miR-152-3p表达下调降低紫杉醇耐药人卵巢癌细胞A2780T对紫杉醇的耐药性

目的探讨miR-152-3p对紫杉醇耐药人卵巢癌细胞A2780T对紫杉醇耐药性的影响及机制。方法①紫杉醇(1.875,3.75,7.5,17和23μmol·L^(-1))与人卵巢癌A2780和A2780T细胞作用48 h,MTT法检测细胞存活率,计算抑制细胞存活半数抑制浓度(IC50)值和耐药指数(RI)。Western印迹法检测A2780和A2780T细胞耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)蛋白表达。②实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测A2780和A2780T细胞miR-152-3p表达水平。脂质体瞬时转染技术转染miR-152-3p抑制物降低A2780T细胞中miR-152-3p表达(miR-152-3p抑制物组),同时设转染miR-152-3p阴性对照组,RT-qPCR检测转染效率,MTT法、划痕实验和流式细胞术分别检测转染miR-152-3p抑制物对A2780T细胞存活、迁移和凋亡的影响;Western印迹法检测转染miR-152-3p抑制物对A2780T细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。③用miRDB,Targetscan,miRWalk和Starbase数据库预测miR-152-3p的靶基因,并用Western印迹法检测转染miR-152-3p抑制物后A2780T细胞磷酸酯酶张力蛋白同源物(PTEN)蛋白表达的变化及RT-qPCR检测A2780和A2780T细胞PTEN mRNA表达水平予以验证。随后,脂质体瞬时转染技术转染PTEN siRNA沉默A2780T细胞中PTEN表达,同时设转染siRNA阴性对照组,RT-qPCR检测转染效率,MTT法检测沉默PTEN表达后A2780T细胞存活率和IC50值,Western印迹法检测P-gp,MRP1和ABCG2蛋白表达。结果①紫杉醇处理后A2780和A2780T细胞存活率均降低(P<0.01),A2780T细胞RI为2.8。与A2780细胞相比,A2780T细胞P-gp,MRP1和ABCG2蛋白高表达(P<0.05,P<0.01)。②与A2780细胞相比,A2780T细胞miR-152-3p明显高表达(P<0.01)。与转染miR-152-3p阴性对照组比较,转染miR-152-3p抑制物后A2780T细胞存活率(P<0.05,P<0.01)和细胞迁移能力(P<0.05)明显降低,细胞凋亡率升高(P<0.01);Bax蛋白表达增加(P<0.01),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。③生物信息学数据库分析结果提示,PTEN是miR-152-3p的一个靶基因;Western印迹法验证显示,转染miR-152-3p抑制物组A2780T细胞PTEN蛋白表达低于转染miR-152-3p阴性对照组(P<0.05);RT-qPCR结果显示,A2780T细胞PTEN mRNA表达水平高于A2780细胞(P<0.01)。转染PTEN siRNA沉默PTEN表达后,与转染siRNA阴性对照组相比,A2780T细胞存活率(P<0.05,P<0.01)和IC50值(P<0.01)显著降低,P-gp,MRP1和ABCG2蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论miR-152-3p在A2780T细胞中高表达,其表达下调可抑制A2780T细胞增殖和迁移,促进细胞凋亡,降低A2780T细胞对紫杉醇的耐药性,该作用可能是通过降低其靶基因PTEN表达发挥的。

