确率93.46%,特异度85%。结论:观察乳腺癌患者体内Th1/Th2、IL-17、CA125、CYFRA21-1、CA153及CEA的6项指标联合预测水平变化,联合检测具有高灵敏度和高准确率的特点,其高效便捷的检测方式可以为改善预后,降低复发,提升评估准确率提供参考。

积雪草酸调控白细胞介素-6/信号转导子和转录激活子3/核转录因子-κB通路对哮喘小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响

目的:探讨积雪草酸调控白细胞介素(IL)-6/信号转导子和转录激活子3(STAT3)/核转录因子-κB(NF-κB)通路对哮喘小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响。方法:采用卵清蛋白(OVA)致敏和激发来制备哮喘小鼠模型,随机分为模型组、积雪草酸低剂量组(54 mg/kg)、积雪草酸高剂量组(108 mg/kg)、积雪草酸高剂量(108 mg/kg)+Colivelin(IL-6/STAT3/NF-κB激活剂,2 mg/kg)组,每组各10只。另选10只小鼠在致敏和激发阶段给予等剂量生理盐水设为对照组,用积雪草酸和Colivelin分组处理各组小鼠后检测其肺组织病理形态,肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞计数,外周血Treg/Th17,BALF和血清中Treg、Th17细胞分泌因子水平,肺组织IL-6/STAT3/NF-κB通路相关蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组小鼠肺组织发生明显病理损伤,外周血Treg细胞占比和Treg/Th17,BALF和血清IL-10、IL-35水平降低(P<0.05)。肺部炎症评分,BALF中白细胞计数与嗜酸粒细胞计数,外周血Th17细胞占比,BALF和血清IL-17、IL-6水平,肺组织IL-6蛋白表达与p-STAT3/STAT3、p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P<0.05)。低、高剂量积雪草酸可逆转哮喘模型小鼠上述病理变化,且高剂量积雪草酸作用更强。Colivelin可减弱积雪草酸对哮喘模型小鼠上述病理变化的作用。结论:积雪草酸可通过减弱IL-6表达与STAT3、NF-κB的磷酸化,抑制哮喘小鼠炎症细胞及炎症因子产生,从而减轻气道炎症及肺组织损伤,改善肺功能。

川芎-独活-牛膝配伍在骨关节炎发病中TH17/Treg细胞免疫平衡的调节作用

目的:探讨川芎-独活-牛膝配伍在骨关节炎发病中Th17/Treg细胞免疫平衡的调节作用。方法:购置SPF级无菌C57BL/6小鼠40只,随机取小鼠10只为空白对照组;剩余30只小鼠采用Hulth-Telhag方法构建膝关节炎动物模型,并随机分为模型组、异戊酸组和川芎-独活-牛膝配伍组,各10只。空白对照组和模型组腹腔灌注等体积生理盐水,异戊酸组腹腔灌胃异戊酸,川芎-独活-牛膝配伍组采用川芎-独活-牛膝水煎液灌胃,各组均持续7d干预,比较各组HE染色结果、炎性因子水平及Th17/Treg细胞免疫。结果:HE染色下异戊酸组伴有轻度关节软骨破坏,可见少许炎症细胞浸润;川芎-独活-牛膝配伍组关节软骨破坏不明显,炎症细胞亦相对较少;川芎-独活-牛膝配伍组IL-17、IL-6、IL-4低于异戊酸组(P<0.05);IL-10和TGF高于异戊酸组(P<0.05);流式细胞仪测定结果表明:川芎-独活-牛膝配伍组干预7d后Th17细胞低于异戊酸组和模型组(P<0.05);Treg细胞高于异戊酸组和模型组(P<0.05)。结论:川芎-独活-牛膝配伍用于骨关节炎中能减轻膝关节滑膜及软组织损伤,降低体内炎性因子水平,其机制可能与Th17/Treg细胞免疫平衡的调节有关。

梓醇调控miR-143-3p干预Th17糖酵解和细胞分化的机制

目的探讨生地活性成分CAT通过调控miR-143-3p干预Th17糖酵解和细胞分化的机制。方法选取(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血CD4^(+)T细胞,检测miR-143-3p及糖酵解酶Glut1、HK2、PKM2、LDHA mRNA表达;体外诱导Th17分化,结合慢病毒转染诱导miR-143-3p低/高表达,未转染的细胞分为Control组、CAT组(20、40、80 mg·L^(-1)),转染细胞分为Control组、miR-143-3p上/下调组、miR-143-3p下调+CAT组,流式、qPCR、ELISA等检测Th17分化比例、miR-143-3p及糖酵解酶表达、上清液中IL-17A、丙酮酸、乳酸水平。结果RA CD4^(+)T细胞中miR-143-3p表达与DAS28、RORγt、Glut1/HK2/LDHA均呈负相关;miR-143-3p下调时Th17分化、Glut1/HK2/LDHA表达及丙酮酸分泌明显升高,miR-143-3p上调时则相反;CAT可明显上调miR-143-3p,降低HK2/LDHA mRNA及丙酮酸、乳酸水平,抑制Th17分化;CAT干预后可恢复miR-143-3p抑制状态下的HK2/LDHA mRNA水平异常上调、丙酮酸/乳酸分泌增多及Th17异常分化。结论miR-143-3p可负调控Th17糖酵解及细胞分化,CAT可通过调控miR-143-3p明显改善Th17细胞的异常分化和糖酵解异常上调。

栀子苷调节PI3K/AKT/mTOR信号通路在动脉粥样硬化形成过程中对Th17/Treg功能的影响

目的:观察栀子苷对载脂蛋白E缺乏(ApoE^(-/-))小鼠Th17/调节性T(Treg)细胞失衡的影响及其作用机制。方法:将50只纯合子ApoE^(-/-)雌性小鼠随机分为对照组、模型组和栀子苷低剂量组、栀子苷中剂量组、栀子苷高剂量组。对照组小鼠喂养普通饲料,模型组和栀子苷组小鼠喂养高脂饲料。从第8周开始,栀子苷各剂量组每日灌胃栀子苷(25、50、100 mg/kg),连续8周。试验结束时,采用油红O染色评估主动脉及其根部动脉粥样硬化(AS)病变面积比。采用定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析主动脉组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-17A和IL-10 mRNA表达;采用流式细胞仪分析脾脏中Th17和Treg细胞百分比;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测主动脉组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白表达。结果:油红O染色病变显示,栀子苷中剂量组、栀子苷高剂量组病变百分比低于模型组(P<0.05)。与对照组比较,模型组主动脉TNF-α、IL-6和IL-17A mRNA表达水平升高(P<0.05);栀子苷各剂量组主动脉TNF-α、IL-6和IL-17A mRNA表达水平降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组主动脉抗炎细胞因子IL-10 mRNA表达水平降低(P<0.05);栀子苷各剂量组主动脉抗炎细胞因子IL-10 mRNA表达水平升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠脾脏中Th17细胞百分比升高,Treg细胞百分比降低(P<0.05)。栀子苷处理恢复了AS小鼠Th17和Treg细胞的平衡。栀子苷抑制PI3K的表达及AKT和mTOR的磷酸化,MHY1485(mTOR活化剂)减弱了栀子苷对T细胞分化的影响。结论:栀子苷抗AS作用机制可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号引起的Treg细胞增多和Th17细胞减少有关。