孕妇外周血miR-152 miR-210与子痫前期病情程度及妊娠结局的相关性研究

目的:探究孕妇外周血微小RNA-152(miR-152)、miR-210与子痫前期(PE)病情程度及妊娠结局的相关性。方法:选取2018年7月至2022年5月我院200例PE患者,根据病情严重程度分为轻度组(轻度PE患者,n=114)和重度组(重度PE患者,n=86),另选同期、同年龄段健康孕妇作为对照组(n=100)。比较三组血压[收缩压(SBP)、舒张压(DBP)]、24h尿蛋白定量(24h Upro)、钙离子(Ca^(+))、外周血miR-152、miR-210水平,分析外周血miR-152、miR-210水平与PE病情程度、血压、24h Upro及Ca^(+)相关性。PE患者随访至妊娠结束,比较不同妊娠结局PE患者临床资料、外周血miR-152、miR-210水平,通过Lasso回归和Logistic回归分析预测因素与不良妊娠结局的关联性,通过受试者工作特征曲线(ROC)、临床决策曲线(DCA)评价外周血miR-152、miR-210对预测PE患者发生不良妊娠结局的价值及临床效用。结果:重度组、轻度组、对照组SBP、DBP、24h Upro、外周血miR-152、miR-210水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);外周血miR-152、miR-210水平与PE病情程度、血压、24h Upro呈正相关(P<0.05),与Ca^(+)水平呈负相关(P<0.05);发生不良妊娠结局年龄、流产史、病情程度、SBP、DBP、24h Upro、Ca^(+)、外周血miR-152、miR-210水平与未发生不良妊娠结局患者比较,差异有统计学意义(P<0.05);Lasso回归选出5个预测变量为病情程度、SBP、24h Upro、外周血miR-152、miR-210水平;Logistic回归显示,外周血miR-152、miR-210水平是PE患者发生不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.05);ROC、DCA结果显示,外周血miR-152、miR-210联合预测PE患者发生不良妊娠结局具有良好的预测价值和临床效用。结论:外周血miR-152、miR-210在PE患者中表达上调,且与病情程度、妊娠结局显著相关,其联合预测患者发生不良妊娠结局具有一定参考价值和临床效用。

miR-152-3p通过AKT/GSK-3β/Nrf2信号通路促进脑出血大鼠神经元铁死亡

目的:探讨miR-152-3p通过AKT/GSK-3β/Nrf2信号通路促进脑出血(ICH)大鼠神经元铁死亡的机制。方法:使用大鼠神经元细胞为研究对象,采用氧合血红蛋白(oxyHb)刺激神经元细胞构建ICH体外细胞模型,分别将miR-152-3p inhibitor和(或)PIK3CA抑制剂分别处理细胞,采用流式细胞术观察细胞凋亡情况,RT-qPCR、Western blot检测相关基因和蛋白表达情况;并用细胞免疫荧光观察Nrf2蛋白的入核率;用双荧光素酶靶标实验验证miR-152-3p与PIK3CA的关系。结果:将miR-152-3p inhibitor转染的细胞构建ICH细胞模型后,细胞凋亡率明显降低(P<0.01);SLC7A11、GPx4、PIK3CA、Nrf2蛋白表达水平以及p-AKT/AKT比率显著升高而GSK-3β蛋白表达水平显著降低(P<0.01);同时,Nrf2蛋白入核量也显著升高(P<0.01);而此作用在使用PIK3CA抑制剂干预后,miR-152-3p inhibitor的改善效果消失;荧光素酶靶标实验证实,miR-152-3p可靶向调控PIK3CA。结论:miR-152-3p通过AKT/GSK-3β/Nrf2信号通路促进ICH大鼠神经元铁死亡。

子宫内膜息肉组织中miR-152和miR-146b-5p的表达及意义

目的探讨微小RNA(miR)-152和miR-146b-5p在子宫内膜息肉中的表达,及其对术后复发的预测价值。方法收集2021年1月至2022年10月在石家庄市第六医院接受宫腔镜息肉切除术的196例子宫内膜息肉患者作为子宫内膜息肉组,根据患者术后6个月的复发情况分为复发组(53例)和未复发组(143例),另选取同期因不孕症进行宫腔镜检查的196例患者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测子宫内膜息肉组织和正常子宫内膜组织中miR-152、miR-146b-5p相对表达水平,并进行组间比较;采用多因素Logistic回归分析子宫内膜息肉患者术后复发的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析子宫内膜息肉中miR-152、miR-146b-5p相对表达水平对子宫内膜息肉患者术后复发的预测价值。结果复发组miR-152、miR-146b-5p相对表达水平、孕激素受体(PR)水平明显低于未复发组和对照组(P<0.05),血管内皮生长因子(VEGF)、雌激素受体(ER)水平明显高于未复发组和对照组(P<0.05);未复发组miR-152、miR-146b-5p相对表达水平、PR水平明显低于对照组(P<0.05),VEGF、ER水平明显高于对照组(P<0.05)。进一步研究显示,miR-152、miR-146b-5p、VEGF、ER、PR是子宫内膜息肉患者术后复发的影响因素(P<0.05)。miR-152、miR-146b-5p二者联合预测子宫内膜息肉患者术后复发的曲线下面积(AUC)为0.949,灵敏度为96.23%,特异度为74.02%,优于二者各自单独预测(Z联合检测-miR-152=4.854、Z联合检测-miR-146b-5p=3.431,P<0.001)。结论子宫内膜息肉组织中miR-152、miR-146b-5p表达明显下调,二者联合对预测子宫内膜息肉患者术后复发有较好的参考价值。

152m^(2) 沸腾焙烧炉产能提升的浅析

在常规湿法炼锌过程中,锌精矿的沸腾焙烧是第一道工序,也是制约生产产能的瓶颈。文章结合实际生产过程,介绍了提高152m^(2)沸腾焙烧炉生产能力的实践经验,通过精细化配料,优化工艺控制,富氧焙烧,搭配适量焙砂以及合理增加冷却盘管等方式,达到提升产能稳定运行的目的。

左心室舒张功能结合血清微小RNA-152-5p、潜在转化生长因子结合蛋白2水平与射血分数保留的心力衰竭患者左心室重构的相关性

目的探讨左心室舒张功能结合血清微小RNA-152-5p(miR-152-5p)、潜在转化生长因子结合蛋白2(LTBP-2)水平与射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)患者左心室重构的相关性。方法选取2019年8月至2020年8月在唐山中心医院进行治疗的HFpEF患者48例为HFpEF组,同期健康体检者52例为对照组。以实时荧光定量PCR法和酶联免疫吸附试验法分别检测血清miR-152-5p、LTBP-2水平。研究对象均进行超声心动图检查,收集二尖瓣环舒张早期峰值速度(E')、晚期峰值充盈速度(A)、二尖瓣口舒张早期峰值充盈速度(E)、左心室舒张末期内径(LVIDd)、舒张末期后壁厚度(PWTd)、舒张末期室间隔厚度(IVSTd),并计算E/A、E/E'及左心室质量(LVM)值。使用Pearson法分析血清miR-152-5p、LTBP-2、E/A、E/E'与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM之间的相关性。结果HFpEF组患者E/A值低于对照组,血清miR-152-5p、LTBP-2水平及E/E'值高于对照组,差异有统计学意义(t=12.722、21.830、9.882、15.979,P<0.05)。HFpEF组患者的LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM水平高于对照组,差异有统计学意义(t=2.044、2.894、5.733、3.973,P<0.05)。HFpEF组患者血清miR-152-5p、LTBP-2、E/E'表达水平均与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM呈正相关(r=0.447、0.425、0.437、0.473、0.414、0.338、0.422、0.347、0.492、0.412、0.385、0.367,P<0.05);E/A与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM呈负相关(r=-0.441、-0.374、-0.369、-0.438,P<0.05)。结论血清miR-152-5p、LTBP-2水平以及E/E'值、E/A水平与HFpEF患者左心室重构有关。

智能驾驶法规之UN R152与UN R131新旧法规探讨

近年来在保险业、汽车安全组织和政府的共同推动下,AEBS成为越来越多车型的标准配置,各家车厂都积极推动发展并配备到近几年出厂的最新车款上,将AEBS功能等作为新车上市的重要卖点之一。随着自动驾驶的继续发展,AEBS可能还会向着更高性能延展。欧盟新的准入UN R152明确要求自2022年7月8日起,新准入轻型车均需配置AEBS功能。UN R152法规主要包含车对车、车对二轮车、车对行人和误触发四大场景。R131新版已于2022年7月实施,与原版本相比,新版本有多处变化。基于此,采用新旧法规比较的方法,对两者的更新进行探讨。