ITP患者外周血Th9、Th17和Treg细胞水平及IL-9、IL-17和TGF-β表达在ITP发病中的作用

目的:检测免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血Treg、Th17、Th9细胞水平及转化生长因子-β(TGF-β)、白介素-17(IL-17)、白介素-9(IL-9)表达水平并探讨他们在ITP发病中的意义。方法:对54例ITP患者(病例组)与40例健康体检者(对照组)外周血Treg、Th17、Th9细胞水平,用流式细胞术检测2组外周血中TGF-β、IL-17、IL-9等细胞因子的表达用酶联免疫吸附法测定。结果:病例组外周血Treg细胞比例较对照组显著降低,而Th17、Th9细胞比例较对照组均显著升高(P <0.01)。病例组外周血中细胞因子TGF-β的表达水平较对照组显著降低,而IL-17、IL-9的表达水平较对照组均显著升高(P <0.01)。经Pearson相关性分析发现,病例组外周血Treg细胞比例与血小板计数(Plt)存在正相关关系(r=0.35,P <0.05),而Th17、Th9细胞比例与Plt均存在负相关关系(r=-0.37、-0.43,均P <0.05);病例组细胞因子TGF-β的表达水平与Plt存在正相关关系(r=0.46,P <0.05),而IL-17、IL-9的表达水平与PLT均存在负相关关系(r=-0.48、-0.54,均P <0.05)。结论:ITP患者外周血Treg、Th17、Th9细胞比例异常,伴有细胞因子TGF-β、IL-17、IL-9表达水平异常,提示可能在ITP的免疫发病中发挥着重要作用。

苦参碱可抑制Th17所诱导的角质形成细胞IL-17RA、IL-21R及IL-22R1的表达

目的考察苦参碱(matrine,Mat)对Th17诱导的角质形成细胞(keratinocytes,KC)系HaCaT细胞白细胞介素-17受体A(IL-17RA)、白细胞介素-21受体(IL-21R)及白细胞介素-22受体1(IL-22R1)表达的影响。方法培养HaCaT细胞,用Th17分泌的主要效应因子IL-17A(10ng/mL)、IL-21(10ng/mL)及IL-22(10ng/mL)联合刺激HaCaT细胞模拟类银屑病样细胞模型,再用10μg/mL及100μg/mL的Mat干预此细胞模型,采用RT-qPCR及Western blot方法检测IL-17RA、IL-21R及IL-22R1的表达变化。结果 IL-17RA、IL-21R及IL-22R1的mRNA及蛋白在HaCaT细胞上有表达。IL-17A、IL-21及IL-22联合刺激可以显著促进HaCaT细胞IL-17RA、IL-21RmRNA及蛋白表达,IL-22R1蛋白的表达量升高(P<0.05)。Mat单独干预或与上述细胞因子联合干预组与未处理的HaCaT细胞组相比,IL-17RA、IL-21R及IL-22R1表达无显著下降(P>0.05),但可以显著降低IL-17A、IL-21及IL-22联合刺激后所升高的受体蛋白表达(P<0.05)。结论 IL-17A、IL-21及IL-22联合刺激角质形成细胞可以增强IL-17RA、IL-21R及IL-22R1的表达,Mat可抑制这种增强作用,可能在多种Th17介导的免疫性皮肤病中发挥抗炎作用。

大黄素对病毒性心肌炎小鼠IL-23/IL-17炎症轴、Th17细胞及病毒复制的影响

目的探讨大黄素对病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌的保护作用及其分子机制。方法 55只雄性BALB/c小鼠随机分为对照组(n=15)、模型组(n=20)及大黄素组(n=20),模型组、大黄素组小鼠腹腔接种0.1 ml内含柯萨奇病毒B3(CVB3)的Eagle's液建立VMC模型,对照组仅注射Eagle’s液,于接种当天,大黄素组以3 mg/ml大黄素溶液0.1 ml灌胃,其余2组以0.1 ml蒸馏水灌胃,1次/d,共21 d,记录实验期间小鼠死亡数目,比较各组死亡率。第7天每组处死5只小鼠,取心脏,测定病毒滴度。第22天称体质量(BW)后处死全部小鼠,收集外周血,剥离心脏,称心脏质量(HW),计算HW/BW,行HE染色计算心肌病理积分,采用荧光实时定量PCR、Western blotting分别检测心肌白介素-23(IL-23)、白介素-17(IL-17)mRNA和蛋白表达,通过酶联免疫吸附法测定血清IL-23、IL-17浓度,流式细胞术分析Th17细胞频率,利用Western blotting测定心肌细胞核内核因子-κB(NF-κB)p65表达,ELISA分析心肌白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果大黄素组死亡率、心肌病理积分及病毒滴度较模型组减少(P<0.05)。模型组HW/BW、心肌IL-23及IL-17 mRNA与蛋白表达水平、血清IL-23和IL-17浓度、Th17细胞频率、胞核NF-κB p65表达水平及心肌IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著高于对照组(P<0.01),与模型组比较,大黄素组上述指标明显降低(P<0.05)。结论大黄素可能通过抑制IL-23/IL-17炎症轴、Th17细胞增殖及病毒复制发挥抗VMC作用。