miR-152-3p对非小细胞肺癌A549细胞顺铂敏感性的作用及分子机制研究

目的:探究miR-152-3p对非小细胞肺癌A549细胞顺铂敏感性的作用及其分子机制。方法:采用顺铂处理体外培养的A549细胞,检测细胞内miR-152-3p、SOS1表达水平的变化;采用荧光素酶活性检测法分析miR-152-3p与SOS1的调控关系。A549细胞转染miR-152-3p慢病毒过表达载体、SOS1慢病毒过表达载体或慢病毒空载体,采用顺铂处理转染的细胞,比较miR-152-3p过表达或SOS1过表达对A549细胞增殖、细胞周期、凋亡及迁移的影响。结果:与正常培养的A549细胞相比,顺铂处理的A549细胞内miR-152-3p表达水平显著降低,而SOS1表达水平显著升高(P<0.05);生物信息学分析显示SOS1是miR-152-3p的一个潜在靶基因,而荧光素酶活性检测法分析显示miR-152-3p具有负调控SOS1的作用。与转染空载体的A549细胞相比,miR-152-3p过表达显著抑制A549细胞增殖及迁移、阻滞细胞周期、促进细胞凋亡(P<0.05)。miR-152-3p过表达的A549细胞内SOS1表达水平显著低于转染空载体的细胞(P<0.05);与单独转染miR-152-3p过表达载体的细胞相比,同时转染miR-152-3p过表达载体和SOS1慢病毒过表达载体的A549细胞增殖、迁移增强,且细胞凋亡受到显著抑制(P<0.05)。结论:miR-152-3p通过抑制SOS1表达增强A549细胞对顺铂的敏感性,继而抑制A549细胞增殖、迁移,阻滞细胞周期以及促进A549细胞凋亡。

MiR-152-3p靶向调控KLF4促进结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:探讨微小RNA-152-3p(miR-152-3p)在结肠癌(CC)中的表达情况及靶向Krüppel样因子4(KLF4)对CC细胞的增殖、迁移和侵袭的影响。方法:通过starBase及TCGA数据库分析预测miR-152-3p与KLF4之间的靶向关系,以及各自在正常组织和CC组织中的表达情况差异;双荧光素酶和RIP实验验证miR-152-3p与KLF4之间的靶向关系;RT-q PCR检测miR-152-3p与KLF4在CC细胞系中的mRNA表达量;Western blot实验检测KLF4在CC细胞系中的蛋白表达水平;MTT实验检测细胞的增殖能力;划痕愈合实验检测细胞的迁移能力;Transwell实验检测细胞的侵袭能力;细胞周期实验和凋亡实验检测细胞的周期分布情况和凋亡百分率。结果:miR-152-3p在CC组织和细胞系中高表达(P<0.001),而KLF4低表达(P<0.01),且miR-152-3p能够靶向下调KLF4的表达(P<0.01)。miR-152-3p过表达能增高CC细胞系的增殖、迁移和侵袭能力,降低细胞周期在G0/G1期的分布,并抑制其凋亡(P<0.05);KLF4过表达可以抑制miR-152-3p对CC细胞增殖、迁移和侵袭能力的促进作用(P<0.05),使G0/G1期细胞比例增加(P<0.05),并促进细胞凋亡(P<0.05)。结论:miR-152-3p通过靶向下调KLF4的表达促进CC细胞的增殖、迁移和侵袭。

敦煌莫高窟第152窟初探

莫高窟第152窟是敦煌石窟晚期营建的重要大型洞窟,关于此窟的营建年代,特别是背屏后的回鹘风格作品及回鹘文题记,一直以来都没有引起足够的重视。通过对该洞窟的实地调查,对洞窟营建与重修情况进行了系统梳理,并对现存的回鹘风格壁画与回鹘文题记进行解读。认为此窟的营建开始于五代至北宋初期,完成窟顶绘制后很可能经历了短暂的停工,北宋时继续完成全窟壁画的绘制,并同时在后甬道附近绘制了回鹘风格的壁画。此后有回鹘人曾进入此窟,并在背屏上补绘了小型的供养人像。

血清miR-200a、miR-152水平与妊娠滋养细胞肿瘤化疗患者预后的关系

目的探讨血清微小RNA-200a(miR-200a)、微小RNA-152(miR-152)在妊娠滋养细胞肿瘤(GTN)预后中的作用。方法选取100例GTN化疗患者为观察组,根据化疗疗效将患者分为预后良好组80例和预后不良组20例;选取同期体检健康女性103例为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-200a、miR-152表达水平。结果观察组血清miR-200a表达水平高于对照组,miR-152表达水平低于对照组(P<0.05)。随化疗时间延长,预后良好组与预后不良组血清miR-200a表达水平依次降低,miR-152表达水平依次升高(P<0.05)。预后不良组化疗前后血清miR-200a表达水平高于预后良好组,miR-152表达水平低于预后良好组(P<0.05)。预后良好组与预后不良组国际妇产科联盟(FIGO)预后评分、化疗前血HCG水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。化疗前血清miR-200a、miR-152表达水平单独及联合预测GTN化疗患者预后不良的AUC分别为0.793、0.844、0.887。miR-200a、miR-152、FIGO预后评分≥7分与GTN化疗患者预后不良有关(P<0.05)。结论化疗前高表达miR-200a,低表达miR-152可能与GTN化疗患者预后不良有关,可为化疗预后评估提供参考。

外周血Hcy、CD28、CD152水平对儿童中枢神经系统血管炎的诊断及预后评估中的价值

目的探讨外周血同型半胱氨酸(Hcy)、CD28、CD152水平对儿童中枢神经系统血管炎(CNSV)的诊断及预后评估中的应用价值,为早期诊断及预后预测提供参考。方法选取2019年1月至2022年1月该院60例CNSV患儿作为观察组,观察组予以免疫治疗,治疗6个月。另选取同期体检健康者60例作为对照组。检测观察组入院时、对照组体检时外周血指标水平及观察组治疗1个月、3个月及6个月后外周血指标水平,分析其对儿童CNSV的诊断价值及复发的影响因素,并分析外周血Hcy与CD28、CD152交互效应对儿童CNSV复发的影响。结果入组后观察组外周血Hcy、CD28、CD152水平均高于对照组,联合诊断儿童CNSV的曲线下面积为0.912,较单独指标高,差异有统计学意义(P<0.05);复发患儿疾病分期为活动期比例及治疗6个月后外周血Hcy、CD28、CD152水平均高于未复发患儿,差异有统计学意义(P<0.05);疾病分期、治疗6个月后外周血Hcy、CD28、CD152均为儿童CNSV复发的独立危险因素(P<0.05);治疗6个月后Hcy与CD28、Hcy与CD152间无相乘交互效应(P>0.05);治疗6个月后Hcy与CD28、治疗6个月后Hcy与CD152同时暴露时复发风险分别是非暴露的6.535、6.171倍。结论外周血Hcy、CD28、CD152对儿童CNSV有较高诊断价值,且均为复发的独立危险因素,治疗6个月后Hcy与CD28、Hcy与CD152同时暴露可增加儿童CNSV复发的危险性,存在相加交互效应。

草鱼(Ctenopharyngodon idella)长链非编码RNA ISG152-L2激活IRF3和ISG152的表达

长链非编码RNA(lncRNA,非编码RNA≥200 bp)以前被认为是转录中的“噪音”。然而,近年来已经发现了相当多的具有重要功能的lncRNA。LncRNA在疾病、发育、细胞分化和先天免疫反应中起着至关重要的作用。本研究通过使用TopHat2软件和Cufflinks软件分析草鱼的转录组数据,鉴定了与免疫相关的长链非编码RNA。筛选出一个lncRNA序列,命名为ISG152-L2,它位于草鱼ISG152的上游。使用综合基因组学查看器(IGV)测定ISG152-L2和草鱼ISG152的同步表达。研究了ISG152-L2的共表达,并确定了包括草鱼ISG152在内的相关基因网络,功能富集分析表明,这些基因在免疫相关过程中功能富集。用poly(I:C)刺激时,ISG152-L2在被测组织(脑,眼,肠,鳃,心脏,肝胰腺,脾脏和肾脏)中上调。同时,ISG152-L2和ISG152在CIK细胞受到poly(I:C)刺激后均上调。双荧光素酶基因检测发现,CIK细胞中的ISG152-L2显著增强了ISG152启动子活性,并且这种增强取决于ISG152-L2的特定620~1 190 bp区域。免疫共沉淀试验表明,草鱼ISG152可以在体外IRF3相互作用。此外,isg152-l2过表达增加了CIK细胞中IRF3的蛋白质水平,而ISG152-L2的干扰则产生了相反的结果。总之,我们筛选了一个免疫相关的lncRNA,即ISG152-L2,它位于ISG152的上游,并通过诱导其启动子的活性,上调IRF3的蛋白表达水平来增强ISG152的表达。