白芍总苷联合NB-UVB照射对寻常型银屑病患者外周血Th17、Th22及血清IL-17A、IL-22的影响

目的:通过检测白芍总苷(TGP)联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗寻常型银屑病患者外周血Th17、Th22细胞及血清中IL-17A、IL-22的水平,探讨TGP联合NB-UVB治疗寻常型银屑病的作用机制。方法:59例寻常型银屑病患者(进行期31例,稳定期28例),采用口服TGP 600mg 3/d及NB-UVB治疗(隔日1次),以PASI评分评价疗效;于治疗前、后采用流式细胞术(FCM)检测外周血Th17、Th22细胞百分比,双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-17A、IL-22的含量。选择30例健康体检者作为对照组。结果:实验组治疗前Th17、Th22及IL-17A、IL-22水平均明显高于健康对照组(P<0.01),治疗后与治疗前相比下降明显(P<0.01),治疗后PASI评分与治疗前比较下降明显(P<0.05)。结论:TGP联合NB-UVB治疗寻常型银屑病可能为:通过抑制患者外周血中Th17、Th22细胞分泌IL-17A、IL-22进而抑制炎症反应。

呼吸道合胞病毒感染支气管上皮细胞介导IL-8致Th17/Treg失衡

目的:探讨呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染导致哮喘易感性增加的机制,观察人支气管上皮细胞感染RSV后IL-8的表达,以及IL-8对Th17/调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Treg)分化的调节作用。方法:将人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBECs)分为对照组和RSV感染组,构建并验证RSV持续感染HBECs模型,real-time PCR检测对照组和RSV感染组中IL-8 m RNA的表达;ELISA检测感染细胞上清液中IL-8的浓度。提取健康人外周血淋巴细胞并将其分为空白对照组和IL-8作用组,参照ELISA检测到的浓度将IL-8作用于淋巴细胞24 h,采用流式细胞仪检测淋巴细胞中Th17和Treg亚群的分布情况。结果:本实验成功构建RSV持续感染HBECs模型,感染后的细胞仍能够继续分裂传代,并可检测到RSV持续存在的证据。免疫荧光显示细胞内有RSV致病蛋白的荧光表达;电镜下观察到感染细胞的线粒体水肿和内质网扩张,出现核周裂隙以及合胞现象,细胞核、胞浆内有病毒颗粒分布。Real-time PCR和ELISA分别检测到RSV感染组细胞内IL-8 m RNA表达和上清液中IL-8的分泌水平均高于对照组(均P<0.05)。进一步将IL-8作用于淋巴细胞,流式细胞学结果表明IL-8作用组淋巴细胞中Th17亚群比率增高(P<0.05),但Treg亚群比率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:RSV感染气道上皮细胞后可通过过度分泌IL-8而引起Th 17/Treg亚群分化异常。

多发性骨髓瘤患者Th17细胞及IL-17水平与患者发病的相关性分析

目的:探讨多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者Th17细胞及IL-17水平与患者发病的相关性。方法:比较45例MM患者(MM组)和45例健康志愿者(对照组)Th17细胞比例、IL-17水平和β2-微球蛋白水平检测结果,进一步将MM组按照ISS分期和治疗情况的进行分组,观察不同ISS分期和治疗情况患者Th17细胞比例和IL-17水平变化,并分析β2-微球蛋白与Th17细胞比例和IL-17水平的相关性。结果:MM组患者Th17细胞比例和IL-17水平均显著高于对照组(P<0.05);ISSⅢ期患者Th17细胞比例和IL-17水平均明显高于ISSⅠ、Ⅱ期患者,差异显著(P<0.05);ISSⅠ和Ⅱ期患者Th17细胞比例和IL-17水平无统计学差异(P>0.05);初治者、复发难治者Th17细胞比例和IL-17水平均明显高于治疗有效者(P<0.05);初治者与复复难治者Th17细胞比例和IL-17水平无统计学差异(P>0.05);MM患者的Th17细胞比例和IL-17水平均与β2-微球蛋白水平呈明显正相关(r=0.422,r=0.416,P<0.05)。结论:Th17细胞比例和IL-17水平异常升高与MM的发病有密切联系,Th17细胞比例和IL-17水平可作为评估ISS分期和判断治疗效果的重要依据。