ssc-miR-152生物信息学及对未成熟猪睾丸支持细胞功能的分析

为研究ssc-miR-152生物信息学特征及对未成熟猪睾丸支持细胞功能的影响,本研究通过NCBI数据库确定ssc-miR-152在猪基因组中的位置,通过MethPrimer和EMBOSS在线软件分析ssc-miR-152上游序列CpG岛,使用Netural Network Promoter Predictio和Promoter-2.0预测其启动子区域,结合AliBaba 2.1和AnimalTFDB3.0软件预测其转录因子结合位点;Clustal W软件分析ssc-miR-152在物种间的保守性,采用CCK-8、流式细胞术和实时荧光定量PCR技术检测细胞增殖、周期及凋亡情况,运用miRanda、EIMMO、TargetScan和PITA在线软件预测ssc-miR-152的靶基因并取交集,并对预测的靶基因进行GO功能及KEGG通路分析,最后利用Cytoscape构建TF-miRNA-mRNA互作网络。结果表明:ssc-miR-152位于猪12号染色体反义链的24 292 249~24 292 328位置,其转录起始位点在上游序列200 bp处,启动子范围为393~4 619,并在该范围内存在1个CpG岛,且有RELA、SP1、SRF、IRF1和EGR1等多个转录因子调控ssc-miR-152的表达。同时发现ssc-miR-152具有高度保守性,在未成熟猪睾丸支持细胞中过表达ssc-miR-152后增强细胞增殖活性、加快细胞的周期进程、抑制细胞凋亡率。互作网络显示ssc-miR-152可调控下游NOG、S1PR1和FBN1等多个基因,参与TGF-β、PI3K/AKT和FoxO等信号通路。本研究说明,ssc-miR-152对未成熟猪睾丸支持细胞生长发育有重要作用,本研究为后续进一步探索未成熟猪睾丸支持细胞机理并对雄性精子发生机理提供理论科学依据。

基于生物信息学分析miR-152在子痫前期发病机制中的作用

目的分析子痫前期(preeclampsia,PE)相关差异表达miRNAs,选择miR-152预测其靶基因并进行生物信息学分析,探讨其参与子痫前期发病的分子机制。方法于GEO数据库中选择子痫前期胎盘组织miRNA差异表达数据集GSE103542,选择上调最显著的miR-152作为研究对象,应用miRDB、TargetScan及miRTarBase软件预测其靶基因并取交集;利用DAVID网络在线富集工具对交集靶基因进行GO功能注释及KEGG通路富集分析,并利用STRING网站对其进行蛋白质互作分析。结果获得的418个交集靶基因在生物过程(biological process,BP)上主要涉及生物黏附、细胞黏附及细胞发育调控等;在细胞组成(cellular component,CC)上主要涉及质膜组成部分、网格蛋白囊泡等;在分子功能(molecular function,MF)上主要涉及钙离子结合、离子结合等。KEGG信号通路富集分析显示其主要参与了调控干细胞多能性的信号通路及TGF-信号通路。蛋白互作分析显示IGF1R、SMAD3、RPS6KB1及PPP2CA是蛋白互作网络的关键节点。结论miR-152可能通过TGF-信号通路多方面影响滋养细胞增殖、侵袭及凋亡参与子痫前期的发生发展,本研究可为后续的靶基因验证及机制探索提供理论基础及研究思路。