10-羟基喜树碱对类风湿关节炎患者Th17细胞功能的影响

目的:探讨10-羟基喜树碱(HCPT)对类风湿关节炎(RA)患者外周血Th17细胞功能的影响。方法:将60例RA患者随机分为3组(HCPT组、阳性对照组及阴性对照组),选取20例健康查体者为正常对照。采集各组患者外周血并分离单个核细胞,HCPT和阳性对照组分别加入HCPT和甲氨蝶呤(MTX)进行培养,余2组不加药。加药前和加药48h后,采用流式细胞术测定Th17细胞百分率,ELISA法检测培养上清中IL-17水平。结果:RA患者Th17细胞百分率和培养上清中IL-17水平均高于正常对照组(t=47.021、12.507,P均<0.001)。培养后,HCPT组和阳性对照组患者Th17细胞百分率和培养上清中IL-17水平较阴性对照和正常对照组明显降低(F=418.743、142.112,P<0.001),HCPT组和阳性对照组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HCPT可抑制RA患者Th17细胞的功能,在RA治疗方面具有潜在应用价值。

黄芪注射液对急性病毒性心肌炎患儿血清IL-23、IL-17水平及Th17细胞的影响

目的:探讨黄芪注射液对急性病毒性心肌炎(AVM)患儿血清白介素-23(IL-23)、白介素-17(IL-17)水平及Th17细胞的影响。方法:将64例AVM患儿随机分为常规组和黄芪组,每组32例,常规组予常规治疗,黄芪组在此治疗基础上加用黄芪注射液,评价两组患儿临床疗效,比较两组治疗前后血清IL-23、IL-17水平及Th17细胞频率,另取同期20名健康儿童作为正常对照组。结果:黄芪组总有效率明显高于常规组(P<0.05)。黄芪组和常规组治疗前血清IL-23、IL-17水平及Th17细胞频率均显著高于正常对照组(P<0.01)。黄芪组和常规组治疗后血清IL-23、IL-17水平及Th17细胞频率均较治疗前下降(P<0.01或0.05),且黄芪组治疗后血清IL-23、IL-17水平及Th17细胞频率低于常规组治疗后(P<0.05)。结论:黄芪注射液可能通过减少AVM患儿血清IL-23、IL-17水平及Th17细胞频率,抑制炎症反应,提高临床疗效。

大鼠胶原诱导性关节炎关节滑膜Treg/Th17平衡及TNF-α拮抗剂的影响

目的:探讨胶原诱导性关节炎(CIA)关节滑膜Treg/Th17平衡状态以及TNF-α拮抗剂TNFR-Fc对Treg/Th17的影响。方法:建立CIA模型,观察踝关节组织病理变化,ELISA检测血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α),免疫荧光双标法检测关节滑膜Treg/Th17的表达。结果:CIA组TNF-α较正常对照组及TNFR-Fc治疗组显著升高(P<0.01),TNFR-Fc治疗组与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05);CIA组滑膜组织的CD4+Foxp3+Treg/CD4+细胞比例与正常对照组比较无明显差异(23.12%±4.93%vs 24.66%±5.82%,P>0.05),而TNFR-Fc治疗组则升高明显(33.07%±5.14%);CIA组CD4+RORγt+Th17/CD4+细胞比例显著增高(9.74%±2.23%vs正常对照组1.00%±0.59%,TNFR-Fc治疗组5.63%±1.76%,P<0.01)。结论:CIA大鼠关节滑膜存在Treg/Th17分化失衡;TNFR-Fc可能通过抑制关节滑膜Th17细胞分化,诱导Treg细胞生成/聚集,使得病变关节的Treg/Th17平衡得以恢复。