circNT5E靶向调控miR-152-3p对胃癌细胞生物学行为的影响

目的探讨circNT5E对胃癌细胞生物学行为的影响及其可能的作用机制。方法采用qRT-PCR法检测胃癌组织、癌旁组织与人胃黏膜上皮细胞GES-1、人胃癌细胞HGC27中circNT5E、miR-152-3p的表达量。双荧光素酶报告基因实验检测miR-152-3p过表达对野生型载体wt-circNT5E、突变型载体mut-circNT5E荧光素酶活性的影响。以HGC27细胞为研究对象进行体外细胞实验,实验分组为si-NC组、si-circNT5E组、si-circNT5E-NC组、si-circNT5E-152-3p组。CCK-8法、平板克隆形成实验、流式细胞术与Transwell实验分别检测细胞增殖、克隆形成、凋亡、迁移及侵袭能力。Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果与癌旁组织和GES-1细胞相比,circNT5E在胃癌组织和细胞中表达量升高(均P<0.05),miR-152-3p的表达量降低(均P<0.05);进一步机制分析提示miR-152-3p是circNT5E的靶基因。功能实验表明敲除circNT5E抑制胃癌细胞的增殖、迁移及侵袭的能力,诱导细胞凋亡(均P<0.05)。敲除miR-152-3p可逆转circNT5E表达降低对细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用和对凋亡的促进作用(均P<0.05)。结论circNT5E可通过调控miR-152-3p介导胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡。

非小细胞肺癌组织中环指蛋白152和四跨膜蛋白12表达情况及临床意义

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中环指蛋白152和四跨膜蛋白12的表达情况及临床意义。方法选取2018年1月至2019年1月国药葛洲坝中心医院收治的NSCLC患者102例为研究对象。比较NSCLC组织及癌旁组织中环指蛋白152和四跨膜蛋白12 mRNA和蛋白的表达水平。统计分析NSCLC组织中环指蛋白152、四跨膜蛋白12蛋白表达与临床和病理特征的关系,分析其对患者预后的影响。单因素及多因素Cox回归方法分析影响NSCLC患者预后的因素。结果NSCLC组织中环指蛋白152、四跨膜蛋白12 mRNA表达水平及蛋白表达阳性率均明显低于癌旁组织[(1.8±0.8)比(2.6±0.6)、(5.1±1.0)比(6.5±0.5)、45.1%(46/102)比83.3%(85/102)、39.2%(40/102)比88.2%(90/102)](均P<0.05)。淋巴结转移、肿瘤临床分期Ⅲ期患者NSCLC组织中环指蛋白152、四跨膜蛋白12蛋白表达阳性率明显低于无淋巴结转移、Ⅰ~Ⅱ期患者(均P<0.05)。环指蛋白152、四跨膜蛋白12阴性表达组患者累积生存率显著低于阳性表达组(均P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示淋巴结转移、肿瘤临床分期Ⅲ期、环指蛋白152阴性、四跨膜蛋白12阴性是NSCLC患者不良预后的独立危险因素,术后辅助化疗是NSCLC患者不良预后的独立保护因素(均P<0.001)。结论NSCLC组织中环指蛋白152、四跨膜蛋白12表达降低,二者的表达与NSCLC肿瘤临床分期及淋巴结转移有关,是NSCLC预后相关肿瘤标志物。

lncRNA SNHG4/miR-152-3p对HepG2细胞增殖、凋亡及免疫因子的影响

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)SNHG4调控miR-152-3p对肝癌细胞增殖、凋亡及免疫因子的影响。方法:qRT-PCR检测肝癌细胞(HepG2、SNU-398、Hep3B)及永生化正常肝细胞THLE-2中SNHG4和miR-152-3p表达水平。将HepG2细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-SNHG4组(转染si-SNHG4)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-152-3p组(转染miR-152-3p)、si-SNHG4+anti-miR-NC组(共转染si-SNHG4与anti-miR-NC)、si-SNHG4+anti-miR-152-3p组(共转染si-SNHG4与anti-miR-152-3p)。qRT-PCR检测SNHG4和miR-152-3p表达水平;CCK8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western Blot法检测PCNA、Bcl-2、Bax蛋白表达;ELISA法检测TNF-α、IL-6表达水平;双荧光素酶报告实验验证SNHG4和miR-152-3p靶向关系。结果:与永生化正常肝细胞THLE-2比较,肝癌细胞HepG2、SNU-398、Hep3B内SNHG4表达水平增加(P<0.05),miR-152-3p表达水平降低(P<0.05);沉默SNHG4或过表达miR-152-3p可降低HepG2细胞活性,降低HepG2细胞中PCNA蛋白、Bcl-2蛋白、TNF-α、IL-6表达水平(P<0.05),增加细胞凋亡率,上调Bax蛋白表达(P<0.05)。SNHG4靶向负调控miR-152-3p的表达,抑制miR-152-3p可逆转沉默SNHG4对HepG2细胞增殖、凋亡和免疫因子表达的影响。结论:lncRNA SNHG4可靶向负调控miR-152-3p抑制HepG2细胞增殖和免疫因子表达,促进细胞凋亡。

早发型子痫前期患者血清miR-152,miR-375水平与妊娠结局关系

目的:探讨早发型子痫前期患者血清miR-152、miR-375水平与妊娠结局关系。方法:回顾性收集2017年8月-2019年8月在本院住院分娩的早发型子痫前期患者88例(病例组)和规律产前检查健康孕妇78例(对照组),比较两组一般资料,通过随访妊娠结局将病例组分为不良组和良好组;采用实时荧光定量PCR检测两组血清miR-152、miR-375相对表达水平;多因素Cox回归分析早发型子痫前期患者发生不良妊娠结局的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线评估血清miR-152、miR-375对早发型子痫前期患者发生不良妊娠结局的预测价值。结果:病例组血清miR-152(7.56±2.42)、miR-375(4.72±1.02)表达高于对照组(1.00±0.26、1.10±0.25)(均P<0.05),病例组中发生不良妊娠结局26例(29.6%),妊娠结局不良患者血清miR-152、miR-375(9.39±2.78、5.98±1.53)表达高于良好患者(6.79±2.06、4.19±0.51)(均P<0.05)。病例组收缩压、舒张压、血清miR-152,miR-375是患者发生不良妊娠结局的独立危险因素;血清miR-152、miR-375评估早发型子痫前期患者发生不良妊娠结局的曲线下面积(AUC)分别为0.769、0.829,截断值分别为7.88、4.99,灵敏度分别为73.1%、69.2%,特异度分别为72.6%、98.4%,且miR-152、miR-375联合评估的AUC为0.921,灵敏度为80.8%,特异度为96.8%。结论:早发型子痫前期患者血清miR-152、miR-375升高,是发生不良妊娠结局的危险因素,且可作为评估不良妊娠结局的参考指标。

血清miR⁃152、miR⁃153和miR⁃203在宫颈上皮内病变中的表达及临床意义

目的探究血清miR⁃152、miR⁃153和miR⁃203在宫颈上皮内病变中的表达及临床意义。方法选取2019年12月至2020年12月安庆市立医院收治的宫颈上皮内病变患者80例(CIN组),根据宫颈上皮内病变级别分为低度鳞状上皮内病变(LSIL)组(n=48)和高度鳞状上皮内病变(HSIL)组(n=32)。另选取宫颈筛查正常、因子宫肌瘤入院患者50例作为对照组,比较CIN组和对照组临床资料、miR⁃152、miR⁃153和miR⁃203水平,采用多因素分析miR⁃152、miR⁃153和miR⁃203与宫颈上皮内病变的关系,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR⁃152、miR⁃153和miR⁃203对宫颈上皮内病变的诊断价值。结果CIN组和对照组年龄、BMI、吸烟史、CEA、CA199、CA125比较,差异无统计学意义(P>0.05);CIN组血清miR⁃152、miR⁃153和miR⁃203水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,miR⁃152(OR=0.271)、miR⁃153(OR=0.201)和miR⁃203(OR=0.164)是宫颈上皮内病变的影响因素(P<0.05)。miR⁃152、miR⁃153和miR⁃203诊断宫颈上皮内病变的ROC曲线下面积分别为0.825、0.755和0.792,miR⁃152、miR⁃153和miR⁃203的特异性/敏感性分别为80.55%/78.65%、72.12%/71.90%和76.93%/78.13%。LSIL组患者血清miR⁃152、miR⁃153和miR⁃203水平显著高于HSIL组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清miR⁃152、miR⁃153和miR⁃203在宫颈上皮内病变患者中呈异常表达,三者或可作为诊断宫颈上皮内病变的指标。