小檗碱对结肠炎小鼠Th17/Treg细胞分化及IL-35的影响

目的研究Th17、Treg细胞分化及白细胞介素-35(IL-35)在小鼠结肠炎发病中的作用,探讨小檗碱对小鼠结肠炎的治疗作用和作用机制。方法将40只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组和小檗碱组,每组10只。正常组未行造模,其余3组均采用三硝基苯磺酸进行结肠炎造模。造模24 h后,小檗碱组小鼠给予小檗碱腹腔注射,地塞米松组小鼠给予地塞米松腹腔注射,模型组和正常组小鼠均以生理盐水腹腔注射,均1次/d,共7 d。第8天处死各组小鼠,观察小鼠结肠黏膜大体形态及组织病理评分,用流式细胞仪检测小鼠脾脏Th17、Treg细胞分化情况,ELISA法检测小鼠结肠组织中IL-35表达情况。结果与正常组比较,模型组小鼠脾脏Th17细胞比例显著升高(P <0. 05),Treg细胞比例显著降低(P <0. 05),结肠组织中IL-35表达水平显著降低(P <0. 05);与模型组比较,小檗碱组、地塞米松组小鼠脾脏Th17细胞比例显著降低(P均<0. 05),而Tregs细胞比例显著升高(P均<0. 05),且结肠组织中IL-35表达水平显著升高(P均<0. 05)。结论脾脏Th17/Treg细胞失衡,促炎细胞Th17细胞分化增加、免疫抑制细胞Treg细胞降低及结肠IL-35分泌减少参与了结肠炎的发生发展过程,而小檗碱可以通过抑制小鼠脾脏Th17细胞分化,促进Treg细胞分化和IL-35表达,起到减轻结肠黏膜炎症的作用。

γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch通路并纠正脑卒中后抑郁大鼠Th17/Treg失衡

目的:探究γ-分泌酶抑制剂DAPT对Notch信号通路和脑卒中后抑郁(PSD)大鼠辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)失衡的影响。方法:SD大鼠采用线栓法结合慢性不可预知性温和应激(CUMS)刺激及孤养建立PSD模型,随机分为PSD组(等量生理盐水)和DAPT组(5 mg/kg DAPT),假手术(sham)组(等量生理盐水)为对照,每组10只。各组大鼠分别于术前(0 d)及术后7、14、21和28 d进行体重检测、敞箱实验(OFT)及蔗糖偏爱实验(SPT)。干预结束后,采用RT-qPCR和Western blot分别检测脑组织海马Notch1和Hes1 mRNA及蛋白表达水平,流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中Th17和Treg细胞比例,ELISA法检测血清白细胞介素17(IL-17)和IL-10水平。结果:术后7、14、21和28 d,与sham组比较,PSD组大鼠体重、水平运动评分、垂直运动评分和糖水消耗比例均显著降低(P<0.05),其中7和14 d PSD组与DAPT组大鼠体重、水平运动评分、垂直运动评分和糖水消耗比例差异无统计学意义(P>0.05);与PSD组比较,21和28 d DAPT组大鼠体重、水平运动评分、垂直运动评分和糖水消耗比例显著增加(P<0.05)。干预结束后,与sham组比较,PSD组大鼠海马Notch1和Hes1 mRNA及蛋白表达水平,PBMC中Th17细胞比例和Th17/Treg比值,以及血清IL-17水平显著升高(P<0.05),Treg细胞比例和血清IL-10水平显著降低(P<0.05);与PSD组比较,DAPT组大鼠海马Notch1和Hes1 mRNA及蛋白表达水平,PBMC中Th17细胞比例和Th17/Treg比值,以及血清IL-17水平显著降低(P<0.05),Treg细胞比例和血清IL-10水平显著升高(P<0.05)。结论:DAPT可阻断Notch信号通路并减轻PSD大鼠抑郁样症状,其机制可能与调节Th17/Treg失衡及炎症因子分泌有关。